CC BY
75
_ВЕСТНИК ПНИПУ_
2020 Химическая технология и биотехнология № 2
DOI: 10.15593/2224-9400/2020.2.06 УДК 579.64
О.И. Бахирева, О.Ю. Маньковская, М.М. Соколова, О.В. Вельможина, Л.С. Пан
Пермский национальный исследовательский политехнический университет, Пермь, Россия
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ БИОРЕМЕДИАЦИИ ПОЧВЫ, ЗАГРЯЗНЕННОЙ ИОНАМИ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ
Представлены результаты изучения эффективности биоремедиации почвы, загрязненной ионами тяжелых металлов (ТМ), с использованием растений и специально выделенных микроорганизмов. Культуры микроорганизмов, используемые для биоремедиации почвы, должны соответствовать следующим основным требованиям: поддерживать стабильную жизнедеятельность в присутствии ионов ТМ, а также оказывать влияние на способность растений поглощать ионы ТМ из почвы. Для достижения этой цели выделенные из загрязненной почвы микроорганизмы культивировались на жидкой питательной среде PYG (пептон - дрожжевой экстракт - глюкоза), после чего подробно исследовались их особенности и возможность жизнедеятельности в присутствии ионов Pb2+ и Hg2+. Выбор указанных ионов обусловлен тем, что соединения свинца и ртути, как известно, являются наиболее опасными экотоксикантами. С помощью дискодиффузионного метода были определены границы устойчивости микроорганизмов к высоким концентрациям ионов Pb2+ и Hg2+. Для оценки возможности биоремедиации загрязненной почвы с использованием полученных культур микроорганизмов применялся метод фитотестирования. Эффективность биоремедиации почвы оценивалась по показателям всхожести и энергии роста семян овса, а также по концентрациям ионов Pb2+ и Hg2+, накопленных в биомассе растений. Содержание ионов ТМ в растениях определялось после их минерализации путем озоления с последующей кислотной экстракцией. Анализ концентраций ионов Pb2+ и Hg^+в полученных растворах проводился с помощью атомно-эмиссионного спектрометра с индуктивно-связанной плазмой ThermoiCAP 6500 Duo.
Ключевые слова: ионы тяжелых металлов, почва, ионы Pb2+, ионы Hg2+, био-ремедиация, фитотестирование, микроорганизмы, растения.
O.I. Bakhireva, O.Yu. Mankovskaya, M.M. Sokolova, O.V. Velmozhina, L.S. Pan
Perm National Research Polytechnic University, Perm, Russian Federation
EVALUATION OF THE EFFECTIVENESS OF BIOREMEDIATION OF SOIL CONTAMINATED WITH HEAVY METAL IONS
The article presents the results of studying the effectiveness of bioremediation of soil contaminated with heavy metal ions (TM), using plants and specially isolated microorganisms. Cultures of microorganisms used for bioremediation of soil must meet the following main requirements: to maintain a stable vital activity in the presence of TM ions, and also to influence the ability of plants to absorb TM ions from the soil. To achieve this goal, the microorganisms isolated from the contaminated soil were cultivated on a liquid PYG nutrient medium, after which their features and the possibility of vital activity in the presence of Pb2+ and Hg2+ ions were studied in detail. The choice of these ions is due to the fact that lead and mercury compounds are known to be the most dangerous ecotoxicants. Using the disc-diffusion method, the stability limits of microorganisms to high concentrations of Pb2+ and Hg2+ ions were determined. To assess the possibility of bioremediation of contaminated soil using the obtained cultures of microorganisms, the phytotesting method was used. The effectiveness of soil bioremediation was assessed by the germination and growth rates of oat seed, as well as by the concentrations of Pb2+ and Hg2+ ions accumulated in plant biomass. The content of TM ions in plants was determined after their mineralization by ashing with subsequent acid extraction. Analysis of the concentrations of Pb2 + and Hg2 + ions in the solutions obtained was carried out with the ThermoiCAP 6500 Duo inductively coupled plasma atomic emission spectrometer.
Keywords: ions of heavy metals, soil, Pb2+, Hg2+, bioremediation, microorganisms,
plants.
В современных условиях интенсивного технического развития всех сфер общества окружающая среда подвержена сильному комбинированному техногенному загрязнению. Среди техногенных загрязнений с большим объемом выбросов особое место занимают тяжелые металлы (ТМ), так как они оказывают наиболее опасное воздействие на живые организмы. По данным Е.А. Ворончихиной [1], Ю.Н. Водя-ницкого [2] и др., основными загрязнителями почв г. Перми являются Pb, Zn, С^ Sn, Ni, Cr, Mn, Ga, Ва, Hg. В почвах г. Перми высокая тех-ногенность характерна для Pb, Ni, Zn, Cu, Cr, Hg, Ga. Содержание подвижных форм Ni, Pb, Hg, Cu, Cr, Mn находится на уровне ПДК или превышает его [3].
Ртуть и ее соединения, как общепризнано, являются наиболее опасными экотоксикантами и даже «суперэкотоксикантами». В связи с различными техногенными процессами трансформация и миграция ртути и ее соединений в окружающей среде являются серьезной проблемой экогеохимии ТМ. Почва является депонирующей средой для соединений ртути, а также источником их поступления в другие компоненты экосистем, в том числе в природные воды и растения, что определяет их дальнейшее распространение по трофическим цепям [4, 5].
Среди причин промышленных отравлений первое место занимает свинец. Это связано с его широким применением в различных отраслях промышленности. Химизм свинца в почве определяется сложным равновесием противоположных процессов, таких как сорбция - десорбция, растворение - переход в твердое состояние. При попадании в почву с различными выбросами свинец включается в цикл физических, химических и физико-химических превращений и, как и ртуть, легко попадает в систему подземных вод.
Разработано множество различных методов ремедиации почв, загрязненных ТМ: технические, физические, химические, биологические (биоремедиация), а также их комбинации [5-7]. В настоящее время большое распространение получают методы биоремедиации, так как они являются малозатратными и простыми в применении. Одним из перспективных методов биоремедиации почвы является фитоэкстрак-ция - извлечение ТМ с помощью растений. Для повышения фитодо-ступности металлов и, следовательно, увеличения выноса загрязнений из почв, наряду с растениями используют также различные химические добавки. Кроме того, для биоремедиации почв предлагается использовать микроорганизмы. В литературе широко описаны микроорганизмы, устойчивые к действию ТМ, способные влиять на их фитотоксич-ность и биодоступность [8, 9].
Помимо биоремедиации, различные биологические объекты активно используются для биотестирования различных компонентов окружающей среды: воздуха, воды, почвы, промышленных отходов, материалов и т.д. [10-13]. Популярность такого тестирования легко объяснима: во-первых, указанные объекты тестирования обычно содержат различные компоненты, токсикологические свойства которых не всегда характеризуются суммой свойств каждого из них с учетом аналитически определенного количественного состава; во-вторых, среда часто загрязнена неустойчивыми продуктами взаимодействия и распа-
да, которые иногда становятся токсичнее исходных веществ; в-третьих, количество присутствующих в окружающей среде загрязнителей превышает число применимых физико-химических методов анализа, которые позволяли бы контролировать их содержание на уровне ПДК; в-четвертых, именно биологические объекты способны отразить суммарное токсическое действие различных загрязнителей окружающей среды. Именно поэтому методы биотестирования постепенно внедряются повсеместно, в том числе для оценки влияния различных добавок на токсичность загрязнений [1].
Цель данной работы - исследовать возможность биоремедиации почвы, загрязненной ионами ТМ, используя культуры микроорганизмов и растения.
В связи с этим из почвы, загрязненной ионами ТМ, были выделены микроорганизмы, которые культивировались на жидкой питательной среде РУО [9]. В результате получены две культуры микроорганизмов, обозначенные далее как «культура I (К1)» и «культура II (КП)». Обе культуры представляют собой мелкие точечные выпуклые глянцевые колонии бежевого и белого цветов (К1 и К11 соответственно). При микроскопировании выяснили, что обе культуры оказались кокковид-ными бактериями (диплококками), причем К1 - грамположительная, К11 - грамотрицательная [9, 14, 15].
Дальнейшие исследования были посвящены оценке возможности использования культур микроорганизмов для биоремедиации почвы, загрязненной ионами РЬ2+ и Н§2+.
Для определения значений концентраций ионов РЬ2+ и Н§2+, при которых микроорганизмы способны выживать, провели дискодиффу-зионное исследование, в котором концентрации ионов металлов варьировали от 10 до 1000 мг/дм3. Исследование показало, что зона подавления роста культур появляется при концентрациях ионов РЬ2+ и Н§2+ более 500 и 100 мг/дм3 соответственно.
Для оценки эффективности биоремедиации почвы был выбран метод фитотестирования с использованием в качестве тест-объектов семян овса. Тест-параметрами при проведении фитотестирования служат показатели прорастания: всхожесть, энергия прорастания, дружность прорастания, скорость прорастания, а также показатели интенсивности начального роста семян (длина корней, длина зеленых проростков, масса корней, масса зеленых проростков).
Нами было подготовлено 20 образцов почвы, в каждом из которых проводилось проращивание семян овса по методике [16]. Для этого в стаканчики с почвой помещали по 25 семян овса, каждую навеску почвы обрабатывали раствором определенного состава:
1. Водопродная вода (контроль)
2. Среда РУО
3. Культуральная жидкость (КЖ) К1
4. Культуральная жидкость К11
5. КЖ К1 и К11
6. Раствор РЬ2+
7. Раствор Н£2+
8. Раствор РЬ2+ и Н§2+
9. Среда РУО + РЬ2+
10. Среда РУО + Н§2+
11. Среда РУО + РЬ2+ + Н§2+
12. КЖ К1 + РЬ2+
13. КЖ К11 + РЬ2+
14. КЖ К1 + Н§2+
15. КЖ К11 + Н§2+
16. КЖ К1 + РЬ2+ + Н§2+
17. КЖ К11 + РЬ2+ + Н§2+
18. КЖ К1 и К11 + РЬ2+
19. КЖ К1 и К11 +Н§2+
20. КЖ К1 и К11 + РЬ2+ + Н§2+
Концентрации солей РЬ(К03)2 и Н§(К03)2 в растворах, вносимых в почву, рассчитывали таким образом, чтобы содержание ионов РЬ2+ и Н§2+ в почве при раздельном внесении составляло 50 мг РЬ2+ (или Н§2+)/кг воздушно-сухой почвы, а при совместном внесении 25 мг РЬ2+ + 25 мг Н§2+/кг воздушно-сухой почвы.
После прорастания семян до 3-4 листов определяли всхожесть, массу зеленых ростков, массу воздушно-сухих зеленых ростков, массу корней и массу воздушно-сухих корней. Результаты взвешивания полученных растений представлены на рис. 1. Всхожесть семян овса в исследуемых образцах почвы представлена на рис. 2. Номера точек на рис. 1, 2 соответствуют номерам образцов почв.
По результатам эксперимента отмечен токсический эффект, в присутствии ионов свинца и/или ртути, выраженный в снижении всхожести семян (до 70 %) и биомассы растений (до 69,8 %). Внесение инокулята микроорганизмов снижало токсичное воздействие металлов,
приближая всхожесть и биомассу к контрольному значению. Наибольшая всхожесть семян и масса растений наблюдались в почве, обработанной средой РУО и культуральными жидкостями К1 и/или К11.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 -♦-Массы ростков «-Массы корней
Рис. 1. Масса растений, полученных в образцах почвы
Рис. 2. Всхожесть семян в образцах почвы
После высушивания до воздушно-сухого состояния полученные растения использовались для определения содержания в них ионов свинца и ртути. Для этого была проведена их минерализация методом озоле-ния и последующая кислотная экстракция по методике [17]. После кислотной экстракции каждый образец был проанализирован на содержание ионов свинца и ртути. Анализ концентраций ионов РЬ и в полу-
ченных растворах проводился с помощью атомно-эмиссионного спектрометра с индуктивно-связанной плазмой ThermoiCAP 6500 Duo.
Измерение концентраций ионов металлов в пробах показало, что свинец накапливается в ростках и корнях растений почти одинаково, а ртуть больше аккумулируется в ростках растений. Результаты общего выноса ТМ биомассой растений (суммарно ростками и корнями) представлены на рис. 3 и 4. Концентрация ионов ТМ рассчитана в мг Pb (или Н£2+)/кг воздушно-сухого растения (ВСР).
2+
"Концентр ация ртути
Концентр ация свинца
Рис. 3. Накопление ртути и свинца при раздельном внесении: 1 - почва + + раствор ТМ (образцы 6 и 7); 2 - почва + ТМ + среда РУО (образцы 9 и 10); 3 - почва + ТМ + КЖ К1 (образцы 12 и 14); 4 - почва + ТМ + КЖ К11 (образцы 13 и 15); 5 - почва + ТМ + КЖ К1 и К11 (образцы 18 и 19)
Рис. 4. Накопление ртути и свинца при совместном внесении: 1 - почва + + раствор ТМ (образец 8); 2 - почва + ТМ + среда РУО (образец 11); 3 - почва + ТМ + КЖ К1 (образец 16); 4 - почва + ТМ + КЖ К11 (образец 17); 5 - почва + ТМ + КЖ К1 и К11 (образец 20)
Результаты определения содержания ионов ТМ в биомассе растений показывают, что присутствие культур микроорганизмов увеличивает общий вынос металлов растениями. Так, аккумуляция свинца в присутствии К1 увеличивается на 8 %, ртути на 22,6 %; в присутствии К11 на 7,8 и 26,7 %, в присутствии сообщества микроорганизмов К1 и К11 - на 9,5 и 40 % соответственно по сравнению с накоплением данных ионов при обработке водными растворами солей металлов. Также отмечена тенденция большей аккумуляции ионов при совместном присутствии культур. При внесении К1 аккумуляция металлов увеличивается на 14,4 и 38,3 %, в присутствии К11 на 13,9 и 45,7 %, а при внесении К1 и К11 на 16,5 и 83,5 % для свинца и ртути соответственно по сравнению с накоплением при обработке водным раствором, содержащим ионы свинца и ртути совместно.
Таким образом, можно сделать вывод, что сообщество культур микроорганизмов оказывает значительное влияние на вынос ионов Pb2+ и Hg2+ из почвы в растения и может быть использовано для биоремедиации почв, загрязненных ионами ТМ.
Список литературы
1. Ворончихина Е.А., Блинов С.М., Меньшикова Е.А. Технофильные металлы в естественных и урбанизированных экосистемах Пермского края // Экология урбанизированных территорий. - 2013. - № 1. - С. 103-108.
2. Водяницкий Ю.Н., Васильев А.А., Лобанова Е.С. Тяжелые металлы в почвах г. Перми // Доклады РАСХН. - 2008. - № 4. - С. 37-40.
3. Водяницкий Ю.Н., Васильев А.А., Лобанова Е.С. Загрязнение тяжелыми металлами и металлоидами почв г. Перми // Агрохимия. - 2009. -№ 4. - С. 60-68.
4. Swiercz A., Zajecka E. Accumulation of heavy metals in the urban soils of the city of Skarzysko-Kamienna (Poland) with regard to land use // Carpathian Journal of Earth and Environmental Sciences. - 2018. - Vol. 13, № 1. - P. 249-266.
5. Кудеяров В.Н., Семенов В.М. Проблемы агрохимии и современное состояние химизации сельскохозяйственного производства в Российской Федерации // Агрохимия. - 2014. - № 10. - С. 3-17.
6. Акбасова А.Д., Саинова Г.А., Ахметов Н.А. Роль вермикомпоста в процессе детоксикации почв от тяжелых металлов // Международный журнал экспериментального образования. - 2015. - № 9. - С. 152-153.
7. Проблемы использования симбиотических растительно-микробных систем для биоремедиации загрязненных металлами почв / А.А. Белимов, Н.Ю. Зиновкина, В.И. Сафронова, Е.В. Семенова // Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой: материалы V всерос. конф. молодых ученых. - Саратов, 2010. - С. 7-8.
8. Diana L. Vullo, Helena M. Ceretti Cadmium, zinc and copper biosorption mediated by Pseudomonas veronii 2E // Bioresour Technol. - 2007. - № 99 (13). - P. 81.
9. Вельможина О.В., Бахирева О.И., Соколова М.М. Применение фитотестирования для оценки возможности биоремедиации почвы, загрязненной ионами свинца и ртути // Вестник Пермского национального исследовательского политехнического университета. Химическая технология и биотехнология. - 2018. - № 1. - С. 9-18.
10. Филенко О Ф. Биологические методы в контроле качества окружающей среды // Экологические системы и приборы. - № 6. - 2007. - С.18-20.
11. Маячкина Н.В., Чугунова М.В. Особенности биотестирования почв с целью их экотоксикологической оценки // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. - 2009. - № 1. - С. 84-93.
12. Терехова В.А. Биотестирование как метод определения класса опасности отходов // Экология и промышленность России. - 2003. - С. 27-29.
13. Маньковская О.Ю., Бахирева О.И., Соколова М.М. Применение биологического метода для доочистки производственных растворов от ионов никеля // Химия. Экология. Урбанистика. - 2019. - Т. 1. - С. 425-428.
14. Makhrova O.V., Bakhireva O.I., Sokolova M.M. Microbiological method of cleaning soil from ions of heavy metals // Chemistry. Ecology. Biotechnology. - Perm, 2016. - P. 18-20.
15. Вельможина О.В., Бахирева О.И., Соколова М.М. Биотестирование как метод оценки эффективности биоремедиации почвы, загрязненной ионами тяжелых металлов // Химия. Экология. Урбанистика - 2017: материалы Всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых, асп., студ. и школ. (с междунар. участием). - Пермь: Изд-во Перм. нац. исслед. политехн. ун-та, 2017. - С. 335-341.
16. ГОСТ Р ИСО 22030-2009. Качество почвы. Биологические методы. Хроническая фитотоксичность в отношении высших растений / Федер. агент. по техн. рег. и метрологии. - М., 2010. - 20 с.
17. ГОСТ Р 53218-2008. Удобрения органические. Атомно-абсорбционный метод определения содержания тяжелых металлов / Федер. агент. по техн. рег. и метрологии. - М., 2009. - 12 с.
References
1. Voronchihina E.A., Blinov S.M., Men'shikova E.A. Tehnofil'nye metally v estestvennyh i urbanizirovannyh jekosistemah Permskogo kraja [Technophilic metals in natural and urban ecosystems of the Perm Territory]. Jekologija urbanizirovannyh territorij, 2013, no. 1, pp. 103-108.
2. Vodjanickij Ju.N., Vasil'ev A.A., Lobanova E.S. Tjazhelye metally v pochvah g. Permi [Heavy metals in the soils of Perm]. Doklady Rossijskoj akademii nauk, 2008, no. 4, pp. 37-40.
3. Vodjanickij Ju.N., Vasil'ev A.A., Lobanova E.S. Zagrjaznenie tjazhelymi metallami i metalloidami pochv g. Permi [Soil pollution by heavy metals and metalloids in Perm]. Agrohimija, 2009, no. 4, pp. 60-68.
4. Swiercz A., Zajecka E. Accumulation of heavy metals in the urban soils of the city of Skarzysko-Kamienna (Poland) with regard to land use. Carpathian Journal of Earth and Environmental Sciences, 2018, vol. 13, no. 1, pp. 249-266.
5. Kudejarov V.N., Semenov V.M. Problemy agrohimii i sovremennoe sostojanie himizacii sel'skohozjajstvennogo proizvodstva v Rossijskoj Federacii [Problems of agricultural chemistry and the current state of chemicalization of agricultural production in the Russian Federation]. Agrohimija, iz-vo: Rossijskaja akademija nauk, Moscow, 2014, no.10, pp. 3-17.
6. Akbasova A.D., Sainova G.A., Ahmetov N.A. Rol' vermikomposta v processe detoksikacii pochv ot tjazhelyh metallov [The role of vermicompost in the process of detoxification of soils from heavy metals]. Mezhdunarodnyj zhurnal jeksperimental'nogo obrazovanija, Penza, 2015, no. 9, pp. 152-153.
7. Belimov A.A., Zinovkina N.Iu., Safronova V.I., Semenova E.V. Problemy ispol'zovaniia simbioticheskikh rastitel'no-mikrobnykh sistem dlia bioremediatsii zagriaznennykh metallami pochv. Materialy V vserossiiskoi konferentsii molodykh uchenykh «Strategiia vzaimodeistviia mikroorganizmov i rastenii s okruzha-iushchei sredoi». Saratov, 2010. Р. 7-8.
8. Diana L. Vullo, Helena M. Ceretti Cadmium, zinc and copper biosorption mediated by Pseudomonas veronii 2E. Bioresur Technol, 2007, no. 99 (13), p. 81.
9. Vel'mozhina O.V., Bahireva O.I., Sokolova M.M. Primenenie fitotestiro-vanija dlja ocenki vozmozhnosti bioremediacii pochvy, zagrjaznennoj ionami svinca i rtuti [Application of phytotesting to assess the possibility of bioremedia-tion of soil contaminated with lead and mercury ions]. Vestnik Permskogo nacional'nogo issledovatel'skogo politehnicheskogo universiteta. Himicheskaja tehnologija i biotehnologija, 2018, no. 1, pp. 9-18.
10. Filenko O.F. Biologicheskie metody v kontrole kachestva okruzhajushhej sredy [Biological methods in environmental quality control]. Jekologicheskie sistemy i pribory, no. 6, 2007, pp.18 - 20.
11. Majachkina N.V., Chugunova M.V. Osobennosti biotestirovanija pochv s cel'ju ih jekotoksikologicheskoj ocenki [Features of soil biotesting for the purpose of their ecotoxicological assessment]. Vestnik Nizhegorodskogo universiteta im. N.I. Lobachevskogo, 2009, no. 1, pp. 84-93.
12. Terehova V.A. Biotestirovanie kak metod opredelenija klassa opasnosti othodov [Biotesting as a method for determining the hazard class of waste]. Jekologija i promyshlennost' Rossii, 2003, pp. 27-29.
13. Man'kovskaja O.Ju., Bahireva O.I., Sokolova M.M. Primenenie biologicheskogo metoda dlja doochistki proizvodstvennyh rastvorov ot ionov nikelja [The use of the biological method for the purification of industrial solutions from nickel ions]. Himija.Jekologija.Urbanistika, 2019, vol. 1, pp. 425-428.
14. Makhrova O.V., Bakhireva O.I., Sokolova M.M. Microbiological method of cleaning soil from ions of heavy metals. Abstract for the Regional Conference o f students and young scientists «Chemistry. Ecology. Biotechnology -2016», Perm, 2016, pp. 18-20.
15. Vel'mozhina O.V., Bahireva O.I., Sokolova M.M. Biotestirovanie kak metod ocenki jeffektivnosti bioremediacii pochvy, zagrjaznjonnoj ionami tjazhjo-lyh metallov [Biotesting as a method for assessing the effectiveness of bioremedia-tion of soil contaminated with heavy metal ions]. Materialy Vserossijskoj nauchno-prakticheskoj konferencii molodyh uchenyh, aspirantov, studentov i shkol'nikov (s mezhdunarodnym uchastiem) «Himija. Jekologija. Urbanistika - 2017», Perm', 2017, pp.335-341.
16. GOST R ISO 22030-2009: Kachestvo pochvy. Biologicheskie metody. Hronicheskaja fitotoksichnost' v otnoshenii vysshih rastenij. Federal'noe agentstvo po tehnicheskomu regulirovaniju i metrologii, Moscow, 2010, 20p.
17. GOST R 53218-2008: Udobrenija organicheskie. Atomno-absorbcionnyj metod opredelenija soderzhanija tjazhjolyh metallov. Federal'noe agentstvo po tehnicheskomu regulirovaniju i metrologyi, Moscow, 2009, 12 p.
Получено 24.04.2020
Об авторах
Бахирева Ольга Ивановна (Пермь, Россия) - кандидат химических наук, доцент кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29, e-mail: bahirevy@mail.ru).
Маньковская Ольга Юрьевна (Пермь, Россия) - магистрант кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29, e-mail: manechkaolka2212@gmail.com).
Соколова Мария Михайловна (Пермь, Россия) - кандидат химических наук, доцент кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29; e-mail: mmsokolova@mail.ru).
Вельможина Ольга Вадимовна (Пермь, Россия) - бакалавр кафедры химии и биотехнологии по направлению «Биотехнология» Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29).
Пан Лариса Сергеевна (Пермь, Россия) - кандидат химических наук, доцент кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29).
About the authors
Olga I. Bakhireva (Perm, Russian Federation) - Ph.D. in Chemical Sciences, Associate Professor, Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Polytechnic University (29, Komsomolsky av., Perm, 614990, Russian Federation; e-mail: bahirevy@mail.ru).
Olga Yu. Mankovskaya (Perm, Russian Federation) - Undergraduate Student of the Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Polytechnic University (29, Komsomolsky av., Perm, 614990, e-mail: manechkaolka2212@gmail.com).
Maria M. Sokolova (Perm, Russian Federation) - Ph.D. in Chemical Sciences, Associate Professor, Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Polytechnic University (29, Komsomolsky av., Perm, 614990, e-mail: mmsokolova@mail.ru).
Olga V. Velmozhina (Perm, Russian Federation) - Student of Chemistry and Biotechnology Department, Perm National Research Polytechnic University (29, Komsomolsky av., Perm, 614990).
Larisa S. Pan (Perm, Russian Federation) - Ph.D. in Chemical Sciences, Associate Professor, Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Polytechnic University (29, Komsomolsky av., Perm, 614990).
