CC BY
51
I
ОСОБЕННОСТИ ГЕМОГРАММЫ У ЗДОРОВЫХ ЛИЦ, ПОСТОЯННО ПРОЖИВАЮЩИХ В Г. СТАВРОПОЛЕ
Т.П. Бондарь, Т.В. Цогоева, О.И. Запарожцева
BLOOD PICTURE PECULIARITIES OF HEALTHY PEOPLE, LOCAL RESIDENTS OF STAVROPOL
Bondar T.P., Tsogoeva T.B., Zaparogtseva O.I.
This article gives information about blood picture peculiarities of healthy people, local residents of Stavropol, and the distinctions of the blood cellular structure quantitative indices of Stavropol citizens from assessing method value. The analysis of automated and manual method of leucocyte formula estimating has been also conducted and the results provided.
Рассмотрены особенности гемограммы здоровых лиц, проживающих в г. Ставрополе. Выявлены отличия количественных показателей клеточного состава крови у жителей города от референсных величин методов. Проведен сравнительный анализ автоматизированного и ручного методов подсчета лейкоформулы.
УДК 616.155
Как известно, клинический анализ крови является одним из наиболее распространенных клинико-лабораторных исследований в медицинской практике. Многие десятилетия при изучении гематологических показателей пользовались ручными методами, не позволяющими выявить и правильно оценить адаптационные гематологические реакции на действие токсических факторов малой интенсивности. Небольшие изменения количества клеток крови легко «теряются» среди физиологических колебаний, свойственных этим показателям, а сами изменения ограничены в своей направленности.
Установлено, что при низком содержании кислорода в воздухе (горы, северные широты и др.) и нормально функционирующей системе эритрона, прежде всего, компенсаторно увеличивается число циркулирующих эритроцитов. При этом размер эритроцита и содержание в каждой отдельной клетке гемоглобина, как наиболее прочно генетически детерминированные признаки эритроцитов, меняются в меньшей степени. Под влиянием неблагоприятных факторов (дефицита в пище железа, белка, микроэлементов, витаминов, недостатка солнечного света и других биологически активных компонентов) при снижении компенсаторных возможностей эритрона могут уменьшаться размер эритроцитов и содержание гемоглобина в клетке (1). Нарушения содержания гемоглобина в эритроцитах у лиц, связанных с профессиональными вредно-
Бондарь Т.П., Цогоева Т.В., Запарожцева О.И.
«Особенности гемограммы у здоровых лиц, постоянно проживающих в г. Ставрополе»
стями, и у жителей районов с неблагополучной экологической ситуацией встречаются в несколько раз чаще (3).
Лейкоциты крови у здоровых людей из мест их выработки или депонирования (костный мозг) переходят в ткани, и основные функции лейкоцитов осуществляются в тканях (1). Процесс выхода лейкоцитов из костного мозга высоко селективен. Покидая костный мозг, лейкоциты являются полностью дифференцированными клетками, имеющими полный спектр поверхностных рецепторов и цитоплазматических гранул с набором многочисленных биологически активных веществ. Лейкоциты являются основой антимикробной защиты организма. Участвуя в возникновении и развитии физиологической воспалительной реакции, лейкоциты играют важную роль и при патологическом воспалении. Основной функцией лейкоцитов в тканях является фагоцитоз. Ней-трофилы, самая большая группа лейкоцитов, обладают уникальной способностью быстро увеличивать свою численность, когда это необходимо организму (1, 3).
Количество тромбоцитов в популяции здоровых людей может варьировать. Однако установлено, что в здоровом организме разрушение тромбоцитов соответствует их продукции. Изменение числа циркулирующих в периферической крови тромбоцитов зависит от воздействия внешних и внутренних факторов, таких как кровопотери, прием химиотерапевтических препаратов, дефицит витаминов и особенности питания (1).
Основой для создания автоматизированных проточных систем явилась необходимость эффективного подсчета результатов анализа крови. Гемограмма, полученная с помощью автоматических гематологических анализаторов, включающая 18 параметров, дает возможность быстро оценить состояние организма в данный момент по количеству клеток периферической крови и их качественному составу (воспаление, анемия, лейкопения и др.). Но применение ручных методов исследования не позволяют полностью выявить эти нарушения (6).
Появление автоматических анализаторов крови решило не только проблему авто-
матизации счета форменных элементов, повышения точности результатов, но дало новые диагностические параметры, содержащие дополнительную информацию (4). В настоящее время выпускается большое количество гематологических анализаторов, различных по степени сложности - один из них счетчик среднего класса Cobas Micros-18 ОТ фирмы «Hoffman-La Roche», Швейцария. Он является полностью автоматизированным гематологическим анализатором и используется для диагностического тестирования цельной крови in vitro. В данной работе был использован именно этот прибор.
Цель работы
Целью нашей работы явилось исследование показателей общего анализа крови у здоровых доноров, постоянно проживающих в г. Ставрополе, расположенном на высоте более 500 метров над уровнем моря, в зоне пониженного атмосферного давления.
Материал и методы
Обследовано 82 здоровых жителя города Ставрополя, впервые сдававших кровь, в возрасте от 35 до 60 лет, из них 48 мужчин и 34 женщины. Взятие венозной крови проводилось в соответствии с общими правилами сбора материала для исследования показателей крови, а именно, утром, у пациента, находящегося в горизонтальном положении, до приема пищи. Использовали только сухие канюли, локтевую вену пережимали на непродолжительное время. Первые 0,5-1,0 мл крови отбрасывали, затем венозной кровью заполняли специальный капилляр пробирки «Микровет» с ЭДТА для проведения анализа и приготовления мазка для просчета лейкоцитарной формулы. Окраску мазка проводили по стандартизированной методике Паппенгейма с раствором метиленового синего, приготовленного по Маю-Грюнвальду (7). Время от взятия крови до отделения форменных элементов было постоянным, но не более 30-60 минут.
Для количественного определения клеток периферической крови у здоровых лиц, проживающих в г. Ставрополе, использовали автоматический гематологический
анализатор «Cobas Micros-1S OT» (Hoffmann
- La Roche, ABX). Подсчет и дифференци-ровка форменных элементов крови проводится кондуктометрическим методом с автоматическим забором и разведением пробы. Гематологический счетчик имеет 2 параллельных канала для детекции сигналов: один из них предназначен для подсчета и анализа эритроцитов и тромбоцитов, второй
- для лейкоцитов. Для измерения гемоглобина служит специальная кювета, установленная в канале счета лейкоцитов. Измерение проводится колориметрически при помощи цианметгемоглобинового метода после лизирования эритроцитов. Объем забираемой пробы составляет 12 мкл цельной крови. Кроме этого, прибор регистрирует на бланке анализа гистограмму распределения эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов по клеточному объему.
С помощью счетчика «Cobas Micros-1S ОТ» измеряли 1S гематологических параметров, определяя следующие показатели: WBC (109/л) - количество лейкоцитов, LYM, GRA и MON - процентное содержание и абсолютный подсчет 3-х популяций лейкоцитов. Измеряемые эритроцитарные показатели: содержание эритроцитов (RBC, 10б/мм3), гемоглобин (HGB, г/л), гематокрит (HCT, %), средний корпускулярный объем эритроцита (MCV, фл), ширину распределения эритроцитов по объему (RDW, %), среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH, пг), среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците (MCHC, г/дл) (7).
Использование автоматического гематологического анализатора сделало возможным определение тромбоцитарных индексов: PLT (109/л) - общее количество тромбоцитов, циркулирующее в периферической крови. MPV (фл) - средний объём тромбоцита - увеличивается с возрастом. «Молодые» кровяные пластинки имеют больший объём, поэтому при ускорении тромбоцито-поэза средний объём Тр возрастает. PDW (%) - ширина распределения тромбоцитов по объёму отражает гетерогенность популя-
ции этих клеток по размерам. РСТ (%) -тромбокрит является параметром, отражающим долю объёма цельной крови, занимаемую тромбоцитами.
По данным исследователей, результаты, получаемые ручными методами и с помощью автоматического счетчика «Cobas Micros-18 ОТ», сопоставимы (2, 5). Результаты исследования мы сравнивали с рефе-ренсными величинами метода, достоверность различий устанавливали, используя статистические методы.
Результаты и обсуждение
В результате исследования периферической крови нами выявлено, что у здоровых лиц, постоянно проживающих в г. Ставрополе, имеются некоторые отличия эрит-роцитарных показателей, полученных с помощью автоматического анализатора «Cobas Micros-18 OT», от аналогичных общепринятых референсных величин, составляющих допустимые пределы колебания: Х±15 (1, 7). Для корректного сравнения полученные показатели гемограммы здоровых доноров представлены в таблицах в 2 вариантах. 1 вариант - допустимые пределы колебания показателя (Х±15). 2 вариант - средний показатель вариационного ряда (Х) с ошибкой среднего (м). Данные представлены в таблице 1.
Известно, что MCV - показатель, характеризует размер каждого эритроцита, проходящего через апертуру, зависит не от формы клетки, а от его объема. Так, микро-сфероцит имеет диаметр меньше нормы, в то время как средний его объем чаще остается в пределах нормы. Следовательно, независимой характеристикой эритроцита может быть только его объем, а для популяции клеток - MCV. Показатель МСНС характеризует среднюю концентрацию гемоглобина в одном эритроците. Он коррелирует с показателем MCV и зависит от гематокрита и гемоглобина (6).
Бондарь Т.П., Цогоева Т.В., Запарожцева О.И.
«Особенности гемограммы у здоровых лиц, постоянно проживающих в г. Ставрополе»
Таблица 1
Показатели гемограммы у здоровых лиц г. Ставрополя
_(Cobas Micros 18-OT)_
Показа- Единицы измерения Референсные показатели, Х±15 Здоровые доноры (п=82)
тели Х±м 15 - Х + 15
RBC 106/мм3 М-4,3-5,7 4,85±0,07 4,49-5,21
Ж-3,8-5,3 4,70±0,11 4,26 - 5,14
MCV Фл 80,0 - 97,0 86,1±0,6 81,8 - 90,4
MCH Пг 27,0 - 31,0 29,1±0,2 27,3 - 30,7
MCHC г/дл 33,0 - 38,0 33,6±0,1 32,6 - 34,3
RDW % 11,5 - 14,5 13,4±0,1 12,5 - 14,1
HGB Г/л М-132-173 144,1±1,9 134,4-153,8
Ж-120-160 132,7±2,9 120,5-144,9
НСТ % М-39-50 44,8±0,6 39,7-49,9
Ж-35-47 39,7±0,9 36,3-45,1
PLT 109/л 150 - 320 223,3±7,2 172,7-273,9
MPV фл 6,5 - 10,0 8,3±0,1 6,9 - 9,7
PDV % 10 - 18 13,6±0,2 11,0 - 16,2
PCT % 0,15 - 0,40 0,22±0,02 0,15 - 0,28
WBC 109/л 4,5 - 10,0 5,08+0,17 4,02 - 6,21
LYM % 19-37 27,6±1,6 22,8-32,4
MON % 3-11 8,9±0,5 7,3-10,5
GRA % 47-72 63,5±2,7 54,5-71,6
Как видно из таблицы 1, выявленные незначительные изменения (снижение верхнего уровня концентрации гемоглобина крови, тенденции к уменьшению количества и среднего объема эритроцита) не выходят за рамки пределов колебаний нормальных величин метода. Это, вероятнее всего, связано с влиянием на эритроциты климатических и экологических факторов.
Помимо этого, определяется снижение верхней границы пределов колебания количества тромбоцитов в крови здоровых лиц данной возрастной группы. При этом изменения среднего объема тромбоцитов не определяются, что является косвенным свидетельством отсутствия тромбоцитарной активности.
Сравнение лейкоцитарных показателей выявило достоверное уменьшение количества лейкоцитов (3,45-5,57*103/мм3 - у здоровых лиц при норме метода 4,5-10,0*103/мм3), что также позволяет говорить о вероятном воздействии окружающей среды на клетки периферической крови и состояние здоровья людей.
Подсчет лейкоцитарной формулы методом визуальной микроскопии не установил достоверных расхождений в лейкограм-мах, полученных автоматическим и ручным методами. Так же, как и при автоматическом анализе лейкоцитарных популяций при ручном методе установлено снижение верхней границы количества лимфоцитов. Данные представлены в таблице 2.
Заключение
В результате проведенного исследования показателей гемограммы у здоровых лиц в возрасте от 35 до 60 лет, постоянно проживающих в г. Ставрополе, и статистического анализа полученных данных выявлены некоторые особенности. Несмотря на то, что средние статистические значения гематологических показателей в обследованной группе не выходят за рамки рефе-ренсных значений метода, имеются тенденции к снижению верхней границы пределов колебания значений (Х±15) для всех пулов форменных элементов периферической крови. Аналогичные данные получены при исследовании лейкограммы ручным методом.
Такие тенденции, вероятно, обусловлены климато-географическими и экологическими особенностями г. Ставрополя, а не характеристиками применяемого лабораторного метода исследования. Что подтверждает
значимость индивидуального лабораторного паспорта здоровья для каждого обследуемого и «собственных» норм при выполнении научных исследований.
Таблица 2
Показатели гемограммы у здоровых доноров г. Ставрополя (микроскопия окрашенных мазков)
Показатели Единицы измерения Референсные показатели, Х±15 Здоровые доноры (п=82)
Х±м 15 - Х + 15
Сегментоядерные лейкоциты % 47,0 - 72,0 57,9±1,8 50,2-64,6
Палочкоядерные % 1,0 - 6,0 3,6±0,4 2,3-4,8
Лимфоциты % 19,0 - 37,0 25,5±2,4 19,3-33,7
Моноциты % 3,0 - 11,0 8,4±0,5 6,9-10,9
Эозинофилы % 0 - 5,0 2,0±0,2 1,4-2,6
Базофилы % 0,5 - 1,0 0,6±0,1 0,4-0,9
ЛИТЕРАТУРА
1. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И. Козинца и В.А. Макарова. - М.: Триада-Х. 1998. - 480 с.
2. Козинец Г.И., Левина Т.Н., Сарычева Т.Г., Белов Е.В. // Клин. лаб. диагностика. - 1999. -№10. - С. 30.
3. Котельников В.М.// Экологические факторы и кроветворение: Российский науч. Симпозиум: Тезисы докладов. - М., 1992.
4. Лаазер Х.Ф. // Клин. лаб. диагностика. -1997. - №2. - С. 45-46.
5. Левина Т.Н., Сарычева Т.Г., Князева Е.С. // Клин. лаб. диагностика. - 1997. - №10. - С. 1820.
6. Луговская СА., Миронова и.И., Морозова В.Т., Почтарь М.Е. // Клин. лаб. диагностика. -
1996. - №6. - С. 7-10.
7. Энциклопедия клинических лабораторных тестов / Под ред. Н. У. Тица. - М.: Лабинформ,
1997. - 960 с.
Об авторах
Бондарь Татьяна Петровна, доктор медицинских наук, профессор, и.о. зав. кафедрой физико-химических основ медицины и лабораторной диагностики МХБФ СГУ. Сфера научных интересов - изучение особенностей гемопоэза, систем адаптации у здоровых людей и при патологических состояниях в условиях метаболического стресса. Автор более 130 научных работ, из них 1 монографии, 12 методических рекомендаций и пособий для слушателей факультета последипломного образования, студентов и врачей. Цогоева Тамара Владимировна, врач клинико-диагностической лаборатории Ставропольского краевого клинического центра организации специализированных видов медицинской помощи. Сфера научных интересов - изучение адаптационных механизмов воспаления в норме м при остром коронарном синдроме. Автор 7 научных статей.
Запарожцева Оксана Ивановна, инженер-лаборант кафедры физико-химических основ медицины и лабораторной диагностики МХБФ СГУ. Сфера научных интересов - изучение особенностей гемопоэза у здоровых лиц.
