CC BY
30
Рис. 2. Кровеносные сосуды и сперматозоиды в канале придатка семенника на 14-е сутки опыта основной группы животных. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофото. 0к.10.0б.40.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Гиалуроновая кислота не обладает токсическим действием на ткани яичка, так как в гистологических препаратах не выявлены деструктивные процессы как в извитых семенных канальцах с гематотестикулярным барьером, так и в придатке семенника. Нормальный сперматогенез свидетельствует о сохранности гормональной активности.
Применение прецизионной микрохирургической техники при открытой и закрытой травме наружных половых органов позволит улучшить результаты хирургического лечения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аманазаров А. А. Патогенетическое обоснованное лечения закрытых повреждений органов мошонки: дис. ... д-ра мед. наук. — Ашгабад, Челябинск, 1995. — 120 с.
2. Божедомов В. А., Теодорович О. В. // Урология. — 2005. — 1 1. — С. 35—44.
3. Бреслер В. М., Шубин В. М. // Вестн. AMH СССР. — 1971. — 1 1. — С. 87—89.
4. Волков В. Г. // Вест. новых мед. технологий. — 2001. —Т. 8, 1 1. — С. 67—70.
5. Довлатян А. А., Черкасов Ю. В. // Урология.— 2003. — С. 24—35.
6. Миланов Н. О., Боровиков А. М., Ги-лис Я. С. // Урология и нефрология. — 1989.
— 1 6. — C. 54—59.
7. Тарасов Н. И., Аманазаров А. // Урология и нефрология. —1990. — i 1.— C. 55—59.
8. Устинкина Т. И. // Пробл. эндокринологии. — 2002. — Т. 48, 1 3. — C. 37—39.
9. Феняк Ю. Ф., Попов В. П. // Травматические повреждения мочевого пузыря, уретры и наружных половых органов. — Челябинск, 1982.
— С. 71—72.
10. Altarac S. // J. Eur. Urol. — 1994. — 1 25 (2). — Р. 119—123.
11. MulhaE J. P., Gabram S. G, Jacobs L. M. //J. Acad. Emerg. Med. — 1995. — 1 2 (7). — Р. 639—643.
12. McConnell J. D, Peters P. C, Lewis S. E. //J. Urology. — 1982. — Vol. 128. — 1 2. — P. 309—311.
13. Talic R. F. // Scand. J. Urol. Nephrol. — 1999. — 1 33 (2). — Р. 131—132.
УДК: 616.381-002-092.9-074
ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ КРАСНОЙ КРОВН ПРИ ЖЕЛЧНОМ ПЕРИТОНИТЕ
М. С. Купреева, Э. А. Петросян, А. А. Сухинин, О. А. Терещенко
Краснодарский государственный медицинский университет
Нарушения метаболизма при желчном перитоните приводят к повреждению эритроцитов. Причиной деструктивных процессов является сорбция на мембране клеток токсинов и активизация перекисного окисления липидов. Изменения мембран носит разнонаправленный характер. Цитолитические процессы характерны для «старых» клеток, их разрушение регулирующе действует на перекисное окисление, тормозя его на уровне менее токсичных форм и приводит к появлению в крови молодых эритроцитов. Для более молодых форм характерно повышение жесткости эритроцитарной мембраны, препятствующее полноценному функционированию.
Ключевые слова: желчный перитонит, эритроциты, интоксикация, перекисное окисление липидов.
Нарушения метаболизма, сопровождающие развитие желчного перитонита (ЖП), приводят к развитию эндогенной интоксикации. Одним из последствий ее развития является клеточная дезорганизация [3]. Молекулярные нарушения клеточной мембраны приводят к дезорганизации клеточного метаболизма, потере функциональной компетентности, изменению жизнедеятельности кле-
ток и их гибели [10—13]. Повреждение клеточных мембран определяет все основные патофизиологические и клинические проявления эндо-токсикоза [7, 9].
Основу структурной организации мембран составляет бимолекулярный липидный слой с встроенными мембранными белками. Поэтому дисбаланс переокисления липидов и антиоксидантной защи-
ты в настоящее время рассматривают как одну из составляющих эндотоксикоза и механизма дестабилизации клеточных мембран [2].
Общность строения и функционирования плазматических мембран различных органов и тканей позволяет предположить однонаправленность изменений свойств клеточных мембран всех органов и тканей. Чувствительность эритроцитов к действию токсинов, простота их выделения и доказанная корреляция между изменениями свойств мембран эритроцитов и клеточных мембран внутренних органов при интоксикации [5] дают возможность использовать красные клетки крови в качестве модели для изучения состояния цитоплазма-тических мембран [1, 11].
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучить процессы повреждения эритроидно-го звена системы крови при интоксикации и найти методы их коррекции.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа была проведена на белых крысах-самцах весом 160—220 г (п=39). Животные были разделены на 2 группы: 1-я группа — интактные животные (п=24); 2-я группа — животные, у которых исследования проводили через 24 часа после создания модели ЖП (п=15). Для создания ЖП была использована модель, разработанная в Российском центре функциональной хирургической гастроэнтерологии [8].
Для оценки эритроцитарного звена крови определяли эритроциты, концентрацию гемоглобина. Для оценки уровня перикисного окисления липидов проводили определение в эритроцитах содержания малонового диальдегида (МДА) и диеновых коньюгат (ДК). Для оценки уровня интоксикации в эритроцитах определяли вещества низкой и средней молекулярной массы по методике М. Я. Малаховой [5]. Состояние мембран эритроцитов оценивали методом определения осмотической резистентности по Л. И. Идельсону [4].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При развитии ЖП наблюдается снижение концентрации эритроцитов на 20 %, обусловленное токсическим воздействием на мембраны эритроцитов, приводящим к цитолитическим процессам. При этом отмечается пропорциональное снижение общей концентрации гемоглобина (см. табл.).
Нарастающая с развитием желчного перитонита интоксикация приводит к развитию процессов, связанных с образованием избыточного количества активных форм кислорода (АФК) и развитием перекисных процессов окисления клеточных мембран. Под влиянием АФК происходит отрыв атомов водорода от молекул полиненасыщенных
жирных кислот, что приводит к перемещению двойной связи с образованием диеновых коньюгат. При дальнейшем усилении окислительной дегенерации клеточных структур возникает образование более токсичных конечных продуктов перекисного окисления липидов МДА.
Таблица
Показатели эритроцитарного звена крови интактных животных и животных
с желчным перитонитом
Обследуемые животные Эр, х1012/л Нв, г/л ДК МДА
Интактные 2,84±0,24 137±16 1,19±0,06 2,36±0,28
С желчным перитонитом 2,31±0,37* 111±9* 5,18±0,17* 5,54±0,41*
* р<0,05 по сравнению с группой интактных животных.
При развитии ЖП отмечается рост всех продуктов перекисного окисления липидов. При этом рост промежуточных продуктов ПОЛ ДК более выражен по сравнению с ростом конечных продуктов МДА: в 4,35 и 2,34 раза соответственно, что свидетельствует в пользу продолжающегося эффективного функционирования процессов антирадикальной защиты на этой стадии развития ЖП.
Развитие синдрома эндогенной интоксикации при ЖП подтверждается ростом ВНСММЭР с 15,6±2,27 до 32,6±2,54 (р<0,05). При этом спектральная кривая поглощения ВНСММЭР имеет сдвиг пика в сторону больших длин волн (рис.1).
Рис. 1. Характер спектрофотометрических кривых ВНСММЭР у интактных животных и животных с ЖП
Увеличение высоты, сдвиг максимума кривой и рост концентрации ВНСММЭР при ЖП характерны для фазы обратимой декомпенсации эндогенной интоксикации, при которой функция деток-сицирующей системы организма в целом сохранена [5].
И у интактных животных, и при ЖП в крови животных при определении осмотической устойчивости эритроцитов выделяются три фракции: низкостойкая — гемолиз которой происходит в пределах 0,60—0,45 %; среднестойкая — с гемолизом в пределах 0,45—0,30 %; высокостойкая в пределах 0,30—0,10 % (рис. 2). Различие в осмотической устойчивости обьясняется разнообразием возрастных форм эритроцитов, которое обес-
печивает разнонаправленность действия токсических продуктов метаболизма на эритроцитарную мембрану.
0,080 0,070
0,040 0,030 0,020 0,010 0,000
0,1 0,2 0,3 -интактные животные
0,4 0,45 0,5 0,55 --животные с перитонитом
Рис. 2. Дифференциальные кривые осмотического гемолиза эритроцитов интактных животных и животных с ЖП
Так, при развитии ЖП отмечается резкое снижение количества низкостойкой («старой») популяции и рост более молодых среднестойкой и высокостойкой популяций. Максимумы гемолиза каждой фракции при перитоните также сдвигаются в сторону уменьшения концентраций гемолитического агента.
Вероятно, действие мембраноповреждающих агентов приводит к повышению чувствительности и снижению устойчивости мембран преимущественно «старых» клеточных фракций к действию АФК и продуктов их реакций с компонентами биомембран. Следствием этого становится образование дополнительных каналов проницаемости, изменение клеточного гомеостаза и разрушение «старых» эритроцитов.
С другой стороны, токсическое действие аномальных продуктов метаболизма при развитии ЖП на мембраны молодых форм эритроцитов не приводит к критическому повреждению белково-фос-фолипидного бислоя мембран, однако способно формировать «жесткую» мембрану, что приводит к резкому снижению трансмембранного транспорта эритроцита.
Положительным следствием разрушения эритроцитов «старой» фракции является компенсаторный запуск эритропоэза и выход в кровь более эффективных молодых форм клеток, что, в конечном счете, направлено на усиление доставки к клеткам кислорода и снижение гипокси-ческих проявлений. Кроме этого, разрушение клеток приводит к выходу в плазму большого количества цитозольных белков, обладающих антиокислительными свойствами, что подтверждается данными о менее интенсивном росте цито-токсичных конечных продуктов перекисного окисления липидов МДА по сравнению с промежуточными ДК.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, развитие желчного перитонита приводит к сорбции на эритроцитарной мембра-
не большого количества токсичных веществ низкой и средней молекулярной массы и активизации пере-кисного окисления липидов мембран эритроцитов.
Продукты патологического метаболизма взаимодействуют с эритроцитарными клетками, что приводит к разнонаправленным изменениям состояния мембран клеток в зависимости от их возраста.
Цитолитические процессы наиболее характерны для «старых» клеток. Разрушение наименее прочных «старых» эритроцитов регулирующе действует на процессы перекисного окисления, тормозя его на уровне менее токсичных форм, и приводит к компенсаторному появлению в крови молодых эритроцитов.
На фоне развития интоксикации при желчном перитоните характерно повышение жесткости эритроцитарной мембраны, препятствующее полноценному функционированию эритроцитов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Горизонтов П. Д. Гомеостаз.— М.: Медицина, 1981.
2. ГорошинскаяИ. А., МогильницкаяЁ. В., Немашкалова Ё. А. и др. // Биохимия. — 1993.
— Т. 58, 1 1. — С. 62—69.
3. Крыжановский Г. Н. Дизрегуляционная патология. — М., 2002.
4. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. В. В. Меньшикова. — М.: Медицина, 1987.
5. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы) / Под ред. проф. А. И. Карпишенко. — СПб: Интермедика, 1997.
6. Михайлович В. А., Марусанов В. В., Би-чун А. Б. и др. // Анест. и реаниматол. — 1993.
— 1 5. — С. 66—69.
7. Новицкий В. В., Стеновая Е. А., Гольд-берг В. Е. и др. Эритроциты и злокачественные новообразования. — Томск, 2000.
8. Петросян Э. А., Каде А. X., Петровский А. Н. и др. // Бюл. экспер. биол. и мед. — 2002. (Прил. 3). — С. 122—124.
9. Рязанцева Н. В., Новицкий В. В., Кублин-ская М. М. // Бюл. экспер. биол. — 2002. — Т. 133, i 1. — С. 98—101.
10. Теннис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функция. — М: Мир, 1997.
11. Dodge J. Т., Mitchell С., Hanahan D. // Arch. Biochem. and Biophis. — 1963. — Vol. 100, i 1. — P. 119—130.
12. Gil Т., Ipsen J. H., Mouritsen O. G., et al. // Biochim. Biophys. Acta. — 1998. — Vol. 1376.
— P. 245—266.
13. de Kruiff B. // Curr. Opin. Chem. Biol. — 1997. — Vol. 1. — P. 564—569.
□,060
0,050
0,35
