№ 3 - 2014 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки УДК 612.111-097:616.155.194.18-053.31
ОСОБЕННОСТИ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ АВО У НОВОРОЖДЕННЫХ
К. В. Алексанян, И. В. Андрюшина, Т. В. Белоусова
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава
России (г. Новосибирск)
Цель: выявление особенностей групповых эритроцитарных антигенов системы АВО у новорожденных и факторов, влияющих на их возникновение. Использовались стандартные жидкофазные и гелевые микротипирующие методики. Такой подход к изучению особенностей групповых антигенов обусловлен значительной гетерогенностью новорожденных по степени их морфофункциональной зрелости. Изосерологический статус новорожденных характеризуется наличием эритроцитов с антигенной незрелостью, слабыми вариантами антигена А, пани полиагглютинабельностью эритроцитов, что может привести к возникновению гемотрансфузионных осложнений. Использование гелевой методики определения группы крови уменьшает риск «ошибочного» определения.
Ключевые слова: система АВО, двойная популяция эритроцитов, полиагглютинабельность, панагглютинабельность, гелевая методика определения группы крови.
Алексанян Карина Владимировна — студент 6-го курса педиатрического факультета ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», e-mail: [email protected]
Андрюшина Ирина Владимировна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры факультетской педиатрии и неонатологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-22-45, e-mail: [email protected]
Белоусова Тамара Владимировна — доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой факультетской педиатрии и неонатологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 3462245, e-mail: [email protected]
Введение. Одним из выдающихся этапов в развитии медицинской науки в начале XX века было открытие K. Landsteiner в 1901 году различий в крови людей, впоследствии обозначенных как группы крови АВО. Групповая дифференциация присуща клеткам крови — эритроцитам, клеточным элементам системы HLA, DR, Na-Nb и др., а также белкам плазмы: гамма-глобулинам (Gm, Inv), гаптоглобинам, трансферринам и др. [3].
Однако наиболее важным для трансфузиологии является учет групповых свойств эритроцитов, так как они в первую очередь определяют совместимость или несовместимость переливаемой крови.
В большинстве групповых систем антигены полностью развиваются к моменту рождения ребенка, и активность их сохраняется на уровне, которого она достигла к данному моменту [1, 3, 6]. Переливание крови, ее компонентов и препаратов широко применяется в клинической практике и при условии соблюдения всех требований, изложенных в соответствующих инструкциях, является эффективным и практически безопасным лечебным методом. Наряду с этим, существуют риски возникновения осложнений, возникающих после переливания несовместимой крови. Эти осложнения представляют угрозу для жизни больных [4, 5].
В неонатальной практике чаще, чем у детей старшего возраста и взрослых, возникает потребность в гемотрансфузионной терапии, а риски гемотрансфузионных осложнений связаны со сложностями определения изосерологического статуса у новорожденных, именно это обстоятельство было положено в основу проведенного исследования.
Цель исследования: выявление особенностей групповых эритроцитарных антигенов системы АВО у новорожденных и факторов, влияющих на их возникновение, с целью предупреждения развития гемотрансфузионных осложнений.
Материал и методы. Проведен ретроспективный анализ результатов определения групповой принадлежности у новорожденных за 2012-2013 годы (по данным отделения экстракорпоральной детоксикации, гемодиализа и переливания крови ГБУЗ НСО «ГНОКБ»). Выявлено 122 новорожденных с «особыми» вариантами групп крови по системе АВО. Проведен анализ историй развития и историй болезни каждого ребенка.
Результаты исследований. Из 122-х детей со сроком гестации 21-42 недели при рождении было зарегистрировано 35 (29 %) доношенных новорожденных и 87 (71 %) недоношенных новорожденных. Среди доношенных новорожденных 38 % детей имели синдром задержки внутриутробного развития (ЗВУР).
В общей группе детей антигенная незрелость эритроцитов (недостаточная экспрессия антигенов на мембране эритроцитов новорожденного) встречалась у 86-ти (76 %), слабые формы антигена А (подгруппы А2 и А2В) — у 21-го (17 %) ребенка, феномен панагглютинабельности эритроцитов (агглютинация эритроцитов со своей сывороткой) установлен у 10-ти (8 %) новорожденных и полиагглютинабельности (способность эритроцитов агглютинироваться всеми образцами сывороток независимо от их АВО принадлежности) — у 5-ти (4 %) новорожденных.
Сравнительный анализ выявления особенностей групповых эритроцитарных антигенов системы АВО среди доношенных и недоношенных новорожденных представлен в табл. 1.
Таблица 1
Частота выявления особенностей групповых эритроцитарных антигенов
системы АВО
Антигенная структура эритроцитов Доношенные новорожденные Недоношенные новорожденные
Всего пациентов в исследуемой группе % выявления Всего пациентов в исследуемой группе % выявления
Антигенная незрелость эритроцитов 13 37 73 84
слабые варианты антигена А (подгруппы А2 и А2В) 13 37 8 10
Панагглютинабельность 7 20 3 3
Полиагглютинабельность 2 6 3 3
Сравнительный анализ выявления двойных популяций в группах доношенных и недоношенных новорожденных представлен в табл. 2.
Таблица 2
Частота выявления антигенной незрелости эритроцитов
Группа Всего пациентов в исследуемой группе %
Доношенные новорожденные 49 15
Недоношенные новорожденные 73 85
Всего 122 100
Количество детей с массой тела при рождении < 2500 г составило 81 (66 %). Структура распределения детей по массе тела при рождении представлена в табл. 3.
Таблица 3
Распределение детей по массе тела при рождении
Масса тела при рождении Всего пациентов в исследуемой группе %
НМТ (2500-1500 г) 48 59,3
ОНМТ (1500-1000 г) 19 23,5
ЭНМТ (< 1000 г) 14 17,2
Примечание: НМТ — низкая масса тела, ОНМТ — очень низкая масса тела, ЭНМТ — экстремально низкая масса тела
Сопоставление частоты регистрации «особых» вариантов эритроцитарных антигенов и массы тела при рождении установило наличие прямой зависимости, что отражено на рисунке.
Особенности вариантов эритроцитарных антигенов в зависимости от массы тела при рождении
эммт
ОНМТ
имт
О И 40 60 ВО 100
■ не грел ость ■ подгруппы ■ панэгглют ■ полиагглют
Характеристика вариантов эритроцитарных антигенов в зависимости от массы тела при
рождении
Обсуждение результатов. Изосерологический статус новорожденных отличается от характеристик детей других возрастных групп и представлен, как правило, наличием эритроцитов с антигенной незрелостью, слабыми вариантами антигена А, а также таких редких феноменов как пан- и полиагглютинабельность эритроцитов.
Приведенные в табл. 1 и 2 данные свидетельствуют о преобладании двойных популяций эритроцитов у детей, родившихся недоношенными, а также встречается среди детей, родившихся при доношенном сроке гестации, но со ЗВУР. Указанный феномен двойной популяции эритроцитов обусловлен их антигенной незрелостью. Присутствие двойных популяций эритроцитов увеличивает вероятность ошибочного определения группы крови при ее первичном исследовании в родильном зале, и в этой связи группа крови должна рассматриваться как «созревающая» вторая либо третья.
Данные табл. 3 и рисунка свидетельствуют о том, что чем меньше масса тела ребенка при рождении, тем чаще регистрируется антигенная незрелость эритроцитов. При этом было также установлено, что на частоту выявления слабых вариантов антигена А срок гестации и масса тела при рождении не оказывают влияния.
Таким образом, высокий процент двойных популяций эритроцитов, определяемых чаще всего у недоношенных новорожденных, свидетельствует о постепенном созревании антигенных структур эритроцитов в онтогенезе. Вместе с тем, среди недоношенных и доношенных новорожденных регистрировались такие редкие феномены, как поли-и панагглютинабельность эритроцитов.
У всех новорожденных детей с феноменом полиагглютинабельности эритроцитов диагностирован неонатальный сепсис и некротический энтероколит, что и обусловливало развитие данного редкого феномена, не свойственного популяции здоровых новорожденных. Наличие феномена полиагглютинабельности явилось прогностически неблагоприятным признаком в плане развития летального исхода.
Панагглютинация в 90 % случаев была связана с погрешностями забора крови из сосудов пуповины в родильном зале, что было подтверждено при повторном определении (переопределении) группы крови путем забора из периферической вены. Только у 1-го ребенка с неиммунной водянкой плода этот феномен сохранялся при повторно проведенном исследовании его групповой принадлежности крови.
Следует отметить, что указанные особенности изосерологического статуса новорожденных удалось установить только при использовании гелевых микротипирующих технологий. В то время как применяемые (параллельно с гелевой методикой) стандартные жидкофазные, не выявляли указанных особенностей. Метод гелевой технологии определения группы крови основан на агглютинации эритроцитов в агаровом геле «сефадекс», помещенном в микропробирки. Методика агглютинации в геле была разработана с целью стандартизации реакций гемагглютинации и получения достоверных результатов. Гелевая технология предусматривает разделение эритроцитов при центрифугировании, при этом неагглютинированные эритроциты проходят через гель и оседают на дне пробирок (отрицательный результат), в то время как агглютинированные эритроциты задерживаются на поверхности или в толще геля (положительный результат). Диапазон выполняемых тестов включает в себя определение фенотипа эритроцитов (включая слабые варианты антигенов), антиглобулиновый тест, скрининг и идентификацию антител, тесты на совместимость и некоторые др. [1, 2, 5].
Выводы. Таким образом, на основании проведенного исследования было установлено, что изосерологический статус новорожденных характеризуется наличием эритроцитов с антигенной незрелостью, что свидетельствует о постепенном созревании антигенных структур эритроцитов в онтогенезе; слабыми вариантами антигена А, а также наличием у новорожденных таких редких феноменов как пан- и полиагглютинабельности эритроцитов. Данные особенности эритроцитарных антигенов увеличивают риск «ошибочного» определения группы крови по системе АВО и, следовательно, развития гемотрансфузионных осложнений у детей периода новорожденности. У недоношенных новорожденных и детей, родившихся доношенными, но со ЗВУР, т. е. имеющих признаки морфофункциональной незрелости, вероятность ошибочного определения групповой принадлежности крови выше, чем у доношенных зрелых новорожденных. Для избежания ошибочного определения группы крови также необходимо брать образцы крови из периферических сосудов либо центрального катетера, а не из вены пуповины. Использование гелевой методики определения изосерологического статуса новорожденных также уменьшает риск «ошибочного» определения группы крови.
Список литературы
1. Жибурт Е. Б. Правила и аудит переливания крови : руководство для врачей / Е. Б. Жибурт, Е. А. Шестаков. - М. : РАЕН, 2010. - 347 с.
2. Карпищенко А. И. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы) : справочник / А. И. Карпищенко. — СПб. : Изд-во «Интермедика», 2004. — 304 с.
3. Минеева Н. В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии / Н. В. Минеева. — СПб., 2004. — 188 с.
4. Приказ МЗ РФ от 02.04.2013 N 183 «Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) её компонентов» (Зарегистрировано в Минюсте РФ 18.08.2013 N 29362)
5. ABC of Transfusion / Еdited by Marcela Contreras. — Fourth édition. — Wiley-Blackwell, 2009.
6. Klein Harvey G. Mollison's Blood Transfusion in Clinical Medicine / G. Klein Harvey, David J. Anstee. — 11th Edition. — Wiley-Blackwell, 2008. — 912 p.
FEATURES ERYTHROCYTIC ANTI-GENES OF ABO SYSTEM AT NEWBORNS
K. V. Aleksanyan. I. V. Andryushina. T. V. Belousova
SBEIHPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health» (Novosibirsk c.)
Purpose of research: detection of features group the erythrocytic anti-genes of ABO system at newborns and the factors influencing their emergence. Standard liquid-phase and gel microtyping techniques were used. Such approach to studying of features of group anti-genes is caused by considerable heterogeneity of newborns on degree of their morphofunctional maturity. The isoserological status of newborns is characterized by existence of erythrocytes with anti-gene immaturity, weak options of anti-gene A, pan- and polyagglutinability of erythrocytes that can lead to haemotransfusion complications. Usage of gel technique of blood testing reduces risk of «wrong» definition.
Keywords: ABO system, double population of erythrocytes, panagglutinability, polyagglutinability, gel technique of blood testing.
About authors:
Aleksanyan Karina Vladimirovna — student of the 6th course of pediatric faculty of at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», e-mail: [email protected]
Andryushina Irina Vladimirovna — candidate of medical science, assistant professor of faculty pediatrics and neonatology chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 346-22-45, e-mail: [email protected].
Belousova Tamara Vladimirovna — doctor of medical science, professor, head of faculty pediatrics and neonatology chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 346-22-45, e-mail:. [email protected]
List of the Literature:
1. Zhiburt E. B. Rules and blood transfusion audit: guidance for doctors / E. B. Zhiburt, E. A. Shestakov. — M.: Russian Academy of Natural Sciences, 2010. — 347 P.
2. Karpishchenko A. I. Medical laboratory diagnostics (programs and algorithms): reference book / A. I. Karpishchenko. — SPb.: «Intermedika» publishing house, 2004. — 304 P.
3. Mineeva N. V. Blood types of the person. Fundamentals of immunohematology / N. V. Mineev. — SPb. 2004. — 188 P.
4. The order of the MH of the Russian Federation of 02.04.2013 N 183 «Approval of rules of clinical use of donor blood and (or) its components» (registered in Ministry of Justice of the Russian Federation 18.08.2013 N 29362)
5. ABC of Transfusion / Edited by Marcela Contreras. — Fourth edition. — Wiley-Blackwell, 2009.
6. Klein Harvey G. Mollison's Blood Transfusion in Clinical Medicine / G. Klein Harvey, David J. Anstee. — 11th Edition. — Wiley-Blackwell, 2008. — 912 p.