CC BY
10
1 2 3 ©
Чуксина Ю.Ю. , Москалец О.В. , Яздовский В.В.
1Старший научный сотрудник, к.м.н., лаб. клинической иммунологии и тканевого типирования; 2Ведущий научный сотрудник, к.м.н., лаб. клинической иммунологии и тканевого типирования; 3Д-р мед. наук, профессор, руководитель лаб. клинической
иммунологии и тканевого типирования, Московский областной научно-исследовательский клинический институт им.
М.Ф. Владимирского, Москва
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ПРИ ГЕМАТОГЕННЫХ ОСТЕОМИЕЛИТАХ
Аннотация
В статье представлены результаты исследования ряда иммунологических показателей при остром и хроническом гематогенном остеомиелите в сопоставлении их с особенностями течения заболевания.
Ключевые слова: гематогенный остеомиелит, субпопуляции лимфоцитов, фагоцитоз, иммуноглобулины.
Keywords: hematogenous osteomyelitis, lymphocyte subsets, phagocytosis, immunoglobulins.
Гематогенный остеомиелит, несмотря на все достижения современной медицины, остается одним из самых распространенных видов хирургической инфекции детского возраста и представляет собой очень сложную медико-социальную проблему. При тяжелых септикопиемических и токсических формах до сих пор встречаются летальные исходы [6,59]. Острый гематогенный остеомиелит (ОГО) в 5-15% случаев приобретает хроническое течение [2, 187; 5, 559]. Дети с хроническим гематогенным остеомиелитом (ХГО) многократно оперируются, нередко остаются инвалидами, т.к у них возникают различные ортопедические осложнения (патологические переломы, ложные суставы, анкилозы, укорочение и деформация конечностей) [3, 96]. Увеличилась доля атипичных, малосимптомных, редких форм заболевания, растет резистентность этиопатогенных микроорганизмов, многократно увеличилась частота случаев подострого и первично-хронического остеомиелита. Существенно изменился возрастной состав: частота гематогенного остеомиелита у детей старше 3 лет стала значительно ниже, при этом более чем в 3 раза увеличилась заболеваемость новорожденных [1, 61]. Все это создает определенные трудности в диагностике и лечении данной патологии. Поэтому изучение иммунопатогенеза данного заболевания и особенностей иммунологической реактивности детей разного возраста крайне актуально [7, 428].
Ранее нами было показано, что одним из механизмов, участвующих в патогенезе гематогенного остеомиелита и способствующих его переходу в хроническую форму, являются аутоиммунные реакции. У 60% больных с ОГО и 74% больных с ХГО выявлялись антитела к двуспиральной ДНК и/или антинейтрофильные антитела, причем их нормализация в процессе лечения ассоциировалась с благоприятным исходом, а при нарастании уровня этих аутоантител в динамике заболевание принимало хроническое течение, формировались патологические переломы [4,162].
Цель исследования: Оценить состояние основных факторов иммунологической реактивности (особенности клеточного, гуморального иммунитета, фагоцитарной функции) у детей с разными формами гематогенного остеомиелита и сопоставить их с особенностями течения заболевания.
© Чуксина Ю.Ю., Москалец О.В., Яздовский В.В., 2016 г.
Материалы и методы. Обследовано 74 ребенка, госпитализированных по поводу гематогенного остеомиелита, в том числе 52 - с острым гематогенным остеомиелитом (ОГО) и 22 - с хроническим гематогенным остеомиелитом (ХГО).
Определение содержания IgA, IgG, IgM в сыворотке крови проводили методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Состояние фагоцитарной системы оценивали по захвату нейтрофилами частиц латекса (латекс-тест) и восстановлению нитросинего тетразолия (спонтанный НСТ-тест).
Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови (ПК) проводилось методом 4-цветной проточной цитометрии ("Becton Dickinson", США) по Т-, В-, NK-клеточным антигенам и маркерам их активации ( CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD19, CD3-CD16+56, CD3+CD16+56, CD25+, HLA-DR+), определялось содержание Т-хелперных лимфоцитов 2 типа по экспрессии СD294. Выраженность экспрессии антигенов оценивалась по параметру средней интенсивности флюоресценции (MFI). Результаты:
Результаты оценки гуморального и фагоцитарного звеньев иммунитета представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови и фагоцитарная активность нейтрофилов у детей с гематогенным остеомиелитом
Показатель ОГО (n=52) ХГО (n=22)
IgA 1,6±0,30 1,5±0,27
IgG 22,1±2,91* 16,4±1,7
IgM 1,7±0,22 1,4±0,28
Латекс-тест 51±3,4 52±4,6
НСТ-тест 24±1,6* 17±1,8
Примечание: * р<0,05
Как следует из таблицы, при остром гематогенном остеомиелите уровень сывороточного 1^0 и НСТ-тест достоверно выше, чем при хроническом гематогенном остеомиелите.
При исследовании данных показателей в динамике оказалось, что при благоприятном течении заболевания (выздоровление при ОГО или ремиссия при ХГО) происходила нормализация всех показателей. При переходе ОГО в хроническую фазу или при затяжном течении ХГО отмечалось нарастание концентраций иммуноглобулинов классов 1^0 и 1^А. Показатели спонтанного НСТ-теста исходно были более низкими и существенно не изменялись к концу наблюдения.
Анализ субпопуляционного состава лимфоцитов до и после проведенного лечения выполнен у 12 детей в возрасте от 1 до 2-х лет, страдающих ОГО. Данные представлены в таблице 2.
Таблица 2
Субпопуляционный состав лимфоцитов ПК у детей с остеомиелитом до и после лечения
Параметры До лечения После лечения Р
исследования N=12 N=10
CD3+, % 59,3+-2,3 69,9 +-3,01 < 0,05
CD3+CD4+,% 36,9+-2,2 45,83+-4,6 <0,05
CD3+CD8+,% 17,2+-1,9 20,2+-4,5 >0,05
CD3- 12,2+-2,2 12,23+-0,74 >0,05
CD16+56+,%
CD3+ 1,16+-0,56 1,3+-0,81 >0,05
CD16+56+,%
CD19+ ,% 27,1 +- 3,05 16,8 +- 2,2 < 0,05
CD3+CD25+,% 10,7+-2,38 8,9+-2,3 >0,05
CD3+HLA-DR+, % 3,15+-0,88 1,73+-0,2 >0,05
CD4+CD294+^ пределахОТ3+) 17,7+-3,7 3,34+-0,14 < 0,001
До начала лечения у пациентов выявлено существенное снижение количества Т-лимфоцитов (CD3+), преимущественно за счет цитотоксической субпопуляции (CD3+CD8+) при нормальном уровне Т-хелперной субпопуляции лимфоцитов (CD3+CD4+). Также до начала терапии отмечено значимое увеличение уровня популяции В-лимфоцитов (CD19+) по сравнению с нормальными значениями (16,9+-1,1%), в то время как относительное содержание натуральных клеток-киллеров (CD3-CD16+56+) и NKT-лимфоцитов (CD3+CD16+56+) существенно не отличалось от возрастной нормы (11,7+-1,3% и 2,06+-0,3% соответственно).
Особенностью явился факт отсутствия увеличения уровня активированных Т-лимфоцитов (экспрессирующих HLA-DR-антиген) (3,2+-0,9% при норме 1,95+-0,27%), что является показателем низкой функциональной активности Т-лимфоцитов. Уровень Т-лимфоцитов, экспрессирующих рецептор ИЛ-2 (CD3+CD25+, ранний маркер активации) незначительно превышал аналогичный показатель у здоровых детей данного возраста (7,9+1,8%).
При анализе клеточного иммунитета пациентов этой возрастной группы после проведения лечения было выявлено существенное увеличение содержания CD3+, CD3+/CD4+лимфоцитов, отмечены нормализация уровня В-лимфоцитов, существенное снижение содержания субпопуляции Т-хелперных лимфоцитов 2 типа (фенотип CD4+/CD294+) по сравнению с исходным.
Заключение. В целом, при гематогенном остеомиелите у детей выявлен дисбаланс количественных показателей субпопуляционного состава лимфоцитов ПК, изначально низкая функциональная активность Т-популяции лимфоцитов. Корреляция увеличения содержания В-лимфоцитов с увеличением содержания субпопуляции Т-хелперных лимфоцитов 2 типа отражает преимущественную направленность регуляции иммунного ответа у детей с данной патологией по ТИ2 - типу.
Нарастание концентрации общих сывороточных иммуноглобулинов классов IgG и IgA, а также исходно низкие значения НСТ-теста могут быть прогностическими признаками хронизации заболевания.
Литература
1. Абаев Ю.К. - Современные особенности хирургической инфекции костей и суставов в детском возрасте //Вестник хирургии им.Грекова. - 2010. - №3. - С.61-65.
2. Акжигитов Г.Н., Юдин Я.Б. - Гематогенный остеомиелит // М.: Медицина . - 1998. - 288 с.
3. Султонов Ш.Р., Машков А.Е., Азизов А.А. Патогенетически обоснованные методы лечения хронического гематогенного остеомиелита у детей // Известия академии наук республики Таджикистан. Отделение биологических и медицинских наук. - 2009. - Т.166, №1. - С.94-99.
4. Москалец О.В., Яздовский В.В. - Аутоантитела при гематогенном остеомиелите // Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук. - 2015. - С. 161-163.
5. Arnold J.C., Bradley J.C. Osteoarticular infections in children //Infect. Dis. Clin. North. Am. - 2015. -V29, №3. - P.557-574.
6. Dodwell E.R. Osteomyelitis and septic arthritis in children // Curr. Opin. Pediatr. - 2013. - V.25, №1. -P.58-63.
7. Pääkkönen M., Peltola H. Bone and joint infections // Pediatr. Clin. North Am. - 2013. - V.60,№2. -P.425-436.
