CC BY
12Российская оториноларингология № 1 (56) 2012
=
УДК: 616.216.2-003.93-089.843.001.42
ОСТЕОГЕНЕЗ ЛОБНОЙ КОСТИ ПРИ ИМПЛАНТАЦИИ ДЕМИНЕРАЛИЗОВАННОГО КОСТНОГО ТРАНСПЛАНТАТА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
И.И. Ромашевская
OSTEOGENESIS FRONTAL BONE WHEN IMPLANTED DEMINERALIZED BONE GRAFT IN EXPERIMENTAL ANIMALS I. I. Romaszewskaya
ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет Минздравсоцраз-вития России»
(Зав. каф. оториноларингологии - засл. врач РФ, проф. А. Г. Волков)
Проведено исследование на 12 беспородных белых крысах для определения сроков репа-ративных процессов в лобных костях черепа в течение 100 дней. Для эксперимента был использован деминерализованный костный трансплантат из бедренной кости здоровых белых крыс. Оценку остеогенеза провели через 30, 60 и 100 дней. Проведенные нами исследования показали, что к 100-му дню после имплантации деминерализованного костного трансплантата в области лобных костей подопытных животных завершаются процессы регенерации.
Ключевые слова: белая крыса, остеогенез, деминерализованная кость.
Библиография: 5 источников.
A study of 12 non-inbred white rats to determine the timing of repair processes in the frontal bones of the skull for 100 days. For the experiment has been used demineralized bone graft from the femur of healthy white rats. Evaluation of osteogenesis performed at 30, 60 and 100 days. Our studies showed that the 100 days after implantation of demineralized bone graft in the frontal bones of white rats completed the regeneration processes.
Key words: white rat, osteogenesis, demineralized bone.
Bibliography: 5 sources.
При пластике костных послеоперационных дефектов стенок околоносовых пазух некоторые клиницисты [2, 3, 5] используют деминерализованные костные трансплантаты (ДКТ), синоним которых - деминерализованный костный матрикс [1]. ДКТ обладает упругостью, легкостью моделирования формы, минимальной антигенной активностью, способностью интенсивно индуцировать остеогенез. ДКТ удобны для проведения восстановительных и заместительных пластических операций, они упруги, гнутся, легко режутся, вяжутся узлом, в измельченном виде принимают задаваемую им форму [4, 5]. Данных о регенерации костной ткани в лобных костях экспериментальных животных нами не обнаружено.
Мы решили провести исследование на 12 беспородных белых крысах, которое уточнило бы сроки репаративных процессов в лобных костях черепа в течение 100 дней. Предварительно было проведено гистологическое исследование строения участков лобной кости у 2 здоровых белых крыс, не принимавших участие в эксперименте. Пластинки костной ткани фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, декальцинировали в 10%-ном растворе азотной кислоты. После фиксации и деминерализации исследуемые образцы заливали в парафин, изготовленные парафиновые срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по методу ван Гизона. При осмотре лобные кости здоровых крыс микроскопически были представлены пластинчатой костной тканью с наличием широкого костномозгового канала, заполненного миелоидными клетками (рис. 1). Морфологическая структура костных пластинок характеризовались однородной структурой, костная ткань после проведенной декальцинации хорошо окрашивалась гематоксилин-эозином, при этом остеоциты слабо дифференцировались. Снаружи пластинки костной ткани были окружены прослойками жировой ткани со слабовыраженным миксоматозным отеком и скоплениями мышечных клеток, цитоплазма которых хорошо прокрашивалась эозином, а ядерные структуры слабо дифференци-
Рис. 1. Морфологическая структура части лобной кости здоровой белой крысы. Г.-э. Ув. 80х.
ровались, что можно объяснить особенностями гистологической проводки, необходимой для декальцинации исследуемого материала.
Для эксперимента был использован ДКТ из бедренной кости здоровых белых крыс, изготовленный по специальному заказу. В преддверии эксперимента три пластинки были подвергнуты гистологическому исследованию - препарат был представлен пластинками остеоидной ткани с наличием остеоцитов, при этом структуры ДКТ слабо воспринимали окраску, отмечались очаговая базофилия пластинчатых структур, их фокальный своеобразный «спонгиоз» (рис. 2).
Всех животных оперировали в один день. Перед операцией проводили обычную подготовку трансплантата. Под эфирным наркозом в стерильных условиях в области лобных костей проводили разрез мягких тканей, которые отсепаровывали от кости и с помощью фрезы накладывали отверстие диаметром 30 мм. Формирование имплантируемого фрагмента ДКТ осуществляли соответственно костному дефекту специальным пуансоном, его промывали в стерильной воде и укладывали на место резецированного костного фрагмента лобных костей крысы без фиксации. Мягкие ткани ушивали наглухо. Швы у всех животных обрабатывали 1%-ной спиртовой настойкой йода. В сроки 30, 60 и 100 дней крысы по три особи выводились из эксперимента.
ш
Г ■
Рис. 2. Микрофотография неизмененного фрагмента ДКТ крысы. Г.-э.
Ув. 80х.
Рис. 3. Участок фрагмента ДКТчерез 30 дней после имплантации. Г. -э.
Ув. 200х.
Пластинки ткани с имплантированным ДКТ фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, декальцинировали в 10%-ном растворе азотной кислоты. После фиксации и деминерализации исследуемые образцы исследовали по ранее описанной схеме.
Через 30 суток крысы по 4 были выведены из опыта. После разреза мягких тканей и от-сепаровки их от кости макроскопически обнаруживалась граница между собственной костью животного и трансплантатом в виде «ручейка», заполненного тканью, внешне похожей на железистую. В гистологических срезах выявлялась выраженная пролиферация периоста с формированием обильно васкуляризованной грануляционной и фиброретикулярной ткани (рис. 3). В пластинках ДКТ отмечались признаки преимущественно остеокластического рассасывания с образованием полостей, содержащих мелкие фрагментированные структуры ДКТ, которые распределялись в виде отдельных глыбок и скоплений. В структуры деминерализованного трансплантата врастали молодые пролиферирующие сосуды, обеспечивая фиксацию ДКТ. В отдельных участках выраженная резорбция костного матрикса, приводившая к формированию обширных полостей рассасывания, которые заполнялись элементами жирного костного мозга и миелоидными клетками. Одновременно регистрировались фокусы остеогенеза за счет активации функции остеобластов с формированием как примитивных остеоидных структур, так и молодых костных балочек. Остеоидные структуры по сравнению с последними слабо воспринимали окраску, которая постепенно интенсифицировалась по мере созревания ткани и формирования более зрелых костных балочек, приобретая умеренную базофилию.
Через 60 дней после имплантации макроскопически после обнажения лобных костей крыс пространство между трансплантатами и собственными костями крысы просматривалось в виде свободной полоски, чем-то напоминая «место перелома» плоских костей черепа.
Микроскопически в ДКТ наблюдались признаки дальнейшей перестройки с прогрессирующей фрагментацией основных структур, их рассасыванием, формированием новообразованной остеоидной и относительно зрелой костной ткани (рис. 4). Наряду с этим продолжался фокальный ангиогенез с пролиферацией сосудов, преимущественно капиллярного типа. К 2 месяцам после вмешательства имплантат замещался пластинчатой костной тканью с формированием гаверсовых каналов. Параллельно продолжались процессы рассасывания, фрагментации, лизиса структур ДКТ с регенераторными процессами, обеспечивающими формирование новообразованной ткани реципиента на месте послеоперационного дефекта кости.
После выведения из опыта последней серии экспериментальных животных через 100 дней после трансплантации ДКТ были проведены разрезы мягких тканей по средней линии в межлобном пространстве. Мягкие ткани отсепарованы от кости, и обнаружено, что даже при тщательном осмотре отсутствовали видимые границы между собственной костью животного и установленным 100 дней назад трансплантатом.
Рис. 4. Участок фрагмента ДКТчерез 60 дней после имплантации. Г. -э.
Ув. 200х.
Рис. 5. Участок фрагмента ДКТ через 100 дней после имплантации.
Г.-э. Ув. 200х.
В течение этого времени происходила полноценная перестройка пластинки ДКТ с замещением его новообразованной костью, обеспечивающей анатомическую целостность тканей реципиента: на месте сформированного дефекта лобной кости животного сформировалась губчатая кость с наличием костномозгового канала, заполненного пролиферирующими клетками миелоидного ряда (рис. 5). Произошло исчезновение незрелых остеоидных структур, которые замещались пластинчатой костной тканью и губчатым костным веществом.
Проведенные нами исследования показали, что к 100-му дню после имплантации ДКТ в области лобных костей белых крыс процессы регенерации практически полностью завершены - в области послеоперационного костного дефекта сформировалась губчатая кость с костномозговым каналом, заполненным пролиферирующими клетками миелоидного ряда, при этом произошло исчезновение незрелых остеоидных структур, которые полностью заместились пластинчатой костной тканью и губчатым костным веществом.
На сроки, близкие к полученным нами, указывают данные Е. Гендлера [1], который имплантировал ДКТ в область грудины крысы-самцы. По данным автора, к 90 дню ДКТ подвергался значительной резорбции и замещался костной тканью с наличием костного мозга.
В. И. Савельев и соавт. [5] имплантировали крысам в мышечный карман бедра фрагменты ДКТ - резорбция ДКТ и замещение его компактно-спонгиозной тканью с элементами жирового и миелоидного костного мозга через 120 суток.
Российская оториноларингология № 1 (56) 2012
Данные наших исследований показали, что после 100 дней имплантации фрагментов ДКТ в области плоских лобных костей экспериментальных животных, проведенной в условиях асептики и антисептики, без применения антибактериальных препаратов (т. е. в условиях стерильной раны), завершается формирование полноценной кости, макроскопически - с исчезновением границ между собственной костью и трансплантатом, а микроскопически - с образованием отчетливо видимых гаверсовых каналов и полноценным костным мозгом.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гендлер Е. Перфорированный деминерализованный костный матрикс, новая разновидность остеоиндуктивно-го материала. Деминерализованный костный матрикс и его применение: сб. науч. тр. - СПб., 1993. - С. 11-16.
2. Горбачевский В. Н., Покотиленко А. К., Макашев В. Е. Клинико-морфологические данные при использовании деминерализованных костных трансплантатов для пластики перегородки носа. Деминерализованный костный трансплантат и его применение: сб. науч. тр. - СПб., 1993. - С. 79-86.
3. Зотов Ю. В. Краниопластика консервированными аллотрансплантатами. Трансплантация деминерализованной костной ткани при патологии опорно-двигательной системы: сб. науч. тр. - Л.: ЛНИИТО, 1990. - С. 96-99.
4. Покотиленко А. К., Горбачевский В. Н., Макашев В. Е. Экспериментальное и морфологическое обоснование применения деминерализованных костных аллотрансплантатов для пластики перегородки носа // Журн. уш., нос. и горл. бол. - 1991. - № 5. - С. 44-46.
5. Савельев В. И., Корнилов Н. В., Иванкин Д. Е. Оценка остеоиндуктивных свойств костных аллотрансплантатов, деминерализованных при различных температурных режимах и консервированных разными способами. Деминерализованные костные трансплантаты и их использование в восстановительной хирургии: сб. науч.тр. - СПб., 1996. - С. 16-25.
Ромашевская Ирина Игоревна - аспирант кафедры болезней уха, горла и носа Ростовского ГМУ. 344000, Ростов-на-Дону, пер. Ворошиловский, д. 105; тел.: 8-863-250-0-659.
УДК: 616.22-007.271-089
ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ДВУХСТОРОННЕГО НЕЙРОГЕННОГО СТЕНОЗА ГОРТАНИ ПАРАЛИТИЧЕСКОЙ ЭТИОЛОГИИ ЭКСТРАЛАРИНГЕАЛЬНЫМ СПОСОБОМ С. А. Саркисян
SURGICAL TREATMENT OF BILATERAL NEUROGENIC LARYNGEAL STENOSIS OF PARALYTIC ETIOLOGY BY EXTRALARYNGEAL LATEROFIXATION
S. A. Sargsyan
ГБОУ ДПО «Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей Минздравсоцразвития России»
(Зав. каф. оториноларингологии им. проф. А. Н. Зимина - проф. Н. В. Мингалев)
В статье приводятся исторические данные о становлении и развитии хирургического лечения двухстороннего нейрогенного стеноза гортани паралитической этиологии методом экстраларингеальной латерофиксации голосовой складки. Представлен новый способ хирургического лечения двухстороннего нейрогенного стеноза гортани паралитической этиологии экстраларингеальным путем.
Ключевые слова: нейрогенный стеноз гортани, хронический стеноз гортани, срединный стеноз гортани.
Библиография: 13 источников.
The article gives the historical data of the formation and the development of surgical treatment of bilateral neurogenic laryngeal stenosis of paralytic etiology by extralaryngeal laterofixation
