CC BY
39
À
2. Антигенная активность концентрированных вакцин из АВ и и ВД
Вакцина Титр антител к АВ Титр антител к ВД
РН РНГА РДП РН РНГА РДП
1-я ассоциированная культуральная вакцина по 2,0 мл 9,82 ± 10,25 ± 4,50 ± 0,69 0,50 0,58 9,13 ± 9,75 ± 5,50 ± 0,85 0,96 1,29
2-я ассоциированная концентрированная вакцина по 0,2 мл 8,68 ± 10,00 ± 3,75 ± 0,24 0,00 0,50 8,51 ± 9,75 ± 4,25 ± 1,34 0,98 0,5
3-я ассоциированная концентрированная вакцина по 0,4 мл 9,03 ± 10,25 ± 4,25 ± 0,17 0,50 0,50 8,22 ± 9,5 ± 4,75 ± 0,74 0,58 0,98
4-я плацебо по 1,0 мл <1,0 <1,0 <1,0 <1,0 <1,0 <1,0
тых моно- и ассоциированными вакцинами, достоверно не отличалось и не зависело от дозы введения. Однако у крыс опытных групп выявили увеличение содержания Т-лимфоцитов на 15 % п В-лимфоцитов на 2,5 % по сравнению с контролем.
Опытные образцы ассоциированных вакцин испытали на 20 серонегативных телятах 1...1,5-месячного возраста. Животных иммунизировали культуральной вакциной в дозе 10,0 мл и концентрированными в дозах 3,0; 2,0 и 1,0 мл. Результаты опыта показали, что динамика нейтрализующих антител не зависела от дозы введения и достоверно не отличалась от контроля. Через 15 дней после ревакцинации титр антител имел значения > 9,0 log., и удерживался на достаточно высоком уровне более 8 мес (срок наблюдения). Титр антител в РН коррелирован с результатами в РНГА и РДП.
Исследуемая ассоциированная вакцина сохраняла свою антигенную активность в течение двух лет (срок наблюдения) при температуре 4 "С.
При изучении влияния иммуномодуляторов фоспренн-ла п гликопина на гуморальные н клеточные факторы поствакцинального иммунитета установили, что при однократном введении с ассоциированной вакциной фоспрени-ла и гликогшна (в дозах 0,2 мкг/кг и 0,12 мкг/кг соответ-
ственно) относительное количество Т- и В-лимфоцитов увеличивалось на 7,0 и 3,0 %, а титр нейтрализующих антител повышался на 2,0 10^.
Заключение
В результате исследований разработана ассоциированная ипактивированная концентрированная вакцина против инфекций АВ и ВД. В опытах на лабораторных животных и телятах препарат оказался безвредным и обладал выраженной антигенной активностью, которая сохранялась 14 мес (срок наблюдения). Сочетанное применение ассоциированной инактивированной вакцины с иммуномодуляторами обеспечивало повышение ее антигенной активности.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Бепоусова Р.В. Профилактика аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Информ. листок. Моск. обл. террит. центр науч.-тех. информации и пропаганды, 1988; №413—88.
2. Белоусова Р.В. Инактивированная вакцина против аденовирусной инфекции крупного рогатого скота // Вестник с.-х. науки, 1989; 8: 91—95.
3. Вазир Я., Третьякова И.В., Ярыгина Е.И. и др. Антигенные свойства экспериментальной ассоциированной вакцины против аденовирусной инфекции и вирусной диареи крупного рогатого скота // Ветеринария, 2008; 4: 23—26.
4. Вазир Я., Третьякова И.В., Устинова Г.И. и др. Влияние иммуномодуляторов на антигенную активность моновалентных вакцин против аденовирусной инфекции и вирусной диареи КРС // Материалы 3-й конференции по учебно-методической, воспитательной и научно-практической работе ФГОУ ВПО МГАВМиБ. 2006.
5. Вазир Я., Белоусова Р.В., Устинова Г.И. и др. Испытание бивалентной вакцины против аденовирусной инфекции и вирусной диареи крупного рогатого скота на кроликах с использованием иммуномодуляторов // Ветеринарная патология, 2007; 3 (22): 199—202.
6. ДееваА.В., РаковаТ.Н., Лобова Т.П.. Белоусова Р.В. Эффективность применения фоспренила для повышения неспецифической резистентности организма и лечения острых вирусных инфекций у молодняка КРС // Ветеринарная патология, 2005; 1: 96—98.
7. Деева А.В.. Белоусова Р.В. Применение фоспренила. Механизм повышения продуктивности, профилактического и терапевтического действия // Ветеринария, 2004; 2: 9—13.
8. Куликова И.Л., Дьяконов Л.П., Жидков С.А. Культура клеток сосудов сердца теленка и чувствительность этой культуры к вирусу диареи крупного рогатого скота // Цитология. 1992; 34(9): 75.
9. Ожерелков C.B. Роль естественных иммуномодулирующих факторов в патогенезе экспериментальных вирусных инфекций: дис. докт. биол. наук. —М., 2003.
10. Петрова О.Т., Татарчук А.Т., Сапожникова Н.Л. Острые респираторные вирусные инфекции КРС в Свердловской области (ИЭВ Сибири и Дальнего Востока) // Ветеринария, 2002; 2.
SUMMARY
R.V. Belousova, V. Yaser, I.V. Tretyakova, M.S. Kalmykova, E.I. Yaryguina. Antigenic properties of associated inactivated vaccine against adenovirus infection and bovine viral diarrhea. Investigate a series of new experimental inactivated associated vaccine adenoviral infections and viral diarrhea in rats and calves. The results of serological studies have shown its high antigenic activity, which rises when its combined with immunomodulators.
удк 619 6153 Особенности накопления и
выведения йода при его поступлении в организм животных в виде неорганической
соли и в связанной с белком форме
Н.П. Лысенко JI.B. Рогожина 2
1 Заведующий кафедрой радиобиологии, доктор биологических наук, профессор.
2 Декан ветеринарно-биологического факультета, кандидат биологических наук, доцент.
Сокращения: Бк — беккерель, ЖКТ — желудочно-кишечный тракт
Введение
Йод — химический элемент, без которого организм не может нормально функционировать. Дефицит йода служит причиной многих заболеваний. Это обусловлено тем, что он входит в состав
тиреоидных гормонов, которые синтезируются в щитовидной железе. Гормональные нарушения, возникающие из-за дефицита йода, подчас не имеют ярко выраженных клинических признаков, и поэтому их трудно диагностировать [4].
Большой ущерб, который приносит йодная недостаточность, можно предотвратить, если в рацион животных включать подкормки, содержащие этот элемент. Назначение таких подкормок в молочном скотоводстве повышает надои на 10...20 %, а содержа-
ние жира в молоке — на 0,18...0,20 % при снижении затрат корма на 1 кг молока в среднем на 12 % [6]. Обычно в целях профилактики йодной недостаточности применяют хорошо растворимую соль йодид калия. Однако из-за высокой химической реактивности она способна быстро окисляться на свету и образовывать нерастворимые комплексы [2].
В настоящее время все шире используют новый способ устранения йодной недостаточности у человека и животных, разработанный отечественными специалистами. Он основан на применении органических соединений йода и обладает рядом преимуществ. Для широкого внедрения в животноводство необходимо его апробировать на лабораторных животных.
Цель исследования
Изучить динамику накопления в органах и тканях крыс, а также выведение из организма этих лабораторных животных различных форм радиоактивного йода.
Материалы и методы
Сформировали 9 групп беспородных белых крыс (по 5 самцов в каждой) массой 226...374 г. Животные получали полноценный рацион с уровнем йода 10 мг/кг корма и имели свободный доступ к воде. Перед постановкой эксперимента их выдерживали 14 дней в карантине в условиях вивария.
Органическую форму I125 получали посредством йодирования казеина изотопом I125 методом Гринвуда и Хантера (цит. но ЧардТ., 1981) в модификации H.I1. Лысенко (2002).
Животным одновременно вводили разные радиоактивные метки (неорганическую форму йода, меченную I131, и органическую, меченную I125) в желудок с помощью зонда. После эфирного наркоза крыс декапитировали через 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 24; 48 и 96 ч после введения метки. От каждого животного собирали пробы крови, а также внутренние органы (сердце, печень, селезенку, почки, щитовидную железу) и мышцы. Радиометрию проводили на гамма-счетчике «RIAGAMMA LKB» (Швеция), имеющем систему дискриминации счета, адаптированную для количественного анализа I125 в смеси с другими изотопами. Радиоактивность каждого образца пересчитывали на 1 г ткани и в целом на орган.
Результаты и обсуждение
Установили, что введенные изотопы йода быстро всасываются из ЖКТ в кровь и в последующем интенсивно накапливаются в органах и тканях крыс. Уже через 30 мин после введения радиоактивного йода в различных формах наибольшее количество радиоактивности в расчете на орган (Бк/ орган) отметили в мышцах, печени, почках и щитовидной железе (табл. 1...4; рис. 1...3).
Быстрое поступление изотопов йода в щитовидную железу объясняется их сродством к этому органу и интенсивным кровоснабжением последнего. Высокое содержание изотопов в других органах отчасти обусловлено относительно большой радиоактивностью крови (1187 Бк по I125 и 262 Бк
1. Радиоактивность сердца крыс при совместном введении изотопов йода
2. Радиоактивность печени при совместном введении в организм крыс I131 и !'25-казеина
Время, ч J131 J12S
М, Бк/орг м М, Бк/орг м
0,5 4,18 0,22 10,7 0,68
1 1,93 0,1 13,6 1,7
2 1,8 0,3 10,22 1,05
4 1,21 0,2 12,96 2,3
8 1,7 0,2 7,64 0,2
16 1,05 0,01 0,96 0,07
24 1,58 0,02 2,93 0,7
48 0,7 0,24 0,85 0,5
96 0,65 0,02 1,06 0,4
Время, ч J131 {125
М, Бк/орг м М. Бк/орг м
0,5 21,66 1,1 174,02 0,68
1 59 8,7 215,5 23,1
2 40,4 0,5 167,6 1,05
4 23,7 1 257,2 25,2
8 14,32 1,7 137,8 32
16 8,55 0,64 40,68 3,2
24 10,37 2,6 53 10
48 16,33 4 39,9 9,4
96 10,26 2,4 22,7 5
3. Радиоактивность мышц при совместном введении в организм крыс I131 и 1125-казеина
Время, ч J131 J125
М, Бк/орг м М. Бк/орг м
0,5 106,4 6,6 1005,7 19,6
1 111 14,5 1290 51,1
2 148 2,8 914 79
4 176 38 1081 132
8 137 8,4 651 13,7
16 51,3 1,42 63,3 2,1
24 136 20,1 395 47
48 54,7 9,6 168,3 28
96 96,7 30 305,8 0,2
4. Радиоактивность изотопов йода (I131 и 1125-казеина), накопленных щитовидной железой при их совместном введении
Время. [131 Г25
ч М ± м, % от введенной М ± м, % от введенной
Бк/орг активности Бк/орг активности
0,5 42,12±3,01 0,36±0,03 1,24±0,56 0,01 ±0,002
1 26,67±3,89 0,24±0,03 5,25±0,37 0,04±0,003
2 40,11 ±5, 72 0,35±0,05 9,91 ±1,23 0,08±0,01
4 49,76±5,62 0,44±0,05 6,21±0,68 0,05±0,005
8 487±78,32 4,31 ±0,69 60,28±9,36 0,49±0,08
16 276,85±23,1 2,45±0,3 12,4±1,16 0,1 ±0,01
24 325,69±23,1 2,88±0,46 25,86±1,96 0,23±0,01
48 227,86±22,9 2,02±0,2 24,7±1,71 0,24±0,01
96 91,55±15,22 0,81±0,13 10,47±1,39 0,12±0,01
Примечание. М — показатель, м — колебания (±).
по I131). Более высокое содержание изотопов в печени и почках по сравнению с другими органами объясняется тем, что они хорошо кровоснабжаются и через них осуществляется выведение изотопов йода.
При этом следует отметить, что изотоп I131, поступивший в организм в неорганической форме, накапливался в указанных органах и тканях в значительно меньшем количестве, чем изотоп I125, введенный в организм крыс в связанной с казеином форме. Так, в сердце в этот период его было меньше в 2,5 раза; в печени — в 8 раз; в селезенке и почках — в 9,4 раза; в мышцах и щитовидной железе — в 14 и 34 раза соответственно.
Достаточно высокая активность I125 сохранялась в органах и тканях в последующий 4-часовой период. В интервале с 4-го по 16-й ч его содержание резко снижалось в мышцах и всех органах: в сердце — в 13,5 раз; в печени — в 6,3 раза; в селезенке и мышцах — в 16,4 и 17 раз соответственно, в почках — в 27,1 раза. В последующие сроки (24,48 и 96 ч) содержание изотопа, введенного в организм крыс в органической форме, было не столь выраженным.
Активность изотопа, введенного в неорганической форме (I131) не претерпевала таких значительных изменений в ука-
1400
1200
*
Ш 1000
л
ho 800
о
T
ш bOO
к
m 400
о
ffl 200
Q.
0
0,5 1 2 4 8 16 24
Время, ч
Рис. 1. Радиоактивность крови крыс после введения смеси изотопов
Время, ч
Рис. 2. Удельная радиоактивность селезенки крыс после
Время, ч
Рис. 3. Удельная радиоактивность почек крыс после совместного введния смеси изотопов
занные сроки исследования. В сердце она составила через 4 ч 1,21 ± 0,2 Бк и оставалась практически на таком же уровне до 24 ч, а к 4-м суткам снижалась на 44 %.
В печени максимальное накопление I131 отметили через 1 и 2 ч после его введения. В более поздние сроки радиоактивность изотопа снижалась с недостоверными различиями в интервале от 8 до 96 ч (см. табл. 2).
В почках наибольшую радиоактивность I131 регистрировали до 2-часового срока исследования, через 4 ч она снижалась в 1,5 раза, а через 8 ч — в 2 раза, достигая к 4-м суткам 0,01 % введенной метки.
В мышцах в течение всего эксперимента отмечали наибольшую радиоактивность I131, особенно через 2 и 4 ч после его введения (см. табл. 3). Даже через 4 сут процент включенной метки в мышцах оставался самым высоким по сравнению с другими органами (0,78 % против 0,08 % в печени и 0,01 % в других органах).
В щитовидной железе динамика накопления изотопов йода была иной (см. табл. 4).
Максимальное накопление I125, введенного в составе ти-розиновых остатков молекулы белка, в щитовидной железе крысы отмечено через 8 ч (4,31±0, 69 %). Наиболее интенсивное ее накопление наблюдали в период с 4 ч (0,44±0,05 %) до 8 ч (4,31±0,69 %), при этом концентрация радиоактивного йода возросла в 9,8 раза. К 16 ч после введения содержание I125 в щитовидной железе постепенно снижалось. Наиболее значительный выход I125 из щитовидной железы отмечен в период 48...96 ч после введения метки (с 2,02±0,2 % до 0,81 ±0,13 %). При этом его концентрация уменьшалась в 2,5 раза. Достоверного понижения концентрации I123 в щитовидной железе с 16 ч по 48 ч не выявили.
Наибольшее накопление I131 (0,49±0,08 %) в щитовидной железе отметили по прошествии 8 ч с момента введения этого изотопа в желудок крыс. В этот период концентрация была в 8,8 раза выше. Наиболее интенсивное накопление I131 происходило в этом органе в период с 4 ч (0,05±0,005) до 8 ч (0,49 ± 0,08 %), при этом концентрация I131 возросла в 9,8 раза, как и в случае с I125.
По данным К.И. Бурова, В.С. Пристер и др. (1970), в какой бы форме йод ни поступал в ЖКТ, в кровь он всасывается как неорганический йодид. Однако проведенные нами исследования убедительно показали, что на протяжении всего периода наблюдения I131, введенный в форме неорганического йодида, накапливается щитовидной железой менее интенсивно, чем встроенный в тирозиновые остатки казеина I125. Возможно, это объясняется тем, что в процессе переноса отрицательно заряженного иона I131 участвует Ка/К-АТФ-аза и затрачивается энергия [1]. Перенос же аминокислот в клетки осуществляется посредством облегченной диффузии при участии молекул-переносчиков, растворимых в липидной фазе клеточных мембран [ В.Ф. Антонов и др., 1999].
Мы считаем, что именно эти факторы способствовали более интенсивному включению изотопов йода, введенных в составе тирозиновых остатков казеина.
Полученные результаты могут быть использованы для профилактики поражений щитовидной железы у человека и животных при свежих выпадениях радиоактивных осадков.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Балаболкин М.И. Эндокринология. — Универсум паблишинг.
2. Благосклонная Я.В. Заболевания щитовидной железы. — СПб.: Невский проспект, 2001.
3. Буров К.И., Пристер B.C. и др. Поведение I'3' в организме овец и поросят-сосунов при однократном введении. Распределение, кинетика и биологическое действие радиоактивных изотопов йода. — М.: Медицина, 1970.
4. Ксендзенко В.И., Стасиневич Д.С. Химия и технология брома, йода и их соединений. — М.: Химия, 1995.
5. Рогожина Л.В. Научно-практические вопросы профилактики поражений щитовидной железы животных при загрязнении окружающей среды радиоизотопами йода // Материалы международной учебно-методической и научно-практической конференции, посвященной 85-летию академии: Сб. науч. тр. —M.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 2004.
6. Туракулов Я.Х. Обмен йода и тиреоидные гормоны в норме и при патологии// Проблемы эндокринологии, 1986; 32 (5): 78—85.
7. Чард Т. Радиоиммунологические методы. — М: Мир, 2001.
А
SUMMARY
N.P. Lysenko, L.V. Rogozhina. Features of iodine accumulation and elimination in the animals body when taken in as inorganic salt or protein-associated forms. Work is executed on males of not purebred white rats in weight of 226...374 g. To Rats in a stomach entered an iodine-131 isotope (the inorganic form of iodine) and l-125-casein (the organic form of iodine). It has been received that jod-131 concentrates in bodies and fabrics in smaller quantities, than iodine-125. At the first 4 o'clock its heart was less in 2,5 times; in a liver — in 8 times; in a spleen and kidneys; in 9,4 times; in muscles and a thyroid gland; in 14 and 34 times accordingly. Dynamics of deducing of different forms of isotopes of iodine has appeared too various.
