Таким образом, трипептид пинеалон оказывает выраженное стимулирующее действие на пролиферацию и дифференцировку и ингибирующее действие на апоптоз клеток коры головного мозга, что может найти применении в лечении различных нейродегенеративных заболеваний у лиц старшей возрастной группы.
Ключевые слова: пептиды, почечная патология, фактор роста фибробла-стов, иммуноцитохимия, старение.
Key words: peptides, renal pathology, fibroblasts growth factor, immunocytochemi-stry, senescence.
УДК 613.98, 577.24
Т.Е. Ничик, Р.И. Халимов, Н.С. Линькова, В.А. Зуев, А.П. Рыжак, В.Х. Хавинсон
ПЕПТИДНЫЕ БИОРЕГУЛЯТОРЫ: ПЕРСПЕКТИВЫ СОЗДАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ С НЕФРОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ДЛЯ ЛИЦ
ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА1
Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии,
Санкт-Петербург, Россия В настоящее время в мире наблюдается тенденция к увеличению доли лиц старших возрастных групп [1]. В связи с этим актуальной проблемой современной медицины становится поиск новых геропротекторных и нефропро-текторных средств. Целью работы явилось сравнительное изучение влияния пептидных биорегуляторов на экспрессию сигнальных молекул - маркеров ре-нальной патологии при старении культур клеток почек.
Материалы и методы исследования. Опыт проводили на культурах. Культивирование проводили во флаконах с обработанной поверхностью объемом 50 мл . Диссоциированную культуру клеток почек крыс линии Wistar выращивали в среде, содержащей DMEM, 15% FBS, 1,5% HEPES-буфера, пенициллина G, стрептомицина и L-глутамин. Культивирование клеток проводили до 14 пасса-
1Nichik T.E., Khalimov R.I., Linkova N.S., Zuev V.A., Khavinson V. Kh.Peptide bioregulators: perspectives for biologically active substances creation with nephroprotective activity for elderly people
жа («старые» культуры), на котором было произведено иммуноцитохимическое окрашивание. Культуры разделили на 4 группы: в 1 группу (контрольную) добавляли физиологический раствор, во 2 группу добавляли пептид AED, в 3 группу - пептид EDL и в 4 группу - полипептидный комплекс почек [2]. Пептиды AED и EDL добавляли в культуральную среду в концентрации 20 нг/мл, а полипептидный комплекс почек - в концентрации 100 нг/мл. Для иммуноцито-химического окрашивания клеток использовали первичные моноклональные антитела к Ki67, p53 и матриксной металлопротеиназе-14 (ММР14), так как эти сигнальные молекулы играют важную роль в развитии почечной патологии [35].
Для оценки результатов реакции проводили морфометрическое исследование с помощью микроскопа NikonEclipse E400, цифровой камеры Nikon DXM1200 и программы «VidеotestMorphology 5,2». Относительную площадь экспрессии рассчитывали, как отношение площади, занимаемой иммунопози-тивными клетками, к общей площади клеток в поле зрения, и выражали в процентах. Статистическая обработка данных проводилась в программе “Statistica 7.0”.
Результаты исследования. Полипептидный комплекс почек увеличивал экспрессию протеина Ki67 в 2 раза в «старых» культурах клеток почек. При этом короткие пептиды AED и EDL не оказывали такого эффекта. Синтетический пептид AED и полипептидный комплекс почек снижали экспрессию р53 в «старых» культурах клеток соответственно в 1,33 и 1,42 раза. Пептид EDL повышал экспрессию желатиназы ММР14 в 1,52 раза в «старых» культурах клеток почек. При этом пептид AED и полипептидный комплекс почек не оказывали такого эффекта.
Таким образом, все исследуемые пептиды влияли на экспрессию сигнальных молекул, уровень синтеза которых изменяется при почечной патологии и являются биологически активными веществами с потенциально высокой неф-ропротекторной активностью.
Литература:
1) Anisimov V.N., KhavinsonV.Kh. // Biogerontology. 2010. Vol. 11. P. 139149.
2) Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Рыжак Г.А. / Средство, нормализующее функции почек, и способ его получения. / 2007 Пат. 2302868 Российская Федерация. МПК А61К 35/23. А61Р 13/12.
3) HanJ., XuX., QinH. etal. // Mol. CellBiochem. 2013. Vol. 378, N 1-2. P. 161169.
4) ShokeirA.A., HusseinA.A., SolimanS.A. et al. // BJU Int. 2012. Vol. 110, N 6. P. 904-911.
5) Uchio K., Manabe N., Tamura K. et al. // J. Nephron. 2000. Vol. 86. P. 145151.
Ключевые слова: пептиды, почечная патология, клеточное обновление, мат-риксная металлопротеиназа, старение.
Key word: peptides, renal pathology, cell rejuvenation, matrix metalloproteinase, senescence.
УДК 616.001
М. В. Новицкий, А. Б. Смолянинов
РЕГЕНЕРАТИВНАЯ ТЕРАПИЯ АУТОЛОГИЧНЫМИ СТВОЛОВЫМИ КЛЕТКАМИ ПРИ РАССЕЯННОМ СКЛЕРОЗЕ1
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И.Мечникова; ООО «Покровский банк стволовых клеток» Санкт-Петербург, Россия, maxim.novitskiy@yandex.ru
Рассеянный склероз (РС) - хроническое прогрессирующее заболевание центральной нервной системы (ЦНС), клинически проявляющееся мультиси-стемной неврологической симптоматикой, а патоморфологически характеризующееся образованием множественных очагов диемилинизации в белом веществе головного и спинного мозга [1]. Основным механизмом, приводящим к повреждению миелина, является активность аутоиммунных Т-лимфоцитов против белка миелина [2]. В настоящее время для лечения РС, помимо симптоматической терапии, используются препараты для купирования обострения (глюкокортикостероиды и цитостатики), а также препараты патогенетического направления (бета-интерфероны). Однако традиционные методы иммуномодулирующей и иммуносупрессивной терапии РС не позволяют достичь выраженно-
1 Maxim Novitsky, Alexander Smolyaninov. Regenerative therapy with autologous stem cells in multiple sclerosis.