Научная статья на тему 'Особенности воспалительного ответа у детей с различными формами микроспории'

Особенности воспалительного ответа у детей с различными формами микроспории Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
162
47
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
МИКРОСПОРИЯ / ФАГОЦИТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ / БИОЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ / ЦИТОКИНЫ / DERMATOPHYTOSIS / PHAGOCYTIC ACTIVITY / BIOCIDE ACTIVITY / CYTOKINES

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Козырева Л. А., Ефремов А. В., Самсонова Е. Н.

В настоящем исследовании было проведено определение фагоцитарной активности, биоцидного потенциала нейтрофилов, содержание интерлейкина-1β, фактора некроза опухоли-α, интерлейкина-4 у 60 детей с различными формами микроспории. При единичных поражениях кожи и волосистой части головы. Наблюдалось повышение спонтанной и зимозан-индуцированной биоцидной активности нейтрофилов. При множественных и сочетанных формах микроспории отмечалось снижение биоцидного потенциала нейтрофилов. При всех формах микроспории установлено снижение фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови и их способности синтезировать некоторые цитокины.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Козырева Л. А., Ефремов А. В., Самсонова Е. Н.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Peculiarities of inflammatory response in children with different forms of dermatophytosis

We determined phagocytic activity, biocide potential of neutrophils, IL-1β, TNF-α, IL-4 in 60 children with different forms of dermatophytosis. Increase of spontaneous and zymosan-induced biocide activity in neurtrophils was seen in the cases of single lesions on skin or scalp. Decrease of biocide potential was found out in combined or multiple forms of the disease. In all dermatophytosis forms the phagocytic activity of peripheral blood and neurtrophils' ability to synthesize some of the cytokines were reduced.

Текст научной работы на тему «Особенности воспалительного ответа у детей с различными формами микроспории»

© КОЗЫРЕВА Л. А., ЕФРЕМОВ А.В., САМСОНОВА Е.Н.

УДК. 616-002:36-002.828

ОСОБЕННОСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОТВЕТА У ДЕТЕЙ С РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ МИКРОСПОРИИ

Л. А. Козырева, А.В. Ефремов, Е.Н. Самсонова

Новосибирский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н.,

проф. И.О. Маринкин; кафедра патологической физиологии и клинической патофизиологии, зав. - чл.-корр. РАМН А.В. Ефремов.

Резюме. В настоящем исследовании было проведено определение фагоцитарной активности, биоцидного потенциала нейтрофилов, содержание интерлейкина-1в, фактора некроза опухоли-а, интерлейкина-4 у 60 детей с различными формами микроспории. При единичных поражениях кожи и волосистой части головы. Наблюдалось повышение спонтанной и зимозан-индуцированной биоцидной активности нейтрофилов. При множественных и сочетанных формах микроспории отмечалось снижение биоцидного потенциала нейтрофилов. При всех формах микроспории установлено снижение фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови и их способности синтезировать некоторые цитокины.

Ключевые слова: микроспория, фагоцитарная активность, биоцидная

активность, цитокины.

Козырева Людмила Александровна - аспирант каф. патологической физиологии и клинической патофизиологии НГМУ; е-таП: milena_kz@bk.ru.

Ефремов Анатолий Васильевич - член-корр. РАМН, зав. каф. патологической физиологии и клинической патофизиологии НГМУ; е-таП: АУБ 48@yandex.ru.

Самсонова Елена Николаевна - д.м.н., проф. каф. патологической физиологии и клинической патофизиологии НГМУ; е-mail: Elena-samsonova@mail.ru.

В природе существует около 500 видов грибов, которые представляют потенциальную опасность для здоровья человека, поскольку могут паразитировать в человеческом организме, вызывая локальные и даже системные грибковые заболевания. Неоспоримыми лидерами по частоте встречаемости и глобальности распространения среди прочих инфекционных заболеваний кожи являются грибковые заболевания. Не случайно их называют «всенародной заразой», «возмездием цивилизации». По данным различных авторов, последние 20 лет в мире наблюдается увеличение числа заболевших грибковами заболеваниями - микозами [1, 7, 17].

Внедрению грибковой инфекции в ногтевые пластинки и кожу способствуют разнообразные хронические заболевания, создающие «предиспозицию» к внедрению грибов извне за счет снижения активности метаболических процессов, иммунных реакций и интенсивности кровотока [2, 10, 14, 16].

В патогенезе грибковых заболеваний важную роль играют все звенья иммунной системы. Достоверно установлено, что у больных микозами в процессе инфекции и после выздоровления наблюдаются изменения клеточного и гуморального иммунитета, что связано со сложностью антигенного состава гриба и его изменчивостью, зависящей от условий существования и стадии микоза. Одним из первых в защите организма от инфекции проявляются фагоцитарные реакции, отвечая практически сразу на внедрение инфекционного агента. При этом фагоцитарные клетки не только препятствуют распространению чужеродных агентов в тканях человека, но и уничтожают их, параллельно стимулируя деятельность Т- и В-звеньев иммунитета [5, 8, 15]. На сегодняшний день патогенез заболеваний грибковой этиологии остается не до конца изученным, что и послужило предпосылкой для проведения данного исследовангия.

Материалы и методы

Обследовано 60 детей в возрасте от 5 до 12 лет с различными формами микроспории. У всех родителей обследованных детей было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования. Все пациенты были разделены на 5 групп (по 12 человек в группе) в зависимости от степени тяжести и распространенности патологического процесса: 1 группа -поражение волосистой части головы (единичные элементы), 2 группа -поражение волосистой части головы (множественные элементы), 3 группа -поражение гладкой кожи (единичные элементы), 4 группа - поражение гладкой кожи (множественные элементы), 5 группа - сочетанные формы.

Для оценки способности нейтрофилов нарабатывать активные формы кислорода (потенциальной биоцидной активности фагоцитирующих клеток) использовали метод люминол-зависимой хемилюминесценции [4]. Измерения интенсивности хемилюминесценции (ХА) проводились на

биохемилюминометре «СКИФ-0301» (Россия). В качестве люминофора был использован очищенный препарат люминола («Serva», США). С целью оценки реактивности фагоцитирующих клеток в системе ХЛ-исследования использовали дополнительный стимул дрожжевой полисахарид - зимозан (Zymosan A, «Serva», США). Реактивность нейтрофилов оценивали по индексу стимуляции (ИС), который отражает соотношение спонтанного и индуцированного ХЛ-ответа. Единица измерения - усл.ед. Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови использовали фагоцитарный индекс Гамбургера (процентное число фагоцитов, поглотивших частицы латекса) и фагоцитарное число Райта (среднее число частиц латекса, поглощенных одним фагоцитом). Определение содержания цитокинов IL-1 в, IL-4 и TNF-a в сыворотке крови выполнялось иммуноферментным методом с использованием реагентов ProCon («Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия). Все измерения проводили с помощью автоматического вертикального

фотометра «Uniplan» фирмы Pikonn, Россия. Количественное содержание IL-1b, TNF-a, IL-4 в сыворотке крови выражали в пкг/мл.

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли пакетом прикладных программ Exel 7,0 с использованием средней арифметической, ошибки средней, критерия Стьюдента. Различия принимались за достоверные при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Снижение реактивности макроорганизма на фоне воздействия различных этиологических факторов, вызывающих воспаление, требует нового осмысления механизмов развития патологического процесса и подходов к тактике лечения. Ключевыми клеточными элементами, детерминирующими реактивность организма, являются нейтрофильные гранулоциты, которые относятся к числу наиболее реактивных клеток, отражающих любое отклонение в гомеостазе. Изменение активности нейтрофилов во многом зависит от состояния микроокружения, уровня медиаторов воспаления и острофазовых белков на уровне макроорганизма и непосредственно в очаге воспаления. В последние годы свободно-радикальное окисление (СРО) привлекает к себе все более возрастающий интерес исследователей и клиницистов. Нарушения СРО, в первую очередь его активация, являются ключевым событием в развитии целого ряда патологий. Развитие «оксидативного стресса» в результате реализации фагоцитарной функции полиморфно-ядерных лейкоцитов через продукцию активных кислородных метаболитов (90% микробиоцидности) в патогенезе развития воспалительного процесса занимает ключевую роль [3, 13]. В связи с этим, изучение окислительно-метаболической функции клеток-эффекторов воспаления играет центральную роль в понимании сути воспалительного процесса, в прогнозировании характера его течения, способствует разработке оптимальной тактики лечебных программ [6, 9].

В табл. 1 приведены результаты исследования спонтанной и индуцированной хемилюминесценции нейтрофилов периферической крови, оцениваемой по I sum у детей с различными формами микроспории. Спонтанная

хемилюминесценция в контрольной группе составила 0,57±0,041 усл. ед. В 1-й группе данный показатель был выше контрольных значений на 70% и составил

0,97±0,072 усл. ед. У пациентов 2-й группы спонтанная XЛ достоверно снижалась на 26% по отношению к контролю. В 3-й группе спонтанная XЛ составила 0,86±0,072 усл. ед, что на 50% выше контрольных значений. В 4-й группе спонтанная XЛ оказалась ниже от нормы на 40%. В 5-й группе была зарегистрированная самая низкая спонтанная XЛ - 0,19±0,014 усл. ед. Таким образом, самые высокие показатели были зафиксированы в 1-й и 3-й группе, самые низкие - во 2-й, 4-й и 5-й группах.

Индуцированная XЛ, оцененная по уровню I sum в контрольной группе составила 1,79±0,16 усл. ед. В 1-й группе данный показатель был на 200% выше конрольных значений и составил 5,41±0,37 усл. ед. Во 2-й группе данный показатель снизился до 0,99±0,079 усл. ед. В 3-й группе индуцированная XЛ была на 75% выше контрольных значений. В 4-й группе индуцированная XЛ равнялась 0,67±0,052 усл. ед. В 5-й группе была зафиксированная самая низкая индуцированная XЛ - 0,24±0,021 усл. ед. Таким образом, высокие показатели индуцированной XС были в 1-й и 3-й группах, а низкие во 2-й, 4-й и 5-й группах.

Индекс стимуляции нейтрофилов крови в контрольной группе был равен 3,14±0,29 усл. ед. В 1-й группе данный показатель повысился на 77% и составил 5,57±0,47 усл. ед. Во 2-й группе индекс стимуляции зафиксировался на уровне 2,35±0,21 усл. ед. В 3-й группе данный показатель был зарегистрирован на уровне 3,65±0,32 усл. ед. В 4-й группе исследуемый индекс стимуляции оказался сниженным относительно величины контроля. В 5-й группе индекс стимуляции нейтрофилов был самым низким и составил 1,26±0,11 усл. ед. Таким образом, индекс стимуляции нейтрофилов периферической крови был достоверно выше 1-й и 3-й группах, а во 2-й, 4-й и 5-й группах ниже по сравнению со значениями контрольной группы.

Показатель фагоцитарного индекса (табл. 2) у пациентов контрольной группы составил 39,61±2,47 усл. ед. У пациентов 1-й группы данный показатель

на 21% ниже контрольных значений. У пациентов 2-й группы исследуемый показатель составил 22,01±1,97 усл. ед., что ниже на 40% от аналогичных значений в контрольной группе. У пациентов 3-й группы фагоцитарный индекс снизился на 33% по сравнению с контролем. В 4-й группе фагоцитарный индекс был на 43% ниже контрольных значений. В 5-й группе был зарегистрирован самый низкий фагоцитарный индекс 19,33±1,84 усл. ед.

Содержание TNF-a в сыворотке крови (табл. 3) у пациентов контрольной группы составило 36,9±3,42 пкг/мл. У пациентов всех наблюдаемых групп отмечалось снижение содержания TNF-a в сыворотке крови. Минимальные значения были зафиксированы у пациентов с множественными очагами поражения гладкой кожи и при сочетанных поражениях гладкой кожи и волосистой части головы - 24,19±2,21 пкг/мл и 19,36±1,17 пкг/мл

соответственно. В 1-й группе исследуемый показатель снизился на 16% по сравнению с аналогичным показателем в контрольной группе. Во 2-й группе пациентов содержание TNF-a в сыворотке крови статистически значимо оказалось ниже времени контроля. В 3-й группе пациентов исследуемый показатель достоверно снизился по сравнению с параметрами контрольной группы на 21%. Содержание интерлейкина-1в в сыворотке крови у пациентов контрольной группы равно 44,26±3,41 пкг/мл. У всех обследованных пациентов с микроспорией отмечалось снижение данного показателя, минимальные значения были зафиксированы у пациентов с множественными очагами поражения гладкой кожи и волосистой части головы, а также при сочетанных поражениях. У пациентов 1-й и 3-й групп (с единичными очагами поражения) снижение содержания IL-1 в сыворотке крови было менее значительным.

Содержание интерлейкина-4 в сыворотке крови у пациентов контрольной группе составило 28,12±1,97 пкг/мл. У всех обследованных пациентов с микроспорией наблюдалось снижение данного показателя, минимальные значения были зафиксированы у пациентов с множественными очагами поражения гладкой кожи и волосистой части головы, а также при сочетанных поражениях (17,54±1,85 пкг/мл и 14,44±1,38 пкг/мл соответственно). У

пациентов 1-й и 3-й групп (с единичными очагами поражения) снижение содержания IL-4 в сыворотке крови были менее значительными (табл. 3).

Таким образом, у пациентов с микроспорией отмечаются разнонаправленные изменения функциональной активности нейтрофилов периферической крови. Во всех группах пациентов наблюдается снижение фагоцитарной активности нейтрофилов. Самые низкие показатели были зафиксированы при множественных и сочетанных поражениях кожи и волосистой части головы. О снижении функциональной активности нейтрофилов свидетельствуют и уровни исследуемых нами цитокинов в сыворотке крови (фактора некроза опухоли-a, интерлейкина-1 в и интерлейкина-4).

Необходимо отметить, что при единичных поражениях кожи и волосистой части головы отмечалось повышение биоцидного потенциала нейтрофилов, а при множественных и сочетанных поражениях кожи и волосистой части головы биоцидный потенциал нейтрофилов снижался, это может свидетельствовать либо об его истощении, либо об исходно низкой функциональной активности нейтрофилов, что и способствовало генерализации инфекции.

A. V. Efremov, l.A. Kozyreva, E.N. Samsonova Novosibirsk State Medical University

Литература

1. Бучинский О.И., Сергеев А.Ю., Мокина Е.В. и др. Современная эпидемиология грибковой инфекции - результаты проекта «Горячая линия» // Тез. докл. симпоз. «Новое в эпидемиологии, терапии и профилактике грибковых заболеваний человека» в рамках Медико-фармацевтического форума - М., 2002. - С. 75-76.

2. Дьяков Ю. Т. Сергеев Ю.В. Новое в систематике и номенклатуре грибов. - М., 2003. - С. 164-192.

3. Зенков Н.К., В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова Окислительный стресс. - М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.

4. Зурочка А.В., Долгушин М.И. Метод регистрации перекисной

хемилюминесценции плазмы крови // Лабораторное дело. - 1985. - №10. -С.586-587.

5. Кубанова А.А., Потекаев Н.С., Потекаев Н.Н. Руководство по практической микологии. - М.: Финансовый издательский дом «Деловой экспресс». - 2001. - С. 71-85.

6. Маянский Д.Н. Цырендоржиев Д.Д., Макарова О.П.и др. Диагностическая ценность лейкоцитарных тестов. Ч.2. Определение биоцидности лейкоцитов / Д.Н.Маянский / Методические рекомендации. - Новосибирск, 1996. - 47с.

7. Мокина Е.В., Бучинский О.И., Сергеев А.Ю. и др. Первое массовое исследование эпидемиологии грибковых инфекций кожи и ногтей // Матер. конф., посвященной памяти А. Л. Машкиллейсона. - М., 2002. - С. 142-143.

8. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Кандидоз: природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, диагностика и лечение. - М.: Триада-X, 2000. - 472 с.

9. Сергеев А. Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции / Руководство для врачей. - М.: БИНОМ-Пресс, 2003. - 440 с.

10. Шкуpупий В.А., Филимонов П.Н., Куpунов Ю.Н. Эволюция ^анулем, индуц^ованных введением вакцины БЦЖ в экспеpименте // Пробл. туберкулёза. - 1998. - №6. - С. 63-65.

11. Beifuss B., Borelli C., Korting H.C. Mycological laboratory // Hautarzt. -2006. - Vol. 57, № 6. - P.487-488.

12. Dictar M.O. Maiolo E., Alexander B. et al. Mycoses in the transplanted patient // Med. Mycol. - 2000. - Vol. 38, № 1. - P. 251-258.

13. Halliwell B., Gutteridge J.M. Free radicals in biology and medicine. - Oxford, 1998. - P. 58-188.

14. Nardin M.E. Pelegri D.G., Manias V.G. et al Etiological agents of dermatomycoses isolated in a hospital of Santa Fe City, Argentina // Rev. Argent Microbiol. - 2006. - Vol. 38, № 1. - P.25-27.

15. Negroni R., Robles A.M., Arechavala A. Clinical problems in medical mycology: problem no.11. Generalized dermatophytosis with subcutaneous nodules // Rev. Iberoam. Micol. - 2004. - Vol. 21, № 3. - P.155-156.

16. Odom R. Pathophysiology of dermatophyte infections // J. Am. Acad. Dermatol. - 1993. - Vol. 28. - P.2.

17. Tortorano A.M., Peman J., Bernhardt H. et al. ECMM Working Group on Candidaemia. Epidemiology of candidaemia in Europe: results of 28-month European Confederation of Medical Mycology (ECMM) hospital-based surveillance study // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 2004. - Vol .23,№ 4. - P.317-322.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.