Научная статья на тему 'ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НА КЛЕТОЧНУЮ ЛИНИЮ М HELA'

ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НА КЛЕТОЧНУЮ ЛИНИЮ М HELA Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
204
48
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ / ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ТРАВЫ

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Балакина Анастасия Александровна, Кузьмина Елена Александровна, Древова Алёна Николаевна, Мубарак Маниа Мабрук, Карсункина Наталья Петровна

Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева Основное внимание в разработке препаратов из растительного сырья, используемых в лечении онкологических заболеваний, уделяется поиску модификаторов биологического ответа. Эта группа биологически активных веществ - ферментов, алкалоидов, различных микроэлементов и регуляторов роста, целенаправленно действуя на опухолевые клетки, оказывает на них цитотоксическое действие, а также стимулирует устойчивость организма к опухолям, усиливая действие терапии при уменьшении токсического действия на организм. Лекарственные растения, содержащие фенольные соединения, флавоноиды, феногликозиды и т.д., играют важную роль в терапии онкологических заболеваний. Эти вещества обладают высокой антиоксидантной активностью, что приводит к нейтрализации свободных радикалов, снижению их концентрации, способствуя стабилизации клеточных мембран; обеспечивают обезвреживание или удаление токсинов, накапливающихся при опухолеобразовании, за счет гепатопротекторного и диуретического эффекта. В данной работе с помощью MTT-теста на клеточной линии эпителиоидной карциномы шейки матки человека (сублиния HeLa, клон M HeLa) изучали цитотоксическое действие экстрактов из Hypericum perforatum L. (семейство Hypericaceae), Thymus vulgaris L., Thymus serpyllum L., Mentha pulegium L. (семейство Lamiaceae). Экстракт из растений зверобоя продырявленного показал цитотоксичность ниже 50 % даже при максимальной концентрации (2500 мкг/мл). Экстракт из растений мяты болотной в той же концентрации привел к почти 100 % гибели опухолевых клеток. Наибольшую эффективность показали экстракты из растений тимьяна обыкновенного и ползучего: уже при концентрации 500 мкг/ мл погибло около 50 % клеток. Полученные результаты свидетельствуют о перспективах изучения и использования экстрактов лекарственных растений в терапии онкологических заболеваний.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Балакина Анастасия Александровна, Кузьмина Елена Александровна, Древова Алёна Николаевна, Мубарак Маниа Мабрук, Карсункина Наталья Петровна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

ESTIMATION OF CYTOTOXIC EFFECT OF MEDICINAL HERBAL EXTRACTS ON М HELA CELLS

The main focus in the development of products based on medicinal stock and used in cancer treatment is the search for biological response modifiers. This is a group of biologically active compounds: enzymes, alkaloids, various microelements and growth regulators - specifically acting on tumor cells, they have a cytotoxic effect, but also stimulate tumor resistance of an organism, thus strengthening the effectiveness of therapy by reducing the toxic effects on a body. Medicinal plants, which include phenolic compounds, flavonoids, xanthones etc., occupy an important role in cancer treatment. The substances have a high antioxidant activity that leads to the neutralization of free radicals and to decreasing their concentrations, promoting cell membranes stabilization, provide complete neutralization and removal of toxins that accumulate in cancer due to hepatoprotective and diuretic effects. In this study we used extracts from Hypericum perforatum L. (family Hypericaceae), Thymus vulgaris L., Thymus serpyllum L., Mentha pulegium L. (family Lamiaceae). To assess the cytotoxicity we used MTT-test on epithelioid cervical human carcinoma cell line (subline of HeLa, clone M HeLa). Extract of Hypericum plants showed cytotoxicity below 50 % even at the maximum concentration (2500 yg/ml). Mint extract at a concentration 2500 yg/ml resulted in almost 100 % tumor cell death. Extracts from Thymus plants were the most effective: already at a concentration of 500 yg/ml a half of cells were killed. The results show prospects of studying and using extracts of medicinal herbs in cancer treatment.

Текст научной работы на тему «ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НА КЛЕТОЧНУЮ ЛИНИЮ М HELA»

ТРИБУНА МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ

УДК 633.88:57.083.36

ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИИ НА

КЛЕТОЧНУЮ ЛИНИЮ М HeLa

БАЛАКИНА Анастасия Александровна, канд. биол. наук, научный сотрудник лаборатории молекулярной биологии, Институт проблем химической физики РАН, 142432, Московская область, г. Черноголовка, elenka291090@mail.ru

КУЗЬМИНА Елена Александровна, elenka291090@mail.ru ДРЕВОВА Алёна Николаевна, alena90dan@mail.ru

студенты кафедры генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства, Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева

МУБАРАК Маниа Мабрук, аспирант кафедры генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства, МСХА имени К.А. Тимирязева; ст. преп. Университета Даманхура, 22516, Даманхур, Египет, Элабадия-комплекс, drmaneea1981@hotmail.com

КАРСУНКИНА Наталья Петровна, канд. биол. наук, доцент кафедры генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства

КАЛАШНИКОВА Елена Анатольевна, д-р биол. наук, профессор кафедры генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства, kalash0407@mail.ru

ЧЕРЕДНИЧЕНКО Михаил Юрьевич, канд. биол. наук, доцент кафедры генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства, michael.tsch@gmail.com

Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева Основное внимание в разработке препаратов из растительного сырья, используемых в лечении онкологических заболеваний, уделяется поиску модификаторов биологического ответа. Эта группа биологически активных веществ - ферментов, алкалоидов, различных микроэлементов и регуляторов роста, целенаправленно действуя на опухолевые клетки, оказывает на них цитотоксическое действие, а также стимулирует устойчивость организма к опухолям, усиливая действие терапии при уменьшении токсического действия на организм. Лекарственные растения, содержащие фе-нольные соединения, флавоноиды, феногликозиды и т.д., играют важную роль в терапии онкологических заболеваний. Эти вещества обладают высокой антиоксидантной активностью, что приводит к нейтрализации свободных радикалов, снижению их концентрации, способствуя стабилизации клеточных мембран; обеспечивают обезвреживание или удаление токсинов, накапливающихся при опухолеобразовании, за счет гепатопротекторного и диуретического эффекта. В данной работе с помощью MTT-теста на клеточной линии эпителиоидной карциномы шейки матки человека (сублиния HeLa, клон M HeLa) изучали цитотоксическое действие экстрактов из Hypericum perforatum L. (семейство Hypericaceae), Thymus vulgaris L., Thymus serpyllum L., Mentha pulegium L. (семейство Lamiaceae). Экстракт из растений зверобоя продырявленного показал цитотоксичность ниже 50 % даже при максимальной концентрации (2500 мкг/мл). Экстракт из растений мяты болотной в той же концентрации привел к почти 100 % гибели опухолевых клеток. Наибольшую эффективность показали экстракты из растений тимьяна обыкновенного и ползучего: уже при концентрации 500 мкг/ мл погибло около 50 % клеток. Полученные результаты свидетельствуют о перспективах изучения и использования экстрактов лекарственных растений в терапии онкологических заболеваний.

Ключевые слова: Hypericum perforatum, Thymus vulgaris, Thymus serpyllum, Mentha pulegium, M HeLa, МТТ-тест, цитотоксичность, лекарственные травы

Введение токсическое действие, а также стимулируют про-

Основным направлением в разработке пре- тивоопухолевую устойчивость системы организма паратов, основанных на лекарственном сырье и в целом, усиливая при этом эффективность тера-

используемых в терапии онкологических заболеваний, является поиск модификаторов биологических реакций. Это группа биологически активных соединений, которая включает в себя вещества, различные по своему строению, происхождению и свойствам. Данные вещества, целенаправленно действуя на опухолевые клетки, оказывают цито-

пии путем ослабления токсического воздействия на организм.

Действие фармакотерапевтических механизмов лекарственных растений на организм человека, в первую очередь, основано на действии входящих в них биологически активных веществ (БАВ). К ним относятся ферменты, фитонциды, фенолы,

© Балакина А. А., Кузьмина Е. А., Древова А. Н., Мубарак М. М. Карсункина Н. П. Калашникова Е. А., Чередниченко М. Ю., 2015г.

Вестник РГАТУ, № 4 (28), 2015

алкалоиды, различные микроэлементы и регуляторы роста, которые являются катализаторами в обмене веществ [4]. Лекарственные растения, содержащие в своем составе флавоноиды и фено-гликозиды, обеспечивают полное обезвреживание и удаление шлаков и токсинов, накапливающихся при онкологических заболеваниях, благодаря ге-патопротекторному и диуретическому действию. В настоящее время проводится изучение моле-кулярно-генетических механизмов, в основе которых лежит фармакологическое действие средств растительного происхождения.

По данным, которые были получены в результате клинических и экспериментальных исследований, применение фитопрепаратов является очень перспективным направлением в терапии опухолевых заболеваний. Ведущее место занимают лекарственные средства, повышающие противоопухолевую резистентность организма и препятствующие развитию метастаз и рецидивов опухолей, а также снижающие токсические эффекты химиотерапии.

Mahavorasirikul с соавторами установили ци-тотоксический эффект растительных экстрактов трав (Atractylodes lancea, Kaempferia galanga, Zingiber officinale, Piper chaba, Mesua ferrea, Ligusticum sinense, Mimusops elengi), используемых в народной медицине Таиланда, на холан-гиокарциному (CL-6), гепатокарциному (HepG2) и карциному гортани (Hep-2). Токсическое влияние растительных экстрактов на опухолевые клетки по сравнению с нормальными эпителиальными клетками (HRE) установили при помощи МТТ-теста, в качестве контроля использовался 5-фторурацил. Данные растения показали высокую цитотоксич-ность: для линии CL-6 IC50 составила от 24,09 до 48,23 мкг/мл, для линии Нер-2 - от 18,93 до 32,40 мкг/мл, для HepG2 - от 9,67 до 115,47 мкг/мл. Наиболее перспективным в отношении всех трех линий раковых клеток был признан экстракт имбиря Zingiber officinale. Наиболее чувствительной к воздействию экстрактов оказалась линия CL-6, наиболее устойчивой - HepG2. Также было установлено, что тип опухоли и степень злокачественности оказывают влияние на чувствительность раковых клеток к растительным экстрактам [5].

В результате исследований Patel с соавторами была подтверждена противоопухолевая активность карвакрола, содержащегося в эфирном масле душицы обыкновенной и некоторых других лекарственных растений, на клетках рака предстательной железы [6]. Выявлено, что данное соединение индуцирует апоптоз раковых клеток. Далее провели ряд тестов, которые позволили определить пути передачи сигнала апоптоза опухолевых клеток. Предположительно установлено, что токсические концентрации простых фенолов активируют гены Р53, рецепторы клеточной смерти [3]. Снижение действия ростовых факторов, которые выделяются клеточным окружением, является сигналом, стимулирующим клетку к апоптозу. Далее идет активация генов рецепторов клеточной смерти FAS, TNF и высвобождение цитохрома

с из митохондрий, происходит запуск каспазного каскада, в результате происходит фрагментирова-ние ДНК и клетки в целом.

За счет антиоксидантной активности тимол и карвакрол играют важную роль в предотвращении образования опухолей. Их антиоксидантная активность объясняется фенольной структурой, а благодаря окислительно-восстановительным свойствам обосновано проявление противоокис-лительной активности этих соединений.

Rahimifard с соавторами был изучен цитоток-сический эффект эфирных масел и экстрактов некоторых видов рода Mentha: M. х piperita, M. х spicata, M. aquatica, M. crispa, M. pulegium и M. longifolia - на клеточных линиях Vero, Hep2 и HeLa. Были испытаны различные концентрации эфирных масел и экстрактов. Результаты показали, что все образцы токсичны в отношении клеточных линий Vero, HeLa и Hep2 (IC50 28,1-166,2 мкг/мл) [7].

Shirazi с соавторами оценивали цитотоксич-ность эфирного масла и метанольного экстракта Mentha pulegium L., собранной в Северном Иране. Была проанализирована цитотоксичность на клеточных линиях аденокарциномы яичников человека SK-OV-3, злокачественной карциномы шейки матки HeLa и карциномы легких А549. Результаты показали, что метанольный экстракт не показал цитотоксический эффект, а эфирное масло оказалось мощным цитотоксическим агентом на вышеуказанных трех клеточных линиях. IC50 эфирного масла на SK-OV-3, Hela и А549 составили 14,10; 59,10 и 18,76 мкг/мл, соответственно. Было высказано предположение, что эфирное масло Mentha pulegium может рассматриваться как потенциальный токсичный агент на клеточных линиях рака человека и возможный кандидат для использования в химиотерапии рака [8] .

Aslani с соавторами оценивали цитотоксиче-ский эффект водно-спиртового экстракта Mentha pulegium перед цветением на клеточную линию K562 в качестве модели хронического миелолей-коза. Цитотоксичность экстракта М. pulegium до цветения оценивали по методу МТТ. Результаты показали, что наибольшее цитотоксическое действие водно-спиртового экстракта c IC50=50 мкг/ мл наблюдалось спустя 72 часач после обработки клеточной линии [2].

Таким образом, использование лекарственных трав в виде экстрактов различными растворителями представляет собой чрезвычайно перспективное направление профилактики и лечения онкологических заболеваний, которое нуждается в проведении дальнейших всесторонних испытаний.

Материалы и методы

Растительный экстракт получали на кафедре генетики, биотехнологии, селекции и семеноводства РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева из микропобегов растений зверобоя продырявленного Hypericum perforatum L. (семейство Hypericaceae), тимьяна обыкновенного Thymus vulgaris L., тимьяна ползучего Thymus serpyllum L., мяты болотной Mentha pulegium L. (семейство Lamiaceae), культи-

вируемых in vitro на питательной среде Мурасиге и Скуга.

Для получения экстракта брали сухую массу образца (200-500 мг), которую экстрагировали 100 %-ным метанолом (3-5 мл), путем растирания ее в ступке. После этого полученную массу помещали в стеклянные пробирки и оставляли при комнатной температуре на одни сутки. По истечении времени экстракции анализируемый образец дважды фильтровали через фильтровальную бумагу, после чего полученный растительный экстракт лио-фильно высушивали.

Выделенный осадок растворяли в дистиллированной воде (1 мл) и стерилизовали через бактериологический фильтр. Полученные экстракты растворяли в культуральной среде в различных концентрациях. Изучение цитотоксичности проводили в лаборатории молекулярной биологии Института проблем химической физики РАН. Для исследования цитотоксичности использовали линию клеток M HeLa (эпителиоидная карцинома шейки матки человека, сублиния HeLa, клон M HeLa, коллекция Института цитологии РАН, Санкт-Петербург). Культивирование опухолевых клеток проводили согласно общепринятой методике [1]. Клетки выращивали на среде EMEM (Игла-МЕМ) с добавлением 10 % эмбриональной телячьей сыворотки и 1 % NEAA (незаменимые аминокислоты) в атмосфере 5 % СО2 и температуре 37 °С.

Для проведения ¡экспериментов клетки рассе-вали в 96-луночные культуральные планшеты с плотностью культуры 50000 кл/мл по 100 мкл среды в лунку. Через 24 ч после посева культураль-

ными концентрациями растительных экстрактов. Инкубацию клеток с экстрактами проводили в течение 72 часов.

Повторность в одном эксперименте каждого варианта 8-кратная, представлены данные 3-х независимых экспериментов. Для определения количества выживших клеток использовали метод МТТ-теста. В каждую лунку после 72 часов культивирования наносили 10 мкл раствора МТТ-красителя и инкубировали в стандартных условиях в течение 3 часов. Культуральную среду удаляли водоструйным насосом и окрашенные клетки растворяли в 200 мкл ДМСО. Планшет помещали на шейкер для полного растворения клеток (1520 мин.). Измерение поглощения проводили при длине волны 570 нм на планшетном фотометре «Эфос». Затем проводили расчет интенсивности МТТ-окрашивания в процентах относительно контроля (контроль - 100 %). Чем выше процент окрашивания, тем выше жизнеспособность клеток и ниже цитотоксичность экстрактов.

Статистическую обработку результатов эксперимента проводили с использованием параметрических критериев Стьюдента и Дункана с помощью программы AGROS (версия 2.11), а также стандартных пакетов программы Windows Excel 2010.

Результаты и обсуждение

Исследования, проведенные с разными видами и сортами растений, показали различный ци-тотоксический эффект на клетки линии M HeLa. Полученные результаты приведены в таблице и на рисунках 1-3.

ную среду удаляли и заменяли средой с различ-

Таблица - Цитотоксичность экстрактов различных видов и сортов растений, %

Вид, сорт Концентрация экстракта, мкг/мл

50 500 2500

H. perforatum, дикий тип 3,2а-с1 11,0c-e 43,3g-k

H. perforatum, сорт Солнечный 1,5аЬ 0,0а 34,9e-h

Th. vulgaris, сорт Альпийский мед 3,2а-е 61,6i-m 98,6n-q

Th. serpyllum, сорт Пикантный 2,7-c 45,0e-g 100,0p-s

M. pulegium, сорт Пеннироял 3,2а-с1 20,8d-f 100,0p-s

M. pulegium, сорт Соня 0,0а 0,0а 93,5mn

Примечание: варианты, отмеченные одинаковыми буквами, статистически незначимо отличаются по критерию Дункана (а = 005).

Так, для зверобоя продырявленного Hypericum perforatum L. дикого типа и сорта Солнечный, выращенных in vitro, полученные экстракты ни при одной из изученных концентраций не проявили цитотоксичность выше 50 % (рис. 1). Наибольший эффект (43,3 % погибших клеток) при концентрации 2500 мкг/мл наблюдали в случае дикого типа зверобоя. Для сорта Солнечный при той же концентрации наблюдали цитотоксичность экстракта только в 34,9 % случаев.

Иные результаты были отмечены с экстрактами, полученными из растений мяты. В исследовании участвовало два сорта мяты болотной Mentha pulegium L. - Пеннироял и Соня. В результате исследований было установлено, что при концен-

трации 500 мкг/мл экстракт растений сорта Соня проявлял большую цитотоксичность, чем экстракт растений сорта Пеннироял (рис. 2). Причем при этих концентрациях цитотоксичность экстрактов не была высокой, и гибель раковых клеток составила всего 20,8 %. Однако с увеличением концентрации до 2500 мкг/мл оба экстракта проявили высокую цитотоксичность, и в этом случае гибель опухолевых клеток составила 100 %. Это согласуется с данными Rahimifard с соавторами, полученными на клеточных линиях Vero, HeLa и Hep2 при использовании эфирных масел и экстрактов некоторых видов рода Mentha: Mentha х piperita, M. х spicata, M. aquatica, M. crispa, M. pulegium и M. longifolia [7].

Вестник РГАТУ, № 4 (28), 2015

Рис. 1 - Влияние экстракта зверобоя продырявленного Hypericum perforatum L.

100 so 60

I г

il Сорт Пениироял

500мкг 2500 мкг

Рис. 2 - Влияние экстракта мяты болотной Mentha pulegium L.

■ Thymus vulgaris

■ Thymus serpyllum

Рис. 3 - Влияние экстрактов тимьяна обыкновенного Thymus vulgaris L. и тимьяна ползучего Thymus serpyllum L. на жизнеспособность опухолевых клеток M HeLa

В результате проведенных исследований экстрактов тимьяна обыкновенного Thymus vulgaris L. и тимьяна ползучего Thymus serpyllum L. было установлено, что наибольшей токсичностью для изученной линии клеток обладает экстракт, полученный из растений Th. serpyllum. Более 50 % раковых клеток гибнет уже при концентрации 500 мкг/мл. С увеличением концентрации цитотоксичность экстрактов возрастает и достигает 100 % при 2500 мкг/мл. Высокая цитотоксичность, вероятно, связана с тем, что в состав эфирного масла тимьянов, главным образом, входит карвакрол, который обладает цитотоксическим действием.

Выводы

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что полученные экс-

тракты обладают разной цитотоксичностью для линии раковых клеток M-HeLa и эта реакция ви-доспецифична, что можно объяснить различным составом вторичных метаболитов в исследуемых растениях. Наибольшим ингибирующим действием обладают экстракты мяты болотной (Mentha pulegium L.) и растений рода Thymus L. Экстракты, полученные из растений зверобоя, не проявили токсичный эффект на раковые клетки M HeLa. Эти результаты показывают перспективы использования экстрактов некоторых лекарственных трав при лечении онкологических заболеваний.

^исок литературы

1. Фрешни, Р.Я. Культура животных клеток. Практическое руководство [Текст] / Р.Я. Фрешни.

- М. : Мир, 2011. - 333 с.

2. Aslani, E. Cytotoxic effect of hydroalcoholic extract of Mentha Pulegium before flowering on k562 leukemia cell line / E. Aslani, N. Naghsh, M. Ranjbar // Arak Medical University Journal. - 2013. - Vol. 16(79). - P. 1-10.

3. Karkabounas, S. Anticarcinogenic and antiplatelet effects of carvacrol / S. Karkabounas, O.K. Kostoula, T. Daskalou // Experimental Oncology.

- 2006. - Vol. 2. No. 28. - P. 121-125.

4. Lagouri, V. Composition and antioxidant activity of essential oils from Oregano plants grown wild in Greece / V. Lagouri, G. Blekas, M. Tsimidou // Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und Forschung. - 1993. - Vol. 197. Nr. 1. - P. 20-23.

5. Mahavorasirikul, W. Cytotoxic activity of Thai medicinal plants against human cholangiocarcinoma, laryngeal and hepatocarcinoma cells in vitro / W. Mahavorasirikul, V. Viyanant, W. Chaijaroenkul, A. Itharat, K. Na-Bangchang // BMC Complementary and Alternative Medicine. - 2010. - Vol. 10(55). -http://www.biomedcentral.com/1472-6882/10/55

6. Patel, B. Anti-proliferative effects of carvacrol on human prostate cancer cell line, LNCaP / B. Patel, V.R. Shah, S.A. Bavadekar // The FASEB Journal. -2012. - Vol. 26. - P. 1037.5.

7. Rahimifard, N. Effects of Essential Oils and Extracts of some Mentha species on Vero, Hela and Hep2 Cell Lines / N. Rahimifard, H. Hajimehdipoor, M.H. Hedayati, O. Bagheri, H. Pishehvar, Y. Ajani // Journal of Medicinal Plants. - 2010. - Vol. 9. No. 35.

- P. 88-92.

8. Shirazi, F.H. Evaluation of Northern Iran Mentha pulegium L. cytotoxicity / F.H. Shirazi, N. Ahmadi, M. Kamalinejad // DARU. - 2004. - Vol. 12. Nr. 3. - P. 106-110.

ESTIMATION OF CYTOTOXIC EFFECT OF MEDICINAL HERBAL EXTRACTS ON М HELA CELLS Balakina Anastasia A., scientific worker, Candidate of Biology, Institute of Problems of Chemical Phisics RAS, stasya.balakina@gmail.com

Kuz'mina Elena A., bachelor student, Russian Timiryazev State Agrarian University, elenka291090@mail.

ru

Drevova Alyona N., master student, Russian Timiryazev State Agrarian University, alena90dan@mail.ru Moubarak Maneea M., PhD-student, Russian Timiryazev State Agrarian University, senior lecturer, Damanhur University, drmaneea1981@hotmail.com

Karsunkina Natalya P., associate professor, Candidate of Biology, Russian Timiryazev State Agrarian University

Kalashnikova Elena A., professor, Doctor of Biology, corresponding member of RANS, Russian Timiryazev State Agrarian University, kalash0407@mail.ru

Cherednichenko Mikhail Yu., associate professor, Candidate of Biology, Russian Timiryazev State Agrarian University, michael.tsch@gmail.com

The main focus in the development of products based on medicinal stock and used in cancer treatment is the search for biological response modifiers. This is a group of biologically active compounds: enzymes, alkaloids, various microelements and growth regulators - specifically acting on tumor cells, they have a cytotoxic effect, but also stimulate tumor resistance of an organism, thus strengthening the effectiveness of therapy by reducing the toxic effects on a body. Medicinal plants, which include phenolic compounds, flavonoids, xanthones etc., occupy an important role in cancer treatment. The substances have a high antioxidant activity that leads to the neutralization of free radicals and to decreasing their concentrations, promoting cell membranes stabilization, provide complete neutralization and removal of toxins that accumulate in cancer due to hepatoprotective and diuretic effects. In this study we used extracts from Hypericum perforatum L. (family Hypericaceae), Thymus vulgaris L., Thymus serpyllum L., Mentha pulegium L. (family Lamiaceae). To assess the cytotoxicity we used MTT-test on epithelioid cervical human carcinoma cell line (subline of HeLa, clone M HeLa). Extract of Hypericum plants showed cytotoxicity below 50 % even at the maximum concentration (2500 yg/ml). Mint extract at a concentration 2500 yg/ml resulted in almost 100 % tumor cell death. Extracts from Thymus plants were the most effective: already at a concentration of 500 yg/ml a half of cells were killed. The results show prospects of studying and using extracts of medicinal herbs in cancer treatment.

Key words: Hypericum perforatum, Thymus vulgaris, Thymus serpyllum, Mentha pulegium, M HeLa, MTT-test, cytotoxicity, medicinal herbs

Literatura

1. Freshni R.Ya. Kultura zhivotnykh kletok: Prakticheskoye rukovodstvo/R.Ya. Freshni. - M.: Mir, 2011. -333 p.

2. Aslani, E. Cytotoxic effect of hydroalcoholic extract of Mentha Pulegium before flowering on k562 leukemia cell line /E. Aslani, N. Naghsh, M. Ranjbar //Arak Medical University Journal. - 2013. - Vol. 16(79). - P. 1-10.

3. Karkabounas, S. Anticarcinogenic and antiplatelet effects of carvacrol/S. Karkabounas, O.K. Kostoula, T. Daskalou //Experimental Oncology. - 2006. - Vol. 2. No. 28. - P. 121-125.

4. Lagouri, V. Composition and antioxidant activity of essential oils from Oregano plants grown wild in Greece / V. Lagouri, G. Blekas, M. Tsimidou // Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und Forschung. -1993. - Vol. 197. Nr. 1. - P. 20-23.

5. Mahavorasirikul, W. Cytotoxic activity of Thai medicinal plants against human cholangiocarcinoma, laryngeal and hepatocarcinoma cells in vitro / W. Mahavorasirikul, V. Viyanant, W. Chaijaroenkul, A. Itharat, K. Na-Bangchang // BMC Complementary and Alternative Medicine. - 2010. - Vol. 10(55). - http://www. biomedcentral.com/1472-6882/10/55

6. Patel, B. Anti-proliferative effects of carvacrol on human prostate cancer cell line, LNCaP/B. Patel, V.R. Shah, S.A. Bavadekar// The FASEB Journal. - 2012. - Vol. 26. - P. 1037.5.

7. Rahimifard, N. Effects of Essential Oils and Extracts of some Mentha species on Vero, Hela and Hep2 Cell Lines / N. Rahimifard, H. Hajimehdipoor, M.H. Hedayati, O. Bagheri, H. Pishehvar, Y. Ajani // Journal of Medicinal Plants. - 2010. - Vol. 9. No. 35. - P. 88-92.

8. Shirazi, F.H. Evaluation of Northern Iran Mentha pulegium L. cytotoxicity / F.H. Shirazi, N. Ahmadi, M. Kamalinejad // DARU. - 2004. - Vol. 12. Nr. 3. - P. 106-110.

УДК 631.6

ИЗУЧЕНИЕ ВОДНО-СОЛЕВЫХ ЭЛЕМЕНТОВ НА МЕЛИОРИРУЕМЫХ ПОЧВАХ ШИРВАНСКОЙ СТЕПИ (НА КЛЮЧЕВОМ УЧАСТКЕ КЮРДАМИРСКОГО РАЙОНА )

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

МУСТАФАЕВ Фарид Мустафа оглы, докторант, Институт Почвоведения и Агрохимии Национальной Академии Наук Азербайджана, Баку, meliorasiya58@mail.ru

В статье даны подробные сведения о результатах комплексных исследований, проведенных на выбранном опытном участке орошаемых лугово-сероземных почвах Ширванской степи (Кюдамир-ский район, бывшая хлопководческая опытная подстанция). Было определено, что на этом участке почвы подвержены различной степени засоления и солонцеватости. В почвах количество солей 0,285-2,210 %, минерализация грунтовых вод 3,018-3,358 г/л; рН 8,0-8,6; гумус 1,58-0,26 %; СПО -

_© Мустафаев Ф. М. 2015г._

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.