CC BY
44
цитотрофобластическую инвазию и реализует свое действие местно [2, 5].
Снижение уровня ПАМГ во II и III группах получено во всех средах, что косвенно может свидетельствовать о нарушениях процесса децидуализации эндометрия, качества инвазии ЦТ и в дальнейшем процесса плацентации.
Обсуждение
Результаты нашего исследования показали, что неблагоприятными факторами предгравидарного статуса женщин с самопроизвольными абортами и неразвива-ющимися беременностями в сроке 6-12 недель являются внутриматочные вмешательства и их отдаленные последствия (бесплодие, хронический эндометрит, цервицит, кольпит, бесплодие, эндокринные нарушения, эндометриоз). Вышеуказанные факторы являются основными причинами, приводящими к функциональной неполноценности эндометрия.
По уровню эндометриальных белков (ТБГ, АМГФ, ПАМГ) у женщин с самоабортами, неразвивающимися и физиологическим беременностями в сроке 6-12 недель, т. е. в период I волны инвазии цитотрофобласта и плацентации, по нашему мнению, можно оценивать функциональную активность эндометрия. Динамика нарастания ТБГ, АМГФ, ПАМГ дает возможность прогнозировать течение гестационного процесса на всем протяжении (децидуализация, инвазия цитотрофоблас-та, плацентация), а также оценить эффективность проведенного лечения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Айламазян Э. К. Молекулярные маркеры старения и зрелости плаценты / Э. К. Айламазян, И. М. Криветной // Мать и дитя: материалы VII Рос. форума. - М., 2005. - С. 12-13.
2. Болтовская М. Н. и соавт. Роль эндометриальных белков в процессах имплантации и плацентации // Российский вестн. акуш.-гинеколога. - 2002. - Т. 2. № 6. - С. 22-26.
3. Глуховец Б. И., Глуховец Н. Г. Патоморфологическая диагностика ранних самопроизвольных выкидышей. - СПб, 1999. - 96 с.
4. Милованов А. П. Патология системы «мать - плацента -плод». - М., 1999. - 448 с.
5. Милованов А. П. и соавт. Микроокружение эмбриона человека // Мат. I Междун. конф. «Ранние сроки беременности». - М., 2002. - С. 50-53.
6. Сидельникова В. М. Привычная потеря беременности. - М., 2002. - 303 с.
7. Сидорова И. С. Фетоплацентарная недостаточность. Клинико-диагностические аспекты / И. С. Сидорова, И. О. Макаров. -М.: Знание-М, 2000. - 127 с.
8. Татаринов Ю. С. и соавт. Специфический альфа-2-мик-роглобулин (гликоделин) репродуктивной системы человека. -Москва - Иваново, 1998. - 128 с.
9. NavotD., LauferN., Kopolovic J. Artificially induced endometrial cycles and establishment of prefnancies in the absence of ovaries // New Engl J Med. - 1996. - Vol. 314. - Р. 806-811.
10. RosenwaksZ. Donor eggs: their application in modern reproductive technologies // Fertil Steril. - 2001. - Vol. 47. - Р. 895-909.
Поступила 11.09.2009
Л. В. ВОХМИНЦЕВА
ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ КАТИОННЫХ БЕЛКОВ В нейтрофилах у КРЫС С ПНЕВМОНИЕЙ, протекающей на фоне введения адаптивных гормонов
Кафедра биологической химии ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет»,
Россия, 630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52.
Е-mail: [email protected], тел. (383) 2266541
Влияние адаптивных гормонов на уровень катионных белков в нейтрофилах было оценено у крыс с пневмонией, которую моделировали интратрахеальным введением сефадекса А-25 в дозе 5 мг/кг веса. Введение гормонов (0,3^10-9 М/100 г гидрокортизона и 0,6^10'6 М/100 г адреналина в течение 3 дней через неделю после введения аллоксана в дозе 120 мкг/100 г массы тела) увеличивало содержание нейтрофилов в кровяном русле с высоким уровнем катионных белков.
Ключевые слова: нейтрофилы, катионные белки, пневмония, гормоны.
L. V. VOKHMINTSEVA
ESTIMATION OF NEUTROPHILS CATIONIC PROTEINS LEVEL IN RATS WITH PNEUMONIA IN CONDITIONS OF ADAPTIVE HORMONES INJECTION
Department of biochemistry, SEIHPE Novosibirsk state medical university,
Russia, 630091, Novosibirsk, Krasnyj avenue, 52. E-mail: [email protected], tel. (383) 2266541
The influence of adaptive hormones on neutrophils cationic proteins level was evaluated in rodents with lung inflammation in a rat model of Sephadex-pneumonia (intratracheal injection of Sephadex A-25 at a concentration of 5 mg/kg body weight). Hormonal administration (0,3^10-9 M /100 g hydrocortisone and 0,6^10-6 M/100 g epinephrine during 3 day after 7 days 120 mg/kg of alloxan) induced increased neutrophils levels in the blood stream with high level of cationic proteins.
Key words: neutrophils, cationic protein, pneumonia, hormones.
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009 УДК 616.24 - 085.357 : 616.155.34 ] - 092.9
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
Одна из ключевых ролей в механизмах врождённого иммунитета принадлежит полиморфно-ядерным лейкоцитам и их полипептидам и белкам, содержащимся в азурофильных (миелопероксидаза, бактерицидный увеличивающий проницаемость белок, дефенсины, эластаза, катепсин G, азуроцидин), специфических (лизоцим, лактоферрин, коллагена-за, желатиназа, кателицидин hCAP-18, НАДФН-окси-даза), желатиназных (желатиназа, аннексин I, белок адгезии Mac-I) гранулах [3]. Дефенсины являются хемотаксическими факторами для макрофагов, модулируют продукцию цитокинов (интерлейкина-1, интерферона-Т, интерлейкина-6) моноцитами крови [12]. Лактоферрин увеличивает адгезивность ней-трофилов [1]. Эластаза и катепсин G участвуют в генерации физиологически активных пептидов ре-нинангиотензиновой системы, калликреинкининовой и системы комплемента, вовлекаются в регуляторные системные реакции, сопряженные с процессами фагоцитоза, воспаления и иммуногенеза [8]. Все эти данные указывают на функциональную полипотент-ность катионных белков нейтрофилов, реализация которой может в значительной степени определять эффективность защитных реакций, осуществляемых данными клетками при воспалении. Несмотря на огромное число публикаций, изучение функциональных свойств нейтрофилов является важной задачей, поскольку изменение их свойств определяет направленность, характер и тяжесть течения воспалительного процесса.
В организме животных стрессовые ситуации сопровождаются активацией гипоталамус-гипо-физ-адреналовой оси, что, в свою очередь, ведёт к секреции глюкокортикоидов, норадреналина и адреналина. Изменение гормонального фона приводит не только к переключению метаболической стратегии организма, но и к изменению функциональной активности клеток иммунной системы [5, 6, 14]. В связи с чем целью данного исследования явилось изучение содержания катионных белков в нейтрофилах у крыс с пневмонией, протекающей на фоне введения адаптивных гормонов гидрокортизона и адреналина при пониженной продукции инсулина.
Материалы и методы исследования
Работа выполнена на крысах Wistar массой 200220 г (ЦНИЛ Новосибирского государственного медицинского университета). Содержание, питание, уход за животными и выведение из эксперимента осуществляли в соответствии с требованиями «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1077 г. № 755). Крысы находились на полноценном обще-виварном рационе со свободным доступом к воде. Экспериментальные животные были разделены на несколько групп. Животным первой группы (количество крыс в группе - 12) пневмонию моделировали интратрахеальным введением под эфирным наркозом суспензии сефадекса А-25 («Pharmacia Uppsala», Швеция), приготовленной на тёплом физиологическом растворе в дозе 0,5 мг/100 г, используя специальный зонд. Второй группе животных (n=12) вводили сефадекс А-25 на фоне гормонального дисбаланса, который моделировали введени-
ем гидрокортизона (0.3-10-9 М/100 г) совместно с адреналином (0.6-10-6 М/100 г) в течение 3 дней через неделю после введения аллоксана (120 мкг/100 г). Гормоны вводили в дозах, необходимых для достижения уровня, характерного для стресса. Поскольку стресс характеризуется снижением толерантности к глюкозе, обусловленной ингибированием секреции инсулина, адаптивные гормоны вводили на фоне сниженной аллоксаном продукции инсулина. Этой группе животных сефадекс А-25 вводили на следующий день после последнего приёма гормонов. Животные были выведены из эксперимента на 2, 10 и 20-е сутки после введения сефадекса А-25. Третьей группе животных (п=16) моделировали гормональный дисбаланс введением гидрокортизона (0,3-10_э М/100 г) совместно с адреналином (0,6^10-6 М/100 г) в течение 3 дней через неделю после введения аллоксана (120 мкг/100 г). В этой группе крыс выводили из эксперимента на следующий день после заключительного воздействия. Интактные животные (п=16) соответствующего возраста, находившиеся на общевиварном рационе, входили в группу контроля.
Содержание катионных белков в нейтрофилах периферической крови оценивали с помощью метода выявления содержания катионных белков, основанного на применении красителя прочного зелёного. Использование данного красителя обеспечивает суммарное цитохимическое выявление катионных белков [2] в тех клетках, где они обнаружены и охарактеризованы биохимически (ней-трофилы крови, макрофаги, эпителий желудочно-кишечного тракта). При значениях рН 8,1 -8,2 катионные белки являются единственными биополимерами, способными взаимодействовать с анионными красителями. Мазки гепаринизированной крови, фиксированные в метаноле, первоначально окрашивали в спиртовом растворе прочного зелёного с рН 8,1-8,2, затем докрашивали азуром А. Определяли следующие показатели: средний цитохимический коэффициент (СЦК) содержания катионных белков, отражающий внутриклеточное содержание катионных белков в нейтрофилах и процентное распределение полиморфно-ядерных лейкоцитов по интенсивности окрашивания прочным зелёным. Средний цитохимический коэффициент содержания катионных белков рассчитывали по формуле: СЦК= (0а + 0,5б + 1в + 1,5г + 2д + 2,5е + 3ж)/100, где цифрами 0-3 обозначена степень интенсивности окрашивания, а буквами (а - ж) - количество однотипных клеток с определённой степенью окрашиваемости цитоплазмы прочным зелёным. В каждом мазке учитывали 100 клеток. Подсчёт процентного распределения нейтрофилов по интенсивности окрашивания был проведён следующим образом: клетки с интенсивностью окрашивания 0-0,5 обозначали как низкоактивные клетки (НАК), 1,0-1,5 - как среднеактивные клетки (САК), 2-3 - как высокоактивные клетки (ВАК).
Статистический анализ полученных данных включал проверку на нормальность распределения количественных признаков с использованием критерия Колмогорова-Смирнова, описание изучаемых параметров в группах с определением средней арифметической (М) и ее стандартной ошибки (т). Определение досто-
верности различий сравниваемых параметров между разными выборками проводили с использованием критерия Стьюдента [4].
Результаты исследования
Интенсивность и характер воспалительного процесса определяются активностью основных эффекторных механизмов, среди которых одно из важных мест занимают полиморфно-ядерные лейкоциты, мигрирующие в очаг воспаления из кровяного русла. Для оценки функционального состояния нейтрофилов использовали метод выявления содержания катионных белков. Динамика среднего цитохимического коэффициента содержания катионных белков в нейтрофилах у крыс с пневмонией представлена на рисунке 1.
Развитие пневмонии у крыс характеризовалось снижением среднего цитохимического коэффициента на всех сроках эксперимента (рис. 1). СЦК содержания катионных белков в нейтрофилах периферической крови на 2-е сутки с момента введения сефадекса А-25 снизился в 1,4 раза (р<0,05) по сравнению с контролем, который составил 1,12±0,1. Падение уровня внутриклеточного содержания катионных белков на 2-е сутки сопровождалось повышением доли низкоактивных клеток среди нейтрофилов периферической крови на 70% (таблица). Тогда как содержание высоко- и среднеактивных клеток было снижено на 40% и 36,7% (р<0,05) соответственно. Перераспределение нейтро-филов по интенсивности окрашивания в сторону увеличения доли низкоактивных клеток сохранялось на 10-е сутки эксперимента. Количество НАК было выше контрольных значений на 85,2%. При этом содержание ВАК продолжало снижаться до 3,1±0,14% (22% от контроля). Незначительное возрастание СЦК содержания катионных белков в нейтрофилах крови происходило на 20-е сутки эксперимента, который, однако, был ниже значений интактных животных на 25%. К 20-м суткам повысилась доля нейтрофилов со светлоокрашенными гранулами. Количество ВАК оставалось низким, оно было в 5 раз меньше, чем у интактных животных. Ко-
личество САК к этому сроку было снижено на 10,7% по сравнению с контролем.
Исследования влияния адаптивных гормонов на содержание катионных белков в нейтрофилах предшествовали экспериментам, в которых изучали влияние гормонов на уровень среднего цитохимического коэффициента содержания катионных белков в нейтрофилах и распределения клеток по интенсивности окрашивания прочным зелёным у крыс с воспалением в лёгких. Введение крысам гидрокортизона и адреналина на фоне сниженной продукции инсулина характеризовалось повышением интенсивности окрашивания нейтрофилов прочным зелёным. Средний цитохимический коэффициента содержания катионных белков в нейтрофилах был выше в 1,35 раза по сравнению с группой интактных животных и составил 1,51 ±0,04 (р<0,05) за счёт увеличения доли высокоактивных клеток (в 2,6 раза) при снижении содержания низкоактивных клеток (в 2,7 раза). Процентное содержание ВАК составило 36%, САК - 51%, а НАК - 13%.
При детальном рассмотрении распределения ней-трофилов в зависимости от интенсивности окрашивания выявлено, что в клетках снижалось количество гранул, имеющих слабую окраску прочным зелёным (клетки с интенсивностью окрашивания 0,5, 1), что сопровождалось сдвигом пика распределения нейтрофилов по степени интенсивности окрашивания в сторону среднеактивных клеток (интенсивность окрашивания 1,5), имеющих равномерно заполненную светло-зелёными гранулами, с единичными тёмно-зелёными гранулами цитоплазму (рис. 2), высокоактивных клеток (интенсивность окрашивания 2, 2,5), у которых цитоплазма заполнена на 1/2 или 2/3 тёмно-зелёными гранулами.
Повышенное содержание катионных белков сохранялось и на 2-е сутки с момента введения сефадекса А-25 у крыс с пневмонией, которым предварительно вводили адаптивные гормоны (рис. 1). СЦК в этот срок наблюдения в группе животных с
10
а- ш 5 О ■8- *
■& а> О Ю
2 ><
11
0 о
Ф 5
1 “
5 К § н га
=г а
>5 “
1 5
ч »
а>
а.
о
§ .
а.
н
х
3
о
10
-15
-20
-25
-30
-35
-40
2 суток 10 суток 20 суток
□ пневмония □ пневмония + гормональный дисбаланс
Рис. 1. Влияние адаптивных гормонов на отклонение среднего цитохимического коэффициента содержания катионных белков от контроля у крыс с пневмонией
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
гормональным дисбалансом превысил аналогичный показатель в группе животных с нормальным гормональным фоном в 1,5 раза (р<0,05). При этом количество ВАК возросло в 2,3 раза, доля САК повысилась на 52% по сравнению с аналогичными показателями в группе крыс без гормонального дисбаланса (таблица). На 10-е сутки эксперимента СЦК в группе с гормональным дисбалансом был ниже контрольных значений, но превышал показатели в группе с нормальным гормональным фоном. Количество ВАК и САК снизилось, но оставалось в 2 и 1,28 раза (соответственно) выше у крыс с пневмонией, протекающей на фоне нормального уровня гормонов. К 20-м суткам повышение СЦК практически до контрольных значений было обусловлено ростом доли САК, их количество превысило контрольные значения на 53%, а показатели в группе с пневмонией, протекающей без гормонального дисбаланса, были ниже на 10,7%.
Обсуждение
Нейтрофилы представляют собой клеточный компонент врождённого иммунитета, одним из первых включающийся в защиту организма от инфекции, а также от трансформированных или поврежденных клеток, и изменение их свойств может определять направленность, характер и тяжесть течения воспалительного процесса. Полиморфно-ядерные лейкоциты содержат большое количество гранул, являющихся депо физиологически активных веществ антибиотического действия, среди которых ведущую роль играет группа катионных белков и полипептидов [2].
Повышение доли нейтрофилов с более высоким содержанием гранул, интенсивно окрашенных прочным зелёным, возможно, обусловлено увеличением количества клеток миелоидного ряда в костном мозге, которые являются резистентными к глюко-кортикоид-индуцируемому апоптозу [7]. Глюкокор-
тикоиды не только увеличивали абсолютное количество нейтрофилов, но также повышали вдвое содержание зрелых нейтрофилов (сегментно-ядерных) в костном мозге [15]. Кроме того, глюкокорти-коиды посредством ингибирования апоптоза значительно повышали время полужизни нейтрофилов в циркуляции [7, 13].
Увеличением выхода в кровь зрелых нейтрофилов возможно объяснить повышение относительного количества высокоактивных нейтрофилов крови крыс в нашем эксперименте, что согласуется с данными исследования М. D. ТгоШег и соавторов (2008), проведённого на мышах с использованием натурального глюкокортикоида - кортикостерона, который вводили мышам в течение 3 дней. При этом различий в фагоцитарной активности, продукции супероксидного аниона, хемотаксисе нейтрофилах, полученных из кортикостерон-обработанных и контрольных животных, в экспериментах М. D. ТгоШег и соавторами не было выявлено [15].
Ингибирующее действие катехоламинов на апоптоз нейтрофилов показано В. А. Фроловым с соавторами, которые показали дозозависимое ускорение спонтанного апоптоза нейтрофилов под влиянием антагониста р-адренорецепторов - пропранолола как в контрольных, так и в предварительно праймированных клетках [5]. Некоторые системные эффекты ЦНС усиливают хемотаксис и индукцию хемокинов, таких как интерлейкин-8, являющийся хемоаттрактантом для нейтрофилов, и повышают рекрутирование полиморфно-ядерных лейкоцитов в кровь [9].
Эволюционная причина, объясняющая глюкокор-тикоид-опосредованную экспансию гранулоцитов, остаётся загадкой. Большинство очевидных объяснений - в том, что ситуация стресса содействует усилению врождённой иммунной защиты, важнейшими эффекторами которой являются нейтрофи-лы, осуществляющие первую линию защиты против
60
0,5
1 1,5 2 2,5
интенсивность окрашивания
контроль--------аллоксан ♦ адреналин + гидрокортизон
Рис. 2. Распределение нейтрофилов периферической крови по степени интенсивности окрашивания зелёным прочным у крыс при введении гидрокортизона и адреналина на фоне сниженной продукции инсулина
Распределение нейтрофилов крови по интенсивности окрашивания у крыс в динамике развития экспериментальной пневмонии, протекающей в условиях различного гормонального фона
Условия эксперимента Процентное содержание нейтрофилов, различающихся по интенсивности окрашивания прочным зелёным
НАК САК ВАК
Контроль 35,3±2,81 51,2±2,80 14,0±0,70
Пневмония 2 суток 60,1±3,30 * 32,4±2,25 * 8,3±0,64 *
10 суток 65,4±2,74 * 32,1±2,47 * 3,1±0,14 *
20 суток 52,4±4,34 * 45,7±3,25 * 2,8±0,17 *
Пневмония+ гормональный дисбаланс 2 суток 32,0±0,21 # 49,3±2,02 # 19,0±0,09 *#
10 суток 53,1±0,27 *# 41,2±2,18 *# 6,3±0,18 *#
20 суток 19,2±0,08 *# 78,5±3,36 *# 2,5±0,03 *
Примечания: НАК - низкоактивные клетки,
САК - среднеактивные клетки,
ВАК - высокоактивные клетки;
* - р<0,05 по сравнению с показателями контрольной группы,
# - р<0,05 по сравнению с группой крыс, у которых пневмония протекала без изменения гормонального фона.
микробных патогенов и особенно важные в иммунитете человека.
Однако повышенный выброс в периферическую кровь нейтрофилов, обладающих более высоким содержанием катионных белков и протеолитическим потенциалом, приводит к развитию повреждения клеток и значительной деструкции межклеточного матрикса лёгких [10, 11]. Результаты гистологического исследования, проведенного ранее (Л. В. Вохминцева,
A. П. Надеев. Вестник новых медицинских технологий. 2008. Т. 15, № 3. С. 11-13), свидетельствуют о том, что пневмония, развивающаяся на фоне гормонального дисбаланса, приобретает неблагоприятный острый характер в отличие от пневмонии, протекающей без гормональных нарушений.
Таким образом, результаты эксперимента показали, что введение адаптивных гормонов крысам приводит к увеличению содержания катионных белков в нейтрофи-лах периферической крови. Повышенное содержание катионных белков в полиморфно-ядерных лейкоцитах сохраняется при развитии сефадекс-индуцированной пневмонии на всех этапах исследования.
ЛИТЕРАТУРА
1. Канышкова Т. Г., Бунева В. Н., Невинский Г. А. Лактофер-рин и его биологические функции // Биохимия. - 2001. - Т. 66.
B. 1. - С. 5-13.
2. Пигаревский В. Е., ред. Клиническая морфология нейтро-фильных гранулоцитов. - Ленинград, 1988. - 142 с.
3. Славинский А. А. Цитоплазматическая зернистость ней-трофильных лейкоцитов (обзор литературы) // Клин. лаб. диагн. -2002.- № 3.- С. 39-43.
4. Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIKA. - М.: Медиа Сфера, 2002. - 312 с.
5. Фролов В. А., Моисеева Е. Г., Пасечник А. В. Патофизиологические аспекты модулирования функциональных свойств нейтрофилов периферической крови человека // Бюл. экспер. биол. мед. - 2008. - Т. 141. № 6. - С. 622-624.
6. Haddad J. J., Saade N. E., Safieh-Garabedian B. Cytokines and neuro-immune-endocrine interactions: role for the hypothalamic-pituitary-adrenal revolving axis // J. Neuroimmunology. - 2002. -Vol. 133. № 1-2. - P. 1-19.
7. Laakko T., Fraker P. Rapid changes in the lymphopoietic and granulopoietic compartments of the marrow caused by stress levels of corticosterone // Immunology. - 2002. - Vol. 105. - P. 111-119.
8. Pham C. T. Neutrophil serine proteases: specific regulators of inflammation // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - Vol. 6. № 7. - P. 541-550.
9. Pruenster M., Mudde L., Bombosi P., Dimitrova S., Zsak M., Middleton J., Richmond A., Graham G. J., Segerer S., Nibbs R. J., Rot A. The Duffy antigen receptor for chemokines transports chemokines and supports their promigratory activity // Nat. Immunol. - 2009. - Vol. 10. -P. 101-108.
10. Quinton L. J., Nelson S., Zhang P., Boe D. M., Happel K. I., Pan W., Bagby G. J. Selective transport of cytokine-induced neutrophil chemoattractant from the lung to the blood facilitates pulmonary neutrophil recruitment // Am. J. Phys.-Lung Cell. Mol. Phys. - 2004. -Vol. 286. № 3. - P. 465-472.
11. Raison C. L., Miller A. H. When not enough is too much: The role of insufficient glucocorticoid signaling in the pathophysiology of stress-related disorders // Am. J. Psychiatry. - 2003. - Vol. 60. № 9. -P. 1554-1565.
12. Rehaume L. M., HancockR. E. Neutrophil-derived defensins as modulators of innate immune function // Crit. Rev. Immunol. - 2008. -Vol. 28. № 3. - P. 185-200.
13. Saffar A. S., Dragon S., Ezzati P., Shan L., Gounni A. S. Phosphatidylinositol 3-kinase and p38 mitogen-activated protein kinase regulate induction of Mcl-1 and survival in glucocorticoid-treated human neutrophils // J. Allergy Clin. Immun. - 2008. - Vol. 121. № 2. - P. 492-498.
14. TaitA. S., Butts C. L., SternbergE. M. The role of glucocorticoids and progestins in inflammatory, autoimmune, and infectious disease // J. Leukoc. Biol. - 2008. - Vol. 84, № 4. - P. 924-931.
15. Trottier M. D., Newsted M. M., King L. E., Fraker P. J. Natural glucocorticoids induce expansion of all developmental stages of murine bone marrow granulocytes without inhibiting function // PNAS. - 2008. -Vol. 105. № 6. - P. 2028-2033.
Поступила 12.10.2009
Кубанский научный медицинский вестник № 9 (114) 2009
