CC BY
76
Фармакология, токсикология
УДК 619:615.9
ОЦЕНКА ПРАЗИФЕНА НА ЭМБРИТОКСИЧЕСКОЕ И ТЕРАТОГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ
И.Р. САЛГИРИЕВ соискатель М.Б. МУСАЕВ доктор ветеринарных наук
Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина, 117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: vigis@ncport. ru
В опытах на самках белых крыс паста празифена в дозе по ДВ 1,0/10,0 и 3,0/30,0 мг/кг соответственно по празиквантелу и фенбендазолу при введении в желудок в различные периоды эмбриогенеза не проявила эмбриотоксического и тератогенного действия.
Ключевые слова: паста, празифен, эмбриотоксич-ность, белые крысы.
Антигельминтная паста празифен состоит из действующих веществ (фенбендазола и празиквантела) и вспомогательных компонентов образующих пасту. Установлена терапевтическая доза празифена против цестод и нематод лошадей, равная 1,0/10,0 мг/кг соответственно по ДВ празиквантелу и фенбендазолу. Празифен в терапевтической дозе проявил высокую эффективность при основных гельминтозах лошадей [7-10].
Препарат не оказывает отрицательного воздействия на организм, а также на гематологические и биохимические показатели крови лошадей [11].
Празифен относится к 4 классу малоопасных веществ со слабовыражен-ной кумуляцией. При изучении субхронической токсичности препарат не оказывал влияния на общее состояние и поведение животных, прием корма и воды, динамику прироста массы тела, гематологические и биохимические показатели белых крыс. Дозы празифена 1/100 и 1/1000 от ЛД50 являются не токсичными [2-5, 12, 13].
Цель нашей работы - оценка празифена на эмбритоксическое и тератогенное действие.
Материалы и методы
Оценку празифена на эмбриотоксическое и тератогенное действие проводили согласно Методическим рекомендациям по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств, одобренным фармакологическим комитетом Минздрава России (протокол № 8 от 3 июля 1997 г.) и утвержденные Минздравом России 18 декабря 1997 [6] на 48 беременных самках белых крыс, из которых 42 были подопытными и 6 контрольными, а также 10 самцах крыс, содержащихся отдельно. Самцов подсаживали в клетки с самками, находящимися в стадии эструса и проэструса, в соотношении 1 : 4. Первым днем беременности самок считали день обнаружения сперматозоидов во влагалищном мазке.
Празифен вводили беременным самкам в форме пасты в терапевтической дозе по ДВ (1,0/10,0 мг/кг соответственно по празиквантелу и фенбендазолу) в желудок с помощью желудочного зонда в периоды с 1 по 7; 8-14 и 15-19-е сутки беременности. Также препарат вводили самкам крыс в терапевтической и 3 раза повышенной дозе с 1 по 19-е сутки беременности. Крысы контрольной группы получали воду в соответствующем объёме, равном объёму вво-
101
димого препарата. В течение беременности проводили наблюдение за общим состоянием самок.
На 20-е сутки беременности крыс убивали декапитацией. По отношению числа желтых тел беременности, мест имплантации, живых и резорбирован-ных эмбрионов определяли пред- и постимплантационную гибель, общую эмбриональную смертность (%). Плоды извлекали из матки, тщательно осматривали, определяли краниокаудальные размеры. Измеряли массу и размер плаценты.
Оценку эмбриотоксического действия празифена проводили с учётом критериев Дыбана и др. (1970) [1].
Тератогенное действие препарата оценивали по методу Wilson (1965) в модификации Дыбана и др. (1970) [14, 15]. Для изучения состояния внутренних органов плоды фиксировали в жидкости Буэна и выдерживали в течение 14 сут. Состояние внутренних органов плодов изучали под стереомикроско-пом МБС-2 на 9 сиггитальных срезах, сделанных лезвием. Полученные результаты обработали статистически с использованием компьютерной программы Microsoft Excel.
Результаты и обсуждение
Результаты изучения возможного эмбриотропного действия празифена при введении крысам-самкам в различные периоды беременности приведены в таблицах 1-4.
1. Результаты изучения эмбрионального материала после введения празифена в дозе по ДВ 1,0/10,0 мг/кг на 1-19-е сутки беременности (сводные данные)
Показатель Группа животных
подопытная контрольная
Количество желтых тел беременности 12,2±0,41 12,4±0,48
Количество мест имплантации 11,2±0,70 11,3±0,66
Количество резорбций 0,5±0,03 0,5±0,03
Количество живых плодов 10,4±0,60 10,6±0,54
Общая эмбриональная смертность, % 16,8±1,24 17,1±1,20
Предимплантационная смертность, % 11,9±1,0430 12,2±1,28
Постимплантационная смертность, % 5,0±0,60 4,8±0,54
Масса плода, г 2,3±0,02 2,3±0,03
Размер плода, см 3,0±0,02 3,0±0,02
Масса плаценты, г 0,5±0,03 0,5±0,02
Размер плаценты, см 1,4±0,03 1,3±0,02
Количество самок, % 50,3 48,9
Количество самцов, % 49,7 51,1
Примечание. Р > 0,05.
2. Средние размеры зачатков костной системы у плодов (мм)
после введения празифена в дозе по ДВ 1,0/10,0 мг/кг с 1 по 19-е сутки беременности (сводные данные)
Название кости Группа животных
подопытная контрольная
Лопаточная правая 2,33±0 ,03 2,34±0,04
левая 2,33±0,03 2,34±0,04
Плечевая правая 2,44±0,04 2,47±0,04
левая 2,44±0,04 2,47±0,04
Локтевая правая 2,47±0,03 2,47±0,03
левая 2,47±0,04 2,47±0,03
Лучевая правая 1,85±0,04 1,86±0,04
левая 1,85±0,03 1,86±0,04
Бедренная правая 1,66±0,04 1,68±0,03
левая 1,66±0,04 1,68±0,03
Большеберцовая правая 1,94±0,05 1,95±0,04
левая 1,94±0,05 1,95±0,04
Малоберцовая правая 1,76±0,03 1,78±0,03
левая 1,76±0,03 1,78±0,03
Примечание. Р > 0,05.
3. Результаты изучения эмбрионального материала после введения празифена в дозе по ДВ 3,0/30,0 мг/кг с 1 по 19-е сутки беременности
Показатель Группа животных
подопытная контрольная
Количество желтых тел беременности 12,1±0,40 12,4±0,42
Количество мест имплантации 11,0±0,52 11,3±0,60
Количество резорбций 0,5±0,03 0,5±0,03
Количество живых плодов 10,2±0,56 10,6±0,54
Общая эмбриональная смертность, % 16,6±1,06 17,0±0,94
Предимплантационная смертность, % 11,7±1,24 12,1±1,12
Постимплантационная смертность, % 5,1±0,52 4,8±0,50
Масса плода, г 2,2±0,03 2,3±0,03
Размер плода, см 3,0±0,02 3,0±0,02
Масса плаценты, г 0,5±0,03 0,5±0,03
Размер плаценты, см 1,3±0,03 1,3±0,04
Количество самок, % 51,5 48,2
Количество самцов, % 48,5 58,8
Примечание. Р > 0,05.
4. Средние размеры зачатков костной системы у плодов (мм) после введения празифена в дозе по ДВ 3,0/30,0 мг/кг (в три раза увеличенной) _с 1 по 19-е сутки беременности (сводные данные)_
Название кости Группа животных
подопытная контрольная
Лопаточная правая 2,32±0,03 2,34±0,04
левая 2,32±0,03 2,34±0,04
Плечевая правая 2,43±0,03 2,47±0,04
левая 2,43±0,03 2,47±0,04
Локтевая правая 2,45±0,04 2,48±0,03
левая 2,45±0,04 2,48±0,04
Лучевая правая 1,84±0,03 1,86±0,04
левая 1,84±0,03 1,86±0,04
Бедренная правая 1,65±0,04 1,68±0,03
левая 1,65±0,04 1,68±0,04
Большеберцовая правая 1,93±0,05 1,95±0,04
левая 1,93±0,05 1,95±0,04
Малоберцовая правая 1,75±0,04 1,78±0,03
левая 1,75±0,04 1,78±0,03
Примечание. Р > 0,05.
Празифен не оказывает отрицательного влияния на развитие плода. Так, при введении празифена с 1 по 7; 8-14 и с 15 по 19-е сутки беременности общая эмбриональная смертность (%) составила соответственно 17,8±1,06; 16,3±1,32 и 16,5±1,40 против контрольных значений 17,5±1,22; 17,2±1,30 и 16,7±1,32 (Р > 0,05). Об отсутствии эмбриотоксического эффекта препарата свидетельствуют значение массы и размер плодов. При введении празифена на 1-7 и 15-17-е сутки беременности масса плодов (г) составила соответственно 2,3±0,02 и 2,3±0,02 (Р > 0,05). Не изменялась масса плодов и при введении препарата с 8 по 14-е сутки беременности. При исследовании плодов во всех группах не выявлено наличия внешних аномалий развития черепа, глаз, ушных раковин, брюшной стенки, конечностей, хвоста.
Нами не обнаружено нарушений топографии крупных сосудов (артерий и вен), сердца, лёгких, органов брюшной полости. На уровне лицевого и мозгового черепа отмечали симметричность расположения анатомических структур нижней челюсти, переднего отдела твердого нёба, носовой полости, глазных яблок и обонятельных луковиц, больших полушарий головного мозга, мозжечка и продолговатого мозга.
На срезах у подопытных и контрольных объектов отмечена идентичность топографии: гортани, пищевода, слюнных желёз, трахеи, спинного мозга, крупных сосудов сердца, лёгких, бронхов, печени, желудка, всех отделов тонкого и толстого кишечника, поджелудочной железы, почек, органов малого таза, а также не обнаружено дефектов скелета.
Размеры зачатков лопаточной, плечевой, локтевой, лучевой, а также бедренной, большой и малой берцовой костей у подопытных и контрольных плодов находились в близких пределах (Р > 0,05).
Не отмечено существенного влияния празифена в 3 раза увеличенной терапевтической дозе на течение беременности и эмбриональную смертность плодов во все периоды эмбриогенеза, а также на развитие костной системы плодов.
Таким образом, в опытах на самках белых крыс при внутрижелудочном введении в различные периоды эмбриогенеза, а также на всём протяжении беременности паста празифен в дозе по ДВ 1,0/10,0 и 3,0/30,0 мг/кг (празик-
вантелу и фенбендазолу) не проявила эмбриотоксической и тератогенной активности.
Литература
1. Дыбан А.П., Баранов B.C., Акимова И.М. Основные методические подходы к тестированию тератогенной активности химических веществ // Архив анат., гистол. и эмбриол. - 1970. - № 10, С. 89-100.
2. Загородников М.В. Справочная книга по ветеринарной токсикологии пестицидов. - М.: Колос, 1976. - 21 с.
3. Каган Ю.С., Станкевич В.В. Актуальные вопросы гигиены труда, промышленной токсикологии в нефтяной и нефтехимической промышленности. - Уфа, 1984. - С. 48-49.
4. Люблина Е.И. Рекомендации по статистической обработке результатов экспериментально-токсикологических исследований. - М.: Ин-т гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР, 1986. - 12 с.
5. Медведь Л.И., Каган Ю.С., Спыну Е.И. Пестициды и проблемы здравоохранения // Вестн. Всес. хим. о-ва им. Менделеева. - 1968. - Т. 13, № 3. -С.263-271.
6. Методические рекомендации по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств, одобренные фармакологическим комитетом Минздрава России (протокол № 8 от 3 июля 1997) и утвержденные Минздравом России 18 декабря 1997.
7. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Испытание празифена при основных гельминтозах лошадей // Рос. паразитол. журнал. - 2009. - № 2. -С. 105-108.
8. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Эффективность празифена при основных гельминтозах лошадей // Матер. докл. научн. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» -М., 2010. - Вып. 11. - С. 299-302.
9. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Эффективность празифена при гельминтозах овец и коз // Рос. паразитол. журнал. - 2010. - № 4. -С. 93-97.
10. Мусаев М.Б., Берсанова Х.И., Джамалова А.З. и др. Комиссионное испытание празифена при основных гельминтозах лошадей // Матер. докл. научн. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 2011. - Вып. 12. - С. 343-345.
11. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Влияние празифена на организм лошадей // Рос. паразитол. журнал. - 2011. - № 3. - С. 74-101.
12. Саноцкий И.В., Уланова И.П. Критерии вредности в гигиене и токсикологии по оценке химических соединений. - М.: Медицина, 1975. - 37 с.
13. Измеров Н.Ф., Саноцкий Н.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии (Справочник). - М.: Медицина, 1977. - 235 с.
14. Dawson A.B. A not the staining of the Sceletion of cleared Specimens with alizarin red s. // Stain techn. - 1926. V. 1. - P. 123-124.
15. Wilson J.G. Methods for administering and detecting maiformations in experimental animals. In Teratology; Principles and Techniques; J.G. Wilson and J. Warkany. Eds. University of Chicago Press, Chicago, 1965. - P. 262-277.
Assessment of prazifen on embryotoxic and teratogenic action I.R. Salgiriyev, M.B. Musaev
Prazifen in a dose of 1,0/10,0 and 3,0/30,0 mg/kg DV respectively on praziquantel and fenbendazole at introduction in stomach during the various periods of embryogenesis didn't show embryotoxic and teratogenic action.
Keywords: paste, prazifen, embriotoxicity, white rats.
