CC BY
71
активных форм кислорода / В. А. Чистяков // Успехи современной биологии. - 2008. - Т.128, №3. - С. 300-306.
КОРРЕКЦИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА И ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ПРИ КОМПЛЕКСНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ДИЗЕНТЕРИИ
СВИНЕЙ
Пахмутов И.А., Осокин О.А., Скворцов В.Н.
Резюме
В патогенезе ДС важная роль избыточности процессов ПОЛ, возрастанию уровня эндогенной интоксикации. Комплексная химиотерапия с включением органического соединения селена (селенопирана) и воднодисперсионного витаминного препарата «Аквитин» повышала антиоксидантную и детоксицирующую активность в органах и тканях поросят, больных ДС, их более раннему клиническому выздоровлению.
OXIDATIRE STRESS AND ENDOGENOUS INTOXICATION IN COMPLEX CHEMOTHERAPY OF SWINE DYSENTERY (SD)
Pakhmutov I..A., Osokin O.A., Skvortsov V.N.
Summary
Complex chemotherapy of swine dysentery (SD) is more effective from all points of view because it stimulates antioxidants and antitoxics systems, which lie in the basis of pathogenesis SD.
УДК 663.1
ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО
НАЗАНАЧЕНИЯ
Пономарев Е.Е., Байматов В.Н., Козлов В.Н.
Филиал МГУТУ в г. Мелеузе
Ключевые слова: молочные продукты, оценка, антиоксидатная активность.
Key words: dairy products, evaluation, antioxidant activity.
Известны две системы эндогенной защиты от окислительного стресса, который возникает при нарушении гомеостатического соотношения процессов образования активных форм кислорода и
активности антиоксидантных систем биохимической адаптации (ферментативной и неферментативной) в живых организмах. К первой относятся механизмы антирадикальной защиты. К числу антирадикальных энзимных защитных механизмов, существующих в клетках, прежде всего относится супероксиддисмутаза. Важную роль в антирадикальной защите играют низкомолекулярные тиолы - глутатион, который способен косвенно осуществлять антирадикальную защиту, спонтанно взаимодействуя с различными пероксидами и свободными радикалами органических соединений, образующихся при действии активных форм кислорода. Эти реакции могут протекать и под воздействием селензависимой глутатионпероксидазы, которая отождествляется с ферментами группы глутатион-Б-трансфераз.
Для защиты от повреждающего действия перекисей неорганической и органической природы в организме сформировалась вторая линия эндогенной антиокислительной системы - линия антиперекисной защиты, функционирующая в тесной связи с элементами антирадикальной защиты. В состав антиперекисной защиты входят каталаза, глутатионпероксидаза, а-токоферол, билирубин, каротиноиды и ряд других соединений. В антирадикальной и антиперекисной линиях противоокислительной защиты организма участвуют также флавоноиды, полифенолы (витамин Р, убихинон), стероидные и тиреоидные гормоны, витамин К, эрготионеин, таурин, гипотаурин, дибунол, сантохин и другие биологически активные вещества.
Материалы и методы исследований. Для оценки антиоксидантной активности разработанного напитка молочного с БАД «Эраконд» в научноисследовательской лаборатории «Пищевые технологии» филиала МГУТУ г. Мелеуз был проведен эксперимент на лабораторных крысах. Определяли активность ферментов антиоксидантной системы (супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы).
Опыты проведены на 72-х белых беспородных крысах-самцах с исходной массой 150-180 г. Все животные были разделены на 5 групп. Крыс 2-й, 3-й, 4-й и 5-й групп вводили в токсический гепатоз трехкратным введением внутрижелудочно ацетона в масляном растворе из расчета 3,5 мл/кг массы тела (МТ) с интервалом в 24 часа. Масляный раствор ацетона готовили перемешиванием 1 части ацетона и 2-х частей оливкового масла [Волкова Е.С. и др., 2007]. Крысы 3-й группы после введения в гепатоз находились на стандартном рационе вивария. Крысам опытных групп один раз в сутки в течение 30-и суток внутрижелудочно вводили анализируемые ингредиенты рациона: 4-й группе - 40-й % раствор БАД «Эраконд»; 5-й группе - молочный напиток обогащенный БАД «Эраконд». Животные 1-й группы (контроль) получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме по аналогичной схеме. Для определения дозы молочного напитка с БАД «Эраконд» исходили из рекомендуемой суточной профилактической
дозы - 7 мг/кг. В связи с тем, что крысы обладают более высокой
интенсивностью метаболических процессов, дозу увеличили в 10 раз, т.е. до 70 мг/кг МТ животного. Водный 40-й % раствор БАД «Эраконд» добавляли в молочный напиток непосредственно перед введением крысам с учетом дозировки в объеме 1 мл.
В конце опыта животных выводили из эксперимента одномоментным декапитированием с соблюдением правил эвтаназии согласно Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным. После декапитации извлекали печень и промывали холодным физиологическим раствором. Промытую печень помещали в стоящую на льду чашку Петри и измельчали ножницами. Далее измельченную ткань печени взвешивали на электронных аналитических весах. Навеску массой 1,0 г помещали в стеклянный гомогенизатор Поттера, добавляли фосфатный буфер (рН=7,45) и гомогенизировали в течение 40 сек. при скорости вращения тефлонового пестика 900 об/мин. Затем тканевые гомогенаты фильтровали через 4 слоя марли в пробирки для центрифугирования. Для удаления не полностью разрушенных клеток и ядер гомогенаты центрифугировали 10 минут при 1000 g (3430 об/мин, температура от 0 до +20 С) в рефрижераторной центрифуге «SIGMA 3-18 К» с ротором 12111-Н. Надосадочную жидкость отсасывали пипеткой и использовали для определения активности ферментов, а осадок из неразрушенных клеток и ядер отбрасывали.
Результаты исследований. Выявлено, что при введении крыс в состояние экспериментального гепатоза снижалась активность ферментов антиоксидантной системы. Как видно из таблицы, активность супероксиддисмутазы у крыс 2-й группы после введения в гепатоз составила 49,86 ± 2,76 Ед/мг/белка против 66,58 ± 5,01 Ед/мг/белка (р<0,01) в контроле. Экспериментальный гепатоз у крыс сопровождался также угнетением активности ферментов, формирующих вторую линию эндогенной акнтиокислительной системы: активность каталазы,
представляющей собой тетрамер-гемопротеин, снизилась с 2739,51 ± 4,78 мкмоль/г/белка в контроле до 1359,89 ± 31,65 мкмоль/г/белка во 2-й группе (р<0,001). Активность селензависимой глутатионпероксидазы, катализирующей разложение не только перекиси водорода, но и гидроперекисей жирных кислот, перекисей белкового или нуклеинового происхождения, у крыс второй группы составила 302,70 ± 13,51 Ед/г/белка против 404,23 ± 25,40 Ед/г/белка в контроле (р<0,01).
На втором этапе эксперимента оценивали в сравнительном аспекте функциональное состояние антиокислительной системы у крыс 3-й, 4-й и 5-й групп. Анализ результатов свидетельствует о корригирующем влиянии БАД «Эраконд» на активность антирадикального фермента -супероксиддисмутазы.
1. Активность ферментов антиоксидантной системы у крыс при экспериментальном гепатозе и его коррекции БАД «Эраконд» (М±т, п=12)
Г руппы животных Активность ферментов антиоксидантной системы
Супероксид- дисмутаза, Ед/мг/белка Каталаза, мкмоль/г/белка Г лутатион-пероксидаза, Ед/г/белка
1-этап
Контроль -1-я группа 66,58±5,01 2739,51±64,78 404,23±25,40
Экспериментальный гепатоз -2-я группа ** 49,86±2,76 *** 1359,89±31,65 ** 302,70±13,51
11-этап
Контроль -1-я группа 70,90±6,94 2954,19±87,94 443,69±21,01
Общевиварный рацион - 3-я группа ** 41,69±3,46 *** 1860,10±43,39 * 384,70±18,57
БАД «Эраконд» -4-я группа 68,86±7,61 * 2703,48±70,86 ** 548,95±29,83
Напиток молочный, обогащенный БАД «Эраконд» -5-я группа 65,04±4,52 * 2543,11±66,30 412,87±14,78
Примечание: * - различие с контролем статистически значимо ( р < 0,05) ** - различие с контролем статистически значимо (р < 0,01) *** - различие с контролем статистически значимо (р < 0,001)
Так, при содержании крыс на общевиварном рационе активность супероксиддисмутазы оставалась на относительно низких значениях, составляя 41,69 ± 3,46 Ед/мг/белка против 70,90 ± 6,94 Ед/мг/белка в контроле (р<0,01), а в 4-й группе аналогичный показатель составил 68,86 ± 7,61 Ед/мг/белка. Напиток молочный обогащенный БАД «Эраконд», в составе рациона крыс 5-й группы также способствовал нормализации активности ферментов 1-го звена эндогенной антиокислительной системы -активность супероксиддисмутазы составила 65,04 ± 4,52 Ед/мг/белка, а во второй группе 49,86 ± 2,76 Ед/мг/белка.
На 31-е сутки от начала второго этапа эксперимента наблюдали
^ /14 г ^
активизацию системы антиперекисной защиты у крыс 4-й и 5-й групп: так, если в 3-й группе активность каталазы составила 1860,10 ± 43,39 мкмоль/г/белка (р<0,001), то в 4-й и 5-й группах аналогичные показатели составили 2703,48 ± 74,86 мкмоль/г/белка (р<0,05) и 2543,11 ± 66,30 мкмоль/г/белка (р<0,05).
Анализируемые показатели у крыс 4-й и 5-й групп приблизились к значениям крыс контрольной группы. Результаты ферментативного анализа
свидетельствовали об активации селензависимой глутатионпероксидазы на 31-е сутки от начала второго этапа эксперимента во всех опытных группах: активность ГПО составила в 3-й группе - 384,70 ± 18,57 Ед/г/белка, в 4-й группе - 548,95 ± 29,83 Ед/г/белка, а в 5-й группе - 412,87 ± 14,78 Ед/г/белка против 302,70 ± 13,51 Ед/г/белка во 2-й группе.
Таким образом, в ходе опытно-экспериментальных исследований установлено, что биологически активная добавка «Эраконд» оказывает корригирующее влияние на активность ферментов эндогенной антиоксидантной системы при патофизиологических сдвигах в системе окислительного гомеостаза.
ЛИТЕРАТУРА: Волкова Е.С. Способ моделирования токсической гепатопатии / Е.С. Волкова, А.Ф. Курамшина, И.Н. Бикбулатова // Интеграция науки и образования: Сб. науч. статей. - М., 2007. - С. 132-134.
ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО НАЗАНАЧЕНИЯ
Пономарев Е.Е., Байматов В.Н., Козлов В.Н.
Резюме
В эксперименте на лабораторных крысах показано, что токсический гепатоз сопровождается патофизиологическими сдвигами в системе окислительного гомеостаза. Рационы, обогащенные биологически активной добавкой «Эраконд», проявляют антиоксидантные свойства «in vivo», повышая ферментативную активность супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы в гомогенатах печени.
MILK PRODUCTS OF FUCTIONAL DIRECTION ANTIOXIDANT ACTIVITY
ESTIMATION
Ponomaryev Ye.Ye., Baimatov V.N., Kozlov V.N.
Summary
In the experiment with laboratory rats it is shown that toxic hepatosis is accompanied by pathophysiological shifts in the system of oxidizing homeostasis. Diets enriched by biologically active additive "Erakond" show antioxidant properties «in vivo» increasing enzymatic activity of superoxide dismutase, catalase and glutation peroxidase... in liver homogenates.
