CC BY
68
3. Методические указания к постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию ПДК избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны. - № 2196-80. - М., 1980.
4. Методические указания к постановке исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздушной среде (рабочая зона и атмосфера). - М., 1991.
5. Методы экспериментального исследования по становлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию с целью гигиенического нормирования (Методические указания). - № 1744-77. - М., 1978.
6. Пинигин М.А. Биологическая эквивалентность в решении методических задач гигиенического регламентирования атмосферных загрязнений: Автореф. дис. д-ра наук. - М., 1977.
7. Сидоренко Г.И., Андреещева Н.Т. //Материалы научных исследований по гигиене атмосферного воздуха, гигиене воды и санитарной охраны водоемов. - М., 1972. - Ч. 1. - С. 100-106.
УДК 616.697-092-07
© М.М. Кутлуев, Р.Р. Фархутдинов, Д.С. Громенко, 2009
М.М. Кутлуев, Р.Р. Фархутдинов, Д.С. Громенко ОСОБЕННОСТИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ В ПАТОГЕНЕЗЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ПРОСТАТИТА
Центральная научно-исследовательская лаборатория ГОУ ВПО Башкирского государственного медицинского университета
Авторами изучены процессы свободнорадикального окисления в ткани простаты крыс, в экспериментально вызванном простатите. Подтверждено что данные процессы играют большую роль в течении воспаления. Применение антиоксидантов патогенетически обоснованно.
Ключевые слова: свободнорадикального окисления, экспериментальный простатит, патогенез, антиокислительная активность.
M.M. Kutluev, R.R. Farhutdinov, D.S. Gromenko SPECIAL FEATURES OF FREE RADICAL OXIDATION IN THE PATHOGENESIS OF EXPERIMENTAL PROSTATITIS
The processes of free radical oxidation in the tissue of prostate with the simulation of experimental prostatitis are studied by the authors and it is confirmed that the given processes play large role in the course of the disease. The application of the antioxidants it is pathogenetically substantiated.
Key words: free radical oxidation, experimental prostatitis, pathogenesis, antioxidizing activity.
По данным зарубежных авторов частота хронического простатита в общей популяции населения составляет от 5-8% [8]. Лечение и диагностика хронического простатита во многих случаях представляет трудную задачу [1,4]. При лечении затянувшихся простатитов неудачи встречаются тем чаще, чем больше времени прошло от момента заболевания. В настоящее время еще нет единого подхода к лечению простатита [5].
Одним из патогенетических механизмов, приводящих к развитию воспалительного процесса в простате, по-видимому, является нарушение процессов свободнорадикального окисления (СРО): образование активных форм кислорода (АФК) и перекисного окисления липидов (ПОЛ).
При простатите избыточная продукция свободнорадикальных форм кислорода фагоцитами и активация ПОЛ, снижает антибакте-
риальный потенциал, и нарушают микрогемодинамику в предстательной железе [6]. Существуют ряд биоантиоксидантов, которые могут реагировать с радикалами кислорода, в частности - альфа-токоферол, который так же способен взаимодействовать и с перекисными радикалами липидов.
Целью настоящей работы было изучение процессов свободного радикального окисления в ткани предстательной железы лабораторных животных при экспериментальном простатите, и оценка эффективности различных способов лечения Материал и методы Основу работы составили 45 экспериментальных исследований in vivo на белых беспородных крысах-самцах репродуктивного возраста массой 300-350 г. Животные содержались в одинаковых условиях на стандартной диете вивария.
Простатит моделировался путем эндо-уретрального введения раствора капсаицина с помощью одноразового шприца снабженного специальной канюлей. Исходя из анатомического строения мочеполовой системы крысы -самца канюля вводилась до мочевого пузыря, что отмечалось выделением мочи, выводилась на 0,5 см, затем по катетеру вливался 0,1 мл -20% спиртового раствора капсаицина.
Первую группу животных составили 15 самцов с экспериментально вызванным простатитом не получавших никакого лечения.
Вторую группу животных составили 15 самцов, которым на фоне моделирования заболевания, аналогично с первой группой, через две недели вводили антибактериальный препарат «Ципрофлоксацин» per os в дозе 62,5 мг ежедневно в течение 12 дней.
Третью группу животных составили так же 15 самцов, которым моделировалось заболевание аналогично первой и второй группам и на фоне применения антибактериального препарата использовали альфа-токоферол (Витамин Е) per os в дозе 30 мг. на кг. массы тела.
С целью изучения интенсивности свободнорадикальных процессов и антиокисли-тельной активности проводился хемилюми-несцентный анализ гомогенатов простаты крыс. Исследовали люминол-зависимую хе-милюминесценцию (ЛЗХЛ) и Fe2-индуцированную хемилюминесценцию (ХЛ) в гомогенатах предстательной железы на аппарате «Хемилюминомер-003», с компьютерным обеспечением [7].
Статистическая обработка полученных результатов проводилась на персональном компьютере с применением программного обеспечения Microsoft Excel (Microsoft corp., 2003), Statistica Inc Ver. 7(Stat Soft, STATISTICA for Windows). В качестве описательных статистик использованы средняя (М) и ошибка средней (m). Группы сравнивались при помощи t-критерия Стьюдента для независимых переменных после выполнения следующих условий: нормальность распределения (тест Лильефорса) и равенства дисперсий обеих выборок.
Результаты
Выявлено изменение поведенческих реакций крыс, в первые 3-е суток уменьшилось количество потребляемой пищи. В первой группе у 7 (46,6%) животных появились фурункулы на теле, что может свидетельствовать о септицемии. После вскрытия было обнаружено образование конкремента в мочевом пузыре у 3 (20%), стриктура задней урет-
ры у 9 (60 %) испытуемых животных первой группы. При гистологическом исследовании ткани предстательной железы I группы животных выявлен выраженный лейкоцитарный инфильтрат, представленный нейтрофильны-ми гранулоцитами, отек тканей, тромбоз отдельных сосудов, что свидетельствует о выраженном воспалении. У животных второй группы определялся умеренный отек, неравномерно выраженный лейкоцитарный инфильтрат стромы. В третьей группе обнаруживался умеренно выраженный стромальный отек, незначительная лейкоцитарная инфильтрация стромы.
Оценка люминолзависимой хемилюми-несценции (ЛЗХЛ) гомогенатов простаты лабораторных животных выявила разницу между исследуемыми группами, данные были занесены в таблицу 1.
Таблица 1
Уровень ЛЗХЛ гомогената простаты разных групп экспериментальных животных
Статистически достоверные различия по уровню светосуммы по сравнению со здоровой группой говорит об увеличении образования АФК в простате животных, при воспалении. В то же время достоверны различия между первой и второй, и третьей группами указывающие на снижение образования АФК по мере применения лечения, и особенно при применении антиоксидантной терапии.
При исследовании Ее2+-индуцированной хемилюминесценции основным параметром исчисления являлась светосумма. Проводилась сравнение изменений антиокислительной активности гомогенатов разных групп крыс по сравнению с антиокислительной активностью гомогената здоровой крысы (табл. 2).
Таблица 2
Сравнение изменений антиокислительной активности гомогената простаты крыс различных групп по сравнению с здоровой в модельной системе, генерирующей АФК.
здоровые I группа II группа III группа
Sm (отн. ед) 2,89 2,84* 2,57* 2,77*
St (отн. ед) 2,63 4,38* 2,49* 2,26*
Sm/Sr 1,09 0,64* 1,03* 1,22*
Изменение Снижение Снижение Повышение
AOA, % 0 на 41 на 6,1 на 11,5
Примечание: 8ш - светосумма модельной системы, генерирующей АФК; 8г - светосумма модельной системы + полученного гомогената; АОА - антиокислительная активность.
Группы Здоровые I группа (n=15) II группа (n=15) III группа (n=15)
Показатели
Светосумма, отн. ед. 0,25+0,03 0,92+0,13* 0,67+0,1* 0,47+0,07*
Спонтанная светимость, отн. ед. 0,18+0,09 0,35+0,09* 0,26+0,09* 0,2+0,07*
Максимальная светимость, отн. ед. 0,28+0,02 0,36+0,01* 0,34+0,08* 0,3+0,01*
Здесь и далее: * - различия статистически значимые со здоровыми животными, при р<0,05.
Из табл.2 видно, что происходило снижение антиокислительной активности в разной степени в первой и второй группе, а в третьей группе наоборот повышение анти-окислительной активности гомогената.
Данные факты указывают на то, что в группе, в которой не использовались лекарственные препараты антиоксидантные свойства гомогената были резко угнетены, при применении антибактериальной терапии так же наблюдалось угнетение, но в меньшей степени. В группе крыс получавших наряду с антибио-тикотерапией витамин Е, гомогенат обладал более выраженной антиоксидантной активностью по сравнению с тканью здоровой крысы.
Обсуждение
У больных хроническим простатитом установлено двукратное снижение показателей АОА, при этом АОА плазмы крови незначительно изменялась по сравнению с таковой у здоровых. Это свидетельствует о локальном, а не о системном всплеске свободнорадикальных реакций при хроническом простатите [2].
Внутрипузырное введение капсаицина
вызывает вторичный простатит, что может применяться в моделировании и изучении данного состояния. Использование наряду с традиционной антибактериальной терапией Витамина Е, приводит к торможению процессов свободнорадикальных реакций, к более быстрому восстановлению ткани простаты [3].
Заключение
Предлагаемая модель экспериментального простатита у крыс позволяет оценить процессы свободно радикального окисления в ткани предстательной железы, изучить состояние данных процессов при различных методах лечения простатита.
После проведенного исследования установлена зависимость выраженности патологического процесса и состояние СРО в ткани предстательной железы. Для восстановления антиокислительной активности ткани необходимо использовать наряду с этиологической терапией, направленной на устранение бактериального фактора, применение патогенетической терапии в виде антиоксидантов.
Сведения об авторах статьи Кутлуев Марат Мусаевич - врач-уролог МУ Поликлиники №48, г. Уфы;
Адрес: 450104, г.Уфа, ул.Уфимское шоссе, 18/3 - 113; раб.тел. (347) 252-01-55; e-mail - Marrat@rambler.ru, Фархутдинов Рафагат Равилевич - д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник Центральная научноисследовательская лаборатория БГМУ;
Адрес: 450000,г. Уфа, ул. Степана Кувыкина, дом 37 - 66; раб. тел (347) 272-41-73; e-mail - farkhutdinov@mail.ru, Громенко Дмитрий Сергеевич - д.м.н., врач-уролог отд. урологии РКБ им. Г.Г. Куватова;
450073, г.Уфа, ул.Гагарина, 10/2 - 99; раб.тел. (347) 228-99-51; e-mail - gdsjjg@mail.ru
ЛИТЕРАТУРА
1. Аполихин О.И., Сивков А.В., Ощепков В.Н. и др. // Х Российский съезд урологов: Материалы.- М., 2002. - С. 233-234.
2. Бордичевский Б.А., Леонтьев И.Г., Журавлева Т.Д., Киянюк Н.С.//Науч. вест. Тюмен. мед. акад. - 2001. - №2. - С. 12.-15.
3. Громенко Д.С. Особенности патогенеза идиопатической патозооспермии при мужской ин-фертильности: Дис. ... докт. мед. наук. - Уфа, 2007.
4. Лоран О.Б., Велиев Е.И., Живов А.В.// Урология. - 2009. - №1.- с. 70-75.
5. Сивков А.В., Ощепков В.Н., Егоров А.А.// Пленум правления Российского общества урологов: Материалы. - М., 2004. - С. 216-230.
6. Тарасов Н.И., Серегин С.П., Рыбаков Ю.И. Хронический простатит. Патогенез, новые пути повышения эффективности лечения. - Снежинск: РФЯЦ-ВНИИТФ. - 1999.
7. Фархутдинов Р.Р., Тевдорадзе С.И.//Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: Сборник докладов научно - практ. семинара.- М., 2005. - С. 147 - 154.
8. National Kidney and Urologic Diseas Advirosy Board. Longrange plan window on the 21-st century. Bethesda: US Department of Health and Human Services; 1990
