CC BY
51
ОПЫТ ПО ОБЕЗВРЕЖИВАНИЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТРИХИНЕЛЛЕЗА В МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ ЖИВОТНЫХ МЕТОДОМ ГЛУБОКОГО ЗАМОРАЖИВАНИЯ
Андреянов О.Н.
ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
Введение. При изучении устойчивости к низким температурам некоторых изолятов трихинелл известно, что наиболее устойчивы к длительному действию низкой температуры личинки трихинелл T. spiralis, паразитирующие у диких животных, особенно плотоядных (Скворцова Ф.К., 2007). Мышечные личинки трихинелл выделенные из мышечной ткани волка методом переваривания после хранения при минус 20°С в течение шести месяцев, продолжали заражать мышей, в то же время эти личинки погибали в мышцах через 5 суток при замораживании при минус 10°С (Скворцова Ф.К., 2009).
Следовательно, с точки зрения проведения профилактических мероприятий при трихинеллезе, практический интерес представляет устойчивость к замораживанию личинок трихинелл, локализованных в мышечной ткани плотоядных.
Материалы и методы. Изолят возбудителя трихинеллеза T. spiralis spp. получали методом переваривания в искусственном желудочном соке (ИЖС) мышечной ткани от обыкновенных лисиц, добытых в Рязанской области. Для опыта было использовано 7 естественно инвазированных тушек лисиц. Размножение изолятов проводили на десяти белых беспородных крысах и десяти мышах. Беспородных мышей и крыс инвазировали природным и лабораторным изолятом личинок трихинелл в дозе 10 личинок на 1 г массы животного. Изолят T. spiralis от свиньи (Белорусский), который в течение многих лет поддерживался в ВИГИСе на белых беспородных мышах и крысах, обладающий невысокой устойчивостью к замораживанию в тушках лабораторных животных, нами использовался для контроля.
Не ошкуренные тушки животных, инвазированных трихинеллами помещали в морозильник при минус 70°С. В опыте был использован морозильник типа MDF-U фирмы SANIO (Япония). Исследования проводились в течение двух с половиной месяцев.
Жизнеспособность личинок трихинелл высчитывали как отношение подвижных личинок к общему числу выделенных (Скворцова Ф.К. и др., 2009). После переваривания в ИЖС и промывания осадка от каждой пробы, проверяли двигательную активность личинок методом инкубирования в термостате при +37°С в течение 20 минут в подогретом до той же температуре физиологическом растворе, и изучали морфологические изменения в структуре гельминтов. Учет биопробы на белых мышах проводили через 45 дней после заражения методом переваривания в ИЖС целой тушки животного.
18
Результаты и обсуждение. Во время глубоко замораживания тушек исследованных животных в морозильнике жизнеспособность личинок трихинелл была различной (табл. 1). Так, при замораживании тушки обыкновенной лисицы, инвазированной трихинеллами естественным способом, жизнеспособность личинок T. spiralis держалась на протяжении 4-х часов без изменений и составляла 100%. Далее жизнеспособность личинок стала падать, через 8 часов она составила 80%. Через 16 часов, жизнеспособных личинок трихинелл природного изолята выделилось 15%. Через 32 часа все личинки в мышечной ткани плотоядного погибли. У выделенных личинок трихинелл наблюдали признаки отслоения кутикулы, вакуолизацию, нарушение целостности кишечной и половой систем.
В белых крысах природный изолят T. spiralis при замораживании в течение 1, 2 и 4-х часов, жизнеспособными оставались 96,1, 65,7 и 7,6% выделенных личинок, соответсвенно. После дальнейшей экспозиции в морозильнике тушки крыс оказались обезврежены.
В лабораторных мышах личинки дикого изолята трихинелл выдержали глубокое замораживание только 1 час (жизнеспособность - 24%), после двух часов все личинки в тушках грызунов погибли.
Лабораторный (Белорусский) изолят мышечных личинок T. spiralis вел себя иначе. В крысах личинки трихинелл сохраняли жизнеспособность 81,0 и 26,3% после 1 и 2 часовой экспозиции в морозильной камере, соответственно. В мышах через 1 час глубокого замораживания жизнеспособность личинок составила 5,2%. При дальнейшем нахождении тушек при минусовой температуре мышечная ткань оказалась обезвреженной.
Таблица 1 .
Жизнеспособность личинок трихинелл в мышечной ткани тушек
животных после замораживания при минус 70°С
Время нахождения материала в морозильной камере Природный изолят трихинелл (лисица обыкновенная) (%) Лабораторный изолят трихинелл (белорусский) (%)
Лисица обыкновен ная Крыса белая Vistar (1 пассаж) Мышь белая (1 пассаж) Крыса белая Vistar Мышь белая беспородная
1 100 96,1 24 81,0 5,2
2 100 65,7 0 26,3 0
4 100 7,6 0 0 0
8 80 0 0 0 0
16 15 0 0 0 0
32 0 0 0 0 0
Контроль (без заморозки) 100 99,2 100 98,7 99,1
19
Личинки трихинелл после глубокого замораживания в тушках исследуемых животных после биологической пробы на белых мышах оказались жизнеспособными и обладали инвазионной активностью.
Заключение. Глубокое замораживание при минус 70°С тушек лисицы, беспородной белой крысы и мыши природного изолята T. spiralis spp. из Рязанской области показало высокую резистентность мышечных личинок к низким температурам. Жизнеспособность личинок трихинелл в мышечной ткани диких плотоядных и лабораторных животных сохранялась по-разному и составила у лисицы 16, у крыс 4, а у мышей 1 час.
Литература: 1. Скворцова Ф.К. // Сб. мат. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» М. 2007, вып. 8.- С. 335 - 337. 2. Скворцова Ф.К. // Сб. мат. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями» М 2009, вып. 10.- С. 374 - 376. 3. Скворцова Ф.К., Андреянов О.Н., Гребенкина Л.А. Методика определения жизнеспособности и инвазионности личинок трихинелл. Москва, 2009, 8с.
Decontamination of Trichinella in muscle tissues of animals by deep freezing. Andreyanov O.N. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.
Summary. Deep freezing at -70oC of carcasses of fox, white rat and mouse infected by natural isolate of T. spiralis originated from the Ryazan Region showed a high resistance of muscle larvae to low temperatures. Trichinella larvae remained viability in muscles of carnivores and laboratory animals: in fox muscles for 16 hours as while in rat and mouse muscles for 4 and 1 hours respectively.
ТРАНЗИТНЫЕ ХОЗЯЕВА ВОЗБУДИТЕЛЯ ТРИХИНЕЛЛЕЗА В УСЛОВИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОГО РЕГИОНА РОССИИ
Андреянов О.Н.
ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
Введение. Транзитную передачу трихинелл T. spiralis могут осуществлять 97 видов жуков (13 видов карабид, 1 вид куркулионид и 83 вида тенебрионид). Скармливая жуков или их личинок после питания последних трихинеллезным мясом, удалось заразить T. spiralis ежа и мышей (Bockeler W. 1977). В противоположность этим данным имеются сообщения E. Kullman, S. Nawabi (1971) о том, что жукам имаго D. iadrarius скармливали кусочки диафрагмы мыши, интенсивно пораженной личинками трихинелл. Насекомые охотно поедали мясо, однако, при вскрытии ни одной жизнеспособной личинки обнаружено не было. Авторы делают вывод о том, что кожееды не только не играют роли в распространении трихинеллеза, но и наоборот, играют роль санитаров в очистке окружающей среды от инвазионного начала.
Материалы и методы. Закладку естественно инвазированных тушек хищников (обыкновенная лисица, лесная куница) проводили в апреле 2009
20
