УДК 616.314-089.23-089.843:612.017.1-036.8]-092.9)
ОЦЕНКА ПРИМЕНЕНИЯ НОВЫХ ОРТОДОНТИЧЕСКИХ МИКРОИМПЛАНТАТОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Д.Е. СУЕТЕНКОВ1 Г.С. ТЕРЕНТЮК2 Г.Н. МАСЛЯКОВА1 АДКАРАГАЙЧЕВ3 А.В.ЛЯСНИКОВА4 О.В. МАТВЕЕВА5
х) Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского
2) Первая ветеринарная клиника, г.Саратов
3)Саратовский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского
4) Саратовский государственный технический университет
5) Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Росмедтехнологий»
e-mail: suetenhov@gmail.com
Введение. Скелетная опора, которую обеспечивают микроимплантаты, за последнее десятилетие значительно изменила клинику ортодонтической стоматологии [1-3]. Применяемые при этом силы колеблются в широких пределах, обеспечивая перенесение нагрузки на скелетные структуры без задействования периодонтальной связки и клеточных механизмов тканевой перестройки [4-6].
Ограничением в применении данного вида опоры могут служить как состояние костной ткани челюстей, их незначительный объем или повреждение, так и развивающие
Отрицательным моментом применения подобного подхода является наличие раны слизистой оболочки полости рта в области введения, а также травмирующее воздействие на минимальные по объему костные структуры альвеолярных и небных отростков челюстей [7-9]. Таким образом, достаточно ажурные костные структуры и слизистая оболочка полости рта находятся в состоянии хронического раздражения и необходимости реагировать на наличие микроимплантатов (раневой процесс, остеоинтеграция, погружной рост), что может отрицательно сказываться на организме пациента, динамике и выраженности ортодонтических эффектов [10,11].
В своих работах одним из вариантов решения подобных проблем мы выбрали нанесение на поверхности микроимплантатов композитных покрытий, содержащих золото, серебро, хитозан и гидроксиапатит, которые позволяют модифицировать ответ макроорганизма на введение хирургических конструкций, а также оказывают антибактериальный и противовоспалительный эффекты [12-15]. Использование золота в покрытиях стоматологических имплантатов минимально изучено [16], а в отношении модификации поверхности ОМИ проводится впервые [17].
Реакция иммунной системы при применении ОМИ с модифицированной поверхностью нами выбрана как маркер важнейших механизмов обеспечивающих как поддержание гомеостаза, так и механизм блокады инфекционного процесса в тканях челюстей. Объектом изучения были выбраны крупные лабораторные животные (собаки), что определялось наличием достаточного объема костных тканей, возможностью соблюдения хирургического протокола установки ОМИ и рекомендациями ведущих разработчиков подобных конструкций [18-22].
Методы. В исследовании использовались титановые ОМИ производства «Плазма Поволжья» с покрытиями гидроксиапатитом, серебро-хитозан-повиаргол содержащими композициями.
Оценена динамика эффектов при использовании ортодонтических микроимплантатов с наноструктурными покрытиями, содержащими серебряные и золотые наночастицы. Обоснована безвредность применения подобных конструкций на животных.
Ключевые слова: ортодонтические микроимплантаты, наночастицы, перемещение зубов.
Нанесение ГАП-покрытий производилось плазменным напылением. Наноком-позитные покрытия на основе низкомолекулярного водорастворимого хитозана и дек-стран-сульфата содержащие наночастицы серебра были получены методом полиион-ной самосборки. Толщину получившихся покрытий определяли при помощи атомносиловой микроскопии, при этом она составляла от 10 до 40 нм. Полиэтиленимин, хи-тозан, декстран-сульфат и серебросодержащий антисептик повиаргол были разведены в водном растворе 2 мг/мл. Хитозан и раствор металлических наночастиц наносились послойно. Подслоем использовался PEI для заряда поверхности стекла.
Отбор экспериментальных животных для проведения операций по введению имплантатов: 1 группа - контроль, 2 группа - опытная (имплантаты с модифицированной поверхностью), 3 группа - сравнение (титановые имплантаты).
Протокол введения имплантатов предусматривал общую анестезию с использованием 2 % ксилозина и золетила, формирование пилотного канала. Каждой собаке вводилось по 2 однотипных имплантата. Прочность фиксации определялась с помощью периотестометрии. Нагрузку микроимплантатов проводили никелидтитановыми пружинами с силой воздействия 100 мг. На каждую собаку оформлялся протокол наблюдения, в которых отражены все изменения в динамике наблюдения. Животные наблюдались в течение 21 дня.
В постоперационный период проводили ежедневный клинический осмотр, измерение температуры тела, орошение слизистой полости рта бидистилированной водой, фотографирование. В динамике исследования на 1, 3, 7, 14, 21 сутки наблюдения после операции определяли динамику изменения массы тела, проводили общий анализ крови, определение биохимических показателей сыворотки крови, уровней щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы, общего белка, бикарбоната, кальция. Из иммунологических показателей собак: исследование антителообразования по содержанию в сыворотке крови циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК); определение концентрации лизоцима в сыворотке крови.
Фото 1. Имплантаты у собаки №428 в день операции (вид сверху)
Фото 2. Нагрузка имплантатов у собаки №576 в день операции
Результаты. Функциональная полноценность конструкций на протяжении периода наблюдения по данным периотестометрии не страдала.
Таблица 1
Масса тела в динамике наблюдения
№ группы Масса тела в динамике наблюдения, кг
Исходная 3 сутки 7 сутки 14 сутки 21 сутки
№ 1 13,7±0,5 13,5±0,7 13,5±0,8 12,2±0,5 13,2±0,6
№ 2 15,1±0,9 15,0±0,5 15,0±0,4 14,8±0,6 14,9±0,2
№3 17,0±0,3 17,0±0,6 18,5±0,7 18,3±о,5 17,5±0,9
Таблица 2
Общий анализ крови в динамике наблюдения
№ группы Показатели Средние значения показателей
Исходные показатели 3 сутки 7 сутки 14 сутки 21 сутки
СОЭ, мм/ч 5,0 6,0 5,0 3,0 3,0
Тромбоциты, тыс. в 1мм3 87,9 55,7 46,3 63,9 37,7
Нейтрофилы: юные, % 0 0 0 0 0
палочкоядерные, % 7 4 4 3 4
№ 1 сегментоядерные, % 49 54 62 60 66
Лимфоциты, % 41 36 22 23 20
Моноциты, % 0 1 3 4 2
Эозинофилы, % 3 3 8 7 8
Базофилы, % 0 2 1 3 0
СОЭ, мм/ч 2,0 2,0 3,0 3,0 2,0
Тромбоциты, тыс. в 1мм3 42,5 47,2 33,2 60,7 32,0
Нейтрофилы: юные, % 0 2 2 0 0
палочкоядерные, % 6 3 3 5 5
№3 сегментоядерные, % 55 43 52 54 66
Лимфоциты, % 31 42 31 28 23
Моноциты, % 2 2 4 3 0
Эозинофилы, % 5 6 5 4 6
Базофилы, % 1 2 3 6 0
СОЭ, мм/ч 2,0 4,0 7,0 5,0 2,0
Тромбоциты, тыс. в 1мм3 45,9 48,1 26,6 27,1 28,5
Нейтрофилы: юные, % 0 1 0 0 0
палочкоядерные, % 4 5 5 7 6
№ 2 сегментоядерные, % 62 49 70 57 76
Лимфоциты, % 22 36 15 28 11
Моноциты, % 3 1 1 3 1
Эозинофилы, % 8 6 6 2 6
Базофилы, % 1 2 3 3 0
Анализируя данные протоколов наблюдения, следует отметить, что введение имплантатов во всех группах не сопровождалось выраженной реакцией слизистой в области их фиксации. Слизистая губы на месте соприкосновения с выступающей частью имплантатов была гиперемированной от 3 до 7 суток. Температура тела, общее состояние и поведение животного в норме. В группе №3 на 7 сутки слизистая оболочка вокруг 1 имплантата воспалена и кровоточит. На 14 сутки слизистая гиперемирована, на слизистой губы в точке соприкосновения с выступающей частью имплантата раневая поверхность. Такое же состояние сохраняется на 21 сутки, что может интерпретироваться как мукозит. После введения имплантатов в группе №2 с композицией «по-виаргол + гидроксиапатит» изменения слизистой минимальны.
Масса тела (табл. 1) и потребление пищи контрольными и опытными собаками особенностями не отличаются.
Анализируя данные общего анализа крови собак в динамике наблюдения (таблица 2), следует отметить увеличение количества сегментоядерных нейтрофилов и уменьшение лимфоцитов во 2 группе на 21 сутки наблюдения. В остальном различий между контрольными и опытными группами не наблюдается. Данные по оценке иммунологических показателей у обследуемых собак представлены в табл. 3
Таблица 3
Анализ иммунологических показателей различных групп в динамике наблюдения
Экспериментальные группы Перечень показателей Исходные показатели Показатели в динамике наблюдения
3 сутки 7 сутки 14 сутки 21 сутки
группа № 1 ЦИК, в 100 мл 101,5±0,б5 6з,5±0,92 42±0,33 42±0,79 15±0,82
лизоцим, мг/кг 4,8±0,11 3,6±0,88 1,9±0,04 2,6±0,07 1,0±0,08
группа №2 ЦИК, в 100 мл 106±1,32 53±0,98 73±0,68 23±0,75 14±0,31
лизоцим, мг/кг 2,4±0,04 1,6±0,07 1,3±0,07 2,1±0,07 1,1±0,01
группа № 3 ЦИК, в 100 мл 43±0,80 30±0,55 13±0,64 22±0,87 1б±0,19
лизоцим, мг/кг 2,1±0,04 2,5±0,05 1,7±0,0б 2,2±0,04 1,2±0,08
Данные таблицы свидетельствуют об отсутствии значимых отклонений уровня циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови прооперированных собак по сравнению с интактными животными. Отмечается тенденция к уменьшению количества циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови собак всех экспериментальных групп в динамике наблюдения. Статистически недостаточное количество животных в экспериментальных группах позволяет отметить только индивидуальные особенности в концентрации лизоцима в сыворотке крови обследуемых собак. Таким образом, значимого влияния введенных имплантатов на анализируемые иммунологические показатели в ходе настоящего эксперимента не установлено.
Данные анализа клинико-биохимических показателей у собак в динамике наблюдения представлены в табл. 4.
Обсуждение. Анализ данных таблицы свидетельствует об отсутствии достоверных различий клинико-биохимических показателей между контрольными и опытными животными в динамике наблюдения, а также об отсутствии достоверных изменений по отношению к исходным данным.
Анализируя данные протоколов наблюдения следует отметить, что введение собакам имплантатов с модификацией поверхности не вызывает у животных местных процессов со стороны слизистой и тканей в области их фиксации. Вместе с тем осложнения в виде воспалительной реакции с отеком и кровоточивостью при использовании ОМИ возможны. При этом на первые сутки после имплантации отмечается тенденция к увеличению концентрации лизоцима в сыворотке крови собак 2 и 3 групп, что может быть связано с увеличением выработки лизоцима различными гранулоцитами, особенно нейтрофилами, в ответ на проведенное хирургическое вмешательство. В дальнейшем активация механизмов неспецифической резистентности организма выражена у собак группы № 3, где на третьи и седьмые сутки увеличение концентрации лизо-цима в сыворотке крови носит достоверный характер.
При изучении гуморального звена иммунной системы биообъектов значимых отклонений уровня циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови экспериментальных животных не выявлено, что свидетельствует об отсутствии нарушения антителообразования при введении собакам имплантатов.
Таблица 4
Анализ клинико-биохимических показателей сыворотки крови в динамике наблюдения
№ группы Перечень показателей Исходные уровни Данные в динамике наблюдения
3 сутки 7 сутки 14 сутки 21 сутки
группа № 1 ЩФ, Е/л 131±2,1 182±1,9 113±3,7 128±2,8 94±1,2
ЛДГ, Е/л 295±2,8 352±4,2 259±5,4 3б2±1,9 341±1,6
Общ. Белок, г/л 66,5±0,9 68,9±1,9 66,7±1,1 71,8±2,3 62,5±0,9
Альбумин, г/л 37±0,8 35,9±1,7 33,3±2,6 38,3±1,7 39,7±2,0
Бикарбонат, ммоль/л 10±0,6 8±0,6 13±0,3 11±0,8 9±0,4
Кальций, ммоль/л 1,б1±0,1 1,77±0,0 2,02±0,3 1,78±0,4 1,49±0,3
ЩФ, Е/л 112±1,7 142±2,0 152±1,8 173±2,3 Таблица
ЛДГ, Е/л 184±1,1 231±1,7 160±3,5 306±2,5 230±4,5
группа №2 Общ. Белок, г/л 73,5±4,2 65,4±1,2 63±2,8 65,8±2,0 67,8±3,0
Альбумин, г/л 38,5±2,1 29,8±1,7 28,4±3,0 31,6±2,6 38,7±2,4
Бикарбонат, ммоль/л 8±0,5 13±0,8 13±0,5 12±0,7 11±0,3
Кальций, ммоль/л 1,84±0,3 1,73±0,4 2,16±0,8 2,21±0,1 2,3±0,1
ЩФ, Е/л 99±1,9 135±2,9 119±3,6 81±1,7 107±4,0
ЛДГ, Е/л 165±3,0 195±1,8 160±3,5 248±4,1 179±3,3
группа № 3 Общ. Белок, г/л 66,7±1,3 64,2±0,8 70,1±1,6 64,8±1,9 61,3±2,0
Альбумин, г/л 37,4±1,1 33,8±1,0 37,2±0,9 38,5±2,0 38,9±1,8
Бикарбонат, ммоль/л 10±0,7 16±1,1 19±0,5 14±0,6 14±0,3
Кальций, ммоль/л 1,67±0,0 1,76±0,0 1,77±0,1 1,49±0,1 1,64±0,1
Заключение. Резюмируя вышеизложенное, следует отметить, что введение собакам имплантатов не сопровождалось развитием у них выраженной общей реакции организма. Исключением является только активация механизмов неспецифической резистентности организма собак, которым вводились имплантаты без покрытия. На 3 и 7 сутки у них наблюдалось достоверное увеличение количества лизоцима. Именно на эти сроки у животных отмечались наиболее выраженные местные реакции слизистой и окружающих тканей на введение. Относительно имплантатов с модификацией поверхности уместно подчеркнуть, что их введение не вызывает у животных ни местных, ни общих реакций.
Список литературы
1. Применение ортодонтических имплантатов при лечении зубочелюстных аномалий. /Н.Ю. Оборотистов [и др.]// Ортодонтия. 2007. №3(39). С.71.
2. Использование имплантатов при ортодонтическом лечении.///Л.В. Польма [и др.] Ортодент-инфо. №3, 2002. С.44-51.
3. Мини-имплантаты - в центре особого внимания. Части 1-6. Dental Tribune: Russian Ed./B. Ludvig [etal.]// 2009. № 3-8(8). С.21-23.
4. Микроимплантаты в ортодонтии. Норта, СПб./Д.Х. Сунг [и др.]// 2006.174 с.
5. Reynders, R. Mini-implants in orthodontics: a systematic review of the literature. Am J Or-thod Dentofacial Orthop./ R. Reynders, L. Ronchi, S. Bipat // 2009. №135 (5). Р.5641-5645.
6. Bone-to-implant contact of orthodontic implants in humans subjected to horizontal loading. Clin Oral Implants Res./ H. Wehrbein [et al.]// 1998. №9(5). Р.348-353.
7. Critical factors for the success of orthodontic mini-implants: a systematic review. Am J Or-thod Dentofacial Orthop./Y. Chen [et al.]// 2009. №135(3). Р.284-291.
8. Histomorphometric Evaluation of Cortical Bone Thickness Surrounding Miniscrew for Orthodontic Anchorage./ T. Deguchi [et al.]// Clinical Implant Dentistry and Related Research, Published Online: 12 May 2009.
9. Factors affecting the clinical success of screw implants used as orthodontic anchorage. Am J Orthod Dentofacial Orthop./ H.S. Park [et al.] // 2006. №130(1). Р.18-25.
10. Sequential bone healing of immediately loaded mini-implants. Am J Orthod Dentofacial Orthop./ G. Serra [et al.]// 2008. №134(1). Р.44-52.
11. Характеристика пролиферативных свойств стволовых клеток костного мозга на поверхности титана и золота. Материалы IX научного форума «Стоматология 2007», посвященного 45-летию ЦНИИС.///А.И. Воложин [и др.] М., 2007. С.226-229.
12. Абдулин, И.Ш. Бактерицидные и биологически стойкие покрытия для имплантатов / И.Ш. Абдулин, М.М. Миронов, В.С. Желтухин // Новое в стоматологии. 1995. № 2. С.24-25.
13. Тумшевиц, О.Н., Белоусова Ю.Б., Тумшевиц В.О. Исследование влияния хитозансо-держащих композиций на ткани пародонта крыс с моделью сахарного диабета. Стоматология детского возраста и профилактика./ О.Н. Тумшевиц, Ю.Б. Белоусова, В.О. Тумшевиц // 2007. №4. С.39-41.
14. Inhibition of HIV Fusion with Multivalent Gold Nanoparticles. J Am Chem Soc. / M.C. Bowman [et al.]// 2008, №130(22). Р.6896-6897.
15. Оптимизация костной регенерации с помощью стволовых клеток - предшественников остеобластов, фиксированных на композитных материалах (в эксперименте) / А.И.Воложин [и др.] // Кафедра. 2006. Т.5, №1. С.37-42.
tology./G. Juodzbalis [et al.] //2007.
_____________ _____ ,,_____, №4(33). P.177-185.
iTitaiABPâriaffiS§;OAmî]p^iiai!înfsfiMriseiîKî60feç®nOPïîiiiîîipaCîïi iî^pvrLaat1 lîiafO^niaî iSâ^îtes : an
experimental study in dogs. Clin Oral Implants Res./ I. Abrahamsson, J.P. Albouy, T. Berglundh // 2008. №19(2). P.153-159.
18. Soft tissues reaction to de novo plaque formation on implants and teeth. An experimental study in the dog. Clin Oral Implants Res./ T. Berglundh [et al.] // 1992, №3. P.1-8.
19. Systematic review of the experimental use of temporary skeletal anchorage devices in orthodontics. Am J Orthod Dentofacial Orthop./ M.A. Cornelis [et al.] // 2007. №131(4). P.52-58.
20. Histological Comparison in the Dog of Porous-coated vs. Threaded Dental Implants. J Dent Res./ D.A. Deporter [et al.] // 1990. № 5(69). P.1138-1145.
21. Anchorage of titanium implants with different surface characteristics: an experimental study in rabbits. Clin Implant Dent Relat Res./ K. Gotfredsen [et al.] // 2000. №2(3). P.120-128.
22. Spider Screw: skeletal anchorage system. Prog Orthod / B.G. Maino [et al.] //2005. №6(1). P.70-81.
EFFECTS OF NEW ORTHODONTIC MICROIMPLANTS USAGE: AN ANIMAL STUDY
D.E.SUETENKOV1 G.S.TERENTYUK2 G.N. MASLYAKOVA1 A.L. KARAGAYCHEV3 A.V. LYASNIKOVA4 O.V. MATVEEVA5
1) Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky The First Veterinary Clinic
Saratov State University n.a. N.G.Chernychevsky
4) Saratov State Technical University
Saratov Research Institute of Traumatology and Orthopedics e-mail: suetenkov@gmail.com
Dynamic of effects during the usage of orthodon- tic microimplants, coated by gold and silver nanoparticles, have been estimated. Proved the harmlessness of such structures in animals.
Key words: orhtodontic microimplant, nanopar- ticles, tooth mobility.