CC BY
5Духинова Марина Сергеевна, dukhinova@scamt-itmo.ru, ООО «НИЦ Синтез технологии», Сочи Ключевые слова:
железо, цитотоксичность, митохондриальный потенциал, опухоль
Актуальность
Поиск новых стратегий для улучшения качества жизни онкобольных и повышения эффективности противоопухолевых препаратов является приоритетной задачей онкологических исследований [1]. Биологически активные пищевые добавки (БАД) могут быть вспомогательными компонентами лечения, однако их терапевтические эффекты мало-изучены. Повышение уровня железа способствует улучшению общего состояния, терапевтического ответа и иммунного статуса онкобольных [2]. БАД цитрат железа (III) (коммерческое название «Син-тезит», разработан в ООО «НИЦ Синтезтех») регулирует активность металлопротеинов, стимулирует процессы кроветворения и нормализует биохимические параметры крови in vivo, при этом активность соединения на клеточном уровне не была исследована.
Цель
Изучить влияние цитрата железа на опухолевые и неопухолевые клетки человека in vitro.
Материалы и методы
Влияние цитрата железа на культуры клеток карциномы толстого кишечника (HCT116 и COLO320HSR), аденокарциномы легких (А549), а также постнатальных фибробластов человека (ПФЧ) и эмбриональных клеток почки человека (HEK293) было исследовано с помощью МТТ-теста. Регистрация оптической плотности проводилась через 48 часов после добавления вещества. Измерение ми-тохондриального потенциала осуществлялось при
помощи проточной цитофлуориметрии и окрашивания красителем MitoTracker™ Red CMXRos. Все эксперименты были проведены в трех независимых повторностях.
Результаты
Установлено, что цитрат железа «Синтезит» способствует снижению пролиферации опухолевых клеток в дозозависимой манере. В частности, добавление 0,25 мг/мл цитрата железа снижало жизнеспособность клеток НСТ116, COLO320HSR, А549 и HEK293 на 50, 25, 54 и 42% соответственно. При максимальной исследованной концентрации (0,5 мг/ мл) выживаемость клеток НСТ116 и А549 составляла 16 и 12% соответственно. Аналогичный эффект не наблюдался в клеточной культуре ПФЧ, где снижение метаболизма не превышало 40% (0,5 мг/мл). В культуре клеток НСТ116 было выявлено падение митохондриального потенциала после инкубации с препаратом, причем в дозо- и времязависимой манере. Для клеточной линии ПФЧ такого влияния не обнаружено.
Выводы
Биологически активная добавка «Синтезит» обладает выраженным цитотоксическим эффектом на метаболизм и жизнеспособность опухолевых и им-мортализованных клеточных линий при сравнительно умеренном влиянии на неопухолевые клетки. Препарат представляется интересным кандидатом для дальнейших исследований по выявлению потенциального использования как сопроводительного средства противоопухолевой терапии.
Список литературы
1. Sleire L. et al . Drug repurposing in cancer // Pharmacological research . 2017 . Т 124 . С . 74-91. 2 . Wang Y et al . Iron Metabolism in Cancer // Int J Mol Sci . 2018 . 20(1) . Р 95 . D0l:10 .3390/ijms20010095 .
Оценка степени пролиферации опухолевых клеток в результате
активации системы YB-1/Notch3
Авторы
Чепорова Мария Сергеевна, masha.cheporova@mail.ru, ФГБОУ ВО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, Москва
Генс Гелена Петровна, gelena974@gmail.com, ФГБОУ ВО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, Москва
Моисеева Наталья Ивановна, n.i.moiseeva@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина», Москва
Ключевые слова:
фундаментальная онкология, Notch3, YB-1, пролиферация, экспрессия, молекулярная онкология
Актуальность
Механизм действия Notch играет значимую роль в развитии эпителиально-мезенхимального перехода и метастазирования. Все четыре рецептора Notch проявляют онкогенные свойства, однако их пути воздействия остаются до конца не изученными и требуют дополнительного анализа. На данный момент большой интерес представляет исследование белка Notch3, ли-гандом которого может выступать многофункциональный ДНК/РНК-связывающий белок YB-1.
Цель
Изучить влияние активации белка Notch3 под воздействием его лиганда белка YB-1 на пролиферацию клеток рака поджелудочной железы (РПЖ) и рака молочной железы (РМЖ). Определить экспрессию и локализацию белка в опухолевых клетках.
Материалы и методы
Для анализа мы использовали четыре клеточные линии РПЖ: PANC-1, MiaPaCa-2, AcPS-1, Capan-2; нетуморогенные эпителиальные клетки молочной железы MCF10A и две клеточные линии РМЖ: MCF7, MDA-MB-453. Экспрессию гена Notch3 определяли с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени, а его локализацию в клетках — иммуноци-тохимическим методом с помощью флуоресцентного микроскопа Carl Zeiss. Также была произведена оценка уровня пролиферации клеток под воздействием rYB-1, подсчет выполнялся в камере Горяева.
Результаты
При оценке клеток РПЖ самую низкую экспрессию гена Notch3 показала линия AcPS-1 (p <0,01),
а самую высокую — линия Capan-2 (р <0,01). Проведено сравнение экспрессии гена Notch3: в Capan-2 экспрессия Notch3 в среднем в 9 раз выше, чем в MiaPaca-2 (р = 0,006), в 37 раз выше, чем в Panc-1 (р = 0,004), более чем в 3000 раз выше, чем в AcPS-1 (р = 0,004). При оценке клеток РМЖ самую низкую экспрессию гена Notch3 показала нетумо-рогенная линия MCF10A. Максимальная экспрессия гена Notch3 наблюдалась в клетках MDA-MB-453 (р <0,01) и превышала экспрессию нетуморогенных клеток MCF10A в 32 раза (р = 0,004). Экспрессия клеток MCF7 была выше экспрессии MCF10A в 5 раз (р = 0,006). В клетках РПЖ белок Notch3 был обнаружен в ядрах клеток у Panc-1. В линиях MiaPaca-2 и Capan-2 клетки с ядерной и цитоплаз-матической локализацией встречались с одинаковой частотой. У клеточной культуры MCF10A была выявлена ядерная локализация белка. Клетки РМЖ линии MCF7 и MDA-MB-453 имели мембранную локализацию с небольшим количеством белка в цитоплазме. Ни в одной из культур РПЖ пролиферация не увеличивалась под действием rYB-1. Тогда как в культурах РМЖ было выявлено увеличение пролиферации.
Выводы
Экспрессия гена Notch3 различается между всеми четырьмя исследованными линиями РПЖ и тремя линиями РМЖ. Локализация белка Notch3 может быть как в цитоплазме, так и в ядрах клеток линий РПЖ. В клетках РМЖ наблюдалась мембранная локализация белка. Только в культурах РМЖ под действием гУБ-1 увеличивалась пролиферация опухолевых клеток.
Список литературы
1. Alexey A . Leontovich, Mohammad Jalalirad, Jeffrey L et al . . Notch3 expression is linked to breast cancer seeding and distant metastasis // Breast Cancer Research . 2018 . 20 . Р105 .
Хроническая нейрогенная боль нарушает баланс свободно-радикальных процессов и антиоксидантной защиты в митохондриях клеток сердца
Авторы
Черярина Наталья Дмитриевна, scalolas.92@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Франциянц Елена Михайловна, super.gormon2@ya.ru, ФГБУ ««НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Нескубина Ирина Валерьевна, neskubina.irina@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Шихлярова Алла Ивановна, shikhliarova.a@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Бандовкина Валерия Ахтямовна, valerryana@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
Сурикова Екатерина Игоревна, sunsur2000@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России, Ростов-на-Дону
