CC BY
1514
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Jj Ставрополья
научно-практическии журнал
УДК 636.22/.28:619:616.995.1 DJDXPP
DOI: 10.31279/2222-9345-2022-11-48-14-19 Дата поступления статьи в редакцию: 17.11.2022 г.
В. И. Четвертнов, В. В. Михайленко
Chetvertnov V. I., Mikhailenko V. V.
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРЕДЖЕЛУДКОВ, СЫЧУГА И ТОНКОГО КИШЕЧНИКА ТЕЛЯТ ПРИ КРИПТОСПОРИДИОЗЕ
PATHOMORPHOLOGICAL CHANGES IN THE PRE-VENTRICLES, RENNET AND SMALL INTESTINE OF CALVES WITH CRYPTOSPORIDIOSIS
Приводятся данные патологических вскрытий, выявленные у телят, павших от криптоспоридиоза. В ходе исследований выявлен гиперкератоз эпителия рубца, вакуолизация и десквамация его клеток. В книжке и сетке на поверхности эпителия листочков визуализировался четко выраженный роговой слой, толщина которого в основном была равномерная, но на верхушках некоторых листочков толщина рогового вещества была значительно больше, чем в большинстве мест. В гистологических срезах стенки сычуга патоморфологические изменения были характерны для подострого катарально-язвенного або-мазита. В большинстве полей зрения визуализировалась полная десквамация клеток эпителия. В отдельных участках обнаруживались небольшие сохранившиеся фрагменты слизистого эпителия. Между железками в толще собственно слизистого слоя сычуга визуализировались обширные скопления макрофагов, лимфоцитов эпители-оидных клеток, единичных гистеоцитов и фибробластов. Железки в участках с обширными клеточными инфильтратами подвергались атрофии. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника была набухшая, неравномерно окрашенная от светло-красного до красного цвета с сероватым оттенком. При микроскопии визуализировалась полная десквамация клеток эпителия ворсинок. Собственно слизистый слой тонкого отдела кишечника неравномерной толщины, истончение отдельных участков произошло за счет частичного некроза и десквамации ворсинок. В других местах визуализировались утолщенные за счет пролиферации большого количества лимфоцитов, макрофагов ворсинки. Крипты собственно слизистого слоя в местах обширных скоплений клеточных пролифератов атрофировались.
Ключевые слова: телята, криптоспоридиоз, патомор-фология, преджелудки, сычуг, тонкий кишечник.
The article presents the data of pathological autopsies revealed in calves that died from cryptosporidiosis. The studies revealed hyperkeratosis of the scar epithelium, vacuolization and desquamation of its cells. In the book and grid, a clearly defined stratum corneum was visualized on the surface of the epithelium of the leaves, the thickness of which was mostly uniform, but on the tops of some leaves the thickness of the corneal substance was significantly greater than in most places. In histological sections of the rennet wall, pathomorphological changes were characteristic of subacute catarrhal ulcerative abomasitis. Complete desquamation of epithelial cells was visualized in most visual fields. Small preserved fragments of the mucous epithelium were found in some areas. Extensive clusters of macrophages, lymphocytes of epithelioid cells, single histocytes and fibroblasts were visualized between the glands in the thickness of the actual mucous layer of the rennet. Glands in areas with extensive cellular infiltrates underwent atrophy. The mucous membrane of the small intestine was swollen, unevenly colored from light red to red with a grayish tinge. Microscopy visualized complete desquamation of the epithelial cells of the villi. The actual mucous layer of the small intestine is of uneven thickness, thinning of individual sections occurred due to partial necrosis and desquamation of the villi. In other places, villi thickened due to the proliferation of a large number of lymphocytes, macrophages, were visualized. The crypts of the mucosal layer proper, in places of extensive accumulations of cellular proliferates, have atrophied.
Key words: calves, cryptosporidiosis, pathomorphology, pancreas, rennet, small intestine.
Четвертнов Виталий Иванович -
кандидат ветеринарных наук, научный сотрудник лаборатории инфекционных, незаразных и паразитарных болезней
ФГБНУ «Северо-Кавказский федеральный аграрный
научный центр»
г. Ставрополь
Тел.: 8-906-442-41-83
E-mail: vitaly.chetvertnov4183@yandex.ru
Михайленко Виктор Васильевич -
кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры паразитологии, ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный
аграрный университет»
г. Ставрополь
РИНЦ SPIN-код: 1102-4150
Тел.: 8(8652)21-79-17
E-mail: viktor.mihaylenKO@yandex.ru
Chetvertnov Vitaliy Ivanovich -
Candidate of Veterinary Sciences, Senior Researcher of the Laboratory for Infections, Non-infectious and Parasitic Diseases
FSBSI «North Caucasus Federal Agrarian Research
Center»
Stavropol
Tel.: 8-906-442-41-83
E-mail: vitaly.chetvertnov4183@yandex.ru
Mikhaylenko Victor Vasilyevich -
Candidate of Veterinary Sciences,
Associate Professor of the Department of Parasitology,
Veterinary Examination,
Anatomy and Pathanatomy,
FSBEI HE Stavropol State Agrarian University
Stavropol
RSCI SPIN-code: 1102-4150
Tel.: 8(8652)21-79-17
E-mail: viktor.mihaylenKO@yandex.ru
Криптоспоридиоз животных повсеместно распространенное заболевание, вызываемое возбудителем Cryptosporidium parvum, отмечающееся острым течением и поражением желудочно-кишечного тракта и, как следствие, в большинстве случаев - массовым падежом животных [1, 2]. Заражение телят криптоспоридиями в Ставропольском крае впервые выявлено в 2020 г., а до этого момента ветеринарными специалистами животноводческих хозяйств заболевания желудочно-кишечного тракта телят в первые дни жизни рассматривались как заболевания инфекционного (вирусы, бактерии) или незаразного (гипотрофия телят, нарушение выпойки молозива, нарушение содержания) характера, отчего применялось лишь симптоматическое лечение с использованием антибиотиков широкого спектра действия. Для понимания полной картины патологического процесса, вызванного паразитированием криптоспо-ридиями, нами решено провести исследование морфологических изменений желудочно-кишечного тракта телят.
Паразитирование криптоспоридий и вызванная ими интоксикация организма приводят к различным формам воспаления желудочно-кишечного тракта и, как следствие, к снижению всасывания и повышению секреции [3]. Пато-морфогенез криптоспоридиоза у телят, поросят и белых мышей имеет общие закономерности [4]. При спонтанном криптоспоридиозе телят в тонком отделе кишечника наблюдается катаральное воспаление с неравномерным слущиванием эпителия, а на отдельных участках - полное обнажение пластинки слизистой оболочки [5, 6]. При криптоспоридиозе телят регистрируются от сли-зисто-катарального до катарально-геморраги-ческого воспаления сычуга и тонкого отдела кишечника [7, 8]. Визуализируется десквамация слизистого эпителия и инфильтрация клеточным пролифиратом собственно слизистого и подсли-зистого слоев стенки кишечника макрофагами, нейтрофильными лейкоцитами, эритроцитами [9]. О воспалениях с кровоизлияниями, очаговыми эрозиями и язвами на протяжении всего тонкого кишечника сообщает [10].
Патоморфологические исследования проводились на базе кафедры паразитологии, вет-санэкспертизы, анатомии и патанатомии имени профессора С. Н. Никольского ФГБОУ ВО Ставропольского государственного аграрного университета. Для патоморфологического исследования были отобраны кусочки преджелудков (рубец, сетка, книжка), сычуга, тонкого отдела кишечника от павших от криптоспоридиоза двух телят в возрасте 9 и 10 дней, принадлежавших СПА «колхоз им. Ворошилова» Новоалександровского района Ставропольского края. Отобранные кусочки для фиксации помещали в 8 %-ный водный раствор забуференного формалина на 7 дней. В дальнейшем профилированные в формалине кусочки промывали в про-
точной воде в течение суток. После промывки кусочки отобранного материала обезвоживали в нескольких порциях изопропилового спирта. В дальнейшем перемещали эти кусочки в четыре порции расплавленного при температуре 56 °С парафина и заливали в парафиновые блоки.
На санном микротоме из полученных парафиновых блоков готовили гистологические срезы толщиной 4-5 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином. При помощи центра визуализации изображения на базе ОИт-риэ 2000 делали микрофотографии. Диагноз на криптоспоридиоз ставили на основании исследования свежих каловых масс от больных диареей телят 6-10-дневного возраста. Для исключения бактериальных инфекций, имеющих сходные клинические признаки, проводили микробиологические исследования патологического материала (слепых кишок, печени, костного мозга, мезентериальных лимфатических узлов и сердца), взятого от тех же павших телят. Взятый материал культивировали на питательных средах Левина и Эндо, а для исключения заболеваний, вызываемых грибками, проводили посевы материала на среду Сабуро.
Визуально установлено: в рубце, сетке и книжке содержимое отсутствует, внутренняя поверхность преджелудков была равномерно окрашена в бледно-розовый цвет. В месте перехода книжки к сетку были видны увеличенные сосочки, имеющие длину до 2-3 мм, белый цвет и твердую поверхность (рис. 1).
При исследовании гистологических срезов рубца патоморфологические изменения в большинстве срезов были характерны для гиперкератоза. Визуализировалось неравномерное утолщение многослойного плоского эпителия рубца. На поверхности эпителия видны обширные, неравномерные, слоистые отложения рогового вещества (рис. 2). В отдельных участках толщина рогового вещества истончалась или полностью отсутствовала. В участках с отсутствием слоистого рогового вещества на поверхности эпителия его толщина была значительно больше, чем в рядом расположенных участках, за счет вакуолизации клеток эпителия, расположенных ближе к просвету (рис. 3).
На поверхности эпителия в этих участках рубца видны десквамированные клетки эпителия в состоянии пикноза, вместе с незначительным количеством рогового вещества (рис. 4). На базальной мембране располагается ростковый слой, представляющий собой несколько рядов интенсивно окрашенных клеток. В подслизи-стом слое кровеносные сосуды были умеренно наполнены. При микроскопии гистологических срезов книжки на поверхности эпителия листочков визуализировался четко выраженный роговой слой, толщина которого в основном была равномерная (рис. 5), но на верхушках некоторых листочков толщина рогового вещества была значительно больше, чем в большинстве мест. Патоморфологические изменения в сетке были сходны с таковыми в книжке.
Ежеквартальный
научно-практический
журнал
Вестник ЛПК
Ставрополья
А
Б
Рисунок 1 - Гиперкератоз сосочков книжки телят 9- (А) и 10-дневного (Б) возраста
Рисунок 2 - Гиперкератоз эпителия рубца
(указано стрелками). Окраска гематоксилином и эозином х100
*
"Я
>
I
Рисунок 3 - Очаговая вакуолизация и десквамация клеток эпителия рубца. Окраска гематоксилином и эозином х100
Рисунок 4 - Десквамированные клетки
эпителия рубца (указано стрелкой). Окраска гематоксилином и эозином х400
При вскрытии сычуга он у обоих телят был полупустой, содержал незначительное количество створоженного молока с сероватой жидкой массой. У теленка 9-дневного возраста на внутренней поверхности сычуга содержалось
о
I V, ' ЧщИ '„^ ум-
' „ - • 1' -. 1 '
Рисунок 5 - Утолщение рогового слоя эпителия книжки (указано стрелкой). Окраска гематоксилином и эозином х100
большое количество плохо смываемой беловатой слизи. Слизистая оболочка была набухшая, неравномерно окрашенная от розовато-серого до светло-красного цвета. На поверхности слизистой оболочки были видны небольшие
эрозии, расположенные в основном по верхушкам складок (рис. 6). У теленка 10-дневного возраста слизеподобная масса на поверхности слизистой оболочки местами имела бурый цвет (рис. 7), слизистая была также набухшая, преимущественно розового, местами красного цвета. На поверхности видны множественные углубления величиной до 1,5 мм в диаметре с незначительно возвышающимися краями, поверхность которых покрыта бурой массой.
ства железок был частично слущен и находился в их просвете. В подслизистом слое сычуга артериальные сосуды были полупустые, их стенка разволокнена, местами гомогенизирована (рис. 9), эндотелий артерий частично слущен. В подслизистом слое обнаруживались очаговые скопления лимфоцитов, макрофагов, единичных гистеоцитов и фибробластов.
Рисунок 6 - Подострый катарально-язвенный обомазит у теленка 9-дневного возраста
Рисунок 8 - Десквамация эпителия сычуга у теленка 9-дневного возраста, павшего
от криптоспоридиоза. Окраска гематоксилином и эозином х200
Рисунок 7 - Подострый катарально-язвенный обомазит у теленка 10-дневного возраста
При исследовании гистосрезов сычуга пато-морфологические изменения были характерны для подострого катарально-язвенного обома-зита. В большинстве полей зрения визуализировалась полная десквамация клеток эпителия (рис. 8). Местами обнаруживались небольшие фрагменты слизистого эпителия. Между железками собственно слизистого слоя визуализировались обширные клеточные инфильтраты из лимфоцитов, макрофагов и единичных гистео-цитов и фибробластов, сдавливающих железки, последние подвергаются атрофии. В местах обширных клеточных инфильтратов железки полностью атрофировались. Эпителий большин-
Рисунок 9 - Гомогенизация стенки артерии в подслизистом слое сычуга у теленка 10-дневного возраста, павшего от криптоспоридиоза.
Окраска гематоксилином и эозином х200
При вскрытии тонкий отдел кишечника у обоих павших телят был полупустой, в просвете содержалась густая слизеподобная красновато-серая масса (рис. 10), слизистая оболочка от светло-красного, местами красного цвета, набухшая. В гистологических срезах визуализировалось полное слущивание эпителия ворсинок. Десква-мированный эпителий вместе со слизью располагался на поверхности кишечника. Собственно слизистый слой тонкого отдела кишечника неравномерной толщины, истончение отдельных участков произошло за счет частичного некроза
18
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Ставрополья
научно-практическии журнал
и десквамации ворсинок (рис. 11). Оставшиеся ворсинки были утолщены за счет пролиферации лимфоцитов, макрофагов, единичных гистеоци-тов и фибробластов. Крипты в собственно слизи-
стом слое атрофировались за счет сдавливания клеточными пролифератами. Эпителий крипт был местами десквамирован. В просвете крипт обнаруживался спущенный эпителий.
Рисунок 10 - Подострый катарально-слизистый энтерит у теленка 9-дневного возраста, павшего от криптоспоридиоза
Под собственно слизистым слоем над мышечной пластиной видны обширные клеточные пролифераты, состоящие из лимфоцитов, макрофагов, эпителиоидных клеток и единичных фибробластов. В артериальных кровеносных сосудах подслизистого слоя тонкого кишечника патоморфологические изменения были характерны для артериита. Артерии были запустевшие. Стенка артерий была утолщена за счет набухания разволокнения соединитель-
Рисунок 11 - Десквамация слизистого эпителия и частичный некроз ворсин у теленка 9-дневного возраста, павшего от криптоспоридиоза.
Окраска гематоксилином и эозином х200
нотканных волокон и пропитывания их жидкостью. Вокруг артерий визуализировались клеточные инфильтраты из лимфоцитов, макрофагов, эпителиоидных клеток и единичных фибробластов. В собственно слизистом слое тонкого кишечника визуализировались отдельные кисты, имеющие округлую форму величиной от 40,0 до 150,0 мкм, содержащие внутри базофильные образования, имеющие круглую форму, величиной 4-5 мкм в диаметре (рис. 12).
Рисунок 12 - Кисты в собственно слизистом слое тонкого кишечника у теленка 9-дневного возраста, павшего от криптоспоридиоза. Окраска гематоксилином и эозином х200
В ходе исследования выявлен гиперкератоз эпителия рубца, вакуолизация и десквамация его клеток. В книжке и сетке на поверхности эпителия листочков визуализировался четко выраженный роговой слой, толщина которого в основном была равномерная, но на верхушках некоторых листочков толщина рогового вещества была зна-
чительно больше, чем в большинстве мест. В гистологических срезах стенки сычуга патомор-фологические изменения были характерны для подострого катарально-язвенного абомазита. В большинстве полей зрения визуализировалась полная десквамация клеток эпителия. Местами обнаруживались незначительные участки сохра-
ненного слизистого эпителия. Между железками в собственно слизистом слое визуализировались пролиферация лимфоцитов, макрофагов, единичных гистеоцитов и фибробластов. В местах обширных скоплений пролиферированных клеток железки были атрофированы. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника была набухшая, неравномерно окрашенная от светло-красного до красного цвета с сероватым оттенком.
При микроскопии визуализировалась полная де-сквамация клеток эпителия ворсинок. Стенка тонкого отдела кишечника местами истончалась за счет некроза и последующей десквамации эпителия ворсинок. Другие ворсинки утолщены за счет пролиферации лимфоцитов, макрофагов, гистеоцитов и фибробластов. Крипты, расположенные в местах обширных клеточных инфильтратов, были атрофированы.
Литература
1. Никитин В. Ф. Криптоспоридиоз домашних животных: (возбудители, клиническая картина, эпизоотология, диагностика, профилактика и терапия) // Всерос. ин-т гельминтологии им. К. И. Скрябина. М., 2007. 36 с.
2. Никитин В. Ф. Криптоспоридиоз как причина диареи телят // Материалы докладов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». М., 2003. С. 279-282.
3. Криптоспоридиоз телят (экология, этиология, эпизоотология, клиника, диагностика, лечение, профилактика) : методические указания / Т. В. Новикова, Н. А. Рыбакова, П. А. Лемехов [и др.]. Вологда-Молочное : ИЦ ВГМХА, 2003. 26 с.
4. Сковородин Е. Н. Патоморфология крипто-споридиоза животных // Вестник ветеринарии. 2002. № 2. С. 36-42.
5. Патогистологические изменения в кишечнике телят, больных криптоспоридиозом / Е. Г. Кириллов, И. Н. Залялов, Д. Г. Латы-пов [и др.] // Ученые записки Казанской гос. академии ветеринарной медицины. Казань, 2016. Т. 226. С. 86-90.
6. Кириллов Е. Г. Патоморфологические изменения в тонкой кишке при криптоспори-диозе // Морфология. 2016. Т. 149, № 3. С. 103.
7. Самигулин Ф. Н., Буканов А. М. Диарея телят криптоспоридийной этиологии // Материалы Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины. Омск, 2000. С. 139-140.
8. Сковородин Е. Н. Патоморфологические изменения при криптоспоридиозе животных // Материалы Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (Уфа, 17-19 сентября). М., 2003. С. 124-125.
9. Диагностика криптоспоридиоза телят : методические рекомендации / М. Ш. Акбаев, Н. В. Есаулова, О. Е. Давыдова [и др.]. М. : МГАВМиБ им. К. И. Скрябина, 2004. 14 с.
10. Кряжев А. Л., Лемехов П. А. Криптоспоридиоз телят в Вологодской области : рекомендации по борьбе и профилактике. Вологда-Молочное : ИЦ ВГМХА, 2004. 32 с.
References
1. Nikitin V. F. Cryptosporidiosis of domestic animals: (pathogens, clinical picture, epizoo-tology, diagnostics, prevention and therapy) // All-Russian Institute of Helminthology named after K. I. Scriabin. M., 2007. 36 p.
2. Nikitin V. F. Cryptosporidiosis as a cause of calf diarrhea // Materials of reports of the scientific conference «Theory and practice of combating parasitic diseases». M., 2003. P. 279-282.
3. Cryptosporidiosis of calves (ecology, etiology, epizootology, clinic, diagnosis, treatment, prevention) : Methodical instructions / T. V. Novikova, N. A. Rybakova, P. A. Lemek-hov [et al.]. Vologda-Molochnoe : IC Vologda State Dairy Academy, 2003. 26 p.
4. Skovorodin E. N. Pathomorphology of cryptosporidiosis of animals // Bulletin of Veterinary Medicine. 2002. № 2. P. 36-42.
5. Pathohistological changes in the intestines of calves with cryptosporidiosis / E. G. Kirillov, I. N. Zalyalov, D. G. Latypov [et al.] // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine. Kazan, 2016. Vol. 226. P. 86-90.
6. Kirillov E. G. Pathomorphological changes in the small intestine in cryptosporidiosis // Morphology. 2016. Vol. 149, № 3. P. 103.
7. Samigulin F. N., Bukanov A. M. Diarrhea of calves of cryptosporidial etiology // Materials of the All-Russian Scientific and Methodological Conference of pathologists of veterinary medicine. Omsk, 2000. P. 139-140.
8. Skovorodin E. N. Pathomorphological changes in animal cryptosporidiosis // Materials of the All-Russian Scientific and Methodological Conference of pathologists of veterinary medicine (Ufa, September 17-19). M., 2003. P. 124-125.
9. Diagnosis of cryptosporidiosis of calves : methodological recommendations / M. Sh. Ak-baev, N. V. Esaulova, O. E. Davydova [et al.]. M. : Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology named after K. I. Scriabin, 2004. 14 p.
10. Kryazhev A. L., Lemekhov P. A. Cryptosporidiosis of calves in the Vologda region : recommendations for control and prevention. Vologda-Molochnoe : IC Vologda State Dairy Academy, 2004. 32 p.
