CC BY
12УДК: 636.32/38:612.33:619:579
Каничева И. В.
Соискатель ученой степени кандидата наук, ФГБОУ ВО Брянский ГАУ
Усачев К. И.
Соискатель ученой степени кандидата наук, ФГБОУ ВО Брянский ГАУ
Усачев И. И.
Д. вет. наук, доцент, ФГБОУ ВО Брянский ГАУ
Поляков В. Ф.
Д. биол. наук, профессор, ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. ЯР. Коваленко
ОСОБЕННОСТИ МИКРОБИОЦЕНОЗА ХИМУСА ПОДВЗДОШНОЙ И СЛЕПОЙ КИШОК ЯГНЯТ РАННЕГО ВОЗРАСТА
В статье представлены результаты исследований, отражающие закономерности и особенности формирования микробиоценоза химуса подвздошной и слепой кишок ягнят от рождения до двух месячного их возраста, то есть в период раннего постнатального развития.
Установлено, что у ягнят от рождения до двухмесячного их возраста в химусе подвздошной и слепой кишок формирование микробиоценоза индивидуально. Не все изучаемые нами представители кишечной микрофлоры имеют одинаковый период стабилизации.
Ключевые слова: микробиоценоз, химус, ягнята, подвздошная кишка, слепая кишка, бифидобактерии, лактобактерии, кишечная палочка, аэробные спорообразующие бациллы, энтерококки и кандиды.
Agris subject categories: L72, L73
Kanicheva, I.V.
competitor of a scientific degree of candidate of sciences, FSBEI HE "Bryansk State Agrarian University", Bryansk
Usachev, K.I.
competitor of a scientific degree of candidate of sciences, FSBEI HE "Bryansk State Agrarian University", Bryansk
Usachev, I.I. Doctor of Veterinary Sciences, docent, FSBEI HE "Bryansk State Agrarian University", Bryansk
Polyakov, V.F.
Doctor of Biological Sciences, Professor, SRI All-Russian Research Institute of Experimental Veterinary Medicine of Y.R.
Kovalenko, Moscow
FEATURES THE CHYME MICROBIOCENOSIS OF ILEUM AND CECUM
OF EARLY AGE LAMBS
The article presents the results of studies showing patterns and peculiarities of chyme microbiocenosis of ileum and cecum of lambs from birth to two months of age, that is, in the early postnatal period.
It was established that the lambs from birth to two months of age chyme in the ileum and cecum formation microbiocenosis individually. Not all of studied representatives of the intestinal microflora have the same period of stabilization.
Key words: Microbiocenosis, chyme, lambs, ileum, cecum, Bifidobacteria, Lactobacteria, Escherichia coli, aerobic spore-forming bacillus, enterococci and Candida.
Введение. Известно, что при коррекции дисбиотических изменений в различных анатомических структурах кишечника животных, необходимо учитывать характер и особенности микроэкологии каждой кишки [1, 6]. Различные биоптаты (химус и слизистая оболочка) каждой кишки входящей в состав тонкого и толстого отделов кишечника отличается содержанием и динамикой различных популяций индигенной микрофлоры [3, 5]. Подвздошная и слепая кишка относятся к различным отделам кишечника и анатомически, расположены рядом. В этой связи научный и практический интерес представляет изучение особенностей микробиоценоза в этих анатомических структурах кишечника животных, в том числе овец [2, 4].
Цель работы изучить закономерности накопления бифидобактерий, лактобактерий, кишечной палочки, энтерококков, аэробных спорообразующих бацилл и кандид в химусе подвздошной и слепой кишок ягнят в период их раннего постнатального развития, а именно от рождения до двух месячного возраста.
Материалы и методы исследования. Овцы романовской породы от 3 до 5 лет и ягнята от рождения до 60 суточного возраста, которые содержались в экспериментальных условиях вивария кафедры терапии, хирургии, ветеринарного акушерства и фармакологии ФГБОУ ВО «Брянского ГАУ». Всего в опыте задействовано 13 взрослых животных и 25 ягнят указанного возраста. Овец содержали индивидуально, под тремя матками находилось по одному ягненку, у двух маток было по три ягненка и под восьмью матками содержалось по два ягненка на подсосе. Кормление животных осуществляли по нормам рекомендованным ВИЖ. В процессе исследований определяли концентрацию бифидобактерий, лактобактерий, кишечной палочки, энтерококков, аэробных спорообразующих бацилл и кандид, в химусе подвздошной и слепой кишок у ягнят в возрасте 1, 7, 15, 30 и 60 суток, на уровне рода, по А.А. Воробьеву (2003). Аналогичные критерии отражающие уровень и динамику изучаемых микробов в химусе подвздошной и слепой кишок овец в возрасте 3-5 лет служили контрольными показателями. Учет полученных результатов проводили через 24 и 48 часов для кандид. Уход за животными и эвтаназию (по 5 животных на каждый возрастной период) осуществляли в соответствии с требованиями приказов МХ СССР № 755 от 12.08.1977 г., № 701 от 27.07.1978 «Европейской конвенции по защите позвоночных животных используемых для экспериментальных и других научных целей (1986). Уровень и динамику изучаемых микроорганизмов определяли на элективных питательных средах: среде Блаурокка в модификации Гончарова Г. И.(1990) — для бифидобактерий, среде Эндо — для кишечной палочки, для лактобактерий использовали лактобакагар, для энтерококков — энтерококкагар, а для кандид среду Сабуро. Концентрацию аэробных спорообразующих бацилл выявляли на питательном агаре (МПА), при этом испытуемый биоптат, а именно химус подвздошной и слепой кишок, предварительно прогревали при 800С в течение 20 минут. Полученные результаты выражали в КОЕ на 1 гр. исследуемого материала, подвергали стандартной статистической обработке, по Г.Ф. Лакину (1980).
Результаты исследования и их обсуждения. Наши исследования показали, что концентрация изучаемых микробов в химусе подвздошной и слепой кишок ягнят в возрасте одни сутки находилась в пределах: бифидобактерий 4,4±0,2 и 5,0±0 ^ КОЕ/г хим., лактобактерий 3,1±0,2 и 3,4±0,2 ^ КОЕ/г хим., эшерихий (Е. соН) 4,1±0,3 и 4,0±0 lg КОЕ/г хим., энтерококков 2,4±0,2 и 3,0±0 lg КОЕ/г хим., аэробных спорообразующих бацилл 2,2±0,1 и 0,4±0,2 lg КОЕ/г хим., кандид 3,1±0,3 и 2,4±0,2 ^ КОЕ/г хим., соответственно для каждой кишки.
Таблица 1 — Содержание микроорганизмов в химусе подвздошной и слепой кишок ягнят (п = 5; М±т ^ 10 КОЕ г/мат.; р < 0,05*)_
MuKpoopraH H3MBI Название кишок Возраст животного
1 7 15 30 60 Овцы 3-5 лет
М±т % М±т % М±т % М±т % М±т % М±т %
Bifido bacterium подвздош ная 4,4±0,2* 38,3 8,6±0,2* 74,8 10,3±0,1* 89,5 11,5±0,2 100 11,5±0,2 100,0 11,5±0,2 100
слепая 5,0±0* 41,6 10,8±0,2 90,0 11,6±0,2 96,7 12,8±0,4 106,7 11,6±0,6 96,7 12,0±0,6 100
Lacto bacillus подвздош ная 3,1±0,2* 34,1 7,1±0,3* 78,0 7,1±0,3* 78,0 9,7 ±0,1* 106,6 9,4±0,2 103,3 9,1±0,1 100
слепая 3,4±0,2 43,6 5,2±0,2 66,7 7,4±0,2 94,9 6,0±0 76,9 7,4±0,6 94,9 7,8±0,4 100
Escherichia (E. coli) подвздош ная 4,1±0,3* 47,7 5,9±0,3* 68,6 8,0±0,3 93,0 8,9 ±0,1 103,5 9,3±0,2* 108,1 8,6 ±0,3 100
слепая 4,0±0* 42,6 9,0±0,4 95,7 9,4±0,6 100 9,4±0,2 100,0 9,8±0,4 104,3 9,4±0,2 100
Entero coccus подвздош ная 2,4±0,2* 141,2 3,8±0,1* 223,5 2,5±0,1* 147,1 1,3±0,3* 76,5 1,1±0,2* 64,7 1,7±0,2 100
слепая 3,0±0 500 2,2±0,2 366,7 3,0±0 500 2,0±0 333,3 1,8±0,4 300,0 0,6±0,2 100
Bacillus подвздош ная 2,2±0,1* 169,2 2,8±0,2* 215,4 2,6±0,2* 200,0 2,8±0,1* 215,4 2,9±0,2* 223,1 1,3±0,2 100
слепая 0,4±0,2 66,7 0,6±0,2 100 1,8±0,2 300 2,4±0,2 400,0 0,6±0,2 100,0 0,6±0,2 100
Candida подвздош ная 3,1±0,3* 620 1,5±0,2* 300,0 0,7±0,2 140,0 0,5±0,1 100 0,3±0,2 60,0 0,5±0,1 100
слепая 2,4±0,2 171,4 1,8±0,2 128,6 2,0±0 142,9 0,2±0,2 14,2 0,8±0 71,4 1,4±0,2 100
Выявлено, что к концу молозивного периода питания ягнят, то есть в возрасте семи суток, уровень контролируемых микробов в указанном биоптате полученном из подвздошной и слепой кишок животных находился в пределах 74,8-90,0%; 78,0-66,7%; 68,695,7%; 223,5-366,7%; 215,4-100% и 300,0-128,6%, соответственно для каждой популяции микробов, по отношению к аналогичной микрофлоре содержащейся в химусе подвздошной и слепой кишок овец 3-5 летнего возраста. Представленные данные свидетельствуют об интенсивном накоплении бифидобактерий, лактобактерий, кишечной палочки, энтерококков, аэробных спорообразующих бацилл и кандид в химусе подвздошной и слепой кишок ягнят в течение их первой недели жизни. Выявленную закономерность следует увязать с влиянием молозива на бактериальную флору и кандиды. Известно, что молозиво сдержит ряд факторов (бифидумфактор и др.) стимулирующих жизнедеятельность и накопление индигенной кишечной микрофлоры. Однако в виду низкого содержания бактерий уровень кандид у ягнят к концу первой недели жизни превышает содержание этих микробов у взрослых овец на 171,4%.
В дальнейшем, с увеличением возраста ягнят и накоплением бактериальной массы в содержимом изучаемых кишок животных 15-60 суточного возраста, уровень кандид снижался до 60,0-71,4% в сравнении с овцами контрольной группы.
Выявлено, что у ягнят в смешанный период питания (30-60 суток) в химусе подвздошной и слепой кишок бифидобактерии стабилизировались на уровне 11,5-12,0 1§ КОЕ/г хим., что соответствовало контрольным овцам. Лактобактерии в подвздошной кишке стабилизировались раньше, чем в слепой кишке, а именно в пятнадцати суточном возрасте животных 11,6±0,2 ^ КОЕ/г хим., и тридцати суточном возрасте 9,7±0,1 ^ КОЕ/г хим. в
слепой кишке. Выявлено, что у ягнят в возрасте пятнадцати суток в химусе слепой и подвздошной кишок уровень кишечной палочки стабилизировался в пределах 8,0-9,3 и 9,49,8 lg КОЕ/г хим., сооветственно. Остальная бактериальная флора — энтерококки и аэробные спорообразующие бациллы не достигали своих стабильных величин и у ягнят шестидесяти суточного возраста в содержимом подвздошной и слепой кишок их концентрация была выше, чем у овец 3-5 летнего возраста на 123,1% исключение составляла слепая кишка, где содержание представителей рода bacillus было аналогично взрослым овцам, то есть имела 100% соответствие.
Заключение. Таким образом, в процессе исследований установлено, что у ягнят от рождения до двухмесячного их возраста в химусе подвздошной и слепой кишок формирование микробиоценоза индивидуально. Не все изучаемые нами представители кишечной микрофлоры имеют одинаковый период стабилизации. Что указывает на необходимость более глубокого и разностороннего изучения микроэкологии кишечника овец. Как общую закономерность формирования микробиоценоза химуса подвздошной и слепой кишок следует отметить, что превалирующие величины в исследуемых биоптатах принадлежат бифидобактериям, лактобактериям и кишечной палочке. Которые по своему содержанию превосходили энтерококки, аэробные спорообразующие бациллы и кандиды на 28,0-73,4% в зависимости от возраста животных. Стабильность микробиоценоза химуса подвздошной и слепой кишок у ягнят 30-60 суточного возраста носит относительный характер, поскольку соотношение микробов в химусе подвздошной и слепой кишок у овец 3-5 летнего возраста и ягнят в смешанный период их питания различны, что необходимо учитывать при выборе препаратов стабилизирующих кишечную микрофлору указанных биотопов пищеварительной системы овец в процессе их жизнедеятельности.
Литература
1. Бондаренко В. М., Грачева Н. М., Мацулевич Т.В..//Дисбактериозы кишечника у взрослых. — М., 2003. — 206 с.
2. Каничева И. В. Микробиоценоз содержимого толстого отдела кишечника ягнят раннего возраста // Вестник Орел ГАУ, 2012. — Т. 37. — № 4. — С. 107-110.
3. Рекомендации по оценке микробиоценоза подвздошной, слепой, ободочной и прямой кишок ягнят в молозивный, молочный и смешанный периоды питания (1-60 суток)./ И. И. Усачев, В. Ф. Поляков, И. В. Каничева, К. И. Усачев. — Брянск: Издательство Брянского ГАУ, 2015. — 153 с.
4. Усачев И. И., Усачев К. И., Гамко Л. Н. Особенности микроэкологии химуса и слизистой оболочки подвздошной кишки у овец. // Междунар. научно-практ. конф. Современные проблемы развития животноводства. — Брянск, 2012. — С. 186-188.
5. Brownlie S. E., Cobb M. A. Observations on the development of congestive heart failure in Irish wolfhounds with dilated cardiomyopathy.// J Small Anim Pract — 1999 — Vol. 40(8). -P.371-377.
6. Руденко А. А. Дисбактерюз кишечнику в собак, хворих на кардюмюпатл та набут вади серця / А. А. Руденко, М. I. Цвшховський // Ветеринарна медицина Украши. — 2010. — №1. — С. 20-23
