CC BY
18
Russian clinical laboratory diagnostics. 2016; 61(9)
doi 10.18821/0869-2084-2016-61-9
ная, костно-суставная и сердечно-сосудистая системы, реже - центральная нервная система). Последствия бактериемии проявляются в инфицировании мочевыводящих путей, могут возникать септические артриты, остеомиелиты, а также гнойные менингоэнцефалиты, при которых летальность достигает 80%. «Золотым стандартом» лабораторной диагностики сальмонеллезов считается бактериологическое исследование проб биоматериала с последовательным применением жидких селективных сред обогащения и дифференциально-диагностических плотных питательных сред с дальнейшей идентификацией выделенных штаммов по ферментативной и антигенной характеристике (МУ 4.2.2723-10). Определение чувствительности к антимикробным препаратам - заключительный этап клинической лабораторной диагностики. Иммунохроматографическая детекция возбудителя и амплификация нуклеиновых кислот относятся к наиболее оперативным методам прямой детекции сальмонелл в пробах биоматериала. Перечисленные методы широко применяют при диагностике ОКИ сальмонеллезной этиологии и, практически не используют при внекишечных формах сальмонелле-зов. Серодиагностика, основанная на выявлении антител в РПГА, используется в качестве вспомогательного теста.
В.Т. Климов', М.В. Чеснокова, Т.В. Каримова2. Оптимизация алгоритма лабораторной диагностики иерсиниозов. 'ФКУЗ «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора, Иркутск; 2ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области», Новосибирск
Для увеличения частоты и спектра выделения энтеропа-тогенных иерсиний (Yersinia pseudotuberculosis и Y. enteroco-litica) при проведении микробиологического мониторинга предложен алгоритм лабораторного исследования с учетом ПЦР и масс-спектрометрии. Все лабораторные исследования на иерсинии, проводимые по оптимизированной нами схеме, включали: 1) холодовое обогащение при +4 - +6oC в течение 2 дней; 2) мультиплексную ПЦР (электрофоретический вариант) на Y. enterocolitica с праймерами на ген адгезии/инвазии (ail- 16SrRNA) и на Y. pseudotuberculosis с праймерами на ген инвазивности (inv) и (или) использование метода real-time ПЦР с тест-системой «Y enterocolitica/pseudotuberculosis -FL» («Ампли-Сенс») с гибридизационно-флуоресцентной детекцией; 3) посев, в случае положительной ПЦР, на среду с бромтимоловым синим (БТС) с инкубацией 48 ч при 37oC; 4) визуальный отбор характерных колоний с детекцией на MALDI-TOF MS с последующим высевом положительных колоний на щелочной агар (28 oC 24 ч); 5) проведение общепринятых дифференциально-диагностических тестов и расширенной идентификации выделенных штаммов - ПЦР О-серогенотипирование Y. pseudotuberculosis; наличие генов, детерминирующих факторы патогенности энтеропатогенных иерсиний (inv, HPI,YAPI, pYV, ypm, ail, yst A, yst B); био- и серотипирование Y. enterocolitica; изучение плазмидного спектра штаммов; генотипирование (VNTR, PFGA, секвени-рование). При наличии положительной ПЦР и отрицательных бактериологических высевов, проводили второй (на 2-3 сутки). При двукратном отрицательном ПЦР анализе дальнейшее бактериологическое исследование прекращали.
Н.И. Ковалевич', Н.С. Саркисян', И.В. Санникова', О.В. Махиня2. Особенности цитокинового статуса у больных острым бруцеллезом до и после проведения антибактериальной терапии. 'ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт» Роспотребнадзора, Ставрополь; 2«Ставропольский государственный медицинский университет», Ставрополь
Бруцеллез является широко распространенным инфекционно-аллергическим заболеванием с длительной персистенцией возбудителя и стертой клинической картиной. Существующие методы диагностики и прогноз течения
заболевания имеют ряд недостатков, поэтому актуальной задачей является поиск надежных, малоинвазивных методов выявления биомаркеров крови. В качестве биомаркеров могут выступать цитокины, непосредственно участвующие в иммунопатогенезе бруцеллеза.
Целью исследования явилось определение уровня про-воспалительных цитокинов: ИЛ-12, ИЛ-8 и ИФН-у, белков острой фазы воспаления - неоптерина и липополисахарид-связывающего белка (ЛПС-белок) в сыворотке крови больных острым бруцеллезом до и после проведения антибактериальной терапии.
Объектом исследования послужил клинический материал от 32 пациентов с лабораторно подтвержденным диагнозом - «Острый бруцеллез», поступивших в отделение по диагностике, лечению и экспертизе профпатологии бруцеллеза ГБУЗ СК «Городская клиническая больница № 2» г Ставрополя. Диагноз бруцеллез устанавливался на основании данных эпидемиологических, клинических и лабораторных исследований. Группу сравнения составили здоровые люди (п = 20). Методом твердофазного иммуноферментного анализа было проведено определение уровня ИЛ-12, ИЛ-8, ИФН-у, неоптерина и ЛПС-белка в сыворотке крови. Для статистического анализа использовали Т-критерий Уилкоксона (до и после лечения) и /-критерий Стьюдента. Определение изучаемых показателей проводили до и после проведения курса антибиотикотерапии. Терапия проводилась в течение 6 недель, в схеме доксициклин и рифампициин.
В ходе проведенного анализа у больных острым бруцеллезом до приема антибиотикотерапии уровень ИЛ-12 составил 25,66±0,72 пг/мл, что ниже (р < 0,05) показателя в группе здоровых людей (31,75±0,72 пг/мл). После лечения уровень ИЛ-12 не изменился. Уровень ИЛ-8 до лечения значительно (р < 0,05) превысил показатель в контрольной группе (4,33±0,8 пг/мл) и составил 8,66±0,59 пг/мл. После лечения антибиотиками уровень ИЛ-8 оставался высоким (8,76±0,96 пг/мл). Концентрация ИФН-у в сыворотке крови больных до проведения терапии значительно превышала показатели в контрольной группе (3,35±0,6 пг/мл), составляя 18,22±5,03 пг/мл (р < 0,05). После завершения курса антибактериальной терапии значения были в пределах референсных (7,19±3,03 пг/мл; р > 0,05).
У больных острым бруцеллезом до лечения антибиотиками уровень ЛПС - белка составил 52,2±0,77 пг/мл, а после курса антибиотикотерапии - 50,79±0,78 пг/мл, (р < 0,05). Уровень неоптерина в сыворотке крови больных бруцеллезом до начала специфической терапии составил 21,01±3,6 нмоль/л, после лечения снизился до 13,69±3,39 нмоль/л (р < 0,05). В результате проведенных исследований наиболее информативные показатели цитокинового статуса: неоптерин, ЛПС-белок, ИФН-у.
Таким образом, комплексная оценка цитокинового статуса (ИЛ-8, ИЛ-12, ИЛ-18) и белков острой фазы воспаления (неоптерина и ЛПС-белка) при течении бруцеллеза позволит получить ценную информацию для возможности прогноза течения инфекции, мониторинга эффективности терапии.
С.С. Козлов Методы лабораторной диагностики кишечных паразитозов. Плюсы и минусы. ФГБВОУ ВПО «Военно-медицинская академии им. С.М. Кирова» МО РФ, Санкт-Петербург
Наиболее высокий регистрируемый уровень заболеваемости кишечными паразитозами в России приходится на энтеробиоз, лямблиоз и аскаридоз. Спектр используемых диагностических методов и приемов в последние годы существенно расширился и включает макро- и микроскопические методы, серологические и молекулярно-биологические, а также метод культивирования и биопроб. Последние два используются крайне редко и, в основном, в научных целях.
