CC BY
37ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА КРЫС В
ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
Камолдинова Рохатой Абдуллаевна Рахмонов Равшан Рахимбердиевич Ибрагимова Хуршида Зафаровна
Андижанский государственный медицинский институт
Согласно современным представлениям, пищеварение и всасывание в желудочно-кишечном тракте осуществляется в полости органов, на поверхности мембран, абсорбирующих клеток и внутриклеточно. И хотя развитие пищеварительной трубки начинается внутриутробно, как функциональная система она формируется в основном в раннем постнатальном онтогенезе. Учитывая это, в настоящем исследовании рассматривается формирование слизистой оболочки фундального отдела желудка в постнатальном онтогенезе.
Ключевые слова: Постнатальный онтогенез, пищеварение, всасывание, электронно микроскопический, фиксированный, слизистая оболочка, эпителий, желудочные ямки, эксцентрично, гемохориальное питание
FEATURES OF THE FORMATION OF THE MUCOUS MEMBRANE OF THE STOMACH OF
RATS IN POSTNATAL ONTOGENESIS
According to modern concepts, digestion and absorption in the gastrointestinal tract is carried out in the cavity of organs, on the surface of membranes, absorbing cells and intracellular. Although the development of the digestive tube begins in utero, as a functional system it is formed mainly in early postnatal ontogenesis. With this in mind, this study examines the formation of the fundal gastric mucosa in postnatal ontogenesis.
Key words: Postnatal ontogenesis, digestion, absorption, electron microscopic, fixed, mucous membrane, epithelium, gallbladder fossae, eccentric, hemochoric, nutrition.
ПОСТНАТАЛ ОНТОГЕНЕЗДА КАЛАМУШ МЕЪДАСИНИНГ ШИЛЛИЦ ПАРДАСИНИ
ШАКЛЛАНИШ ХУСУСИЯТЛАРИ
Хозирги замон тавсифларга кура, меъда- ичак хазм килиш тизимида, хазм килиш ва сурилиши процесслари най бушликларида булиб, сурувчи хужайраларнинг мембраналарининг юзасида ва хужайра ичида амалга оширилади. Хазм найининг ривожланиши эмбрионал тараккиёт даврида бошлансада, функционал тизим сифатида постнотал онтогенезда шаклланади. Шуларни этиборга олган холда, мазкур тадкикотда меъданинг фундал кисмдаги шиллик пардасининг постнатал онтогенездаги шакилланиши курилмокда.
Калит сузлар: Постнатал онтогенез, хазм жараёни, сурилиш, электронн микроскопия, фиксацияланган, шиллык парда, эпителий, меъда чукурчалари, эксцентрик, гемохориал озикланиш.
Бй!: 10.24411/2181 -0443/2020-10038
Цель исследования. На основе общеморфологических, электронномикроскопических и морфометрических изучений слизистой оболочки фундального отдела желудка крыс различного возраста установить закономерности ее формирования как функциональной системы.
Материалы и методы: Работа выполнена на белых беспородных крысах обоего пола в возрасте 1,3,7, 14, 21 и 90 дней после рождения, находившихся на естественном грудном вскармливании в течение первых трех недель жизни. ' Сроки исследования выбраны на основании данных литературы о возрастной периодизации лабораторных животных (Западнюк В.И., 1971) и критических периодах их развития.
Забой животных осуществлялся согласно общепринятых правил. Для светооптических исследований кусочки фундального отдела желудка размером 0,5 см3 фиксировались в жидкости Карнуа. После соответствующей проводки они заливались в парафин. Ориентированные срезы толщиной 5-6 мкм после депарафинизации окрашивались гематоксилином и эозином, по Самсонову (Самсонов, 1984).
Для электронной микроскопии кусочки слизистой оболочки фундального отдела желудка фиксировались в забуференном 2,5% растворе глютаральдегида (90 мин.) и 1% растворе 0б04. После промывки в фосфатном буфере и проводки по спиртам возрастающей концентрации они заливались в м|етил -метакрилат, аралдит или смесь эпон-аралдит (Уикли, 1994). Срезы, полученные на ультрамикротоме ЬКБ-4800, концентрировались в насыщенном растворе уранил-ацетата (20 мин.) и цитрата свинца (рН=12,0; 1-2 мин.) и просмотрены в электронном микроскопе |ЕМ-1005.
Для установления динамики формирования слизистой оболочки фундального отдела желудка крыс различного возраста в 50 продольно ориентированных ямках и железистых трубочках на каждый случай •определены:
а) линейные параметры (мкм) с помощью окуляр -микрометра МОВ-15х;
б) митотический индекс -МИ (%) и зональность локализации камбиальных и железистых клеток;
в) общее, абсолютное и относительное число типов железистых клеток в фундальных жрлезах.
Результаты количественных исследований обработаны на персональном компьютере с помощью пакета программ Бхзе1-2000 и др. При этом вычислены средняя арифметическая (М), ее ошибка (ш), достоверность (Р) результатов при Р<0,05.
Результаты: У новорожденных крыс при рождении стенка фундального отдела желудка тонкая и состоит из слизистой, не отделенной от подслизистой основы, мышечной и серозной оболочек. Эпителий, выстилающий ее внутреннюю поверхность и неглубокие редкие ямки, высокоцилиндрический, над ядром содержит хорошо развитый комплекс Гольджи и секреторные гранулы, вариабельные по величине и электронной плотности. Базально располагается ядро и профили гранулярного эндоплазматического ретикулума. Эпителий дна ямок и образующихся коротких фундальных желез низкопризматический, клетки имеют относительно крупное округлое ядро, богатое эухроматином, много рибосом и полисом. Единичные мелкие митохондрии, высокой электронной плотности мелкие и крупные округлые секреторные гранулы, профили гранулярного ретикулума короткие, единичны.
Среди эпителиальных клеток нижней половины желудочных ямок и формирующиеся желез выявляются митотически делящиеся. В первые сутки после рождения их МИ равен 14,6 ± 1,2 и 36,8 ± 1,9 % соответственно. Среди железистых эпителиальных клеток при рождении крысят наряду с малодифференцированными выявляются париетальные клетки с характерными начальными признаками цитодифференцировки (табл. 1)
Таблица №1
Динамика абсолютного и относительного числа эпителиальных клеток в фундальной части желудка крыс в постнатальном периоде жизни (М±ш; п=12)
Сутки После рождеиия Покровно -ямочные эпителиа льные клетки Фундал ь-ные железис тые клетки (100%) Абсолютное и относительное число отдельных * видов железистых клеток Железисто-ямочный клеточный ивдекс (ЖЯКИ)
шееч ные добаво чные * главные париетал ьные
1 9,21±0,32 4,16±0,2 0 3,81± 0,20 0,72±0,03 0,45
3 10,8±0,22 20,6±0,8 3 4,68± 0,18 10,96± 0,30 4,30±0,20 , 1,91
5 11,6±0,43 23,8±1,4 5,60± 0,25 14,3±0, 52 5,12*0,20 2,05
7 11,4±0,35 31,2±1,2 6,44± 0,26 12,42± 0,24 5,81± 0,12 7,43±0,31 2,74
14 12,6±0,42 34,8±1,2 6,75± 0,23 10,8±0, 30 8,43± 0,15 9,85±0,40 2,76
21 15,2±0,82 44,2±1,4 6,20± 0,32 8,10±0, 20 18,6± 0,30 12,4±0,32 2,91
60 22,*= 1,2 65,1±1,6 6,35± 0,28 11,8±0, 35 30,4± 0,95 18,6±1,2 2,85
90 25,7±1,4 96,4±2,8 7,60± 0,45 18,6±0, 80 >3,3± 2,8 17,9±1,2 3,75
180 26,3±1,6 90,3±2,6 6,03± 0,40 18,4±0, 92 -8,9+ 2,4 10,3±0,62 3,43
360 20,1±1,8 78,9±2,8 3,92± 0,33 20,6±1, 3 ;8,6± 1,6 16,2±0,86 3,92
Они отличаются от других смежных клеток крупными размерами, эксцентрично расположенным ядром, формированием внутри- и межклеточного секреторных канальцев, мелкими многочисленными митохондриями; комплекс Гольджи почти не развит, протяженность профилей гранулярного эндоплазматического ретикулума умеренно вариабельна. В цитоплазме дифференцирующихся париетальных клеток изредка выявляются единичные электронноплотные секреторные гранулы. В скоплениях малодифференцированных клеток дна ямок и желез отмечаются также эпителиальные клетки с умеренно развитыми профилями гранулярного эндоплазматичекого ретикулума, округлыми секреторными гранулами умеренной и высокой плотности без определенной зональности. Нередко они могут находиться в состоянии митоза (рис.2).
Митотически делящаяся клетка в области дна ямки и развития фундальной железы желудка в первые сутки после рождения крыс. У в. 8000
На основании этих ультраструктурных признаков они рассматриваются как предшественники добавочных клеток.
Через 7дней после рождения крыс наблюдается интенсивное образование желудочных ямок, поэтому, видимо, их глубина почти не изменяется (табл.2).
Таблица №2
Динамика глубины желудочных ямок и длины железистых тру'бок, железисто-ямочный индекс (ЖЯМИ) фундального отдела желудка крыс в постнатальном
периоде жизни (М±ш, мкм; п=8)
Возраст, дни после рождения Глубина ямок Длина железистых трубок ЖЯМИ (отношение глубины ямок к длине желез)
1 41,5±1,5 105±1,9 2,53
3 41,0±1,3 131±1,9 3,18
7 1 45,0±1,3 170±1,4 3,78 <
14 66,0±1,4 244±2,7 3,70
21 70,0±1,5 275±3,0 3,93
90 93,0±2,0 464±5,1 4,99
Фундальные железистые трубочки увеличиваются как по длине, так и по количеству и, как следствие, прослойки соединительной ткани между ними становятся тоньше. Поверхностно -ямочный эпителий высокопризматический, содержит в надъядерной цитоплазме значительное количество секреторных гранул различной электронной плотности. В их базальной части вокруг ядра возрастает протяженность профилей ' гранулярного ретикулума. Вдоль железистых трубочек увеличивается абсолютное и относительное число париетальных клеток. В их цитоплазме митохондрии многочисленны, имеют электронноплотный матрикс и большое число крист. Существенно уменьшается протяженность профилей гранулярного ретикулума и структур комплекса Гольджи, рибосом и полисом, возрастают мелкие и средние везикулы около -, внутри- и межклеточных секреторных канальцев. Через неделю после рождения крыс среди клеток фундальных желез обнаруживаются первые начальные признаки дифференцировки главных клеток.
Увеличение профилей гранулярного ретикулума в базальной части дифференцирующейся главной клетки при формировании фундальных телец желудка через 7 суток после рождения крыс.
При наличии в цитоплазме значительного количества свободных рибосом и полисом увеличивается протяженность профилей гранулярного ретикулума вокруг относительно крупного округлого базально располагающегося ядра. Однако
комплекс Гольджи еще состоит из небольшого числа уплощенных цистерн и единичных везикул и вакуолей. Секреторные гранулы немногочисленны, высокой электронной плотности. При анализе митотической рктивности в желудочных ямках и вдоль железистых отмечается их преимущественная локализация в шеечной области и значительное уменьшение в нижней половине железистых трубочек.
К 14 суткам после рождения слизистая оболочка фундального отдела желудка утолщается. При глубине ямок 66,0 ± 1,4 мкм, железы становятся равны 244 ± 2,7 мкм. Основная масса митотически делящихся эпителиальных клеток выявляется на дне желудочных ямок и в шеечной области желез. Единичные фигуры митоза обнаруживаются в нижней и средней частях фундальных желез. При этом достоверно уменьшается доля добавочных клеток и увеличиваются главные и париетальные клетки.
Главные клетки, как правило, располагаются в базальной части железистых трубочек, отличаются многочисленными базально расположенными профилями гранулярного эндоплазматического ретикулума, низкой плотностью первичных секреторных гранул в их цистернах. Образование единичных зрелых секреторных гранул происходит внутри расширяющихся цистерн и вакуолей комплекса Гольджи. Необходимо отметить, что в процессе дифференцировки главных клеток отчетливо прослеживается установление взаимосвязи между ядром и гранулярной эндоплазматической сетью, комплексом Гольджи и митохондриями. Аналогичная консолидация и интеграция ядра и цитоплазматических структур отмечается в париетальных клетках.
Между 14-21 днями после рождения у крыс наблюдается период смешанного питания: наряду с грудным молоком они питаются зерном и хлебом. К концу третьей недели они полностью переходят на дефинитивное питание.
К концу 3 недели жизни (масса тела равна 26,5 ± 1,7) индекс массы желудка (0,82 - 0,83) становится как у половозрелых трехмесячных крыс. В слизистой оболочке фундального отдела желудка при глубине ямок 70,0 ± 1,5 железы имеют длину 275 ± 3,0 мкм. Митотически делящиеся эпителиальные клетки выявляются только в зоне шейки фундальных желез. В ямках единичные митозы могут встречаться только на самом дне, на границе с шейкой желез. К этому возрасту главные клетки в основном сосредоточены в области дна, париетальные - тела, добавочные - на границе шеечной области и тела фундальных желез. Эндокринные клетки диффузно выявляются на всем протяжении тела и дна железистых трубочек. Четкая очерченность зон локализации камбиальных, дифференцирующихся и зрелых (главных, париетальных и эндокринных) клеток в фундальных железах желудка страдает формирование органа ко времени перехода животных на дефинитивное питание, консолидации и интеграции их, адаптации к внеутробным условиям, к дефинитивному питанию, когда желудок -становится составной частью пищеварительно -транспортного конвейера, регуляции гомеостаза.
Ультраструктурно париетальные клетки характеризуются эксцентрично расположенным ядром, многочисленными светлыми везикулами, митохондриями с умеренно плотным матриксом и кристами, концентрирующимися вокруг внутриклеточных канальцев и вблизи межклеточных выводных протоков. Микроворсинки, выступающие в просвет канальцев и протоков, вариабельны по числу и протяженности (рис.4)
Главные клетки конусовидной формы отличаются густой сетью параллельно расположенных профилей гранулярного ретикулума , расположенных вокруг ядра, умеренно развитым комплексом Гольджи, расположенным над ядром. Секреторные гранулы умеренно плотные концентрируются в надъядерной цитоплазме. На апикальной поверхности, обращенной в просвет железы, микроворсинки
нерегулярны (рис.5).Через 3 месяца после рождения масса крыс и желудка соответственно составляет 121±6ги1015±64мг соответственно (индекс массы желудка 0,84). Глубина.желудочных ямок и фундальных желез равна соответственно 93,0 ±2,0 и 464± 5,1 мкм. Как и в предыдущий срок исследования, митотически делящиеся эпителиальные клетки локализуются только в области шейки железы соответствующим изменением подвергаются относительное и абсолютное число добавочных, главных и париетальных клеток в фундальных железах равно соответственно (табл.1). Топографически главные клетки в основном располагаются на дне и единичны в области тела железы, париетальные в основном сосредоточены в области тела. Добавочные клетки, как и ранее, выявляются в околошеечной области фундальных желез. Эндокринные клетки диффузно встречаются по всей железе.
Следовательно, формирование слизистой оболочки фундального отдела желудка, ее желез происходит в течение периода грудного вскармливания и завершается ко времени перехода на дефинитивное питание. Морфологически это выражается в установлении закономерных соотношений линейных параметров ямок и железистых трубочек, топографической зональности расположения митотически делящихся эпителиальных клеток, добавочных, главных, париетальных и эндокринных клеток, интегрированной деятельности цитоплазматических органелл и специализированных железистых клеток. Выводы:
1. Слизистая оболочка фундального отдела желудка крыс при рождении незрела: ямки образованы, железы развиваются, покровно -ямочный эпителий дифференцирован, париетальные клетки дифференцируются, главные отсутствуют.
2. Ко времени перехода на смешанное питание отмечаются признаки диффереяцировки главных клеток, функционирование покровно -ямочных и париетальных клеток, зона пролиферирующих обособляется в области шейки растущих фундальных желез.
3. Структурно-функциональное становление слизистой оболочки фундального отдела желудка в основном завершается ко времени перехода на дефинитивное питание и проявляется пространственной
зональностью расположения интегрирующихся камбиальных,
дифференцирующихся и высоко специализированных главных и париетальных, покровно-ямочных клеток.
ЛИТЕРАТУРА:
1 Анохин П.К. Очерки по физиологии функциональных систем. М., «Медицина», 1975-448с. ,
2. Баранов К.А., Тутельян В.А. Национальная программа оптимизации вскармливания детей первого года жизни Российской Федерации. М, 2010 -68 с.
3. 3.Воронцов И.М., Фатеева Е.М. Естественное вскармливание. СПб, «Фолиант», 1998260 с.
4. Западнюк В.И. К вопросу о возрастной периодизации лабораторных животных.//Старениеклетки.-Киев,1971.-с.433-438
5. Конь И.Я., Тмошинская М.В. Состав и свойства женского молока// Руководство по детскому питанию, М. МИА, 2004, с. 256-28t
6 Луфт В.М. Теоретическая и прикладная трофология// Рос.журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии, 2003. -т. 14, №4,-приложение 20. - с. 13-16
7. Самсонов В.А. Язвенная болезнь.Петрозаводск:Карелия,1975.-261 с.
8. Судаков К.В. Функциональные системы организма. М «Медицина» 1987-432 с.
9. Тимофеева Н.М. Роль пептидаз в ассимиляции белков (обзор современных данных)// Рос.физиол.журнал им. И.М.Сеченова - 1993. - т.79,№6.-с. 1-18
10. Ю.Тутельян В.А., Конь И.Я. Руководство по детскому питанию. М., МИА, 2004.662 с.
11. Тутельян В.А.. Конь И.Я. Детское питание. М., МИА, 2009. - 952 с.
12. Уголев А.М.Эволюция пищеварения и принципы эволюции функций. Л.:Наука,1985.-544с.
13. Уикли В. Электронная микроскопия для начинающих (пер. с англ.). М., «Мир», 1975.-334 с.
14. Шлыгин Г.К. Мембранный обмен нутриентами и пищеварительная система М. Изд-во МГУ. - 1997. - с. 44-72
15. Шлыгин Г.К.Межорганный обмен нутриентами и пищеварительная система. М.:МГУ,1997.-136 с.
16. Ширина Л.И., Мазо В.К. Система пищеварения ребенка, ее созревание и развитие.// Руководство по детскому питанию - М., 2004. - с.28-51
17. Hamosh М. Enzymes in human milk: Jn: Jensen R.G. (ed.) Handbook of milk composition. - SanDiego: Acad.Press? 1995. - p. 388
18. Hamosh M. Digestion in the newborn.// Clinics in Perinatology - 1996. - v.23,№2-p. 191-209 ,
19. Jensen Pv! (ed.) Handbook of milk composition. N.J.-L.: Acad.Press, - 1995. 762 p.
20. Johnson I.R. (ed.) Physiology of gastrointestinal tract. - N.J., Raven press,1994.-1531 p
21. Koldovsky O. Digestive-absorptive functions in fetuses infants and children.Jn: Nutrition in Pediatrics. - 1997. - p. 233-247
22. Walker W, Watkins J.B.C. Nutrition in Pediatrics. - Hamilton - London, 1997.-850 p.
23. Юлдашев Акром Юлдашевич, Рахматова Мукаддас Халтаевна, Ибрагимова Хуршидабону Зафаровна Функциональная морфология бокаловидных клеток слизистой оболочки тонкой кишки в различные периоды постнатального онтогенеза // Re-health journal. 2019. №1.
24. Кахаров Зафар Абдурахманович, Абдурахимов Абдухалим Холиддинович, Нурёгдиева Муштари ПРОБЛЕМА ПИТАНИЯ ДЕТЕЙ ГРУДНОГО ВОЗРАСТА: ВСЕ ЗАВИСИТ ОТ НАЧАЛА // Re-health journal. 2019. №4.
25. Юлдашев А.Ю., Кахаров З.А., Абдурахимов А.Х., Абдуворисова С.С., Абдумухтарова М.З., Ибрагимова Х.З. ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССА ВСАСЫВАНИЯ В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ ЖИЗНИ //В сборнике: Однораловские морфологические чтения Сборник материалов Всероссийской научной конференции с международным участием. 2019. С. 277-282.
