JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 4 - P. 119-121
УДК: 616.155.392 DOI: 10.24412/1609-2163-2023-4-119-121 EDN OPGRYL |||||
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗАТОРА BECKMAN COULTER DXH-800 В
ДИАГНОСТИКЕ ОСТРОГО ЛЕЙКОЗА (краткое сообщение)
М.А. ОСТАНИН*'**, П.А. ЛАЙ/'"', А.А.РУДНЕВА ***
*Государственное учреждение здравоохранения Тульской области «Тульская областная клиническая больница»,
ул. Яблочкова, д. 1А, г. Тула, 300053, Россия **Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Тульский государственный университет», пр. Ленина, д. 92, г. Тула, 300012, Россия ***Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова, ул. Высоковольтная, д. 9, г. Рязань, 390026, Россия
Аннотация. Использование гематологических анализаторов в диагностике острых лейкозов открывает новые возможности для улучшения прогноза заболевания и повышения эффективности лечения. В клинической лаборатории ГУЗ Тульской области «Тульская областная клиническая больница» был приобретен современный гематологический анализатор Beckman Counter DxH 800 для повышения производительности и оптимизации процесса общеклинического анализа крови. Приобретенное оборудование в совокупности с рациональным использованием метода световой микроскопии позволило расширить диагностические возможности первичного скрининга острых гематологических патологий, увеличить производительность лаборатории, а также снизить вероятность лабораторных ошибок. Цель исследования - определить возможность использования DxH800 в первичной диагностике острого лейкоза. Материал и методы исследования: В период с 01.01.2023 по 01.10.2023 проведены исследования образцов крови 50-ти пациентов ГУЗ ТО ТОКБ, у которых при общеклиническом анализе крови обнаружили бластные клетки методом световой микроскопии. У всех больных исследовалась периферическая венозная кровь, взятая натощак в вакуумные пробирки с антикоагулянтом с К2-ЭДТА производства фирмы «SARSTEDT». Выводы. Опыт практического применения приобретенной автоматизированной системы гематологического анализа позволил расширить спектр гематологических исследований и оптимизировать их выполнение. Более чем в 80% случаев «сигналы тревоги» DxH 800 подтвердились в ходе проведения световой микроскопии. Это доказывает состоятельность данных уведомлений, а также необходимость детального, скурпулезного микроскопического исследования препарата крови в случае их возникновения.
Ключевые слова: гематологические исследования, автоматизированные системы, Beckman Coulter DxH-800, диагностика острого лейкоза.
EXPERIENCE OF USING THE BECKMAN COULTER DXH-800 HEMATOLOGICAL ANALYZER IN THE DIAGNOSIS
OF STRICT LEUKEMIA
M.A. OSTANIN*'**, P.A. LAI",'"', A.A. RUDNEVA ***
*State healthcare institution of the Tula region 'Tula Regional Clinical Hospital", st. Yablochkova, 1A, Tula, 300053, Russia **Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "Tula State University", Lenin Ave., 92, Tula, 300012, Russia ***Ryazan State Medical University named after Academician I.P. Pavlova, st. High-voltage, no. 9, Ryazan, 390026, Russia
Abstract. The use of hematological analyzers in the diagnosis of acute leukemia opens up new opportunities for improving the prognosis of the disease and increasing the effectiveness of treatment. In the clinical laboratory of the Tula Regional Clinical Hospital, a modern hematology analyzer Beckman Couliter DxH 800 was purchased to increase productivity and optimize the process of general clinical blood analysis. The purchased equipment, together with the rational use of light microscopy, made it possible to expand the diagnostic capabilities of primary screening of acute hematological pathologies, increase laboratory productivity, and also reduce the likelihood of laboratory errors. Purpose of the study: to determine the possibility of using DxH 800 in the primary diagnosis of acute leukemia. Material and methods of research: In the period from 01.01.2023 to 01.10.2023, blood samples were examined from 50 patients of the State Clinical Hospital of the Tula Regional Clinical Hospital, in whom blast cells were detected during general clinical blood test using light microscopy. In all patients, peripheral venous blood was examined, taken on an empty stomach into vacuum tubes with an anticoagulant with K2-EDTA produced by the company «SARSTEDT». Conclusions/ Experience in the practical application of the acquired automated hematological analysis system has allowed us to expand the range of hematological studies and optimize their implementation. In more than 80% of cases, DxH 800 alarms were confirmed by light microscopy. This proves the validity of these notifications, as well as the need for a detailed, meticulous microscopic examination of the blood product if they occur.
Key words: hematological studies, automated systems, Beckman Coulter DxH-800, diagnosis of acute leukemia.
Введение. ГУЗ ТО ТОКБ является многопрофильным медицинским учреждением, оказывающим первичную медико-санитарную помощь, в том числе высокотехнологичную, пациентам Тулы и Тульской области.
Для обеспечения своевременной, качественной диагностики и выбора верной тактики лечения пациентов оборудована современная клиническая лаборатория, которая выполняет общеклинические,
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2023 - Т. 30, № 4 - С. 119-121 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 4 - P. 119-121
гематологические, коагулологические и биохимические исследования.
Лейкозы (лейкемии) - опухоли с первичным поражением костного мозга. Заболевание характеризуется пролиферацией незрелых бластных клеток в красном костном мозге с угнетением нормального гемопоэза и вовлечением в процесс различных органов (ЦНС, печень, селезёнка, лимфатические узлы) [6]. За 2021 год в Тульской области был зарегистрирован 1531 случай заболевания, за 2022 год - 1652 случая. Ежегодно в стенах ГУЗ ТО ТОКБ выявляется от 18 до 24 случаев лейкоза за календарный год, что подчеркивает высокую значимость качественной диагностики данного патологического состояния.
Согласно актуальным клиническим рекомендациям, ОАК рекомендуется пациентам при подозрении на острый лейкоз, диагностике острого лейкоза, а также в ходе терапии с частотой от ежедневного до ежемесячного. Выполнение общего (клинического) анализа крови необходимо проводить с подсчетом лейкоцитарной формулы и определением числа тромбоцитов для определения дальнейшей тактики ведения пациента и верификации диагноза [3,4].
С целью оптимизации гематологических исследований и повышения производительности лаборатории в конце 2022 года был приобретен гематологический анализатор Beckman Couliter DxH800.
Ввиду того, что в составе больницы имеется гематологическое отделение, в январе 2023 года возник вопрос о возможности использования данного гематологического анализатора в первичном скрининге острого лейкоза.
Цель исследования: изучить возможности использования гематологического анализатора Beck-man Coulter DxH-800 с целью раннего выявления пациентов с диагнозом острый лейкоз. Для достижения поставленной цели необходимо решение следующих задач:
1. Изучить характеристики автоматического гематологического анализатора Beckman Coulter DxH-800.
2. Провести сравнительный анализ возможностей автоматического анализатора по сравнению с микроскопическими методами исследования на базе ГУЗ ТО ТОКБ.
3. Определить возможность использования DxH 800 в первичной диагностике острого лейкоза
Материал и методы исследования. В период с 01.01.2023 по 01.10.2023 проведены исследования образцов крови 50-ти пациентов ГУЗ ТО ТОКБ, у которых при ОАК обнаружили бластные клетки методом световой микроскопии. У всех больных исследовалась периферическая венозная кровь, взятая натощак в вакуумные пробирки с антикоагулянтом с й-ЭДТА производства фирмы «SARSTEDT».
Результаты и их обсуждение. ОАК в ГУЗ ТО
ТОКБ проводится при помощи нескольких гематологических анализаторов:
1. Beckman Couliter DxH 500
2. Beckman Couliter DxH 800
Beckman Couliter DxH 500 - прибор нового поколения в линейке гематологических анализаторов Beckman Coulter, предназначенный для лабораторий с небольшим потоком образцов. Однако, несмотря на небольшую производительность и компактный размер, обеспечивает высокое качество 5Diff анализа. В ГУЗ ТО ТОКБ Beckman Couliter DxH500 используется как вспомогательный прибор для проведения ОАК, когда поточность образцов становится низкой (вечерние и ночные часы).
BC DxH 800, напротив, является более производительной машиной и имеет ряд преимуществ, важных для обеспечения должного качества исследования, а именно:
- Высокая производительность - 100 образцов в
час;
- Определение до 52 параметров крови;
- Автоматическое перемешивание образцов перед проведением анализа;
- Автопродление времени счёта тромбоцитов для образцов с тромбоцитопенией;
- Обеспечение высокого качества определения ядросодержащих эритроцитов без использования специальных дорогостоящих красителей;
- Автоматические повторные исследования.
DxH800 работает по технологии VCSn - это метод
многопараметрической проточной цитометрии, который оценивает объем, электропроводимость и светорассеивание клетки. Определение объема происходит с использованием принципа Культера на основе оценки сопротивления при постоянном токе. Измерение электропроводности в переменном токе высокой частоты характеризует «непрозрачность» клетки, позволяет оценить плотность клеточного ядра и внутренний состав клетки. Рассеивание лазерного света под разными углами позволяет получить представление о структуре клеточной поверхности, гранулярности цитоплазмы и лобулярности ядра.
Многопараметрическая проточная цитометрия на основе VCSn позволяет оценивать морфологию лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов и ретикулоцитов. Для выполнения подобного анализа системе достаточно только пяти реагентов, что немаловажно для мощного учреждения с высоким потоком проб. Результат анализа каждого образца можно увидеть в виде скатерограммы - JD-режима представления результатов с возможностью просмотра каждой популяции клеток [2].
Еще одним преимуществом данного гематологического анализатора является возможность получения «сигнала тревоги». Это уведомления, указывающие на отклонения тех или
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2023 - Vol. 30, № 4 - P. 119-121
иных параметров от установленных границ. Они могут касаться как увеличения, так и уменьшения количества тех или иных клеток, либо же изменения их функционального состояния.
Для оценки возможностей анализатора в целях первичного скрининга острого лейкоза был выполнен следующий эксперимент:
С января по октябрь 2023 года производился сбор данных. В качестве материала для исследования использовались 50 образцов крови при анализе которых DxH 800 выдавал «сигналы тревоги», свидетельствовавшие о возможном наличии бластных клеток в исследуемом биоматериале. Референсным методом обнаружения бластов являлась световая микроскопия.
На рис. 1, 2 и 3* представлены результаты проведенного эксперимента. В 84% случаев «сигнал тревоги», уведомляющий о наличии в анализируемом биоматериале бластных клеток, был подтвержден световой микроскопией.
На рис. 2 представлена структуризация процента бластных клеток, подтвержденных световой микроскопией. Исходя из полученных данных можно сделать вывод, что эффективность обнаружения бластных клеток DxH 800 в биоматериале возрастает пропорционально с увеличением их количества.
На рис. 3 показана структуризация количества областных клеток, подтвержденных при световой микроскопии, но «пропущенных» гематологическим анализатором. Как видно из диаграммы, наибольший процент ошибок составляют пробы, где процент бластных клеток не превышает 30%.
Следует отметить, что диагностические возможности DxH 800 можно расширить, увеличив чувствительность анализатора к незрелым формам клеток, однако в виду того, что это уменьшает производительность анализатора, данный эксперимент проводился на стандартных настройках прибора.
Выводы:
1. Более чем в 80% случаев «сигналы тревоги» DxH 800 подтвердились в ходе проведения световой микроскопии. Это доказывает состоятельность данных уведомлений, а также необходимость детального, скрупулезного микроскопического исследования препарата крови в случае их возникновения.
2. DxH800 способен «увидеть» бластные клетки вне зависимости от их количества, но эффективность выявления таких клеток растет с увеличением их количества (отсутствие ошибок анализатора при содержании бластных клеток более 40% в препарате).
3. DxH800 можно использовать в первичном скрининге острого лейкоза у пациентов общеклинических отделений, а также в целях мониторинга состояния гематологических больных, однако в случае последних необходима обязательная обзорная микроскопия в целях предупреждения некорректных результатов.
4. Референтным методом обнаружения бласт-ных клеток остается световая микроскопия
5. Опыт практического применения приобретенной автоматизированной системы гематологического анализа позволил расширить спектр гематологических исследований и оптимизировать их выполнение.
Литература / References
1. Алгоритмы диагностики и протоколы лечения заболеваний системы крови / под ред. В. Г. Савченко. М.: Практика, 2018 / Algo-ritmy diagnostiki i protokoly lecheniya zabolevaniy sistemy krovi / pod red. V. G. Savchenko [Algorithms for diagnosis and treatment protocols of diseases of the blood system / edited by V. G. Savchenko]. M.: Praktika, 2018. Russian.
2. Инструкция к автоматическому гематологическому анализатору Beckman Couliter DxH 800, 2022 / Instruktsiya k avtomatich-eskomu gematologicheskomu analizatoru Beckman Couliter DxH 800 [Operating instructions for the Beckman Coulter DxH 800. 2022 automatic hydraulic unit]; 2022. Russian.
3. Клинические рекомендации «Острые лимфобластные лейкозы», 2020 / Klinicheskie rekomendatsii «Ostrye limfoblastnye leykozy» [Clinical recommendations "Acute lymphoblastic leukemia"]; 2020. Russian.
4. Клинические рекомендации «Острые миелоидные лейкозы». 2020 / Klinicheskie rekomendatsii «Ostrye mieloidnye leykozy» [Clinical recommendations "Acute myeloid leukemia"]; 2020. Russian.
5. Лобанова Т.И., Гальцева И.В., Паровичникова Е.Н. Исследование минимальной остаточной болезни у пациентов с острыми ми-елоидными лейкозами методом многоцветной проточной цитофлу-ориметрии // Онкогематология. 2018 / Lobanova TI, Gal'tseva IV, Pa-rovichnikova EN. Issledovanie minimal'noy ostatochnoy bolezni u patsientov s ostrymi mielo-idnymi leykozami metodom mnogotsvetnoy protochnoy tsitoflu-orimetrii [Investigation of minimal residual disease in patients with acute myeloid leukemia by multicolored precision cyto-fluorometry]. Onkogematologiya. 2018. Russian.
6. Луговская С.А., Почтарь М.Е. Гематологический атлас. Москва: Триада, 2023 / Lugovskaya SA, Pochtar' ME. Gematologicheskif atlas [Hematologi-cal Atlas]. Mocsow: Triada; 2023. Russian.
7. Шуваев В.А., Мартынкевич И.С. Миелопролиферативные новообразования. Litres, 2022 / Shuvaev VA, Martynkevich IS. Mielopro-liferativnye novoobrazovaniya [Myeloproliferative neoplasms]. Litres; 2022. Russian.
Библиографическая ссылка:
Останин М.А., Лай П.А., Руднева А.А. Опыт применения гематологического анализатора Beckman coulter DXH-800 в диагностике острого лейкоза (краткое сообщение) // Вестник новых медицинских технологий. 2023. №4. С. 119-121. DOI: 10.24412/16092163-2023-4-119-121. EDN OPGRYL.
Bibliographic reference:
Ostanin MA, Lai PA, Rudneva AA. Opyt primeneniya gematologicheskogo analizatora Beckman coulter DXH-800 v diagnostike ostrogo leykoza (kratkoe soobshchenie) [Experience of using the Beckman coulter DXH-800 hematological analyzer in the diagnosis of strict leukemia]. Journal of New Medical Technologies. 2023;4:119-121. DOI: 10.24412/1609-2163-2023-4-119-121. EDN OPGRYL. Russian.
* Рисунки данной статьи представлены на обложке 2