CC BY
10
УДК 639.215.2:574.24./625 DOI 10.52231/2225-4269_2021_3_37
Оценка фагоцитарной активности клеток крови тиляпии в условиях индуцированного гормонами стресса
Березина Дарья Игоревна, аспирант, ассистент, младший научный сотрудник кафедры ВНБ, хирургии и акушерства e-mail: vetxwork@gmail.com
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина»
Аннотация. Работа посвящена изучению фагоцитарной способности клеток крови нильской тиляпии Oreochromis niloticus L. под влиянием гормональной индукции стресса различной продолжительности. В нативных мазках выявлено, что Staphylococcus aureus подвергается фагоцитированию как лейкоцитами, так и тромбоцитами и эритроцитами крови тиляпий. Проведена количественная оценка фагоцитарной способности этих клеток. Установлено, что длительное воздействие стресса обладает иммуносупрессивным влиянием на фагоцитарную активность лейкоцитов и иммуностимулирующим влиянием на фагоцитарную активность эритроцитов (60 мин. инкубации) к концу эксперимента по сравнению с другими группами. Кратковременное воздействие стресса повышает активность лейкоцитов и снижает активность эритроцитов (60 мин. инкубации) в течение 7-ми дней после воздействия.
Ключевые слова: фагоцитарная активность, рыбы, стресс, кровь, лейкоциты, тромбоциты,эритроциты.
Актуальность
Стресс у культивируемых рыб является все более изучаемой темой из-за его влияния на рост [1], размножение [2], функционирование защитных систем: иммунитета и гемостаза [3] и, в конечном счете, на приспособленность животного. Наиболее полно влиянию стресса на восприимчивость рыб к болезням и функционированию иммунной системы посвящены работы G.A. Wedemeyer [4] и L. Tort [5]. Влияние синтетических гормонов (дексаметазон и гидрокортизон) на структуру и функцию иммунной системы некоторых видов рыб подробно описаны в работе Д.В. Микрякова [б].
При оценке реакции клеточного звена иммунитета рыб на различные виды стресса в первую очередь необходимо обратить внимание на наиболее филогене-
V/ I V/ V/ I U I
тически древний неспецифический врожденный фактор иммунной защиты - фагоцитарную активность клеток крови. Фагоцитоз характерен для нейтрофилов, моноцитов крови и макрофагов в почках, селезенке, тимусе, печени, лейдиговом органе, стенках кишечника [7]. Фагоцитарная активность лейкоцитов рыб зависит от температуры среды [8]. У рыб в определенных условиях отмечают фагоцитоз эритроцитов [9; 10] благодаря тому, что они имеют сходные с клетками белой крови изменения в цитоскелете [11], а также тромбоцитов [8], причем именно сенсибилизированные лейкоциты активизируют фагоцитоз тромбоцитов благодаря растворимым факторам [12]. Имеющиеся данные говорят о снижении способности фагоцитировать бактерии под воздействием стресс-реакции у лейкоцитов в результате температурного воздействия [13], снижения кислотности среды [14], введения кортизола [15], увеличения плотности посадки [16]. Другие эксперименты отмечают усиление фагоцитарной активности лейкоцитов и эритроцитов рыб, вместе с коагуляцией, в результате комбинированного стресса [17], изменения солевого состава воды [18] и метеорологических параметров [19]. У тиляпии количественно охарактеризовано увеличение фагоцитарной способности эритроцитов к определенным патогенам в результате гипо- и гипертермического воздействия [20].
Иммуносупрессия, оцененная по косвенным признакам (устойчивость к заражению) была вызвана введением такого синтетического кортикостероида, как три-амцинолон [21]. Другие авторы [22] обнаружили, что даже незначительное хроническое повышение уровня кортизола снижает сопротивляемость рыб к болезням, вероятно, из-за нарушения функций как В-, так и Т-лимфоцитов, и это часто связано со снижением устойчивости к патогенам (бактериям, грибам, простейшим или вирусам) или экспериментальному заражению [3].
Данные о количественном анализе фагоцитарной активности различных клеток крови тиляпии под влиянием синтетических кортикостероидов в литературе отсутствуют.
Целью работы было изучение изменений фагоцитарной способности ядерных клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов) тиляпии в условиях длительной и кратковременной гормональной индукции.
Материалы и методы
Работа выполнена в центре развития аквакультуры «АкваБиоЦентр» Вологодской ГМХА имени Н.В. Верещагина в рамках реализации гранта РФФИ №19-3490109 («Аспиранты»).
Эксперимент проводили на 30 тиляпиях Oreochromis niloticus L. Рыб каждого вида в соответствии с видом гормонального воздействия предварительно раздели-
ли на группы (таблица): рыбы с имитацией острого стресса (первая экспериментальная группа), рыбы с имитацией хронического стресса (вторая экспериментальная группа) и контрольные животные. Для имитации острого стресса использовали дексаметазон-фосфат (4 мг/мл) [23], который метаболизируется в течение 4 часов. Животных однократно обрабатывали Дексаметазоном (Эллара, Россия) путем парентеральных инъекций в дозе 0,2 мл или 0,8 мг активного вещества дексамета-зон-фосфата на особь. В качестве глюкокортикоида, имитирующего хронический стресс, однократно применяли суспензию бетаметазона (2,63 мг бетаметазона натрия фосфата + 6,43 мг бетаметазона дипропионата/мл), период выведения которого более 10 дней. Рыбам инъецировали Дипроспан (Schering-Plough Labo N.V., Бельгия) по 0,5 мл на особь, что соответствует 3,5 мг активного вещества, доза которого была определена экспериментальным путем по нормам вещества на массу, установленным в инструкции. Контрольная группа оставалась интактной.
Рыб содержали в экспериментальной установке с обеспечением непрерывной циркуляции воды между аквариумами и принудительной аэрацией при температуре воды 28-30°C, режим кормления - 1 раз в сутки гранулированным кормом. Перед забором крови рыб анестезировали при помощи добавления в воду гвоздичного масла в дозе 0,033 мл/л [24] с последующей выдержкой в ней 15 минут.
Для оценки состояния клеточного иммунитета определяли фагоцитарную активность (ФА) клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов) к Staphylococcus aureus согласно общепринятой методики [25].
Полученные в ходе исследования результаты обрабатывались с помощью программного обеспечения Microsoft Excel и STATISTICA 12.0. Значения полученных результатов в работе представлены в виде средней величины и стандартной ошибки средней (M±m). Достоверность различий показателей крови для множественных независимых выборок определяли с помощью критерия Кроскелла-Уоллеса, для парных зависимых выборок использовали критерий Вилкоксона. Результаты исследования со значением вероятности допущения альфа-ошибки, равные либо менее 5% (р < 0,05), расценивались как статистически значимые. Различие двух показателей считали достоверным, если оно равнялось или превышало свою среднюю ошибку разности в два и более раз.
Результаты
В результате проведенных исследований был зафиксирован факт фагоцитирования Staphylococcus aureus как лейкоцитами, так и эритроцитами в нативных мазках крови тиляпий (рисунок), а также количественно охарактеризована фагоцитирующая способность этих клеток в зависимости от времени действия гормо-ниндуцированного стресса (см. таблицу).
Рисунок. Процесс фагоцитирования стафилококка лейкоцитами (а) и эритроцитами (Ь) у тиляпий
Фагоцитарная активность (ФА) - процент лейкоцитов (нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов), способных к связыванию с патогенной микрофлорой и ее перевариванию.
Стоит отметить снижение ФА лейкоцитов у рыб с модуляцией хронического стресса, в отличие от рыб других групп, при 30-ти минутной инкубации на 50% к концу эксперимента по сравнению с исходным значением, тогда как этот показатель у рыб в других группах повысился за тот же период на 19,7-33,3%.
Динамика ФА лейкоцитов при 60-минутной инкубации у рыб во всех группах оставалась сходной.
I а и V/ V/
ФА лейкоцитов количественно в контрольной и второй экспериментальной группах достигала своего максимума в первый день эксперимента спустя 120 минут инкубации с патогеном, затем, сохраняя отрицательную динамику, снизилась на 70 и 20% соответственно к последнему дню эксперимента. Напротив, ФА лейкоцитов первой экспериментальной группы достигла максимума при таком же времени инкубации на 7-й день на 72,7%, что говорит о краткосрочном иммуностимулирующем эффекте обработки, затем снизилась на 36,8% к концу эксперимента, оставаясь при этом на 9% больше относительно изначального значения.
Из вышеизложенных данных можно заключить, что наиболее деструктивно хронический стресс влияет на начальную ФА лейкоцитов по сравнению с другими группами, тогда как острый стресс имеет сильный иммуностимулирующий эффект
на конечную ФА лейкоцитов, длящийся в пределах семи дней.
Анализируя динамику ФА эритроцитов, максимум активности этих клеток крови выявлялся спустя 30 минут инкубации в контрольной группе, затем, претерпев кратковременный спад на 47,2%, она снизилась на 30,5% к концу эксперимента по отношению к исходному. Аналогичная динамика (на 63,2 и 36,7% соответственно) отмечается и у эритроцитов под влиянием острого стресса. Падение активности у эритроцитов второй группы рыб к 21-му дню происходило прямолинейно и составило 49,2%.
Наименьшую активность спустя 60 минут инкубации можно отметить у эритроцитов первой группы рыб, упавшую на 38,2% спустя 7 дней эксперимента и восстановившуюся к его концу. ФА эритроцитов у рыб второй группы при таком же времени инкубации, наоборот, сильно повысилась к 7-му дню на 63,2% и оставалась выше на 47,3% к 21-му дню по сравнению с исходным значением. Эта динамика указывает на острое иммунносупрессивное влияние кратковременного стресса к середине эксперимента и иммуностимулирующее действие хронического стресса к его концу относительно фагоцитарной активности эритроцитов рыб при часовой инкубации их с патогенами.
Значительных изменений ФА эритроцитов при 120-минутной инкубации с патогеном выявлено не было.
Выводы
Таким образом, можно сделать вывод, что у тиляпий в условиях хронического стресса, вызванного синтетическими кортикостероидами, наиболее четко можно проследить его иммуносупрессивное влияние на конечную фагоцитарную активность лейкоцитов и иммуностимулирующее влияние на срединную фагоцитарную активность эритроцитов по сравнению с другими группами к концу эксперимента.
Острый стресс, напротив, стимулирует конечную фагоцитарную активность лейкоцитов и снижает срединную активность эритроцитов в течение недели после воздействия.
Таблица. Динамика параметров фагоцитоза лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов тиляпий в ходе эксперимента
Показатель До обработки 7-й день 21-й день
контрольная группа (П = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (П=10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (П=10) контроль-ная группа (П = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (П = 10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (П = 10) контроль-ная группа (П = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (П = 10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (П = 10)
30 минут
ФА лейкоцитов, % 1,67± 0,67 1,50± 0,50 2,00± 1,00 2,25± 0,63 1,50± 0,50 2,00± 0,41 2,00± 0,00 2,00± 0,58 1,00
ФА эритроцитов, % 14,40± 2,50#Ьс 9,80± 2,58Ьс 10,50± 2,18 7,60± 1,60# 3,60± 0,40*с 8,75± 1,75 10,00± 2,45 6,20± 0,37 5,33± 0,33
До обработки 7-й день 21-й день
Показатель контрольная группа (n = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (n=10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (n=10) контроль-ная группа (n = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (n = 10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (n = 10) контроль-ная группа (n = 10) первая экспе- римен- таль- ная группа (n = 10) вторая экспе- римен- таль- ная группа (n = 10)
60 минут
ФА лейкоцитов, % 1,10± 0,37bc 1,63± 0,55 1,50± 0,29 2,25± 0,63 2,00± 1,00 2,33± 0,88 2,00± 0,41 1,80± 0,58 1,67± 0,67
ФА эритроцитов, % 6,60± 1,08 6,80± 0,66 4,75± 0,85b 6,20± 0,73 4,20± 1,02*c 7,75± 1,31 7,75± 0,48 6,60± 0,68 7,00± 1,53
120 минут
ФА лейкоцитов, % 5,00± 1,64c 2,75± 0,63 2,50± 0,87 4,40± 1,03c 4,75± 0,85*c 2,25± 0,63 1,50± 0,50 3,00± 0,71 2,00± 0,58
ФА эритроцитов, % 5,80± 0,80 5,20± 1,07b 4,50± 1,26 4,80± 0,97c 3,80± 0,66 5,25± 0,48 8,00± 1,47# 3,60± 0,87 4,33± 0,33
#Различия с показателем первой экспериментальной группы в тот же день эксперимента достоверны (Р-0,05). *Различия с показателем второй экспериментальной группы в тот же день эксперимента достоверны (Р-0,05). Ь Различия с аналогичным показателем аналогичной группы на 7-й день эксперимента достоверны (Р-0,05). с Различия с аналогичным показателем аналогичной группы на 21-й день эксперимента достоверны (Р-0,05).
Литература:
1. Van Weerd, J.H., Komen, J. The effects of chronic stress on growth in fish: a critical appraisal. Comparative Biochemistry and Physiology Part A: Molecular & Integrative Physiology, 1998, no. 120(1), pp. 107-112.
2. Reid, S.G., Bernier, N.J., Perry, S.F. The adrenergic stress response in fish: control of catecholamine storage and release. Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Pharmacology, Toxicology and Endocrinology, 1998, no. 120(1), pp. 1-27.
3. Berezina, D.I, Fomina, L.L. Effect of hormone-induced stress on carp (Cyprinus carpio) coagulogram. Periodico Tche Quimica, 2020, no. 17(36), pp. 346-356.
4. Wedemeyer, G.A., Meyer, F.P., Smith, L. Environmental stress and fish diseases. Neptune City: T.F.H. Publications, 1976. 192 p.
5. Tort, L. Stress and immune modulation in fish. Developmental & Comparative Immunology, 2011, no. 35(12), pp. 1366-1375.
6. Микряков, Д.В. Влияние некоторых кортикостероидных гормонов на структуру и функцию иммунной системы рыб: автореферат дис. ... кандидата биологических наук : 03.00.10, 14.00.36 / Д. В. Микряков. - М., 2004. - 24 с.
7. Аминева, В.А. Физиология рыб: учеб. для высш. спец. учеб. заведений / В.А. Аминева, А.А. Яржомбек. - М. : Лег. и пищ. пром-сть, 1984. - 200 с.
8. Ботяжова, О.А. Физиология системы крови: сравнительные, экологические и эволюционные аспекты: учеб. пособие / О.А. Ботяжова. - Ярославль: Ярославский гос. ун-т, 2000. - 60 с.
9. Березина, Д.И. Динамика фагоцитарной активности эритроцитов рыб под воздействием эндогенного и синтетического кортизола / Д. И. Березина, Л. Л. Фомина // Молодежная наука - развитию агропромышленного комплекса : мат-лы Всеросс. (нац.) науч.-практ. конф. студ., асп. и мол. уч., Курск, 3-4 декабря 2020 года. -Курск: Курская ГСХА им. И.И. Иванова, 2020. - С. 401-405.
10. Чернявских, С.Д. О способности к фагоцитозу и фагоцитарной активности ядерных эритроцитов холоднокровных (на примере Rana ridibunda и Cyprinus carpio) / С.Д. Чернявских, Д.Х. Кует, И.С. Буковцова, В.В. Тхань // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Естественные науки. - 2016. - Т. 35. - № 11 (232).
11. Chernyavskikh, S.D., Fedorova, M.Z., Van Thanh, V. Reorganization of actin cytoskeleton of nuclear erythrocytes and leukocytes in fish, frogs, and birds during migration. Cell and Tissue Biology, 2012, no. 6(4), pp. 348-352.
12. Nagasawa, T., Somamoto, T., Nakao, M. Carp thrombocyte phagocytosis requires activation factors secreted from other leukocytes. Developmental & Comparative Immunology, 2015, no. 52 (2), pp. 107-111.
13. Chen, W.H., Sun, L.T., Tsai, C.L., Song, Y.L., Chang, C.F. Cold-stress induced the modulation of catecholamines, cortisol, immunoglobulin M, and leukocyte phagocytosis in tilapia. General and comparative endocrinology, 2002, no. 126(1), pp. 90-100.
14. Nagae, M., Ogawa, K., Kawahara, A., Yamaguchi, M., Nishimura, T., Ito, F. Effect of acidification stress on endocrine and immune functions in carp, Cyprinus carpio. Water, Air, and Soil Pollution, 2001, no. 130(1), pp. 893-898.
15. Law, W.Y., Chen, W.H., Song, Y.L., Dufour, S. and Chang, C.F., 2001. Differential in vitro suppressive effects of steroids on leukocyte phagocytosis in two teleosts, tilapia and common carp. General and Comparative Endocrinology, 121(2), pp.163-172.
16. Ortuno, J., Esteban, M.A., Meseguer, J. Effects of short-term crowding stress on the gilthead seabream (Sparus aurata L.) innate immune response. Fish & shellfish immunology, 2001, no. 11(2), pp.187-197.
17. Ruis, M.A., Bayne, C.J. Effects of acute stress on blood clotting and yeast killing by phagocytes of rainbow trout. Journal of aquatic animal health, 1997, no. 9(3), pp. 190-195.
18. Адамова, В.В. Морфофункциональные особенности ядерных эритроцитов и лейкоцитов Cyprinus carpio и Rana ridibundа в условиях умеренной гипотонии / В.В. Адамова., С.Д. Чернявских // Региональные геосистемы. - 2013. - Вып. 23. - № 10 (153). - С. 103-106.
19. Поглотительная способность ядерных гемоцитов Cyprinus carpio L. и Rana ridibunda Pall. в разные сезоны года / И.С. Буковцова, С.Д. Чернявских, Кует До Хыу, Тхань Во Ван // Региональные геосистемы. - 2013. - Вып. 24. - № 7(160). -С. 86-91.
20. Тхань Во Ван. Действие температурного фактора на фагоцитарную актив-
ность ядерных эритроцитов Oreochromis sp. / Тхань Во Ван, С.Д. Чернявских, Кует До Хыу; Международный Научный Институт «Educatio». - 2015. - № 6 (13). - С. 6-7.
21. Houghton, G., Matthews, R.A. Immunosuppression of carp (Cyprinus carpio L.) to ichthyophthiriasis using the corticosteroid triamcinolone acetonide. Veterinary Immunology and Immunopathology, 1986, no. 12(1-4), pp. 413-419.
22. Pickering, A.D., Pottinger, T.G. Stress responses and disease resistance in salmonid fish: effects of chronic elevation of plasma cortisol. Fish physiology and biochemistry, 1989, no. 7(1), pp. 253-258.
23. Балабанова, Л. В. Реакция лейкоцитов карпа Cyprinus carpio на гормонин-дуцируемый стресс / Л.В. Балабанова, Д.В. Микряков, В.Р. Микряков // Биология внутренних вод. - 2009. - № 1. - С. 91.
24. Hamackova, J., Kouril, J., Kozak, P., Stupka, Z. Clove oil as an anaesthetic for different freshwater fish species. Bulgarian Journal of Agricultural Science, 2006, no. 12(2), p. 185.
25. Методические указания по определению уровня естественной резистентности и оценке иммунного статуса рыб № 113-4-2 / 1795 от 25.11.99. - М. : Минсельхозпрод, 1999.
References:
1. Van Weerd J. H., Komen J. The effects of chronic stress on growth in fish: a critical appraisal. Comparative Biochemistry and Physiology. Part A: Molecular & Integrative Physiology, 1998, No. 120(1), pp.107-112.
2. Reid S. G., Bernier N. J., Perry S. F. The adrenergic stress response in fish: control of catecholamine storage and release. Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Pharmacology, Toxicology and Endocrinology, 1998, No. 120(1), pp. 1-27.
3. Berezina D. I., Fomina L. L. Effect of hormone-induced stress on carp Cyprinus carpio) coagulogram. Periodico Tche Quimica, 2020, No. 17(36), pp. 346-356.
4. Wedemeyer G. A., Meyer F. P., Smith L. Environmental Stress and Fish Diseases. Neptune City, T.F.H. Publications, 1976.192 P.
5. Tort L. Stress and immune modulation in fish. Developmental & Comparative Immunology, 2011, No. 35(12), pp.1366-1375.
6. Mikryakov D. V. Vliyanie nekotorykh kortikosteroidnykh gormonov na strukturu i funktsiyu immunnoy sistemy ryb: avtoreferat dis. ... kandidata biologicheskikh nauk: 03.00.10, 14.00.36 [Influence of Some Corticosteroid Hormones on Structure and Function of Fish Immune System: Abstract of Thesis. ... Candidates of Biological Sciences: 03.00.10, 14.00.36]. Moscow, 2004. 24 P. (In Russian)
7. Amineva V. A., Yarzhombek A. A. Fiziologiya ryb [Tekst]: ucheb. dlya vyssh. spets. ucheb. zavedeniy [Physiology of Fish: Textbook for Higher Specialized Educational Institutions]. Moscow, Leg. i pishch. prom-st' Publ., 1984. 200 P. (In Russian)
8. Botyazhova O. A. Fiziologiya sistemy krovi: sravnitel'nye, ekologicheskie i evolyutsionnye aspekty [Tekst]: ucheb. posobie [Physiology of Blood System: Comparative, Ecological and Evolutionary Aspects [Text]: Teaching Guide]. Yaroslavl, Yaroslavskiy gos. un-t Publ., 2000. 60 P. (In Russian)
9. Berezina D. I., Fomina L. L. Dynamics of phagocytic activity of fish erythrocytes under the influence of endogenous and synthetic cortisol [Text]. Molodezhnaya nauka - razvitiyu agropromyshlennogo kompleksa: Mat. Vseross.(nats.) nauch.-prakt. konf. stud., asp. i mol. uch., Kursk, 03-04 dekabrya 2020 goda [Youth Science -
for Development of Agro-Industrial Complex: Math. All-Russian (Nat.) Research and Practice. Conf. of Stud., Postgrad. and Young Scholars, Kursk, December 03-04, 2020], Kursk, Kurskaya GSKhA im. I. I. Ivanova Publ., 2020, pp. 401-405. (In Russian)
10. Chernyavskikh S. D., Kuet D. Kh., Bukovtsova I. S., Tkhan^ V. V. On ability to phagocytosis and phagocytic activity of nuclear erythrocytes of cold-blooded (on the example of Rana ridibunda and Cyprinus carpio) [Text]. Nauchnye vedomosti Belgorodskogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya: Estestvennye nauki [Scientific Bulletin of Belgorod State University. Series: Natural Sciences], 2016, Vol. 35, No. 11 (232). (In Russian)
11. Chernyavskikh S. D., Fedorova M. Z., Van Thanh V. Reorganization of actin cytoskeleton of nuclear erythrocytes and leukocytes in fish, frogs, and birds during migration. Cell and Tissue Biology, 2012, No. 6(4), pp. 348-352.
12. Nagasawa T., Somamoto T., Nakao M. Carp thrombocyte phagocytosis requires activation factors secreted from other leukocytes. Developmental & Comparative Immunology, 2015, No. 52(2), pp.107-111.
13. Chen W. H., Sun L. T., Tsai C. L., Song Y. L., Chang C. F. Cold-stress induced the modulation of catecholamines, cortisol, immunoglobulin M, and leukocyte phagocytosis in tilapia. General and Comparative Endocrinology, 2002, No. 126(1), pp. 90-100.
14. Nagae M., Ogawa K., Kawahara A., Yamaguchi M., Nishimura T., Ito F. Effect of acidification stress on endocrine and immune functions in carp, Cyprinus carpio. Water, Air, and Soil Pollution, 2001, No. 130(1), pp.893-898.
15. Law W. Y., Chen W. H., Song Y. L., Dufour S., Chang C. F. Differential in vitro suppressive effects of steroids on leukocyte phagocytosis in two teleosts, tilapia and common carp. General and Comparative Endocrinology, 2001, No. 121(2), pp.163-172.
16. Ortuno J., Esteban M. A., Meseguer J. Effects of short-term crowding stress on the gilthead seabream (Sparus aurata L.) innate immune response. Fish & Shellfish Immunology, 2001, No. 11(2), pp.187-197.
17. Ruis M. A., Bayne C. J. Effects of acute stress on blood clotting and yeast killing by phagocytes of rainbow trout. Journal of Aquatic Animal Health, 1997, No. 9(3), pp.190-195.
18. Adamova V. V., Chernyavskikh S. D. Morphofunctional features of nuclear erythrocytes and leukocytes of Cyprinus carpio and Rana ridibunda under conditions of moderate hypotension. Regional'nye geosistemy [Regional Geosystems], 2013, I. 23, No. 10(153), pp. 103-106. (In Russian)
19. Bukovtsova I. S., Chernyavskikh S. D., Kuet D. Kh., Tkhan" V. V. Absorption capacity of nuclear hemocytes in Cyprinus carpio L. and Rana ridibunda Pall. during different seasons of the year. Regional'nye geosistemy [Regional Geosystems], 2013, I. 24, No. 7 (160), pp. 86-91. (In Russian)
20. Tkhan" V. V., Chernyavskikh S. D., Kuet D. Kh. Effect of temperature factor on phagocytic activity of nuclear erythrocytes of Oreochromis sp. Mezhdunarodnyy Nauchnyy Institut «Educatio» [International Scientific Institute "Educatio"], 2015, No. 6(13), pp. 6-7. (In Russian)
21. Houghton G., Matthews R. A. Immunosuppression of carp (Cyprinus carpio L.) to ichthyophthiriasis using the corticosteroid triamcinolone acetonide. Veterinary Immunology and Immunopathology, 1986. No. 12(1-4), pp. 413-419.
22. Pickering A. D., Pottinger T. G. Stress responses and disease resistance in salmonid fish: effects of chronic elevation of plasma cortisol. Fish Physiology and Biochemistry, 1989, No. 7(1), pp. 253-258.
23. Balabanova L. V., Mikryakov D. V., Mikryakov V. R. The reaction of leukocytes of carp Cyprinus carpio to hormone-induced stress [Text]. Biologiya vnutrennikh vod [Biology of Internal Waters], 2009, No. 1, pp. 91. (In Russian)
24. Hamackova J., Kouril J., Kozak P., Stupka Z. Clove oil as an anaesthetic for different freshwater fish species. Bulgarian Journal of Agricultural Science, 2006, No. 12(2), p.185.
25. Metodicheskie ukazaniya po opredeleniyu urovnya estestvennoy rezistentnosti i otsenke immunnogo statusa ryb [Tekst] № 113-4-2 / 1795 ot 25.11.99 [Guidelines for Determining the Level of Natural Resistance and Assessing the Immune Status of Fish [Text], No. 113-4-2 / 1795 from 25.11.99], Moscow, Minsel'khozprod Prod., 1999. (In Russian)
Assessment of phagocytic activity of tilapia blood cells
under hormone-induced stress
Berezina Dar'ya Igorevna, a postgraduate student, an assistant lecturer, a junior researcher of the Internal Non-Infectious Diseases, Surgery, and Obstetrics Chair
e-mail: vetxwork@gmail.com
The Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education the Vologda State Dairy Farming Academy named after N. V. Vereshchagin
Abstract. The paper presents an assessment of the phagocytic ability of blood cells of Nile tilapia Oreochromis niloticus L. under the hormonal induction of stress with range of duration. It has been revealed that Staphylococcus aureus is phagocytosed by leukocytes, platelets, and erythrocytes of tilapia blood in direct smears. The phagocytic capacity of the cells has been quantified. It has been found that long-term exposure to stress has an immunosuppressive effect on the phagocytic activity of leukocytes and an immunostimulating effect on the phagocytic activity of erythrocytes (60-minute incubation) by the end of the experiment in comparison with other groups. Short-term exposure to stress increases the activity of leukocytes and decreases the activity of erythrocytes (60- minute incubation) for 7 days after exposure.
Keywords: phagocytic activity, fish, stress, blood, leukocytes, platelets, erythrocytes.
