CC BY
23
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
лые, а иногда смертельные осложнения для плода. В настоящее время ни одна вакцина против краснухи не производится на территории России, таким образом, вопрос налаживания производства отечественной противокраснушной вакцины очень актуален. Однако, для промышленного производства необходима отработка технологических условий накопления вирусной биомассы.
Целью данной работы является выбор наиболее чувствительной клеточной культуры и определение оптимальных условий культивирования вируса краснухи. Были проведены исследования по культивированию вируса краснухи в следующих культурах клеток: первично трипсинизированной почечной ткани новорожденного кролика (ППК), диплоидных культурах фибробластов легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) и кожно-мышечного лоскута человека (М-22), перевиваемой культуре почки зеленой обезьяны (VERO-В). Наиболее чувствительными, а следовательно, наиболее целесообразными для использования оказались культуры клеток ФЛЭЧ и VERO-В со сходным средним значением инфекционной активности вируса, полученного на этих культурах. При варьировании состава питательных сред, было установлено, что использование смеси сред 199 и Игла с добавлением аргинина увеличивает инфекционную активность вирусных сборов на 2,0—2,5 lg ТЦД50/0,5 мл. Добавление хлористого кальции усиливает накопление вируса в клетках, однако его добавление возможно лишь в случае культивирования вируса для диагностических препаратов. Кроме того, было показано, что инфекционные титры вируса краснухи на 1,0—1,5 lg ТЦД50/0,5 мл больше при роллерных условиях культивирования по сравнению со стационарными.
В настоящее время для производства вакцин разрешены диплоидная клеточная культура М-22 и перевиваемая клеточная культура VERO-В. При этом по таким параметрам как чувствительность к вирусу, коэффициент пролиферации, количество полезных вирусных сборов, пригодность для роллерного культивирования клеточные культуры VERO-В и ФЛЭЧ превосходят разрешенную клеточную культуру M-22. Однако, для культуры ФЛЭЧ пока не создан производственный банк клеток и нет исчерпывающей аттестации клеточной линии в соответствии с требованиями ВОЗ. Поэтому культура VERO-В представляется наиболее перспективной как тканевый субстрат для промышленного производства вакцины против краснухи.
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ВОЗДЕЙСТВИЯ БЕЛКАТЕПЛОВОГО ШОКА НА ФОРМИРОВАНИЕ ИММУНИТЕТА К ИНАКТИВИРОВАННЫМ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ВАКЦИНАМ
В.В. Варгин1, Т.К. Дзагурова1, А.М. Сапожников2,
A.П. Иванов1, Н.А. Коротина1, Т.Н. Николаева3,
B.Н. Ляпустин1, М.С. Смирнова1
'ГУ Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, Московская область; 2ГУ Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва; 3ГУ Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалея РАМН, Москва
Повышение эффективности вакцинации для значительного числа вирусных инфекций до сих пор остается весьма актуальной. Предпринятые по-
пытки добиться усиления иммуногенности вакцин с использованием концентрированных, либо очищенных, а также гомогенных генно-инженерных продуктов вирусного происхождения, как и известных адъювантов, оказались малоэффективными.
Полученные в последнее время данные указывают на возможность избирательного усиления иммунного ответа к вирусным белкам при использовании в составе вакцин белков теплового шока (БТШ).
В экспериментах на мышах Ва1Ь/с исследована иммуномодулирующая активность БТШ70 в условиях формирования гуморального и клеточного иммунитета к цельновирионным инактивированным вакцинам — против вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) и геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ВГЛПС), а также белка Е вируса клещевого энцефалита.
В результате трехкратной иммунизации ВКЭ или ВГЛПС имеет место формирование у животных гуморального (вируснейтрализующие антитела) и клеточного (данные реакции бласттрансформации лимфоцитов) компонентов вирусспецифического иммунного ответа. Вместе с тем иммуностимулирующие воздействие БТШ70 в различных условиях эксперимента, где варьировалась в составе комплекса доза БТШ и (или) вакцинного антигена отражалось лишь на усилении клеточного, но не гуморального (противовирусные антитела) компонента иммунитета. Однако при использовании для вакцинации животных комплекса БТШ70-субъединичная ВКЭ (белок Е вируса клещевого энцефалита) наблюдали стимуляцию формирования как клеточного, так и гуморального вирусспецифического иммунитета.
Полученные данные свидетельствуют о неоднозначном характере воздействия БТШ70 на формирование гуморального и клеточного компонентов иммунитета к цельновирионным и субъединичным вирусным вакцинам, что связано, по-видимому, с особенностями функционирования БТШ70 при доставке антигенпредставляющим клеткам цельно-вирионного вакцинного материала, либо гомогенного вирусного белка.
ВЛИЯНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ НА УРОВЕНЬ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ КЛЕЩЕВЫМ ВИРУСНЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ В РЕСПУБЛИКЕ ХАКАСИЯ
Г.М. Величко, Т.Н. Викторова
Управление Роспотребнадзора по Республике Хакасия, г. Абакан
Республика Хакасия в 2010 г. по уровню заболеваемости клещевым вирусным энцефалитом заняла 4 место в ранговом ряду среди 12 территорий Сибирского федерального округа. Показатель заболеваемости составил 10,9 на 100 тыс. населения при среднем показателе по Сибирскому федеральному округу — 9,28. В 2011 г. зарегистрировано 65 случаев клещевого вирусного энцефалита, показатель заболеваемости составил 12,2 на 100 тыс. населения.
На современном этапе ареал природного очага клещевого вирусного энцефалита охватывает 10 из 13 административных территорий Республики Хакасия. По данным энтомологического мониторинга за природными очагами в течение последних десяти лет вирусофорность клещей составляла от 3 до 17%, в эпидемический сезон 2011 г. — 9,9% против 3,8% в 2010 г.
