CC BY
14
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2022 - N 6
УДК: 61 DOI: 10.24412/2075-4094-2022-6-3-2 EDN WWJYVY ** f^ll**
ОЦЕНКА ВЗАИМОСВЯЗИ ПРОГРЕССИРОВАНИЯ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИИ С ГЕНОТИПАМИ ПОЛИМОРФНЫХ ГЕНОВ У ПАЦИЕНТОВ С УСТАНОВЛЕННЫМ ДИАГНОЗОМ «ДИАБЕТИЧЕСКАЯ РЕТИНОПАТИЯ»
А.Г. ИСХАКОВА*, А.Н. ТОРОПОВСКИЙ**, О.Н. ПАВЛОВА*, О.Н. ГУЛЕНКО*, М.В. КОМАРОВА***,
Л.Г. ВАРФОЛОМЕЕВА****, А.А. ДЕВЯТКИН****
ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации. ул. Чапаевская, д. 89, г. Самара, 443099, Россия ООО «ТестГен», 44-й проезд Инженерный, д. 9, г. Ульяновск, 432072, Россия ФГАОУ ВО «Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева», Московское ш., д. 34, г. Самара, 443086, Россия ФГБОУ ВО «Тамбовский государственный университет имени Г.Р. Державина» Министерства высшего образования и науки Российской Федерации, ул. Интернациональная, д. 33, г. Тамбов, 392000, Россия
Аннотация. Введение. Диабетическая ретинопатия является одним из многочисленных осложнений сахарного диабета и является основной причиной слепоты трудоспособного населения развитых стран. Полиморфные локусы генов VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853, ITGA2 rs2910964, ADRB3 rs4994, APOE rs7412, APOE 429358, рассматриваемые независимо друг от друга, не связаны с развитием диабетической ретинопатии в изученной группе больных сахарным диабетом II типа. Однако учет сложных межаллельных взаимодействий генов VEGF, AKR1B1 и APOE позволил выделить неблагоприятные сочетания генотипов. Цель исследования - анализ взаимосвязи прогрессирования диабетической ретинопатии с генотипами полиморфных генов у пациентов. Материалы и методы исследования. Исследование проведено на базе ГБУЗ «Самарская областная клиническая офтальмологическая больница имени Т.И. Ерошевского», также на базе ООО «ТестГен» и ООО «Джинэкст» (г. Ульяновск), где происходило выделение ДНК и анализ полиморфных маркеров генов. Всего в исследование приняли участие 475 пациентов. Результаты и их обсуждение. Установлено влияние различных сочетаний генотипов полиморфных генов у пациентов на про-грессирование и развитие диабетической ретинопатии. Установлено, что сочетание гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 с гомозиготой С/С гена VEGF rs2010963 и сочетание гетерозиготы G/А гена AKR1B1 rs759853 с гетерозиготой G/С гена VEGF rs2010963 не ведет к развитию диабетической ретинопатии (хороший прогноз); сочетания гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 с гетерозиготой G/С гена VEGF rs2010963; гетерозиготы G/А гена AKR1B1 rs759853 с гомозиготой по дикому типу С/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготой по редкому аллелю G/G гена VEGF rs2010963, а также сочетание гомозиготы по редкому аллелю А/А гена AKR1B1 rs759853 и гомозиготы С/С по дикому типу не являются достоверными факторами в развитии диабетической ретинопатии (неясный прогноз, умеренный риск развития диабетической ретинопатии); сочетания гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 и гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963, гомозиготы А/А по редкому аллелю гена AKR1B1 rs759853 и гетерозиготы G/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963 является неблагоприятным и ведет к развитию диабетической ретинопатии (плохой прогноз). Заключение. Установлено влияние различных сочетаний генотипов полиморфных генов у пациентов на прогрессирование и развитие диабетической ретинопатии.
Ключевые слова: диабетическая ретинопатия, VEGF, AKR1B1, ITGA2, ADRB3, APOE.
ASSESSING THE RELATIONSHIP BETWEEN DIABETIC RETINOPATHY PROGRESSION AND POLYMORPHIC GENE GENOTYPES IN PATIENTS DIAGNOSED WITH DIABETIC
RETINOPATHY
A.G. ISHAKOVA*, A.N. TOROPOVSKIJ**, O.N. PAVLOVA*, O.N. GULENKO*, M.V. KOMAROVA***,
L.G. VARFOLOMEEVA****, A.A. DEVIATKIN****
FGBOU VO "Samara State Medical University" Ministry of Health Care of the Russian Federation.
Chapayevskaya St., 89, Samara, 443099, Russia TestGen, 44 Engineering Lane, 9, Ulyanovsk Region, Ulyanovsk, 432072, Russia Samara National Research University named after Academician S.P. Korolev, Moskovskoe sh., 34, Samara, 443086, Russia Tambov State University named after G.R. Derzhavin of the Ministry of Education of the Russian Federation, Internatsionalnaya Str., 33, Tambov, 392000, Russia
Abstract. Diabetic retinopathy is one of the many complications of diabetes mellitus and is the leading cause of blindness in the working-age population of developed countries. The polymorphic loci of VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853, ITGA2 rs2910964, ADRB3 rs4994, APOE rs7412, APOE 429358, considered independent of each other, are not associated with development of diabetic retinopathy in the studied group of type II diabetes patients. However, consideration of complex interallelic interactions of VEGF, AKR1B1 and APOE genes allowed us to identify unfavorable combinations of genotypes. The aim of the study was to analyze the relationship between the progression of diabetic retinopathy and polymorphic gene genotypes in patients. Materials and methods of research. The study was carried out on the basis of Samara Regional Clinical Oph-thalmological Hospital named after T.I. Eroshevsky, also on the basis of TestGen LLC and Genext LLC (Ulyanovsk), where DNA extraction and analysis of polymorphic gene markers were carried out. A total of 475 patients took part in the study. Conclusion: the effect of different combinations of polymorphic gene genotypes in patients on the progression and development of diabetic retinopathy was established. The combination of G/G homozygote wild-type AKR1B1 rs759853 with homozygote C/C of the VEGF rs2010963 gene and combination of G/A heterozygote AKR1B1 rs759853 with heterozygote G/C of the VEGF rs2010963 gene was found to not lead to the development of DR (good prognosis); combinations of G/G homozygote wild-type AKR1B1 rs759853 gene with heterozygote G/C of VEGF rs2010963 gene; G/A heterozygotes of the AKR1B1 rs759853 gene with a homozygote for the wild-type C/C of the VEGF rs2010963 gene or a homozygote for the rare G/G allele of the VEGF rs2010963 gene, as well as the combination of homozygote for the rare A/A allele of the AKR1B1 rs759853 gene and homozygote C/C wild-type are not reliable factors in the development of DR (unclear prognosis, moderate risk of DR); combinations of G/G homozygotes for the wild-type AKR1B1 gene rs759853 and G/G homozygotes for the rare allele of the VEGF gene rs2010963, A/A homozygote for rare allele of AKR1B1 rs759853 and heterozygote G/C of VEGF rs2010963 or homozygote G/G for rare allele of VEGF rs2010963 are unfavorable and lead to the development of DR (poor prognosis). Conclusion: the effect of different combinations of polymorphic gene genotypes in patients on the progression and development of diabetic retinopathy was established.
Key words: diabetic retinopathy, VEGF, AKR1B1, ITGA2, ADRB3, APOE.
Введение. Диабетическая ретинопатия (ДР) является одним из многочисленных осложнений сахарного диабета и является основной причиной слепоты трудоспособного населения развитых стран [1]. Установлено, что потеря зрения или его нарушения у пациентов с сахарным диабетом (СД) развиваются в 25 раз чаще, чем в среднем в популяции и чем больше «стаж» СД, тем выше риск развития ДР [2, 3].
В настоящее время различают непролиферативную, препролиферативную и пролиферативную ДР. Непролиферативныа форма характеризуется окклюзией и повышенной проницаемостью мелких сосудов сетчатки и является начальной стадией ДР. Препролиферативная стадия ретинопатии характеризуется наличием венозных аномалий (чёткообразность, извитость, наличие петель и др.), большим количеством твёрдых и «ватообразных» экссудатов, интраретинальных микрососудистых аномалий, крупных рети-нальных геморрагий [4, 5]. Пролиферативная ДР возникает тогда, когда окклюзия капилляров приводит к возникновению обширных зон ишемии с формированием микроаневризм и к нарушениям кровоснабжения сетчатки, что ведет к полной потере зрения. Изменения сетчатки на данной стадии идут двумя путями: формирование новообразованных сосудов или разрастание соединительной ткани [6, 7].
Как правило, выраженность ретинопатии зависит от длительности течения сахарного диабета, концентрации глюкозы в крови и уровня артериального давления. Для того, чтобы избежать вышеизложенных осложнений, крайне важно, как можно раньше диагностировать развитие ДР и предупреждать ее прогрессирование.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2022 - N 6
В настоящее время выделено около 196 полиморфизмов 20 генов обуславливающих развитие ДР [8, 9]. В ранее проведенном нами исследовании мы выявили, что полиморфные локусы генов VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853, ITGA2 rs2910964, ADRB3 rs4994, APOE rs7412, APOE 429358, рассматриваемые независимо друг от друга, не связаны с развитием диабетической ретинопатии в изученной группе больных сахарным диабетом II типа. Однако учет сложных межаллельных взаимодействий генов VEGF, AKR1B1 и APOE позволил выделить неблагоприятные сочетания генотипов. Стаж сахарного диабета и гликемия увеличивают вероятность ДР, а установленная комбинация генов в комплексе с биохимическими показателями повышает прогностическую значимость оценки развития данного заболевания [10]. В связи с установленной закономерностью было решено провести анализ взаимосвязи прогрессиро-вания ДР с генотипами полиморфных генов у пациентов.
Цель исследования - анализ взаимосвязи прогрессирования диабетической ретинопатии с генотипами полиморфных генов у пациентов.
Задачи исследования: на основе выявленных ассоциации полиморфных маркеров генов-кандидатов с риском развития ДР при СД 2-го типа установить взаимосвязи прогрессирования ДР с генотипами полиморфных генов у пациентов.
Материалы и методы исследования. Исследование проведено на базе ГБУЗ «Самарская областная клиническая офтальмологическая больница имени Т.И. Ерошевского», также на базе ООО «ТестГен» и ООО «Джинэкст» (г. Ульяновск), где происходило выделение ДНК и анализ полиморфных маркеров генов. Всего в исследование приняли участие 475 пациентов: 79 мужчин и 396 женщин, удовлетворяющие критериям включения и исключения и давшие письменное информационное согласие на участие в научном исследовании. Возраст обследованных составил от 24 до 89 лет. У 272 пациентов на момент осмотра ДР обнаружено не было, у 100 - установлено непролиферативная ДР, у 23 - препролифератив-ная ДР, у 80 - пролиферативная ДР.
Для выделения ДНК использовали набор реагентов «ДНК-Кровь-М» производства ООО «Тест-Ген», оптимально работающий при роботизированном выделении на станции Tecan. В работе были использованы олигонуклеотидные праймеры и зонды для ПЦР в реальном времени, подобранные коллективом автором исходя из данных NCBI GeneBank. При проведении ПЦР реакционную смесь составили: dNTP, праймеры (VICE, FAME) и зонды с флуоресцентными метками по FAM/HEX (BHQ). На основании предварительно проведенных исследований было установлено, что оптимальным для постановки ПЦР является использование в реакционной смеси 2х Encyclo GC буфер и Encyclo polymerase. Для амплификации в работе использовали детектирующий амплификатор DTprime (ООО «ДНК-Технология», г. Москва). Процесс амплификации состоял из первичной денатурации, циклов амплификации и кривой плавления. Протокол амплификации был оптимизирован экспериментально. Детекция продуктов амплификации проводилась в реальном времени. На основе анализа проб венозной крови, полученных от пациентов больных сахарным диабетом второго типа, выявляли взаимосвязь повышенного риска развития ДР при сахарном диабете и наличии точечных мутаций генов: VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853, ITGA2 rs2910964, ADRB3 rs4994, APOE rs7412, APOE 429358. Подробная методика исследования приведена в нашей работе, опубликованной ранее [8].
Для выделения сочетаний генотипов по различным генам, ассоциированных с большим или меньшим риском ретинопатии, применяли метод MDR [11]. Анализ взаимосвязи прогрессирования диабетической ретинопатии с генотипами полиморфных генов у пациентов проводили по картине сетчатки методом стереоскопического фотографирования с помощью фундускамеры семи стандартных полей сетчатки. Данная методика оценки разработана в Early Treatment Diabetic Retinopathy Study (ETDRS) [12]. По полученным результатам создана шкала оценки прогрессирования ДР. После проведения прямой офтальмоскопии с расширенным зрачком производится фотографирование сетчатки (рис. 1), и результаты оцениваются по шкале (табл. 1).
Правый глаз Левый глаз
Рис. 1. Шкала ETDRS (Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study)
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2022 - N 6
Таблица 1
Шкала оценки тяжести ретинопатии
ETDRS уровень ретинопатии Тяжесть ретинопатии
10 Нет
20 Только микроаневризмы
35 Мягкая NPDR
43 Умеренная NPDR
47 Умеренно тяжелая NPDR
53 a-d Тяжелая NPDR
53 e Очень тяжелая NPDR
61 Мягкая PDR
65 Умеренная PDR
71, 75 Высокого риска PDR
81, 85 Прогрессирующая PDR
Затем по шкале проводится подсчет следующих патологических изменений в каждом из семи полей в правом и левом глазу соответственно:
• микроаневризмы;
• геморрагии;
• твердые экссудаты;
• ватные мягкие экссудаты;
• аномалии калибра вен;
• перивенозные экссудаты;
• аномалии артериол;
• ИРМА (интраретинальные микрососудистые аномалии);
• артериовенозные перетяжки;
• фиброзная пролиферация;
• возвышение сетчатки;
• неоваскуляризация;
• преретинальные геморрагии;
• витреальные геморрагии;
• очаги ЛФК;
• поля макулярного отека;
• уплотнение макулярного отека.
Отдельно проводится оценка состояния сетчатки в области диска зрительного нерва и макулярной области (поле 1 и 2). Затем каждое из найденных изменений оценивается в баллах от 0 (нет изменений) до 8 (оценка невозможна). Затем по каждому глазу баллы суммируются.
Самая тяжелая степень поражения сетчатки выражается 81-85 баллами. Уровень от 10 до 21 балла считается нормальным. О прогрессировании ДР свидетельствует переход через 2 уровня.
Статистический анализ полученных данных выполняли в среде пакета IBM SPSS 21. Для сопоставления частот генотипов с наличием ретинопатиии использовали критерий хи-квадрат Пирсона (Хи2). Критическое значение уровня значимости принимали равным 0,05.
Результаты и их обсуждение. Проводили анализ ухудшения стадии ДР у пациентов в течение года. Результаты когортного исследования представлены в табл. 2.
Таблица 2
Анализ ухудшения стадии ДР при наблюдении за пациентами в течение года
Изменение стадии ДР
Стадия ДР не изменилась ухудшилась хи2 Р
Абс. % Абс. %
Отсутствие ДР 225 85,0% 39 15,0%
Непролиферативная ДР 95 97,0% 3 3,0% 24,3 <0,001
Препролиферативная ДР 17 77,0% 5 23,0%
Пролиферативная ДР 79 100%
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2022 - N 6
Исходя из полученных данных, следует отметить, что среди группы пациентов с отсутствием ДР -у 39 человек установлено ухудшение зрения и появление ДР. В целом, всего у 47 человек ухудшилась стадия ДР. Ухудшение стадии ДР происходило в основном на одну градацию, и лишь у одного пациента сразу из непролиферативной ДР перешла в пролифератинвую стадию (табл. 3).
Таблица 3
Изменение стадий ДР у пациентов через год
Стадии ДР Стадии РП (исходная)
Отсутствие ретинопатии непролиферативная препролиферативная пролиферативная
Абс. % Абс. % Абс. % Абс. %
Отсутствие ДР 227 86%
Непролиферативная ДР 37 14% 95 97%
Препролиферативная ДР 3 3% 17 77%
Пролиферативная ДР 5 23% 79 100%
Дальнейший анализ динамики ДР у пациентов вели по изменению баллов по шкале ETDRS (табл. 4).
Таблица 4
Анализ баллов у пациентов по ETDRS при наблюдении через год
Стадии ДР не изменились баллы по ETDRS ухудшилась быллы по ETDRS Хи2 Р
Абс. % Абс. %
Отсутствие ДР 222 84,0% 42 16,0% 79,5 <0,001
Непролиферативная ДР 40 41,0% 58 59,0%
Препролиферативная ДР 10 45,0% 12 55,0%
Пролиферативная ДР 40 51,0% 39 49,0%
Установлено, что изменения баллов по ETDRS у пациентов в зависимости от стадии ДР происходили не равномерно, но статистически значимо. Так в группе больных с отсутствием ДР увеличились баллы у 16,0 % пациентов, в группе с препролиферативной ДР - у 59,0 % больных, в группе с препроли-феративной ДР - у 55,0 %, а в группе с пролиферативной ДР - у 49,0 %, что свидетельствует о прогрес-сировании ДР.
Также мы оценили взаимосвязь возрастания баллов шкалы ETDRS с генотипами полиморфных геном у пациентов (табл. 5).
По данным, представленным в табл. 5, видно, что достоверной взаимосвязи возрастания баллов ETDRS у пациентов с различными генотипами полиморфных генов - не установлено, но так как данные по гену ЛКК1В1 находятся на границе статистической значимости, мы провели более детальный анализ (табл. 6).
Установлено, что в случае предположения доминантности 1-го аллеля ^) гомозиготы по более редкому аллелю Л статистически значимо повышают риски ухудшения баллов по ETDRS за год (20% против 13%), ОШ=1,69 (95% ДИ: 1,00-2,83), р=0,047.
Таблица 5
Анализ взаимосвязи возрастания баллов ETDRS с генотипами полиморфных геном у пациентов
Ген Вариант генотипа Изменение баллов ETDRS хи2 р
не изменились баллы по ETDRS ухудшилась баллы по ETDRS
Абс. % Абс. %
VEGF rs2010963 C/C 98 31% 52 34% 1,5 0,476
G/C 130 42% 54 36%
G/G 84 27% 45 30%
ADRB3 rs4994 T/T 250 80% 121 80% 1,0 0,610
T/C 60 19% 30 20%
C/C 2 1%
AKR1B1 rs759853 G/G 111 36% 61 40% 5,6 0,060
G/A 160 51% 61 40%
A/A 41 13% 29 20%
ITGA2 rs2910964 C/C 115 37% 45 30% 3,4 0,183
C/T 151 49% 76 50%
T/T 45 14% 30 20%
APOE rs7412 C/C 259 83% 128 85% 2,0 0,370
C/T 49 16% 23 15%
T/T 4 1%
APOE rs429358 T/T 231 74% 121 80% 4,7 0,097
T/C 79 25% 27 18%
C/C 2 1% 3 2%
APOE e2e2 4 1% 9,2 0,102
e2e3 44 14% 19 13%
e3e3 183 59% 102 68%
e3e4 74 24% 23 15%
e4e4 2 1% 3 2%
гетерозиготы 5 2% 4 3%
На первом этапе нашего исследования с помощью MDR метода было установлено, что сочетание различных генотипов генов VEGF rs2010963 и AKR1B1 rs759853 сопряжено с развитием ДР и было установлено следующее:
• сочетание гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 с гетерозиготой G/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963 является неблагоприятным и ведет к развитию ДР;
• сочетание гетерозиготы G/А гена AKR1B1 rs759853 и гомозиготы С/С по дикому типу гена VEGF rs2010963 также является неблагоприятным;
• сочетание гомозиготы А/А по редкому аллелю гена AKR1B1 rs759853 и гетерозиготы G/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963 является неблагоприятным и ведет к развитию ДР.
На основании полученных данным мы провели оценку прогноза увеличения баллов ETDRS у пациентов при сочетании различных генотипов генов VEGF rs2010963 и AKR1B1 rs759853 (табл. 7).
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2022 - N 6
Таблица 6
Расчет ОШ для гена AKR1B1
Генотип не изменились баллы по ETDRS ухудшилась баллы по ETDRS ОШ (95%ДИ) хи2 Р
Абс. % Абс. % Референс -- 1й аллель
гомозигота 1 GG 111 35,58% 61 40,4% 1 6,981 0,030
гетерозигота GЛ 161 51,60% 60 39,7% 0,68 (0,44-1,04)
гомозигота 2 ЛЛ 40 12,82% 30 19,9% 1,36 (0,77-2,41)
Итого 312 100% 151 100%
Аллель1-- рецессивный
гомозигота 1 GG 111 35,6% 61 40,4% 1 1,013 0,314
гетерозигота +гомозигота 2 GЛ + ЛЛ 201 64,4% 90 59,6% 0,81 (0,55-1,21)
Аллель1-- доминантный
гомозигота 1 + гетерозигота GG + ОЛ 272 87,2% 121 80,1% 1 3,938 0,047
гомозигота 2 АЛ 40 12,8% 30 19,9% 1,69 (1-2,83)
Частоты аллелей
Аллель 1 О 383 61,4% 182 60,3% 1 0,106 0,745
Аллель 2 Л 241 38,6% 120 39,7% 1,05 (0,79-1,39)
Проверяем равновесие
Контроли Набл. Теор
гомозигота 1 ОО 111 0,356 118 0,377 2,439 0,118
гетерозигота ОЛ 161 0,516 148 0,474
гомозигота 2 ЛЛ 40 0,128 46,5 0,149
Случаи Теор. Набл.
гомозигота 1 ОО 54,84 0,363 61 0,404 4,381 0,036
гетерозигота ОЛ 72,32 0,479 60 0,397
гомозигота 2 ЛЛ 23,84 0,158 30 0,199
Таблица 7
Прогноз возрастания баллов ETDRS по сочетанию различных генотипов генов VEGF rs2010963 и
AKR1B1 rs759853
Изменение баллов ETDRS
Прогноз развития ДР не изменились баллы по ETDRS ухудшилась баллы по ETDRS хи2 Р
Абс. % Абс. %
Прогноз ДР по генам VEGF и AKR1B1 Низкий риск ДР 166 53,21% 53 35,10%
Повышенный риск ДР 146 46,79% 98 64,90% 12,66 <0,001
По данным, представленным в табл. 7, видно, что сочетание различных генотипов 2-х генов дает достоверной прогноз ухудшения баллов ETDRS у пациентов с отсутствием или наличием ДР любой стадии (для неблагоприятного сочетания генотипов ОШ = 2,1 (95%, ДИ: 1,41-3,14). Более детальный анализ сочетания генотипов генов VEGF rs2010963 и AKR1B1 rs759853 и прогноз возникновения ДР представлен в табл. 8.
Таблица 8
Детальный прогноз возникновения ДР по сочетанию различных генотипов генов VEGF ^2010963 и ЛШ1В1 ^759853
Прогноз развития ДР Ген 1 VEGF
Гомозиготы по дикому типу C/C Гетерозиготы G/C Гомозиготы по редкому аллелю G/G
Ген 3 AKR1B1 Гомозиготы по дикому типу G/G Хороший прогноз Неясный прогноз Неблаго приятный прогноз
Гетерозиготы G/A Неясный прогноз Хороший прогноз Неясный прогноз
Гомозиготы по редкому аллелю A/A Неясный прогноз Неблагоприятный прогноз Неблаго приятный прогноз
Используя метод MDR, установлено:
• сочетание гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 с гомозиготой С/С гена VEGF rs2010963 и сочетание гетерозиготы G/А гена AKR1B1 rs759853 с гетерозиготой G/С гена VEGF rs2010963 не ведет к развитию ДР (хороший прогноз);
• сочетания гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 с гетерозиготой G/С гена VEGF rs2010963; гетерозиготы G/А гена AKR1B1 rs759853 с гомозиготой по дикому типу С/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготой по редкому аллелю G/G гена VEGF rs2010963, а также сочетание гомозиготы по редкому аллелю А/А гена AKR1B1 rs759853 и гомозиготы С/С по дикому типу не являются достоверными факторами в развитии ДР (неясный прогноз, умеренный риск развития ДР).
• сочетания гомозиготы G/G по дикому типу гена AKR1B1 rs759853 и гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963, гомозиготы А/А по редкому аллелю гена AKR1B1 rs759853 и гетерозиготы G/С гена VEGF rs2010963 или гомозиготы G/G по редкому аллелю гена VEGF rs2010963 является неблагоприятным и ведет к развитию ДР (плохой прогноз).
На основании полученных данным мы провели оценку прогноза увеличения баллов ETDRS у пациентов при сочетании различных генотипов генов VEGF rs2010963 и AKR1B1 rs759853 с учетом риска развития ДР (табл. 9).
Таблица 9
Прогноз возрастания баллов ETDRS по сочетанию различных генотипов генов VEGF rs2010963 и ЛКЯ1В1 ^759853 с учетом установленных рисков развития ДР
Изменение баллов ETDRS
Прогноз развития ДР не изменились баллы по ETDRS ухудшилась баллы по ETDRS хи2 p
Абс. % Абс. %
Прогноз ДР по Низкий риск ДР 99 31,73% 28 18,54%
генам VEGF и Средний риск ДР 162 51,92% 82 54,30% 12,541 0,002
AKR1B1 Высокий риск ДР 51 16,35% 41 27,15%
По данным, представленным в табл. 9, видно статистически значимое возрастание баллов по шкале ETDRS у пациентов с учетом прогнозирования риска возникновения ДР при сочетании различных генотипов генов VEGF ^2010963 и AKR1B1 ^759853. При прогнозировании высокого риска действительно чаще наблюдалось увеличение баллов (27,15% против 16,35%, р=0,002, ОШ=1,91 (1,2-3,04) (рис. 2).
100% 90% 80% 70% H 60% 50% H 40% 30% H 20% 10% 0%
Классификатор по генам VEGF и AKR1B1
□ Высокий риск
□ Средний риск
□ Низкий риск
Не изменились Ухудшилась баллы по баллы по ETDRS ETDRS
Рис. 2. Распределение пациентов с наличием и отсутствием ухудшений баллов по ETDRS по классификатору на основе полиморфных вариантов гена VEGF rs2010963 иAKR1B1 rs759853
Ранее нами с помощью MDR метода было установлено, что сочетание различных генотипов трех генов VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853 и APOE (2 локуса) также сопряжено с развитием ДР. Прогноз возрастания баллов ETDRS по сочетанию различных генотипов трех генов VEGF rs2010963, AKR1B1 rs759853 и APOE (2 локуса) выявил неплохую тенденцию, но достигнутый уровень статистической значимости оказался выше критического.
Вывод: установлено влияние различных сочетаний генотипов полиморфных генов у пациентов на прогрессирование и развитие диабетической ретинопатии.
Литература
1. Бахарева Ю.С., Рымар О.Д., Чапаева Н.Н. Гемодинамические, биохимические, воспалительные, ростовые факторы у пациентов с сахарным диабетом 2 типа и доклинической диабетической нефропати-ей // Лечение и профилактика. 2016. № 2. С. 77-83.
2. Бездетко П.А. Лекарственная терапия диабетической ретинопатии на этапах ее развития (проблемы, сомнения, решения) // Офтальмология Восточная Европа. 2016. № 1 (28). С. 109-123.
3. Астахов Ю.С., Шадричев Ф.Е., Лисочкина А.Б. Диабетическая ретинопатия (тактика ведения пациента) // Клиническая офтальмология. 2004. № 2. С. 85-88.
4. Балашевич Л.И., Измайлов А.С. Диабетическая офтальмопатия. СПб.: Человек, 2012. 336 с.
5. Величко П.Б., Османов Э.М. Современные методические подходы к лечению диабетической ретинопатии // Вестник ТГУ. 2013. Т. 18, № 6. С. 3248-3249.
6. Воробьева И.В., Меркушенкова Д.А. Диабетическая ретинопатия у больных сахарным диабетом второго типа. Эпидемиология, современный взгляд на патогенез // Офтальмология. 2012. Т. 9, № 4. С. 18-21.
7. Ермакова Н.А. Диабетическая ретинопатия. Клиника, диагностика, классификация, лечение // Клиническая офтальмология. 2013. № 1. С. 33.
8. Исхакова А.Г. Анализ частоты мутации генов, ассоциированных с диабетической ретинопатией, в поволжской популяции [Электронный ресурс] // Современные проблемы науки и образования. 2019. № 6. URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=29283 (дата обращения: 09.01.2021).
9. Исхакова А.Г. Роль генетических факторов риска в развитии диабетической ретинопатии. Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье: Выпуск № 5 /2018. Самара, 2018. С. 41-49
10. Исхакова А.Г., Тороповский А.Н., Золотарев А.В., Павлова О.Н., Комарова М.В. Молекулярно-генетические аспекты ранней диагностики диабетической ретинопатии // Международный научно-исследовательский журнал. 2021. № 3 (105). С. 79-85
11. Hahn L.W., Ritchie M.D., Moore J.H. Multifactor dimensionality reduction software for detecting gene-gene and gene-environment interactions // Bioinformatics. 2003. Vol.19, №3. P. 376-382.
12. Kaiser P.K. Prospective evaluation of visual acuity assessment: a comparison of snellen versus ETDRS charts in clinical practice (An AOS Thesis) // Trans Am Ophthalmol Soc. 2009. №107. Р. 311-324
References
1. Bahareva JuS, Rymar OD, Chapaeva NN. Gemodinamicheskie, biohimicheskie, vospalitel'nye, rostovye faktory u pacientov s saharnym diabetom 2 tipa i doklinicheskoj diabeticheskoj nefropatiej [Hemodynamic, biochemical, inflammatory, growth factors in patients with type 2 diabetes mellitus and preclinical diabetic nephropathy]. Lechenie i profilaktika. 2016;2:77-83. Russian.
2. Bezdetko PA. Lekarstvennaja terapija diabeticheskoj retinopatii na jetapah ee razvitija (problemy, somnenija, reshenija) [Drug therapy of diabetic retinopathy at the stages of its development (problems, doubts, solutions)]. Oftal'mologija Vostochnaja Evropa. 2016;1 (28):109-23. Russian.
3. Astahov JuS, Shadrichev FE, Lisochkina AB. Diabeticheskaja retinopatija (taktika vedenija pacienta) [Diabetic retinopathy (tactics of patient management)]. Klinicheskaja oftal'mologija. 2004;2:85-8. Russian.
4. Balashevich LI, Izmajlov AS. Diabeticheskaja oftal'mopatija [Diabetic ophthalmopathy]. Sankt-Peterburg: Chelovek; 2012. Russian.
5. Velichko PB, Osmanov JeM. Sovremennye metodicheskie podhody k lecheniju diabeticheskoj retinopatii [Modern methodological approaches to the treatment of diabetic retinopathy]. Vestnik TGU. 2013;18(6):3248-9. Russian.
6. Vorob'eva IV, Merkushenkova DA. Diabeticheskaja retinopatija u bol'nyh saharnym diabetom vtorogo tipa. Jepidemiologija, sovremennyj vzgljad na patogenez [Diabetic retinopathy in patients with type II diabetes mellitus. Epidemiology, a modern view of pathogenesis]. Oftal'mologija. 2012;9(4):18-21. Russian.
7. Ermakova NA. Diabeticheskaja retinopatija. Klinika, diagnostika, klassifikacija, lechenie [Diabetic retinopathy. Clinic, diagnosis, classification, treatment]. Klinicheskaja oftal'mologija. 2013;1:33. Russian.
8. Ishakova AG. Analiz chastoty mutacii genov, associirovannyh s diabeticheskoj retinopatiej, v povolzhskoj populjacii [Analysis of the frequency of mutation of genes associated with diabetic retinopathy in the Volga population] [Jelektronnyj resurs]. Sovremennye problemy nauki i obrazovanija. 2019 [cited Jan 09];6 [about 6 p.]. Russian. Available from: http://science-education.ru/ru/article/view?id=29283.
9. Ishakova AG. Rol' geneticheskih faktorov riska v razvitii diabeticheskoj retinopatii [The role of genetic risk factors in the development of diabetic retinopathy]. Vestnik medicinskogo instituta «REAVIZ»: Reabilitacija, Vrach i Zdorov'e: Vypusk № 5 /2018. Samara; 2018. Russian.
10. Ishakova AG, Toropovskij AN, Zolotarev AV, Pavlova ON, Komarova MV. Molekuljarno-geneticheskie aspekty rannej diagnostiki diabeticheskoj retinopatii [Molecular genetic aspects of early diagnosis of diabetic retinopathy]. Mezhdunarodnyj nauchno-issledovatel'skij zhurnal. 2021;3 (105):79-85 Russian.
11. Hahn Lw, Ritchie MD, Moore JH. Multifactor dimensionality reduction software for detecting genegene and gene-environment interactions. Bioinformatics. 2003;19(3):376-82.
12. Kaiser PK. Prospective evaluation of visual acuity assessment: a comparison of snellen versus ETDRS charts in clinical practice (An AOS Thesis). Trans Am Ophthalmol Soc. 2009;107:311-24
Библиографическая ссылка:
Исхакова А.Г., Тороповский А.Н., Павлова О.Н., Гуленко О.Н., Комарова М.В., Варфоломеева Л.Г., Девяткин А.А. Оценка взаимосвязи прогрессирования диабетической ретинопатии с генотипами полиморфных генов у пациентов с установленным диагнозом «диабетическая ретинопатия» // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2022. №6. Публикация 3-2. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2022-6/3-2.pdf (дата обращения: 15.11.2022). DOI: 10.24412/2075-4094-2022-6-3-2. EDN WWJYVY* Bibliographic reference:
Ishakova AG, Toropovskij AN, Pavlova ON, Gulenko ON, Komarova MV, Varfolomeeva LG, Deviatkin AA. Ocenka vzaimosvjazi progressirovanija diabeticheskoj retinopatii s genotipami polimorfnyh genov u pacien-tov s ustanovlennym diagnozom «diabeticheskaja retinopatija» [Assessing the relationship between diabetic retinopathy progression and polymorphic gene genotypes in patients diagnosed with diabetic retinopathy]. Journal of New Medical Technologies, e-edition. 2022 [cited 2022 Nov 15];6 [about 10 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2022-6/3-2.pdf. DOI: 10.24412/2075-4094-2022-6-3-2. EDN WWJYVY
* номера страниц смотреть после выхода полной версии журнала: URL: http://medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2022-6/e2022-6.pdf
"идентификатор для научных публикаций EDN (eLIBRARY Document Number) будет активен после выгрузки полной версии журнала в eLIBRARY
