CC BY
20ОСНОВНЫЕ ИТОГИ 15~го КОНГРЕССА МЕЖДУНАРОДНОГО ОБЩЕСТВА МЕДИЦИНСКИХ И ВЕТЕРИНАРНЫХ МИКОЛОГОВ (18НАМ) 25-29 МАЯ 2003 г., г» САН-АНТОНИО, ШТАТ ТЕХАС (МАРРИОТТ РИВЕР-ЦЕНТР), США
Н.П. Блинов, Н.В. Васильева
НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования, Россия
© Н.П. Блинов, Н.В. Васильева, 2003
Авторами сделано обозрение работ, представленных на 15-м Конгрессе 18НАМ.
PRINCIPAL RESULTS OF THE 15th CONGRESS OF THE INTERNATIONAL SOCIETY FOR HUMAN AND ANIMAL MYCOLOGY (ISHAM), MAY 25-29, 2003; SAN ANTONIO, TEXAS; MARRIOTT RIVERCENTER; USA
N.P. Yelinov, N.V. Vasilyeva
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, St. Petersburg Medical Academy of Postgraduate Education, Russia
© N.P. Yelinov, N.V. Vasilyeva, 2003
Authors have surveyed principal materials presented on 15th Congress of ISHAM.
Проведение данного Конгресса ISHAM стало возможным благодаря неограниченным образовательным грантам от следующих корпораций: «Мерк», «Пфайзер», «Гилед Фуджисава» (платиновые спонсоры), «Шеринг-Плау», «Энзон Фармацев-тикалс», «Бристоль-Мейерс Сквибб К°» (серебряные спонсоры), «Викурон Фармацевтикалс» (бронзовый спонсор). Конгресс также поддерживали корпорации «Мира Виста диагностике», «Трансгеномик», трансформирующая мир, «Био-Рад», «Микробиа», «Плива», «Ингибитекс®», «Тейлор и Фрэнсис группа», «У. Б. Сандерс».
Организатором Конгресса выступала «Imedex®» с лозунгом «Образование — самое лучшее лекарство».
Президентом ISHAM ныне является Ph. D. Michael R. Me Ginnis (США). Президентом Конгресса был Ph. D. Michael G. Rinaldi (США), председателем программного комитета — M.D. John R. Graybill (США).
Язык Конгресса — английский (без переводчиков).
Программа Конгресса одновременно реализовывалась по четырем направлениям: 1) фундаментальная микология, 2) прикладная микология, 3) иммунология, 4) клиническая микология. К сожалению, из-за большого числа устных и «постерных» докладов невозможно было проводить заседания последовательно, и в этом был недостаток в организации работы Конгресса, так как всегда имеется потребность выборочно заслушать интересные для специалиста доклады, но они проводились в параллельных секциях в одно и тоже время. Исключение составила смешанная сессия «Новые достижения по главным эндемическим микозам», объединившая элементы фундаментальной и прикладной микологии, иммунологии и клинической микологии в обзорах по пяти главным эндемическим микозам.
Кроме того, были организованы заседания «slide-презентаций», отобранных из представленных резюме работ по четырем вышеназванным направлениям, и постерные сессии.
Интегральной частью Конгресса были выставки от компаний и организаций производимых ими продуктов, имеющих отношение к микологии.
25 мая 2003 г. в 18— состоялось открытие Конгресса и прием его участников, а также представление претендентов на награды. 26 мая 2003 г. были начаты параллельные сессии. Первая из них «Таксономия грибов. Классические собрания молекулярщиков» (руководители — J. Guarro и L. Sygler); вторая — «Геномика грибов I» (руководители — J. К. Lodge, Р. Т. Magee); третья — «Результаты диагностики инвазивных микозов» (руководители — P. Е. Verweij,
G. Quindos); четвертая — «Врожденный иммунитет» (руководители — T.R. Kozel, D. Poulain). Все названные сессии проходили с 8Ш до 10—. Параллельные устные и постерные доклады по фундаментальной, прикладной и клинической микологии проводились с 10ш до 1235.
Во второй половине дня (с 14м до 17м) продолжались конкурентные (параллельные) сессии:
1) «Новое видение при использовании моделей на животных» (руководители — J.C. Rhodes, Т. J. Walsh);
2) «Эпидемиология грибковых инфекций» (руководители — R. Haijeh, J.E. Patterson);
3) «Геномика грибов II» (руководители — М. Т. Cushion, F. Dietrich);
4) «Грибы и клетки при врожденном иммунитете) (руководители — L. Romani, S. Newman);
5) «Микозы в Азии» (руководители — К. Nishimoto,
B.I. Ro).
На первой сессии по таксономии грибов с докладами выступили Дж. Гуарро, Г. Сибрен де Хоог, Р. С. Саммербелл, С. У. Питерсон и Л. Сиглер.
Гуарро (Испания) в сообщении «Гены и структура, дополнительные средства в диагностике грибковых инфекций» отметил, что микозы, вызываемые оппортунистическими патогенами, не сопровождаются типичной клинической картиной заболеваний, и диагноз здесь обычно зависит от идентификации возбудителя, полученного в культуре на питательных средах. Поскольку грибы часто не спорулируют, то этот метод оказывается не всегда полезным. В настоящее время развиты молекулярные методы, основанные на полимеразной цепной реакции (ПЦР), чрезвычайно ускорившей филогенетические исследования грибов из разных групп и, соответственно, их широкого разнообразия, пригодного при анализе различных генетических структур. Некоторые из датабаз (с тысячами вариантов, заложенных в пробных датабазах) доступны и их можно сравнивать по результатам сиквенирования с конкретным клиническим изоля-том, и таким образом определить их идентичность или, в любом случае, отнести к самым близким видам, и все это — за секунды времени.
Данный метод обеспечивает легкий и быстрый путь получения полезной информации по идентификации конкретного гриба на основании молекулярных данных. Однако при этом требуются фундаментальные знания по микологии и знание некоторых морфологических проявлений гриба, чтобы оценить — совместимы ли данные, полученные из обоих источников информации (по генам и морфологии).
Любое возможное загрязнение, неточная идентификация или верификация последовательностей нуклеиновых оснований может быть причиной ошибочного определения гриба.
Сибрен де Хоог (Нидерланды) выступил с докладом «Эволюция и патогенность Penicillium species с уклоном на Penicillium marneffei». P. marneffei относят к 3-й группе опасности для человека (НЗ) с выраженной внутриклеточной тканевой фазой. После проникновения в легкие гриб способен к латентному существованию внутри макроорганизма с возможной последующей эндогенной реактивацией при снижении клеточного иммунитета. Это служит до-
казательством возможности существования вектора распространения гриба, например грызунов.
Возникает главный научный вопрос — каков ареал распространения вида, в котором он (P. marneffei) обладает потенциалом патогенности? Поскольку грибковая патология, как думается, является многофакторным процессом, то трудно представить себе, как существующая экологическая обстановка может неожиданно возникнуть для грибов-сапротрофов в качестве «мудрого шага» эволюции в направлении возрастания ассоциации с животными? Если такие виды возникли, то это может помочь точно реконструировать эволюционные шаги, ведущие к патогенности. Тогда появление патогенности есть относительно недавнее событие. Напротив, если P. marneffei появился как патоген среди сап-ротрофов, то следует заключить, что виды с более низкими степенями адаптации к млекопитающим животным, чем P. marneffei, оказались вымершими. В таком случае молекулярные данные должны быть в согласии с более длительным временем прошедшей эволюции, которая отразилась в больших средних дистанциях между таксонами, чем между недавно появившимися видами пенициллов. Нам представляется такое рассуждение докладчика логичным, но не единственным, например, в случае привлечения оценки частоты мутаций среди пенициллов или в связи с далеко неполным изучением видового состава этого рода и др.
Тем не менее, поставленный докладчиком вопрос был адресован проверяющим филогенетические связи среди видов Penicillium в подроде Biverticillium на основе нуклеотидных характеристик, полученных от рДНК ITS (Internal Transcribed Spacer) домена и от экзонов 3-5 с встроенными интронами в генах
р-тубулипа.
Отобранные последовательности, сохраненные в EMBL/ GenBank, добавлялись к вновь накопленным последовательностям из видов Biverticillium и телеоморф, отнесенных к этой группе и классифицированных среди эуротиевых аскомицетов рода Talaromyces. Другие виды, описанные при микозах человека, но классифицированные в подродах As-pergilloides, Furcatum и Penicillium, были включены в эксперименты для сравнения.
Было найдено, что Biverticillium ближе к Paecilo-myces и Talaromyces, чем к остальным пенициллам. Таким образом, телеоморфа — это показатель связи, а анаморфные генетические пограничные линии нуждаются в пересмотре. Относительно большое молекулярное разнообразие у Talaromyces дает право предполагать, что у этих грибов повторялась утрата телеоморф. Почти все штаммы от пациентов с симптомами системных инфекций были найдены в подроде Biverticillium (исключая анаморфы Talaromyces), остальные подроды содержали лишь сапротрофы и случайно — как возбудители поверхностных микозов.
Этиологические агенты системного заболевания могли быть отнесены к Р. тагпеЦел, а также к некоторым родственным сестринским видам, вызывающим болезнь.
Сибрен де Хоог также отметил, что большинство бивертициллатных пенициллов являются термотолерантными, но дрожжеподобный рост при 37 °С присущ только Р. тагпеЦе1. Докладчик выдвигает гипотезу о том, что эволюция патогенности, произошедшая с Р. тагпе$е1, связана с термотолерантностью в качестве лидирующего фактора.
С интригующим по названию докладом выступил Ричард Саммербелл (Нидерланды): «Асгетотит: дикий Запад в идентификации грибов». В последние годы грибы рода Асгетотит рассматриваются оппортунистическими патогенами, хотя давно установлено, что они являются относительно частыми агентами микотических кератитов и, нечасто, но регулярно встречающимися при мицетомах. Автором также сказано, что они являются удивительно обычными возбудителями так называемого «поверхностного белого онихомикоза».
Знания о значении грибов рода Асгетотит оставались неопределенными, поскольку эти грибы находятся среди большинства «трудных» групп для идентификации до вида.
Многие ранее определенные виды Асгетотит оказались не теми, за которые их приняли (например, из-за микроконидиальных изолятов их относили к йшш'ига яр.). Многочисленные другие сообщения касались видов, которые оказались неверифициро-ванными и, следовательно, названы неправильно.
Многие изоляты, собранные докладчиком (Сам-мербеллом) в последние годы, не были совместимы с любыми описанными видами и также не могли быть отнесены по морфологии к какому-либо из известных таксонов. Виды Асгетотит очень просты по морфологии, большинство изолятов образует длинные, тонкие, лентовидные (подострые, игловидные, остроконечные) фиалиды и одноклеточные конидии в головках, цепочках или в тех и других одновременно. Они легко отличаются от микроконидиальных штаммов йшш'ига по медленной скорости роста (около 5 см при 25 °С через 7 суток) и по тонким гифам (большей частью — около 2,5 мкм в диаметре), но трудно отличимы от оппортунистических видов РЫа1етотит по их преобладанию базально септированных фиалид.
Автор с коллегами начали выполнение проекта по сиквенированию частей рибосомального генома с использованием аутентичных и типичных штаммов видов Асгетотит из СВБ и иАМЫ коллекций; цель исследования — сделать идентификацию Асгетотит 8рр. приемлемой там, где есть соответствующее оборудование для молекулярных исследований. Кроме того, авторы надеялись понять биосистемати-ческий диапазон рода Асгетотит, в котором многие аскомицетовые роды были описаны как имеющие Асгетотит-подобные анаморфы. В результатах
показано, что в то время как некоторые виды Асгетотит, ассоциированные с инфекциями человека и животных, проявили единство (унитарность) видов — пример — A. kiliense, определенно другие, по большей части, составляют комплексы видов или отличающиеся виды (A. strictum, A. potronii, A. blochii, A. recifei).
В предварительном заключении докладчик приходит к выводу, что определенные виды Асгетотит не могут быть реально идентифицированы при использовании самых лучших из существующих критериев. A. falciforme — возбудитель мицетомы должен быть немакроконидиальным членом комплекса Fu-sarium solani, и поэтому был назван F. falciforme.
Большинство RCS’s необычных изолятов под названием Асгетотит (упомянутые выше) оказались неописанными видами.
Четвертым докладчиком на сессии был Стефан Питерсон (США), выступивший с материалами о молекулярной оценке секций в роде Aspergillus с особым уклоном на секции Versicolores и Nidulantes.
Автор подчеркнул, что традиционно род Aspergillus подразделяли на группы (секции) на основании характера роста колоний и, в меньшей степени, основываясь на данных микроморфологии. Это был весьма практичный подход к идентификации культур. Эра молекулярной генетики и филогенетического анализа обеспечила становление независимых методов, которые могли быть использованы для определения ценности методов фенотипической идентификации, и те же данные могли быть использованы для определения филогенетических отношений интересующих нас организмов. Различными критериями была доказана реальность традиционных методов фенотипического и феногенетического анализов. В 1995 г. докладчик изучил взаимоотношение видов Aspergillus, включенных в секции Cremei, Sparsus и Wentii вместе с Petromyces alliaceus (секция Ochraceus). Выбор их основывался по большей части на данных анализа Рейпера и Финнела (1965), подтвердивших возможность ошибочного помещения некоторых видов между этими секциями.
По правилам номенклатуры, в случае устранения из таксономической группы типового вида, группа перестает существовать. По автору, в таком разряде оказалась секция Wentii, не имеющая права «претендовать» на таксономическую значимость согласно данным филогенетического анализа.
В 2000 году Питерсон проверил филогенетически род Aspergillus в целях определения взаимоотношений видов, а также насколько хорошо филогенетические группы коррелируют с фенотипически выделенными подродами и секциями Aspergillus (Games et al., 1985).
Имеется 10 различных, сексуально определенных родов, которые формируют анаморфы аспер-гиллов: Neocarepenteles (секция Ornati), Eurotium (секция Aspergillus), Neosartorya (секция Fumigati), Hemicarpenteles, Warcupiella, Sclerocleista (все сек-
ции Ornati), Emericella (секция Nidulantes), Fennelia (секция Flavipedes), Petromyces (секция Circumdati) и Chaetosartorya (секция Cremei). Все виды Euro-tium включены в секцию Aspergillus или Restrictus. Виды этих двух секций обладают физиологической характеристикой — пышно растут лишь на средах, содержащих высокие концентрации сахаров (20-60 % сахарозы). Виды Emericella образуют два различных клада (от англ. clade — монофилетическая группа любой величины; phylum — таксономическая единица между царством и классом; = отдел); они тесно связаны с видами из секций Versicolores, Nidulantes и Ornati.
Для дифференциации атипичных изолятов, например A. thomii, A. terricola, ключи для секций определенно вводят в заблуждение, и даже внимательный фенотипический анализ оставляет некоторое сомнение в корректности определения изолятов. С другой стороны, ДНК-сиквенирование является вполне информативным, а прямое ДНК-сиквенирование ITS и частично lsu рДНК — наиболее эффективные методы идентификации изолятов в настоящее время. Основываясь на имеющейся в ARS культуральной коллекции, виды Aspergillus из клинического материала составляют филогенетическую широту рода. Обычно встречающимися видами являются: A. flavus, A. fumigatus, A. terreus, A. nidulans, A. niger и некоторые виды Emericella. Эти оппортунистические патогены образуют обилие спор, попадающих в атмосферу, и растут при 37 °С, но не близки в филогенетическом отношении.
Последний доклад на утреннем заседании по таксономии грибов сделала Линн Сиглер: «Взгляд классического таксономиста на некоторые изменения в порядке Onygenales под влиянием молекулярных данных».
Аскомицетовый порядок Onygenales включает телеоморфы (мейотические половые стадии) настоящих патогенных грибов для млекопитающих, например, дерматомицеты и диморфные грибы, способные вызывать заболевания и у здорового организма. Некоторые авторы включают в этот порядок и семейства, различающиеся по орнаментации стенок аскоспор, местообитанию, способности разрушать кератин или целлюлозу анаморфными клетками, располагающими литическими ферментами, например, одиночные алеуриоконидии или чередующиеся артроконидии.
На основании молекулярно-филогенетического анализа из порядка исключили одно семейство Myxotrichaceae, а признали дополнительные линии. Одна из них включает членов рода Ajellomyces и родственные анаморфы, а вторая — членов рода Arachnomyces. Фенотипические характеристики данных линий рассматриваются в аспекте оценки их взаимоотношения по результатам, полученным на молекулярном уровне. Члены клада (отдела) Ajellomyces являются димофрными патогенами. Анаморфы рассматривали ключевыми характеристиками
для классификации видов и их помещали в роды Histoplasma, Blastomyces, Emmonsia и Paracoccidioides. Хотя виды Ajellomyces были классифицированы в семействе Onygenaceae вместе с Coccidioides immitis и непатогенными грибами, по результатам молекулярного анализа очевидно, что клад (отдел) Ajellomyces филогенетически отличен. Эти грибы различны по вирулентности и по индукции различных реакций со стороны макроорганизма. Ajellomy-сея-телеоморфы известны для Н. capsulatum, В. der-matitidis и Е. crescens.
Результаты молекулярного филогенетического анализа подтверждают тот факт, что виды Emmonsia и В. dermatitdis вместе с Н. capsulatum, P. brasiliensis и Lacazia loboi (не получена в культуре) являются членами одного клада. Несмотря на то, что внутренние взаимоотношения в кладе не полностью выяснены, Emmonsia и Blastomyces более близки друг к другу, чем любой из них к Н. capsulatum. P. brasiliensis и Lacazia lobboi более близки друг к другу, чем к другим грибам внутри клада. Arachnomyces, первоначально включенный в семейство Gymnoascaceae на основании формирования закрытых плодовых тел — клейстотециев, гладких аскоспор и круглых придатков, позже был исключен из семейства и, таким образом, вопрос о его точном систематическом положении остается открытым.
На сессию по геномике грибов I было представлено 6 докладов. В первом из них П. Т. Мэджи (США) остановился на сиквенировании генома Candida albicans — «одного из наиболее важных патогенов людей». Геном вида исследован многократно и собран в диплоидное состояние. Поскольку Candida albicans является диплоидом (W.L. Whelan, R.M. Partridge, Р. Т. Magee. Heterozigosity and segregation in Candida albicans. Molecular and General Genetics, 1980; 180: 107-113), не располагающим управляемым половым циклом, гетерозиготность значительно осложнила сборку диплоида. В итоге конечный диплоид в сборке содержал 412 так называемых «супер-смежников», в числе которых были 266 гомологичных пар.
Референтный гаплоидный геном, состоящий из 269 «смежников», был создан произвольно.
Строение Са ndida-иптро па подобно строению интрона у Saccharomyces. Почти половины открытых рамок считывания имели пары в геномах S. cerevisiae, S. pombe и в геноме человека, в то время как около 1/6 имели пары только в клетках двух видов дрожжей. Сходства и различия между S. cerevisiae и С. albicans могут быть рационализированы, исходя из их несходных условий жизни.
Доклад Терри Ретмер (Канада) был посвящен Candida albicans как модельному патогену на предмет открытия противогрибковых антигеномных лекарственных средств. Автор рассматривает С. albicans в качестве первичного грибкового патогена для людей.
Elitra Pharmaceuticals разработала функциональный геномный подход, основанный на сикве-
нировании генома диплоидной С. albicans и названный GRACE (Gene Replacement and Conditional Expression). Он был использован для испытания значения гена через комбинацию замещения гена и условной генной экспрессии (R. Haselbeclc, D. Wall, В. Jiang и др. Comprehensive essential gene identification as a platform for novel anti-infective drug discovery. Curr. pharm. Des.-2002; 8:1155-1172).
Густаво X. Голдман (Бразилия) сообщил о Paracoccidioides EST (Expressed Sequence Tag) геномном проекте. P. brasiliensis — термодиморфный гриб, являющийся причиной преобладающего числа системных микозоввЛатинскойАмерике — паракокцидиоидоза (паркокцидиоидомикоза). На основании полученных результатов сделано предположение о возможной консервации механизмов патогенности/ вирулентности среди грибов, значительно расширяя идентификацию генов у P. brasiliensis и обеспечивая более широкую базу для дальнейшего прогресса в понимании его биологических особенностей.
Анита Сил (США) сделала доклад об использовании геномики для изучения патогенности Histoplasma capsulatum и патогенеза гистоплазмо-за. Н. capsulatum клонизует макрофаги в период инфекции. Оксид азота (NO), образуемый инфицированными макрофагами, очевидно, является важным компонентом способности макроорганизма содержать в себе Н. capsulatum. Мутантная мышь, неспособная образовывать NO, оказывается много более чувствительной к заражению Н. capsulatum, чем ее дикий двойник. Хотя продукция NO является решающим фактором для контроля инфекции, тем не менее, иммунная система неспособна полностью элиминировать Н. capsulatum — дрожжевые клетки остаются в латентном состоянии в макроорганизме в течение многих лет. NO и его окисленные аддукты, вместе известные как реактивные интермедиаты азота (РИА), являются исключительно токсичными для большинства микробов. Как Н. capsulatum «избегает искоренения» реактивными интермедиатами азота? — остается тайной. А. Сил с коллегами предположили, что при экспозиции клеток Н. capsulatum с РИА происходит индукция транскрипции генов, требующихся для обезвреживания РИА. После выполнения специальных экспериментов авторы доказали наличие у Н. capsulatum P450nor гомолога (nitric oxide reductase), который был назван NOR1; это первый такой ген, найденный у патогена человека. Авторы предполагают, что Н. capsulatum имеет кооптированный Р450 nor ген для детоксификации NO, продуцированного активированными макрофагами в течение инфекции.
На данной сессии были представлены два доклада по Cryptococcus neoformans.
Р.Х. Браун (Великобритания) доложил материалы по «генному предсказанию и резюме по С. neoformans». Генное предсказание может значительно сократить время и затраты труда, необходимые для сиквенирования белок-кодирующих генов,
благодаря обеспечению информации с достаточно высокой степенью аккуратности, чтобы определить большинство экзонов, кодирующих особый белок. С такими предсказаниями могут быть созданы ПЦР-праймер-пары, чтобы охватить кодирующую последовательность для целого белка.
Созданное «генное предсказание» на гибком диске было названо Twinscan. Его основные характеристики объединяют сайт сплайсинга и кодирующий регион признания с гомологией между родственными организмами. Из криптококков были использованы С. neoformans серотип D штамм JEC21 датабаза из института геномных исследований (TIGER) в качестве геномной мишени, и С. neoformans серотип А штамм Н99 из Дюкского Университета, чтобы обеспечить гомологию. Текущими предсказаниями определили более 4200 генов у С. neoformans (в среднем 6 экзонов приходится на 1 ген). Сравнение с TIGER-аннотациями на 431 ген показывает, что более 80% индивидуальных предположительных экзонов содержат корректно предсказанные объединённые донорский и акцепторный сайты. Исследования в этом направлении продолжаются.
Дженифер К. Лодж выступила с докладом «Пост-геномные подходы для открытия генов вирулентности у Cryptococcus neoformans».
Д. К. Лодж с коллегами исследовала двухмерным гель-электрофорезом экспрессию некоторых белков штаммом С. neoformans, выращенным при 37 °С и 25 °С. MALDI-TOF анализом и «sequence homology» на других видах показано, что два экспрессированных белка являлись пероксидазами и относились к семейству тиоловых специфических антиоксидантов (TSA). Затем авторы экспериментально доказали важность тиоловых пероксидаз в проявлении вирулентности грибным патогеном.
Третья сессия «Результаты диагностики инвазивных микозов» началась с выступления Варнока (США). Д.У. Варнок в докладе «Промахи и вознаграждения в ранней диагностике грибковых заболеваний» отметил важность ранней диагностики при аспергиллезе и кандидозе у пациентов с разными трансплантатами и относимых в группу иммуно-компрометированных. Лечение больных с высоким риском развития аспергиллеза обычно проводят эмпирически амфотерицином В, опираясь лишь на клинические данные. Хотя условные диагностические тесты (микроскопические и культуральные) остаются краеугольными в микологическом диагнозе, их рейтинг у иммунокомпрометированных пациентов остается низким, а вклад в принятие клинического решения ограниченным.
Некоторый прогресс в ранней диагностике инфекций в последние годы, например, таких как инвазивный аспергиллез, большей частью был связан с использованием высокоразрешающей компьютерной томографии (КТ), сканирующих и других процедур, а не с развитием лабораторных тестов. Тем не менее, отмечает докладчик, «поиск более
быстрых, чувствительных и специфических методов продолжается». Среди них наиболее обещающим он называет определение грибных антигенов и детекцию грибных геномных последовательностей, используя ПЦР. И все же цель создания быстрых, простых и не затратных лабораторных методов (тестов) для ранней диагностики опасных для жизни пациентов грибковых инфекций остается неясной. «Хочется надеяться, — заключил докладчик, — что технологические подвижки, имеющие место в этой области, приведут вскоре к улучшениям в ведении пациентов с этими заболеваниями».
В сходном контексте выступил и Холгер Хебарт (Германия) с докладом «К вопросу о молекулярной диагностике инвазивного аспергиллеза». Докладчик отметил, что, наряду с другими авторами, он и его коллеги доказали полезность ПЦР как быстрой, чувствительной и специфической реакции для определения и идентификации различных известных и вновь появляющихся грибных патогенов. При этом ДНК экстрагировали из различных клинических материалов, включая цельную кровь, сыворотку крови, плазму, образцы тканей и спинномозговую жидкость, бронхо-альвеолярные промывные жидкости. Этим доказывали реальность детекции ДНК, освобожденной из клеток патогена in vivo. Автор с уверенностью считает, что новые «подвижки» в совершенствовании вариантов ПЦР и биотехнология с использованием ДНК-чипов (см. Ж. Проблемы медицинской микологии, 2000.- Т.5, №1, с.17) вскоре достигнут рутинных микробиологических лабораторий.
X. Киндос (Испания) сделал доклад на тему: «Имеет ли какое-либо значение определение антител? Инвазивный кандидоз как парадигма». Определение антител для диагностики инвазивных микозов снизилось в течение последних десятилетий, поскольку сложилось общее мнение, что использованные методы не чувствительны и не специфичны, однако, существует четкое представление о том, что антитела могут быть определены у пациентов с выраженными иммун о дефицитами (например, такими как реципиенты костно-мозговых трансплантатов).
В настоящее время определение антител с диагностическими целями проводят при некоторых первичных микозах (гистоплазмоз, паракокцидиоидомикоз, бластомикоз и кокцидиоидоз). Важную роль играет детекция антител при аспергил-ломе, аллергическом бронхо-легочном аспергиллезе и споротриксозе.
По данным Г. Киндоса, одни авторы сообщали о высокой специфичности (97,2%) и умеренно высокой чувствительности (64,3%) маннана у имму-нокомпетентных пациентов в ELISA-тестах (Platelia Candida Ab, Bio-Rad, Франция) с сыворотками крови. Другие авторы пишут о более низких показателях чувствительности (59,0 до 90,9%) и специфичности (18,4 до 63,1%) при использовании этих же и других коммерческих тест-систем (Candiquant, Biomerica,
США; Candida albicans ELISA, Virotech GmbH, Германия).
Применение в качестве антигенов ферментативно активных субстанций (энолазы, аспартилпротеина-зы и металлопептидазы) оказалось не равнозначным по результатам, а коммерческие «киты» для этого еще не разработаны.
Маннопротеин с молекулярной массой 230-250 кДа, локализующийся на поверхности клеточной стенки ростковых трубок, реагировал с сывороткой крови от пациентов с инвазивным кан-дидозом. Докладчик и его сотрудники разработали непрямой иммунофлуоресцентный метод определения антител (CAGTA) к названному выше антигену. Данный метод оказался полезным при диагностике инвазивного кандидоза у различных групп пациентов, включая наркоманов, использующих героин внутривенно, реципиентов трансплантатов костного мозга, пациентов с гематологическими нарушениями и пациентов в ОРИТ.
Тест проявил общую чувствительность от 77 до 89%, а специфичность — от 91 до 100%. Определение CAGTA у пациентов с инвазивными инфекциями, вызванными другими видами Candida (не С. albicans) — С. tropicalis, С. parapsilosis, С. gla-brata, С. dubliniensis, С. guilliermondii и С. krusei, может быть также позитивным, хотя титры ниже, чем при кандидозе, вызванном С. albicans. С. albicans IFA IgG (Vircell Laboratories, Испания) недавно был коммерциализирован для CAGTA-определения.
Дж. Питер Донелли (Нидерланды) выступил с докладом о привлечении и возможностях суррогатных маркеров к планируемым испытаниям. Такие суррогатные маркеры могут помочь прояснению задуманного плана. Как пример названы С-реактивный белок (CRP), ПЦР для определения грибной ДНК, обнаружение галактоманнана в БАЛ и крови в целях подтверждения наличия аспергиллеза.
Малком Ричардсон (Финляндия) остановился на будущих направлениях в развитии методов молекулярных исследований и, прежде всего, на технологии с использованием ДНК-чипов (см. обзор «Биочипы в эксперименте и практическом применении, ранее опубликованный в Ж. Проблемы медицинской микологии, 2000.- Т.5, № 1, с.17-20).
На параллельной сессии по врожденному иммунитету были представлены интересные материалы Даниэлем Пуленом (Франция), Артуро Касадо-валлом (США), Томасом Р. Козелом (США), Полом Л. Фриделем (США), и Скоттом Г. Филлером (США). Первый из них доложил о кандидозном фосфолипоманнане — молекуле, которая уравновешивает активацию клеток организма-хозяина через так называемый toll-like («предупреждающий» рецептор 2 и апоптоз). В первой части доклада рассмотрены (3-1,2-связанные олигоманнозиды Candida albicans и их функция в клетках-хозяевах. Вторая часть посвящена фосфолипоманнановой (PLM) молекуле, экспрессирующей (3-1,2-маннан на повер-
хности клеточной стенки С. albicans. В третьей части доклада рассмотрены PLM триггеры двух базовых сигнализирующих путей макрофагов, ответственных за инфекцию.
А. Касадевалл затронул СКЗ-опосредованный фагоцитоз Cryptococcus neoformans в присутствии и отсутствии комплемента. Докладчик сообщил о механизме С-независимого, IgM-опосредованного фагоцитоза и пояснил штаммную вариабельность, наблюдаемую при С-опосредованном фагоцитозе.
Т. Р. Козел рассмотрел значение комплемента в природной резистентности к грибковой инфекции.
Противокандидозная активность оральных и вагинальных эпителиальных клеток затронута в докладе П. Л. Фиделя. В разрезе этой же темы был заявлен доклад Г. Филлера.
На послеобеденных сессиях 26 мая 2003 г. по моделям на животных выступили: Кокс (США), Л. де Репентиньи (Канада), К. В. Клемонс (США), Б. Мерад (США).
В порядке очередности ими рассмотрены модели криптококкоза у животных в аспекте изучения патогенеза и проверки антифунгальных агентов; патогенез кандидоза слизистых оболочек у ВИЧ-транс-генных мышей; модели кокцидиоидного менингита в аспекте оценки патогенеза; и, наконец, модель инвазивного легочного аспергиллеза у мышей с ней-тропенией.
На параллельной сессии «Грибная геномика II» были представлены следующие доклады:
1) «Наличие метаболических путей в геноме Pneumocystis: представления о жизненном стиле» (М. Кашьон, США);
2) «Сиквенирование генома Coccidioides pasada-sii» (Т. Н. Кёркланд, США);
3) «Геномный проект по Aspergillus fumigatus» (М. Дж. Андерсон, Великобритания);
4) «Выуживание рыбы»: вычислительные стратегии обнаружения генов у Pneumocystis и других грибных геномов» (Дж. Миллер, США);
5) «Объединение навыков LEGOS: значение в сик-венировании и сборке генома Pneumocystis carinii» (Б. Е. Славен, США).
М. Т. Кашьон представила данные о Pneumocystis carinii и Encephalitozoon cuniculi. Оба представителя относят к царству Fungi, причем это сделано в отношении Е. cuniculi совсем недавно (в 2002 г. см. Vivares С. P. et al. Functional and evolutionary analysis of a eucaryotic parasitic genome. Curr. Opin. Microbiol. 2000; 5: 499-505). Pneumocystis spp. находятся вне-клеточно в альвеолах легких почти у каждого вида млекопитающих. Они как оппортунистические виды могут вызвать летальную пневмонию в случаях ослабления иммунной системы (иммунодефициты). Оба объекта не могут поддерживаться на питательных средах или в культурах клеток внелегочно.
Геном P. carinii сиквенирован и картирован. В нем найдено 8,0 Мвр оснований (см. http:// www.pneumocystis.uc.edu).
Микроспоридии Е. cuniculi вызывают различные заболевания у разных организмов, включая насекомых и млекопитающих. Они — облигатные паразиты, не размножающиеся вне организма-хозя-ина. У Е. cuniculi — амитохондриального паразита человека было найдено в геноме 2,9 Мвр оснований (см. Katinka M.D. et al. Genome sequence and gene compaction of the eukaryote parasite Encephalitozoon cuniculi. Nature. 2001; 414:450-453).
Сравнением геномов у двух названных патогенных организмов с геномом свободно живущего Sac-charomyces cerevisiae показана непрерывность метаболической емкости, генного ряда и размера генома, которые коррелировали с экологическими нишами этих микробов.
Из доклада Т.Н. Керкланда следует, что Coccidioides pasadasii и С. immitis имеют геномы из 28 Мв, расположенные в 4-х хромосомах. Полагают, что оба вида гаплоидные в мицелиальной и сферульной фазах роста. Докладчик подчеркнул особый интерес, проявляемый им к антигенноактивным белкам, располагающимся на поверхности сферульной фазы или секретируемым вовне — как потенциальным кандидатам на приготовление вакцин при кок-цидиоидозе. В связи с этим были исследованы 3 гена — гомологи аллергенов из Trichophyton rubrum и Aspergillus fumigatus. Во всех трех случаях RT-PCR из сферульной мРНК удачно амплифицировали предсказанную последовательность. Белки, закодированные этими генами, были экспрессированы и тестированы как антигены на мышах.
М. Андерсон в своем докладе о геномном проекте по Aspergillus fumigatus указал, что проект был инициирован в 1999 г., и он является международным с двумя основными центрами: 1) Wellcome Trust Sanger Institute (Neil Hall) и The Institute for Genomic Research (TIGR) (William Nierman). Большинство процессов сиквенирования и структурирования библиотеки было выполнено в этих двух центрах. Другими учреждениями, вовлеченными в проект, являются Манчестерский Университет (Давид Деннинг), испанский консорциум (сообщество), возглавляемый Университетом в Саламанке (Мигель Санчес-Перез), который генерировал выраженные сиквенирован-ные штампы (expressed sequence tags, EST) и случайные геномные сиквенсы, а также французский консорциум, возглавляемый институтом Пастера (Frank Kunst), где сконструирована одна из бактериальных искусственных хромосомных (ВАС) библиотек. Фондирование проекта обеспечили Wellcome Trust (Великобритания), National Institute of Allergy and Infections Diseases (США), и Fondo Investigations Sanitarias (Испания). Проект находится в финальной стадии завершения. Есть надежда, что большинство теломеров будет идентифицировано и что сиквенс,
по крайней мере, одного центромера будет определен.
Милер и Славен, в унисон с Кашьон, Коркландом и Андерсоном, доложили: о геномном проекте Pneumocystis carinii, основанном в 1999 г. с целью создать физическую карту, EST-датабазу и собранный ДНК-сиквенс для названного патогена; а также о методах и средствах сборки генома того же патогена. Исследования находятся в развитии.
Пять докладов было сделано на сессии по эпидемиологии грибковых инфекций. Первой выступила Рана Хаджих (США) о грибковых заболеваниях в аспекте текущих тенденций и результатов, важных для здравоохранения различных стран, включая развитые и развивающиеся. При этом ею было обращено внимание на финансовую сторону проблемы разработки стратегии профилактических мероприятий впредь.
Второй докладчик — Стивен М. Тиутш (США) рассмотрел бремя грибкового заболевания и пользу его экономической оценки. Докладчик затронул такие вопросы как:
— насколько велика проблема?
— возможности предотвращения возникновения этой проблемы и др.
Ссылаясь на Уилсона с сотрудниками, Тиутш указал, что прямая стоимость системных грибковых инфекций в США в 1998 г. была следующей:
Заболевание Число больных Цена в больнице (млн.$) Цена амбулат. 6-х (млн. $) Всего (млн.$)
Кандидоз 61680 971 728 1699
Гистоплазмоз 3681 4 49 53
Аспергиллез 9261 352 323 674
Криптококкоз 7987 58 93 151
Всего 82609 1385 1193 2577
В завершающей части доклада Тиутш обсудил «понимание и использование экономических оценок».
Нина Синг (США) в своем выступлении затронула возникающие тенденции при грибковых инфекциях у пациентов с трансплантатами: изоляция иных видов аспергиллов (кроме A. fumigatus) и других плесеней (кроме Aspergillus spp.) примерно в 30% случаев от всех инвазивных грибковых инфекций, и это были представители зигомицетов и другие темноокрашенные виды грибов; она коснулась также возросшей частоты инвазивных С a ndida - и п фе к -ций, вызванных не С. albicans видами у пациентов с трансплантатами.
Дж. И. Паттерсон (США) проинформировал о двух руководствах по предупреждению грибковых инфекций. Одно из них, изданное в 2000 г. CDC, является руководством по предупреждению оппортунистических инфекций у пациентов с трансплантатами гемопоэтических клеток; в 2003 г. будет опубликовано современное руководство по предупреждению грибковой пневмонии у иммунокомпро-метированных пациентов.
Мэри Брандт (США) выступила с докладом о роли микологической лаборатории в эпидемиологических исследованиях. Она остановилась на необходимости и важности идентификации до вида выделенных культур от пациентов и из окружающей среды различными методами. Как на редком случае она остановилась на случае криптококкоза с приобретенной резистентностью возбудителя к азолам.
В исследованиях, проведенных с участием Брандт в Сан-Франциско, было документировано, что только около 25% филаментирующих грибковых изолятов, обнаруженных на стерильных местах тела, могли быть связаны с серьезными клиническими заболеваниями.
В параллельной сессии «Грибы и клетки при врожденном иммунитете» были представлены 4 доклада. В первом из них Стюарт М. Левитц (США) рассмотрено взаимодействие дендритных клеток с маннопротеинами Cryptococcus neoformans. Исследования были начаты с тем, чтобы определить механизмы, ответственные за выраженную иммуностимулирующую активность маннопротеина. Сделано предположение о том, что маннозные рецепторы на дендритных клетках эффективно связывают и ин-тернализуют маннопротеин, приводя к презентации антигена и инициации эффективного Т-клеточного ответа.
Эммануэль Роплиндес (Греция) доложил о комбинированных эффектах фагоцитов, антифунгальных лекарств и цитокинов против Aspergillus fumigatus и других медицински важных грибных патогенов (.Scedosporium prolificans, S. apiospermum, Fusarium solani). В докладе обозрены, в основном, данные, полученные при участии докладчика и опубликованные в литературе за 1998-2002гг.
Симон Ньюмен (США) и Майкл Лоренц (США) выступили: первый — по дифференциальному взаимодействию Histoplasma capsulatum с макрофагами и дендритными клетками, второй — о взаимодействиях фагоцитов с Candida albicans с учетом генома клеток.
На третьей параллельной сессии «Микозы в Азии» с докладами выступили:
1) К. Нисимото (Япония), очертивший проблемы, связанные с микозами в Азиатских странах;
2) Й. Миядзаки (Япония) — «Оппортунистические грибковые инфекции в Японии»;
3) Р. Ли (Китай) — «Глубокие микозы в Китае» (представлен Г. Балмером);
4) Р. Унгпакорн (Таиланд) — «Penicillium marnef-fei»;
5) Г. Балмер (Филиппины) — «Состояние медицинской микологии в развивающихся странах Азии»;
6) Байюнг-Ин Ро (Южная Корея) — «Импортированные микозы».
В тот же день 26.05.03 г. состоялись еще 3 конкурентных (параллельных) сессии, начинавшиеся
мини-лекциями и устными выступлениями по 15 минут.
На сессии I по прикладной микологии с минилекцией выступил Л. П. Самараньяке (Китай, Гонконг) на тему: «Микозы ротовой полости (новые представления и терапевтические направления».
По генетике и эпигенетике лекарственной резистентности у Candida albicans выступила Р. Фан-дига (США); от группы исследователей из Испании выступил М. К. Эстрелла с докладом «Корреляция между предложенной процедурой тестирования ан-тифунгальной активности Европейским Комитетом по антибиотической чувствительности к антибиотикам (EUCAST), микро-методом NCCLS и двумя коммерческими методами Е-тест и Sensititre дрожжевой метод».
С. П. Сэвилл (США) доложил об in vivo анализе роли морфогенетической конверсии вирулентности у Candida albicans.
А. Косте (Швейцария) представил материалы о микроанализе Candida albicans, обработанной лекарствами, индуцирующими резистентность, включая мультирезистентность. При этом становятся задействованными соответствующие гены CDR1 и CDR2 (Candida Drug Resistance 1 и 2) и CaMDR ('Candida albicans MultiDrug Resistance 1).
П.Д. Роджерс (США), К. С. Баркер (США) и Й. Моршхёйзер (Германия) рассмотрели профиль геномной экспрессии, координированно регулируемой геном MDR1 (MultiDrug Resistance), в связи с приобретением клиническими изолятами С. albicans резистентности к флуконазолу.
Т. Уайт (США) заключил данную сессию минилекцией «Генетика лекарственной резистентности и регуляция».
На конкурентной сессии I по фундаментальной микологии мини-лекцию прочитал Г. С. Мэй (США) на тему «Молекулярно-генетический анализ генной функции у Aspergillus fumigatus», другие доклады заявлены: Хонгбо Ли (США) о Wangiella (Exophiala) dermatitidis, ее хитин-синтазе как существенном факторе вирулентности и поддержании вагинальных секретов; С. Юнгчим (Великобритания) о мелани-зации патогенных грибов, особенно — у Aspergillus fumigatus и Penicillium marneffei; А. Литвинцевой (США) о значительной части клинических изолятов Cryptococcus neoformans var. grubii (серотип А) из Африки, обладающих аллелем МАТа типом спаривания; Дж. Рамос (США) о лакказе у авирулентного штамма Cryptococcus neoformans; Р.Е. Марра (США) о картировании генома С. neoformans var. neoformans; С. Келлер (Италия) об изолятах С. neoformans серотипа А: конгенные пары из двух линий.
На конкурентной сессии I по клинической микологии: вклад в диагностику и лечение мини-лекцию «Оценка in vitro и in vivo использования полиен-ин-тралипидных смесей против инфекций, вызванных Candida и Aspergillus, прочитала Э. Сегал (Израиль); последующими докладчиками были: Д. Римек
(Германия) — о маннановом антигене Candida; Т. Харрисон (США) — о комбинированной анти-грибковой терапии ВИЧ-ассоциированного криптококкового менингита; Р. Пиару (Франция) — о лечении кандидоза у критически больных хирургических пациентов.
Из представленных данных по сессиям, проведенным 26 мая 2003 г., видно, что насыщенность повесток заседаний в последующие дни, очевидно, будет равно чрезмерной. Так, 27 мая 2003 г. в 6— утра был проведен симпозиум, поддержанный фирмой «Pfizer Inc.», с 8Ш до 11— проведены 4 конкурентные (параллельные) сессии:
1) Определение чувствительности и корреляция данных, полученных in vitro/ in vivo.
2) Факторы вирулентности грибов.
3) Грибковые инфекции при трансплантации.
4) Протективные антитела.
На первой сессии выступили 5 докладчиков с 30минутными сообщениями; на второй сессии выступили 6 докладчиков с 25-минутными сообщениями; на третьей сессии с 40-минутными докладами выступили 4 человека; на 4 сессии было заслушано 5 получасовых докладов.
В 11— до 12— были проведены устные и стендовые доклады по клинической микологии — сессия II и грибковой иммунологии, а с 1271 состоялся симпозиум, поддержанный «Fujisawa Healthcare Inc.»
Послеполуденные 5 сессий были проведены с 15т до 17т. Тематика их была следующей:
1) Ветеринарная микология (4 доклада);
2) Эволюционная и популяционная генетика (6 докладов);
3) Микозы возрастающей значимости (4 доклада);
4) Иммунные ответы у людей (4 доклада);
5) Новые агенты/ новый выбор антимикотиков (5 докладов).
В докладе Ф. Бранкиези на первой сессии подчеркнуто, что корреляция между чувствительностью дрожжей к эхинокандинам и клиническим исходом заболевания еще не установлена; сравнивая эффективность каспофунгина и амфотерицина В при инвазивном кандидозе, было показано, что исход лечения не был предсказан определением активности каспофунгина (MIC) по методу NCCLS. Корреляция между антигрибковой чувствительностью (по результатам ее определения) и клиническим исходом инфекций, вызванных филаментирующими грибами, остается мало определенной для всех лекарств.
Фактически подобный вывод сделала А. В. Эспай-нел Айнгроф (США), доложившая о NCCLS методах для определения чувствительности плесеней к анти-микотикам и альтернативных подходах.
О чувствительных и резистентных видах Candida при кандидемии за 10-летний период доложил М.А. Пфалер (США). Проанализирована чувствительность in vitro 6082 изолятов из крови, собранных из 250 медицинских центров с 1992 по 2001гг. Об-
щий главный вывод докладчика: «Эти наблюдения, в основном, ободряющие относительно устойчивой полезности флуконазола как системного противогрибкового агента для лечения кандидемии».
А. Ф. Форсгилл (США) доложила результаты определения чувствительности грибов к комбинированным друг с другом антимикотикам (азолов с амфотерицином В, каспофунгином, тербинафином и каждого — друг с другом). Она выявила комбинации синергитические, аддитивные, индифферентные и антагонистические. Автор указывает, что результаты заметно вариабельные, что зависит от изолята патогена и определяемой комбинации препаратов. На результаты влияли также используемые питательные среды.
Отчасти в унисон с данными Форсгилл находятся результаты X. Л. Родригеса-Тудела (Испания).
Доклады на второй сессии несомненно интересны для специалистов-микологов, поскольку они дают представление о глубине и широте познания грибов-патогенов: Histoplasma capsulatum (фазоспецифические гены вирулентности вида, доклад У.Н. Голдмана, США); Coccidioides immitis (GPI-за-якоренный антиген на клеточной поверхности привносит свой вклад в вирулентность патогена, доклад Г. Т. Коула, США); Cryptococcus neoformans (важность МАТа феромонового рецептора у С. neoformans, докладчик — Й. Чанг, США); Candida albicans (молекулярные механизмы, лежащие в основе кандидеми-ии, доклад М. Хостеттер, США); Aspergillus fumigatus (биосинтез меланина и вирулентность патогена, доклад А. Б. Бракаге, Германия); Pneumocystis carinii (сигналы у патогена, опосредованные присоединением к другим структурам, доклад Дж. Смульяна, США).
На 3-ей сессии по грибковым инфекциям при трансплантации выступили, в основном, американские исследователи — Д. Патерсон, Л. Баден, Б. А. Лодж и Бен Е. де Поу из Нидерландов. В материалах докладчиков поставлены проблемы, хорошо известные отечественным специалистам.
4-ая сессия всецело была посвящена протектив-ным антителам. На ней выступили Дж. Носанчук из США («Защищенные антитела Histoplasma capsulatum»), Ф. Дромер из Франции («Защищенные антитела в течение криптококкоза»), А. Хармстен из США («Роль антител в устойчивости к пневмонии от Pneumocystis carinii»); Л. Полонелли из Италии («Противогрибковые защитные антиидиотипические антитела и мимотопы»), Дж. Л. Лопез Рибот из США («Защитные антитела в течение кандидоза»).
В четырех докладах на сессии по ветеринарной микологии были затронуты немногие темы, что свидетельствует о недостаточном привлечении специалистов — ветеринарных микологов к проблеме микозов у животных и их возбудителям. Однако существуют и свои особенности в ветеринарной микологии, например, Candida spp. являются важной причиной нозокомиальных инфекций у людей,
особенно — в ОРИТ, а в ветеринарии вклад видов Candida в подобных ситуациях минимален. Или другой пример со СПИД у людей, на фоне которого возникают или могут возникнуть разные грибковые заболевания; у животных такой проблемы нет, хотя у кошек обнаружен свой (кошачий) иммунодефицит -ный вирус.
На сессии по эволюционной и популяционной генетике выступили: К. О’Донелл (США) — по филогенетическому разнообразию медицински важных фузариев, Т. Л. Даусон (США) — о грибах рода Malassezia, В. Мейер (Австралия) — о Cryptococcus neoformans, Ф. Симоен (Бельгия) — о генетическом полиморфизме Aspergillus species при заболевании человека, М. Р. Мак Джиннис (США) — об эволюционной биологии дерматомицетов, К. Дж. Моррисон (США) — о молекулярной идентичности видов Candida.
Продолжением перечисленных тем были доклады на 7-й сессии «Микозы возрастающей значимости». Так, М. Нуччи (Бразилия) сообщил о Fusarium и других гиалогифомицетах (Acremonium spp., Sce-dosporium spp.), С. К. Реванкар (США) — об опако-(фео)гифомикозе (термин «феогифомикоз» введен Л. Аелло с сотр. в 1974г. для обозначения инфекций, вызванных темно окрашенными, или пигментированными нитчатыми грибами, содержащими меланин в своих клеточных стенках); С. У. Реддинг (США) — о появляющихся дрожжевых патогенах (не albicans видах Candida), X. Гролл (Германия) — о новых и заново появляющихся зигомицетах (в двух порядках — Mucorales и Entomophthorales).
На 8-й сессии речь шла об иммунных ответах у людей, в частности, при кокцидиоидозе (Н.М. Ампел, США), на капсульный материал — при криптокок-козе (А. Веккиарелли, Италия), при кандидозе и ас-пергиллезе в случаях иммунодисрегуляции (Т. Дж. Уэлш, США); последний доклад на сессии сделал Дж. Д. Клири (США) о фармакогеномных ответах у пациентов с диссеминированным кандидозом.
На 9-й сессии речь шла о новых триазолах (К. А. Марр, США), о вкладе эхинокандинов в управление инвазивных грибковых инфекций (Дж. Маиртенс, Бельгия), о контаминирован-ной антифунгальной терапии, базирующейся на эхинокандине (Ф.К. Оддс, Великобритания); о планировании антифунгальных клинических испытаний (Дж. X. Пауэрс, США), о новых агентах: антимикотиках, которые пока еще не вполне там, но могут быть скоро (Дж. Р. Пёрфект, США); в этом последнем докладе обращено внимание на три группы перспективных веществ. В первой группе названы азоловые компоненты — позаконазол, равуконазол и альбаконазол (широкоспектральный антимикотик, включая его активность против Cryptococcus neoformans); во второй группе указаны эхинокандины — блокаторы синтеза (3-1,3-глюкана, в том числе — микофунгин и анидулафунгин; в третью группу включен PLD-118, ингибирующий изо-
лейцил-тРНК. Он безопасен и, как полагают, будет назначаться per os для лечения кандидоза.
27 мая 2003 г. состоялись также устные презентации в конкурентной сессии II по клинической микологии. Мини-лекцию прочитал А. Л. Коломбо (Бразилия) на тему: «Глобальный вклад изменяющейся эпидемиологии инвазивных микозов»; с устными докладами выступили:
1) Р. Нир-Паз (Израиль) — о клинических и эпидемиологических аспектах инфекций, вызванных Fusarium species в Израиле. За 10 лет были изолированы фузарии от 89 пациентов, среди которых 68 были иммунокомпетентными. Большинство пациентов — из сельских местностей, они приобрели фузариозы летом. Ассоциация инфекций глаз и легких в этот сезон отражает воздушный способ заражения и распространения конидий Fusarium;
2) Т. Кларк (США) с коллегами из США и Нидерландов доложил о группе инфекций, вызванных Phialemonium sp. среди пациентов с гемодиализом; причина инфекции — водные источники;
3) К. Нгуен (Австралия) сообщил об изучении кандидемии в Австралии;
4) С. Вебер (Бразилия) доложил о паракокциди-оидозе у пациентов с дисфонией и ларингеальными приступами. Морфлогическое и фониатрическое изучение.
В параллельной оральной сессии «Иммунология в микологии» 27.05.03 г. заявили доклады:
1) К. Р. Касере (Испания) «GP43, главный антигенный компонент Paracoccidioides brasiliensis, индуцирует апоптоз ( !1.)4+Т-клетки у пациентов с активным паракокцидиоидозом»;
2) P.M. Занкопе-Оливейра (Бразилия) «Структурная характеристика М антигена Histoplasma сар-sulatum»;
3) Уезу Каори (Япония) «Кинетика и роль гамма дельта Т-клеток в легких мышей, инфицированных Cryptococcus neoformans»;
4) Ф. Боттере (Франция) «Фагоцитоз конидий Aspergillus jumigatus эпителиальными клетками дыхательных путей человека»;
5) A. Е. Каро (Колумбия) «Взаимодействие между ламинином и конидиями Paracoccidioides brasiliensis»;
6) Дж. Тиерри (Франция) «Укрытие Candida albicans от макрофагов индукцией клеточного апоптоза посредством регуляции ошибочного фосфорилиро-вания».
28 мая 2003 г. состоялись 8 параллельных сессий:
1) По грибным биопленкам;
2) По биохимии;
3) По аспергиллезу как рефрактерному микозу;
4) Иммунитет слизистых оболочек;
5) Грибная и наша окружающая среда: микотоксины и так называемый «синдром больного здания»;
6) Сигнализирование;
7) Новые направления по главным эндемическим микозам;
8) Клеточный иммунитет.
Из них 5-8 сессии проводились в послеполуденные часы (с 14s0 до 17—); утренние сессии — с 8й до 10ш. С 10ш до 11ш состоялось ключевое выступление Дж. X. Рекса на тему «Будущее медицинской микологии: клиническое обозрение», с 11— до 12—
— ключевое выступление Г. Р. Финка на тему: «Будущее медицинской микологии: молекулярные перспективы». 28.05.03 г. с 121,0 состоялся симпозиум, поддержанный «Merc & Co. Inc.».
На первой сессии по грибным биопленкам с обзорным докладом выступила Дж. Дуглас (Великобритания). Она затронула основные проблемы с биопленками, развитые также последующими докладчиками: Р. К. Мукерджи (США), рассмотревшего структуру и развитие биопленок представителями рода Candida; Г. Рамадж (Канада), доложившего о резистентности Candida-биопленок к антими-котикам; У.Л. Чаффин (США) — о генной экспрессии у биопленок С. albicans; X. С. ван дер Мей (Нидерланды) — об образовании биопленок на голосовых протезах. Естественно, что рассмотренные на этой сессии материалы не охватывают в достаточной полноте всех проблем с биопленками, например, качество и формы материалов, на которых формируются биопленки, особенности взаимодействия анти-микотиков с материалами и биопленками, равно как и механизмы резистентности грибов в биопленках к антимикотикам, о биопленках из микст-микробиоты и т.д.
Сравнительно ограниченная тематика была на конкурентной второй сессии «Биохимия», где выступили:
1) Питер Р. Уильямсон (США) с докладом о новых регуляторах лакказы у Cryptococcus neoformans;
2) Брайан Уонг (США) с докладом о белковых траффике (движение — Н.Е.) и процессинге у Candida albicans;
3) Дж. Пол Латже (Франция) — о клеточной стенке Aspergillus fumigatus: состав, биосинтез и роль в патогенности гриба;
4) Тамара Л. Дёринг (США) — о синтезе и сборке капсулы у Cryptococcus neoformans;
5) Луис Л. Хойер (США) — об ALS-генном семействе у Candida albicans (agglutinin — like sequence); см. также http://www-sequence. Stanford, edu/ group/ Candida;
Третья конкурентная утренняя сессия полностью была посвящена рефрактерному аспергиллезу. Стюарт М. Левитц (США) представил доклад «Защита макроорганизма-хозяина вне фагоцитов». Здесь учтены возможные механизмы выключения бронхоальвеолярных; макрофагов и процесса фагоцитооз из-за нейтропении и других причин.
Илья Дж. Энайсси (США) говорил об эпидемиологии и, в том числе, об изменениях в последнее десятилетие.
Пол Н. Вервейдж (Нидерланды) остановился на ранней диагностике инвазивного аспергиллеза.
С учетом состояния проблемы, автор отметил нужду в новых диагностических методах, которые были бы включены в текущие диагностические стратегии.
Томас Дж. Уэлш (США) остановился на противогрибковых агентах для лечения аспергиллеза: «Один калибр не решает все».
На четвертой параллельной утренней сессии «Иммунитет слизистых оболочек» были представлены доклады о защите макроорганизма против Candida на уровне слизистых оболочек ротовой полости и вагины (Пол. Л. Фидел, США); о роли дендритных клеток в моделировании Т1 против Т2 легочного иммунитета в течение криптококковой инфекции (Эми К. Херринг, США); о манипулировании тканевыми иммунными реакциями на Pneumocystis carinii (Джадд Н. Шелитто, США); о легочном иммунитете против Paracoccidioides brasiliensis (Луц Елена Кано, США); уравновешивание врожденных и приобретенных иммунных реакций: уроки, преподанные дымчатым аспергиллом (Кори М. Хогабоэм, США).
Пятая конкурентная сессия 28.05.03 г. была посвящена микотоксинам и так называемому «синдрому больного здания».
По этому поводу см. также журналы «Микология и фитопатология», 1999, том 33, в. 2, стр. 130-133 и «Проблемы медицинской микологии», 2002, Т.4, №4, стр.3-7. Материалы, доложенные на данной сессии Дж. Д. Миллером, Д. Г. Диаборн, Б. Жарвисом, Т. Рэндом и Дж. А. Питтом, в основном, известны нашим специалистам, однако, российские авторы монографических работ, очевидно, мало известны или совсем неизвестны американским коллегам. Более того, фактический материал о sick building syndrome, достаточно хорошо рассмотренный немецкими исследователями во главе с доктором X. Г. Ньюмайстер, почти не затронут на этой сессии.
Шестая сессия «Сигнализирование», по существу, продолжает тематику о взаимодействии клеток (см., например, послеполуденную 8-ю сессию 26.05.03 г. «Грибы и клетки при врожденном иммунитете»). Здесь выступили М. Уайтивей (Канада), Дж. Хейтман (США), А. Митчелл (США), Дж. У. Кронстад (Канада), А. Дж. П. Браун (Великобритания), Э. Алспаф (США).
Первый из них доложил о молекулярном анализе морфогенеза и взаимодействии Candida albicans (патоген) с организмом хозяином (макрофаги мыши). Установлено, что при этом вовлекаются сложные и интерактивные транскриптивные ответы.
Второй докладчик рассмотрел МАТа и а типы Cryptococcus neoformans как модельного патогена. Были определены кальциневриновый, МАП киназный и цАМФ каскады, которые контролируют вирулентность и спаривание криптококков.
Третий докладчик коснулся лекарственной резис-тености у Candida species, указав на то, что «старая стратегия привносит новые гены». На основании результатов инсертионного мутагенеза С. albicans
автор сообщил об открытии генов вирулентности у этого «асексуального диплоида».
Доклад Дж. У. Кронстад был посвящён «SAGE программе (Serial Analysis of Gene Expression) для объяснения сигнализирования у Cryptococcus neoformans».
В пятом докладе речь шла об интеграции морфогенеза с другими клеточными реакциями у Candida albicans. Автором установлено, что аминокислотное голодание стимулирует псевдогифальный рост у Candida albicans, синтез ферментов и изменения в углеродном метаболизме.
Последний доклад на данной сессии был связан с генетическим анализом G-протеинового сигнализирования у Cryptococcus neoformans. Автором было отмечено, что им проведено определение путей внутриклеточного сигнализирования у патогена, которое регулируется гуанин-нуклеотид-связыва-ющими белками (G-протеинами) и контролирует клеточную дифференциацию так же, как экспрессию детерминант, индуцирующих вирулентность.
На 7-ой сессии 28.05.03 г. «Новые направления по главным эндемическим микозам» было заявлено 5 докладов:
1) «Paracoccidioides brasiliensis; гены, вовлеченные в димофризм» (Густаво Ниньо-Вега, Венесуэла);
2) «Penicillium marneffei — прошлое, настоящее и будущее, методы идентификации» (Н. Вениттана-ком, Таиланд);
3) «Факторы вирулентности у Blastomyces derma-titidis» (Б. Финкел-Джайминез, США);
4) «Новые лечебные средства для гистоплаз-моза» (Л. Дж. Уит, США). Рассмотрены известные лечебные препараты.
5) «Coccidioides как избранный агент, на что он пригоден?» (Д. М. Диксон, США);
С. immitis по уровню биобезопасности относится к 3 уровню (BSL3=Biosafety Level 3). С. immitis и С. pasadasii — оба теперь (на 13 декабря 2002 г.) подпадают под контроль согласно федеральному регистру США «Обладание, использование и передача избранных агентов и токсинов».
Последняя (восьмая) конкурентная сессии
28.05.03 г. была посвящена клеточному иммунитету. На ней выступили: В. Л. Г. Калич (Бразилия), Л. Р. Тра-вассос (Бразилия), К. Каваками (Япония), У. Мёрфи (США) и Л. Романи (Италия). Первая доложила о контроле легочного паракокцидиоидоза посредством Т-клеточных суб-наборов.
Л. Р. Травоссос рассмотрел иммунодоминантные смешанные Т-клеточные эпитопы в GP43 Paracoccidioides brasiliensis. Гикопротеин с массой 43 кДа впервые открыт в 1986 г. Он является главным диагностическим антигеном P. brasiliensis. Факт, что
15-мерный пептид 10 (РЮ) не индуцирует антител против gp'V.'} и является смешанным иммунодоми-нантным Т-клеточным эпитопом у мышей, подтолкнул автора исследовать его признание HLA-DR
антигенами пациента. Это и было выполнено на 19 отобранных пациентах.
«Лимфоциты при наследственном иммунитете и защитный иммунитет к СгурЬососсш пео/огтат» — тема К. Каваками. В результате выполнения работы показано, что натуральные киллер-ные Т-клетки играют важную роль в резистентности макроорганизма против криптококковой инфекции благодаря повышению продукции ЮТ-у и ТЫ клеток, и еще было предположено, что у5Т-клетки могут быть контрарегуляторами этих ответов, аттенуируя (ослабляя — Н. Е.) ТЫ клеточно-опосредованный иммунный ответ. Таким образом, механизм хозяйской защиты может быть хорошо сбалансированным, чтобы предупредить тканевое повреждение, вызванное возросшими иммунными ответами.
Четвертый доклад У. Мёрфи сделан на следующую тему: «Дендритные клетки и защитный иммунитет против СгурШсоссш пео/огтат». Было найдено, что иммунизация криптококковым культуральным фильтратом с полным адъювантом Фрейнда индуцирует классическую реакцию ГЗТ с типичным мо-нонуклеарным инфильтратом и продукцией ШБ-у, ответ — защитный.
В подобном ряду был доклад Луиджини Романи «Дендритные клетки и грибы: экспериментальные обоснования и перспективы». Дендритные клетки уникально способны к декодированию ассоциированной грибом информации и транслированию ее в качественно различные Т-хелпер (’11л) иммунные ответы.
Последний день 15-го Конгресса 1БНАМ 29 мая 2003 г. был также насыщенным по научной программе — состоялось 6 конкурентных сессий, два заседания за круглым столом.
Утренние сессии проходили с 8Ш до 10ш. С 10ш до 13— имели место устные сессии по фундаментальной микологии (сессия II) и в параллели — оральная сессия II по прикладной микологии с 10'° до 12ш. В это же время проводилась Роя1ег-сессия.
Конкурентные сессии 29.05.03 г. проводили по следующим темам: первая — «Антифунгальная резистентность» (сопредседатели — Доминик
Санглар, Швейцария, и Йоахим Моршхёйзер, Германия); вторая — «Морфология и развитие» (сопредседатели — Нил А. Гоу, Великоброитания, и К. Джун Квон-Чунг, США); третья — «Круглый стол: подходы к управлению» (сопредседатели — Джон Р. Уингард, США, и Бен И. де Поу, Нидерланды); четвертая — «Грибковые вакцины» (сопредседатели — Брюс С. Клайн, США, и Д. Митчелл Маджи, США); пятая — «Обучение и практика по медицинской микологии, роль референтных лабораторий» (сопредседатели — Дэвид У. Варнок, США, и Дэвид X. Эллис, Австралия); шестая — « Открытие антимикотиков» (сопредседатели — Христофер
А. Хичкок, Великобритания, и Фрэнк К. Оддс, Великобритания); седьмая — «Дерматомикозы» (сопредседатели — Роза Али, США, и Лоан Тоуэрси,
Бразилия); восьмая — «Круглый стол: иммунотерапия, показание-противопоказание» (сопредседатель — Карл В. Клемонс, США).
На каждом заседании было представлено от 1 до 6 докладов. Наименьшее число сообщений было на заседании за круглым столом (8-е заседание, на котором выступили И. Энайси и Дж. Р. Грейбилл, США); на сессии по дерматомикозам выступили 3 докладчика: 1) А. Л. Коломбо (Бразилия) — о кожных проявлениях системных инфекций (имелись ввиду гистоплазмоз, кокцидиоидоз, бластомикоз, паракок-цидиоидоз, криптококкоз, кандидоз, зигомикоз и, более редко, аспергиллез); 2) Д. И. Бэбил (США) — об экологии, эпидемиологии и новых лекарствах при дерматомикозах; 3) Э. Гупта (Канада) — о Malassezia и кожной инфекции.
По грибным вакцинам выступили 4 докладчика:
1) Б. С. Клайн (США) — о механизме иммунитета к вакцине Blastomyces dermatitidis; на основе генетической инженерии изготовлена живая, ослабленная грибковая вакцина. Эффективность ее доказана на летальной «мышиной модели» легочного бластомикоза.
2) Л.-А. Пирофски (США) — о пептидных ми-митопах и иммунитете к Cryptococcus neoformans; работа продолжается.
3) А. Кассоне (Италия) — о новой гликоконъ-югатной вакцине против кандидоза. Работа продолжается.
4) Д. М. Мэджи (США) — о создании вакцины против кокцидиоидоза. Автор с сотрудниками остановили внимание на белке, первоначально описанном как антиген 2 (Ag2), который теперь обозначается Ag2/ PRA (PRA-акроним = пролином обогащенный антиген). Моделируя различные подходы в создании защитной вакцины против названного микоза и проверяя их на экспериментальных животных, докладчик полагает, что разработка такой вакцины возможна.
По 5 докладчиков выступили на 1, 3, 5 и 6 сессиях. О резистености грибов к антимикотикам (1 сессия) говорили Т.Д. Идлинд (США), И. Моршхёйзер (Германия), Д. Санглар (Швейцария), П.Д. Роджерс (США) и Р. Д. Кэннон (Новая Зеландия).
В ряду очередности их сообщения были посвящены: перекрестной резистентности между сельскохозяйственными фунгицидами и клинически важными антимикотиками; регуляции лекарственной резистентности у Candida albicans; механизмам резистентности и толерантности к антимикотикам у патогенных дрожжей; функциональной геномике резистентности к азолам; функциональному анализу грибной efflux-помпы для лекарств.
На заседании за круглым столом по подходам к управлению выступили:
- Б. И. де Поу (Нидерланды): что такое профилактика, эмпирическая, пре-эмптивная, или нацеленная на возбудитель терапия?
- К. А. Марр (США): возможности и ограничения профилактики против плесневых инфекций;
Подобный доклад, но в отношении аспергиллеза, представил Дж. Р. Уингард (США), а кандидоза — Дж. И. Эдварс (США).
В унисон выступлению Б. И. де Поу сделал сообщение Дж. Р. Дорнелли (Нидерланды): «Возможности и ограничения пре-эмптивной стратегии».
Пятая сессия фактически была посвящена обучению и практике по медицинской микологии, и выступали здесь известные микологи: Д.У. Варнок (США), Э.М. Джонсон (Великобритания), М. Р. Мак Гиннис (президент ISHAM, США), У. Дж. Стейнбак (США) и Д.Х. Эллис (Австралия).
Были рассмотрены такие вопросы, как текущий статус диагностической медицинской микологии и роль CDC; развивающиеся практические курсы по медицинской микологии и роль лаборатории наблюдения в системе здравоохранения (Public Health Laboratory Surveillance = PHLS); потенциал www для обучения и практики по медицинской микологии; текущее образование по медицинской микологии на факультетах в США и, наконец, о роли ISHAM.
На шестой сессии по открытию антимикотиков заявленными докладчиками были: Х.А. Хичкок (Великобритания), сообщивший о структурно-прицельном создании фунгицидных N-миристоил-трансферазных ингибиторов; Г. Т. Милнэ (США) с сообщением о биологическом и химическом управлении грибной инвазией; С. С. Уолкер (США) — о мишененаправленном изобретении антимикотика;
В. Шёнефельд (Хорватия) — об изобретении антимикотиков из естественных продуктов; Ф. К. Оддс (Великобритания) — о моделях на животных при открытии антимикотиков.
На второй конкурентной сессии 29 мая 2003 г. выступили 6 докладчиков: К. Дж. Квон-Чунг (США),
Н.А. Гой (Великобритания), Б. С. Клейн (США), А. Сил (США), А. Андреанополус (Австралия), А. Джонсон.
К. Дж. Квон-Чунг сообщила о роли STE12 генов и монокариотическом плодоношении у Cryptococcus neoformans; второй докладчик затронул вопрос «плесневение почки внутри гифы: клеточный цикл и развитие Candida albicans», В данном случае под «плесневением» имеется в виду формирование из почки псевдомицелиальной нити. Третий докладчик говорил о механизмах «вакцинального иммунитета» к Blastomyces dermatitidis. А. Сил доложила об использовании геномики для изучения диморфизма у Histoplasma capsulatum. Пятый докладчик изложил материалы о контроле за морфогенезом у Penicillium marneffei и, наконец, А. Джонсон коснулся молекулярной биологии спаривания и вирулентности у Candida albicans.
Устные презентации также состоялись 29.05.03 г. как конкурентные сессии с 10ш до 12ш и с 10-до 13—. Первая из них была посвящена приклад-
ной микологии (II) — сопредседателями были Д. Р. Солл (США) и Д. П. Контояннис (США); вторая — фундаментальной микологии (II), сопредседателями на ней были Р. Калдерон (США) и Б. Кор-мак (США).
По прикладной микологии (II) были предусмотрены 2 мини-лекции по 15 минут, одна — в начале, другая — в конце заседания.
Д. Р. Солл (США) осветил тему «Потребности для создания новых открытий на основе ДНК-finger printing патогенных грибов»; в последующих выступлениях докладчики касались реального времени ПЦР для раннего определения инвазивной грибковой инфекции у гематологических пациентов — проспективное изучение (Б. Джонс, Шотландия); применения светового циклера для определения 18S рРНК в клинической микологической лаборатории (Г. Робертс, США); MLST Candida glabrata, с помощью которого удается обнаружить географически специфические клады (А. Догсан, Великобритания); MLST=Multi Locus Sequence Typing; развития метода определения и идентификации видов Aspergillus, используя световой циклер — ПЦР испытание (И. Робертс, США); полезности количественной постановки ПЦР (qPCR) и определения галактоманнана (GM) ELISA-методом в бронхоальвеолярном лаваже в целях диагностики инвазивного аспергиллеза (Б. Машер, США); высокого уровня ложно положительных результатов применительно к аспергиллезному галактоманнану ELISA-методом у онкопедиатрических пациентов (П. Буре, Франция).
Заседание закончилось второй мини-лекцией, которую прочитал Д. П. Контояннис (США) на тему: «Последовательная противогрибковая терапия при аспергиллезе: от клиники до скамьи подсудимых и обратно». Вторая конкурентная сессия по фундаментальной микологии (II) 29.05.03 г. началась минилекцией Б. Кормака (США): «Семейство клеточно-стеночных белков, вовлеченное в вирулентность патогенных дрожжей Candida glabrata, присутствует в субтеломерических кластерах и при условии субте-ломерического молчания».
После этой мини-лекции выступили 10 заявленных докладчиков:
1) Г. Моран (Германия) — по теме: «Микроустройства, обнаруживающие отсутствие и разнообразие отрегулированных факторов вирулентности у Candida dubliniensis»;
2) Б. Хубе (Германия) — по теме: «Стадиеспецифическая генная экспрессия Candida albicans в крови человека»;
3) Т.Д. Идлинд (США) — по теме: «цАМФ сигнализирующий путь моделирует чувствительность дрожжей к азолам и другим антимикотикам»;
4) Н. Новерр (США) — по теме: «Контроль ги-фальной трансформации у С. albicans жирными кислотами»;
5) Ш. Локкарт (США) — по теме: «Микроскопическая визуализация спаривания у С. albicans»;
6) Г. Палмер (США) — по теме: «Случайный мутагенез важного для С. albicans гена ВМН1 генерирует не летальные аллели»;
7) X. Пелтроше-Лаксахуанга (Германия) — по теме: «Pmt-1-опосредованное О-гликозилирование требуется для С. albicans — пленкообразования»;
8) А. Таванти (Великобритания) — по теме: «Мульти-локусное сиквенс-типирование и вспомогательные молекулярные тесты для дифференциации штаммов С. albicans»;
9) С. Тиагар (США) — по теме: «Идентификация и характеристика трех спаривающихся типоподобных локусов у С. glabrata»;
10) Н. Шохан (США) — по теме: «Ответственный регуляторный ген (SSKI) у С. albicans адаптирует клетки к пероксиду водорода и регулирует экспрессию различных клеточностеночных белков».
Во все дни работы Конгресса ISHAM в отведенное время происходили постерные доклады (их было около 300). Авторы настоящей статьи также представляли доклад на тему: «О введении государственного образования по клинической микологии и лабораторной микологии в России». Его содержание нашло отражение в работе специальной сессии 29 мая 2003 г. «Teaching and training Medical Mycology and the Role of Reference Laboratories», где выступали известные-микологи-преподаватели.
29.07.03 г. в 17ш состоялось заседание, на котором были вручены премии молодым микологам, отобранным специальной комиссией; заслушан отчет казначея ISHAM (К. Тинтелнот, Германия), избраны на последующие 3 года: президент ISHAM Д. Варнок (США), генеральный секретарь (М. Ричардсон, Финляндия) и 5 вице-президентов: Й. Нодзава (Япония); Г. Шар (Швейцария); Е. Бургер (Бразилия); Д.Элад (Израиль); Г. Булмер (Филиппины). В 19ш на территории музея искусств г. Сан-Антонио состоялся заключительный банкет, на котором выступил президент ISHAM Майкл Р. Мак Гиннис (США) с программной лекцией: «Патогенез грибковых заболеваний в закрытых помещениях».
В целом, 15-й Конгресс прошел интересно и продуктивно; его участники имели возможность контактировать, «не выходя из дома», поскольку все заседания проходили в отеле, в котором размещались делегаты и гости. Мы выражаем искреннюю признательность представительству Pfizer international Inc. за поддержку российских микологов, участвовавших в работе данного конгресса. Следующий
16-й Конгресс ISHAM состоится в Париже в 2006 г. и его организатор проф. Б. Дюпон пригласил специалистов к активному участию в работе предстоящего форума.
