CC BY
26
УДК 616.33:571.27
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА ПАЦИЕНТОВ С СОЧЕТАНИЕМ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО РИНИТА И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ВЕРХНЕГО ОТДЕЛА ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
Н.С. Ираклионова1, Э.Б. Белан1, С.В. Туркина2, А.М. Доценко3, Е.Л. Рудобаба1, А.А. Панина1, Р.Г. Мязин4
ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 1кафедра иммунологии и аллергологии,
2кафедра внутренних болезней педиатрического и стоматологического факультетов, 3кафедра фундаментальной медицины и биологии, 4кафедра пропедевтики внутренних болезней
В статье представлены результаты изучения иммунного статуса пациентов с воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта в зависимости от наличия инфекции H. pylori и аллергического ринита. Обследовано 65 пациентов в возрасте от 18 до 40 лет. У всех пациентов был определен иммунофенотип лимфоцитов по CD-маркерам, концентрации IgM, IgA, IgG, циркулирующих иммунных комплексов, а также уровень IL-4, IL-10, общего IgE в сыворотке крови. Выявлено, что при наличии инфекции H. pylori увеличивалось количество зрелых CD3+ лимфоцитов, при этом количество CD22+ клеток снижалось. Также в данной группе пациентов был снижен уровень общего IgE, IL-4, IL-10 в сыворотке крови. Результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что наличие инфекции H. pylori у пациентов с аллергическим ринитом ассоциируется с несколько иным характером иммунологической реактивности по сравнению с монопатологией (аллергический ринит) и H. pylori-независимыми воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта.
Ключевые слова: воспалительные заболевания верхнего отдела желудочно-кишечного тракта, H. pylori, иммунный статус.
DOI 10.19163/1994-9480-2020-1 (73)-55-58
THE FEATURES OF THE IMMUNE STATUS OF PATIENTS WITH COMBINATION OF ALLERGIC RHINITIS AND INFLAMMATORY DISEASES OF THE UPPER GASTROINTESTINAL TRACT
N.S. Iraklionova1, E.B. Belan1, S.V. Turkina2, A.M. Dotsenko3, E.L. Rudobaba1, A.A. Panina1, R.G. Myazin4
FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation, department of immunology and allergology, 2Department of internal medicine of the pediatrics and dental faculties,
3Department of fundamental medicine and biology, 4Department of propedeutics of internal medicine
This article presents the results of the study of the immune status of the patients with inflammatory diseases of the upper gastrointestinal tract depending on the presence of H. pylori infection and allergic rhinitis. A total of 65 patients aged 18 to 40 years were examined. The lymphocyte immunophenotype by CD markers, the level of IgM, IgA, IgG, circulating immune complexes, IL-4, IL-10, total IgE in serum were determined in all patients. It was revealed that the number of mature CD3+ lymphocytes increased while the number of CD22+ cells decreased in patients with H. pylori infection. In addition, the level of total IgE, IL-4, IL-10 in serum was reduced in this group of patients. The results of the study indicate that the presence of H. pylori infection in patients with allergic rhinitis is associated with a slightly different nature of immunological reactivity compared with monopathology (allergic rhinitis) and H. pylori-independent inflammatory diseases of the upper gastrointestinal tract.
Key words: inflammatory diseases of the upper gastrointestinal tract, H. pylori, immune status.
Хронические воспалительные заболевания верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (ВЗВОЖКТ) являются самой частой формой поражения органов пищеварения. Данным видом патологии в России страдает около трети населения [3]. ВЗВОЖКТ характеризуются полиэтиологичностью, при этом одной из основных причин развития гастритов в настоящее время считается инфекционная, и главная роль принадлежит бактерии H. pylori.
Вместе с тем, к настоящему времени получены неопределенные результаты в отношении H. pylori в качестве фактора, оказывающего влияние на развитие и течение аллергических заболеваний.
В ряде исследований показана возможная способность данной бактерии предотвращать развитие аллергических заболеваний [6], в частности, бронхиальной астмы и пищевой аллергии. Другие работы демонстрируют H. pylori в качестве фактора, играющего роль в развитии и/или течении заболеваний, не относящихся к пищеварительной системе (хроническая крапивница, пищевая аллергия, бронхиальная астма) [2].
Учитывая то, что основное число исследований направлено на изучение локальных изменений, происходящих под воздействием H. pylori (слизистая оболочка желудка и двенадцатиперстной кишки),
представляют интерес процессы, касающиеся особенностей системной реактивности организма при H. ру/о/7-ассоциированных заболеваниях пациентов при контролируемом течении аллергического ринита (АР).
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Выявить особенности иммунного статуса у пациентов с ВЗВОЖКТ в зависимости от наличия аллергопатологии и H. ру/о/7-инфекции.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа выполнена в дизайне одномоментного сравнительного аналитического исследования в параллельных группах. В исследование были включены 65 человек в возрасте от 18 до 40 лет, средний возраст составил (29,0 ± 6,64) года.
Критерии включения: ВЗВОЖКТ до начала терапии (диагноз устанавливался гастроэнтерологом); наличие АР (диагноз устанавливался/подтверждался аллергологом-иммунологом) в стадии ремиссии. Критерии невключения: менее 30 дней после острых воспалительных заболеваний, не локализованных в области ЖКТ; наличие хронических воспалительных процессов другой локализации (кроме аллергических заболеваний).
I группу (n = 23) составили пациенты с АР без патологии ЖКТ. II группу (АР+Нр-; n = 20) -пациенты с ВЗВОЖКТ и с АР, H. pylori-негативные. III группу (АР+Нр+; n = 22) - пациенты с ВЗВОЖКТ и с АР, H. pylor/'-позитивные.
Показатели общего анализа крови определяли на гематологическом анализаторе ADVIA 2120 (Siemens, США).
Иммунофенотип лимфоцитов по CD-антигенам (CD3, CD4, CD8, CD16, CD22) определяли иммуно-флюоресцентным методом на проточном цито-метре Cytomics FC 500 (Beckman Coulter, США) с применением моноклональных антител (Beckman Coulter, США), меченных FITC (изотиоцианат флуо-ресцеина), PE (фикоэритрин), PC5 (комплекс PE с цианином-5) и ECD (комплекс PE с техасским красным).
Определение концентрации IgM, IgA, IgG в сыворотке крови проводили иммунотурбиди-метрическим методом с использованием биохимического анализатора Bio Majestry JCA-BM6010/C (Jeol, Япония).
Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводилось методом осаждения полиэтиленгликолем по методу Гашковой и соавт. (1978).
Определение содержания IL-4 и IL-10 в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, Россия)
с использованием следующего оборудования: фотометра для микропланшетов Stat Fax-2200 (Awareness Technology, США), шейкера-термостата ST-3L (Elmi, Латвия), вошера PW40 (Bio-Rad Laboratories, США). В соответствии с инструкцией, чувствительность наборов составляла 0,4 пг/мл и 1,0 пг/мл, верхняя граница референтного интервал а 4 пг/мл и 31 пг/мл соответственно. Определение содержания общего IgE в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа (Siemens, Великобритания; чувствительность метода 1,0 МЕ/мл) с использованием иммуно-хемилюминесцентного анализатора Immulite 2000 (Siemens, США).
Статистическая обработка данных проводилась общепринятыми методами с помощью пакета прикладных программ «Statistica 6.0» (StatSoft Inc., США). Для количественной характеристики показателей использовали среднее арифметическое значение и среднеквадратическое отклонение (М ± SD) (при нормальном распределении показателя), медиану c интерквартильным размахом (Me [Q1; Q3]) (при распределении показателя, отличающимся от нормального). Для сравнения абсолютных величин использовали критерий Стьюдента. Для сравнения частот в двух независимых группах объектов исследования применяли точный критерий Фишера или критерий х2 (в зависимости от численности группы). Различия показателей считали достоверными при уровне значимости p < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Пациенты во всех группах были сопоставимы между собой по возрасту и полу. В группу обследованных вошли лица обоего пола: 46 женщин (70,8 %) и 19 мужчин (29,2 %).
Показатели иммунного статуса всех обследованных пациентов представлены в таблице.
В целом, количество лейкоцитов в группах пациентов находилось в пределах референтных значений, однако наблюдались некоторые раз-л ич ия . Так, H. pylori-инфекция ассоциировалась с более высоким количеством лейкоцитов (за счет более высоких абсолютных значений количества нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов) (данные не приводятся).
Как относительные, так и абсолютные показатели содержания CD3+ клеток у Нр+ пациентов с ВЗВ ОЖКТ были значительно выше, чем в группе как с изолированной аллергопатологией, так и с заболеваниями ЖКТ без H. pylor/'-инфекции, что, по нашему мнению, является отражением активации Т-клеточного звена.
Показатели иммунного статуса пациентов с ВЗВОЖКТ
Показатель Референтное значение № группы р < 0,05
I II III
АР (п = 23) АР+Нр-(п = 20) ( + м + )+
Количество лейкоцитов, *109/л 3,8-8,6 5,30 ± 1,29 5,40 ± 1,28 7,60 ± 1,79 и" 0,0000 0,0000
CD3+ % 60-85 69,20 ± 8,92 65,90 ± 10,01 81,30 ± 11,26 и" 0,0002 0,0000
кл/мкл 1100-1900 1807,00 ± 292,23 1895,50 ± 491,18 2387,9 ± 519,8 и" 0,0000 0,0031
CD4+ % 29-59 36,0 ± 5,7 38,40 ± 6,46 42,20 ± 6,34 и" 0,0013
кл/мкл 700-1400 977,70 ± 149,16 1012,60 ± 63,68 1234,20 ± 164,37 и" 0,0000 0,0000
CD8+ % 19-46 30,80 ± 5,79 31,80 ± 6,32 35,10 ± 5,95 и" 0,0179
кл/мкл 500-1100 911,60 ± 107,68 882,1 ± 172,7 1040,40 ± 214,92 и" 0,0141 0,0125
CD4+/CD8+ 1-1,5 1,20 ± 0,32 1,30 ± 0,46 1,20 ± 0,23 -
CD16+ % 6-29 13,6 ± 4,99 11,30 ± 3,59 15,10 ± 4,42 ""ш0,0040
кл/мкл 200-600 389,50 ± 135,99 365,90 ± 97,66 336,7 ± 90,1 -
CD22+ % 1-15 13,80 ± 6,57 10,9 ± 3,49 8,60 ± 3,51 и" 0,0018 0,0309
кл/мкл 50-600 358,70 ± 95,76 313,90 ± 72,15 279,50 ± 62,12 и" 0,0021
1дМ, г/л 0,5-2,5 1,20 ± 0,48 1,30 ± 0,21 1,30 ± 0,38 -
1дА, г/л 0,7-3,5 1,50 ± 0,48 1,50 ± 0,41 1,40 ± 0,31 -
г/л 7-22 11,90 ± 4,81 11,30 ± 3,44 10,90 ± 2,88 -
ЦИК, усл. ед. <60 25,40 ± 10,65 24,4 ± 8,8 25,9 ± 9,7 -
^-4, пг/мл 0-4 4,2 [0,10; 6,10] 12,0 [0,30; 18,60] 1,0 [0,01; 6,70] -
Частота значений ^-4 >пг/мл, % - 52,2 70,0 36,4 0,0365
^-10, пг/мл 0-31 33,7 [12,80; 136,90] 34,0 [4,70; 40,10] 16,7 [4,60; 29,00] -
Частота значений ^-10 > 31 пг/мл, % - 56,5 60,0 22,7 и" 0,0331 0,0265
Общий 1дЕ, МЕ/мл 0-78 101,6 [54,00; 327,50] 100,0 [34,80; 154,00] 31,5 [15,80; 98,00] -
Частота значений общего 1дЕ >78 МЕ/мл, % - 52,2 70,0 31,8 0,0294
Аналогичная закономерность сохранялась и при сравнении количества CD4+ и CD8+ клеток. При этом у Нр+ пациентов относительное содержание этих клеток было достоверно выше только в сравнении с группой пациентов с АР. Можно предположить, что в группе АР+Нр- имеет место тенденция к повышению количества хелперных и цитотоксических клеток, вероятно, за счет Н. руОп-независимой этиологии заболевания.
Иммунорегуляторный индекс (коэффициент), определяемый по соотношению CD4+/CD8+, у пациентов с ВЗВОЖКТ вне зависимости от наличия Н. руЬп-инфекции был сопоставим между группами.
Полученные данные свидетельствуют о том, что при Н. руОп-неассоциированных ВЗВОЖКТ происходит снижение количества Т-клеток за счет
возможной супрессии данного звена и/или ухода этих клеток в очаг воспаления, что согласуется с имеющимися научными данными [4]. Не исключено, что в группах Нр+ пациентов происходит дополнительная стимуляция иммунной системы за счет наличия бактериальной инфекции.
Относительное содержание CD16+ клеток в периферической крови Нр+ пациентов с сочетанием АР и ВЗВОЖКТ было значительно выше, чем в группе Нр- лиц с аналогичной патологией. По данным литературы, CD16+ рецептор участвует в реализации антителозависимой цитотоксичности. Следовательно, увеличение численности CD16+ лимфоцитов и, как результат, реализация их цитотоксичности при обострении заболеваний верхнего отдела ЖКТ могут способствовать атрофии
слизистой оболочки. Также известно, что наличие H. pylori-инфекции ассоциируется с риском развития онкологических заболеваний ЖКТ [1]. Полученные данные свидетельствуют о напряженности естественных противоопухолевых механизмов в группе Нр+ лиц.
Что касается CD22+ клеток, то их относительное и абсолютное содержание у Нр+ пациентов было значительно ниже, чем у пациентов I группы. Вероятнее всего, причиной этому служит угнетение ^2-типа иммунного ответа у Нр+ пациентов за счет активации Thl-пути.
По содержанию иммуноглобулинов классов G, M, A достоверных различий между группами выявлено не было, так же, как и по количеству ЦИК.
Группа АР+Нр- оказалась сопоставима с группой пациентов с АР по уровню повышенных значений общего IgE (70,0 % vs 52,2 %, р = 0,3495). Существует вероятность, что в развитии воспалительных заболеваний ЖКТ у данных пациентов принимали участие IgE-зависимые механизмы. При этом у пациентов III группы отмечалась более низкая частота повышенных значений общего IgE по сравнению с Нр- пациентами с аналогичными патологиями (31,8 % vs 70,0 %, р = 0,0294).
Группа АР+Нр- также оказалась сопоставима с I группой по уровню повышенных значений IL-4 и IL-10 (соответственно 70,0 % vs 52,2 %, р = 0,3495; 60,0 % vs 56,5 %, р = 0,8176) и характеризовалась более высокой частотой повышенных значений данных показателей по сравнению с группой АР+Нр+ (соответственно 70,0 % vs 36,4 %, р = 0,0365; 60,0 % vs 22,7 %, р = 0,0265). Вероятной причиной представленной зависимости может служить факт попадания ингаляционных аллергенов в ЖКТ пациентов группы АР+Нр- и, как следствие, развитие у данных пациентов аллергического гастрита. Возможно, что в группе АР+Нр+ развитие этого патологического процесса блокируется наличием H. pylor/'-инфекции [5].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, ВЗВОЖКТ у больных с АР ассоциируются с различным характером иммунного ответа в зависимости от наличия H. pylori-инфекции. При ее наличии характерной особенностью является активация специфической и неспецифической цитотоксичности, в ее отсутствие -большая активность Th2- и Treg-клеток.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белая О.Ф., Волчкова Е.В., Паевская О.А., Зуев-ская С.Н., Юдина Ю.В., Пак С.Г. Роль Helicobacter pylori в процессе канцерогенеза путем дисрегуляции экспрессии микроРНК // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2014. - Т. 19, № 6. - С. 43-47.
2. Зарипова Т.Н., Антипова И.И., Юрьева Н.М. Бронхиальная астма и верхние отделы системы пищеварения: клинические параллели // Пульмонология. - 2017. -Т. 27, № 5. - С. 629-635.
3. Караева В.Ю. Частота кровотечений при эрозивно-язвенных поражениях верхних отделов пищеварительного тракта у детей // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2013. - № 1. - С. 15-19.
4. Синяков А.А., Смирнова О.В., Цуканов В.В., Каспаров Э.В., Васютин А.В. Показатели иммунного статуса в крови у больных атрофическим гастритом // Дневник казанской медицинской школы. - 2016. -№ 1 (XI). - С. 29-31.
5. Larussa T., Leone I., Suraci E., Imeneo M., Luzza F. Helicobacter pylori and T Helper cells: mechanisms of immune escape and tolerance // Journal of Immunology Research. - 2015. - Vol. 2015. - P. 1-10.
6. Von Arnim U., Wex T., Link A., Messerschmidt M., Venerito M., Miehlke S., Malfertheiner P. Helicobacter pylori infection is associated with a reduced risk of developing eosinophilic oesophagitis // Alimentary Pharmacology and Therapeutics. - 2016. - Vol. 43. - P. 825-830.
REFERENCES
1. Belaya O.F., Volchkova E.V., Paevskaya O.A., Zuevskaya S.N., Yudina Yu.V., Pak S.G. Rol' Helicobacter pylori v processe kancerogeneza putem disregulyacii ekspressii mikroRNK [The role of Helicobacter pylori in the process of carcinogenesis by means of dysregulation of miRNA expression]. Epidemiologiya i infekcionnye bolezni [Epidemiology and Infectious Diseases], 2014, Vol. 19, no. 6, pp. 43-47. (In Russ.; abstr. in Engl.).
2. Zaripova T.N., Antipova I.I., Yur'eva N.M. Bronhial'naya astma i verhnie otdely sistemy pishche-vareniya: klinicheskie paralleli [Bronchial asthma and upper digestive system: clinical parallels]. Pul'monologiya [Pulmonology], 2017, Vol. 27, no 5, pp. 629-635. (In Russ.; abstr. in Engl.).
3. Karaeva V.Yu. Chastota krovotechenij pri erozivno-yazvennyh porazheniyah verhnih otdelov pishche-varitel'nogo trakta u detej [The frequency of bleeding with erosive and ulcerative lesions of the upper digestive tract in children]. Eksperimental'naya i klinicheskaya gastroenterologiya [Experimental and clinical gastroenterology], 2013, no. 1, pp. 15-19. (In Russ.; abstr. in Engl.).
4. Sinyakov A.A., Smirnova O.V., Cukanov V.V., Kasparov E.V., Vasyutin A.V. Pokazateli immunnogo statusa v krovi u bol'nyh atroficheskim gastritom [Indicators of immune status in the blood of patients with atrophic gastritis]. Dnevnik kazanskoj medicinskoj shkoly [Diary of Kazan Medical School], 2016, no. 1 (XI), pp. 29-31. (In Russ.; abstr. in Engl.).
5. Larussa T., Leone I., Suraci E., Imeneo M., Luzza F. Helicobacter pylori and T Helper cells: mechanisms of immune escape and tolerance. Journal of Immunology Research, 2015, Vol. 2015, pp. 1-10.
6. Von Arnim U., Wex T., Link A., Messerschmidt M., Venerito M., Miehlke S., Malfertheiner P. Helicobacter pylori infection is associated with a reduced risk of developing eos i n ophi lic oesophagitis. Alimentary Pharmacology and Therapeutics, 2016, Vol. 43, pp. 825-830.
Контактная информация Ираклионова Наталья Сергеевна - ассистент кафедры иммунологии и аллергологии, Волгоградский государственный медицинский университет, e-mail: [email protected]
