CC BY
6
20. Sweeney В. M. //Int. J. Cronobiol. — 1974. — No 2. — P. 25—33.
21. Thyrtnan R. G., Scholz R. // Europ. J. Biochein. 1969. —Vol. 10, № 3. —P. 459—467.
Vol. 2, 22. Williamson J. R., Ohkawa /(.. Meijer /1. /.//Alcohol
and Aldehyde Metabolising System. — New York, 1974.— — P. 365—383.
Поступила 24.10.80
УДК 615.9:628.32: [547.567 + 547.665]-07:616.151.5
Б. Т. Мазаев, В. Е. Василенко, А. П. Андрианов
ОПЫТ ИЗУЧЕНИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА В ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
I ММИ им. И. М. Сеченова
Объектом гигиенического нормирования являлись производные хинондиазида и индена, присутствующие в сточных водах производства офсетных печатных форм. Аналоги изучавшихся соединений, по данным литературы, обладают как противогеморрагической активностью (витамин К и его синтетический заменитель викасол), так и антикоагу-лянтной (зооцид ратиндан). В связи с этим одной из задач подострого токсикологического эксперимента явилось установление характера и степени влияния ортонафто-хинондиазида и ннденкарбоновой кислоты (ИКК) на свертывающую систему крови. В качестве метода исследования был избран анализ тромбоэластограммы (ТЭГ), записанной на отечественном приборе гемокоагулографе ГКГМ1-03. Расшифровка ТЭГ производилась по общепринятой методике [11]. Данный метод считается одним из наиболее чувствительных при оценке состояния гемостаза в токсикологических исследованиях [5]. По данным Коваленко И. И. [6], результаты анализа показателей ТЭГ согласуются с данными исследования системы гемостаза традиционными методиками (протромбиновое и тромбиновое время, определение фибриногена в крови, общее время свертывания и т. д.).
В процессе эксперимента у контрольных белых крыс были выявлены изменения временных показателей ТЭГ относительно показателей фона. Чередование направленности этих изменений позволяет расценить их как проявления гипер-гипокоагуляционного синдрома — ГГКС (рис. 1). Тромбогеморрагический синдром, характеризующийся чередованием тромботических и геморрагических проявлений одного и того же процесса активации коагуляции, описан в 1962 г. М. С. Мачабели [9]. В настоящее время общепризнан неспецифический, универсальный характер ГГКС, описание которого имеется в работах ряда авторов [2, 8, 10]. Существующие различия в терминологии (тромбогеморрагический синдром, синдром потребления факторов свертывания, диссеминированное или локальное внутрисо-судистое свертывание) не меняют сущности данного синд-
14 12 10 8 6 4 2
%
_ \
> \ \
в
\
w
\
Фон
7
4
5
Рис. 1. Динамика изменения временных показателей ТЭГ в подостром опыте у контрольной группы животных.
По оси абсцисс — продолжительность опыта (в кед); но оси ординат—показатели ТЭГ (в мин), / — время реакции; 2 —время
коагуляции; 3 — общее время свертывания.
рома, как сложного патологического процесса, в основе которого лежит диссеминированное свертывание крови, являющееся следствием нарушения динамического равновесия свертывающей и противосвертывающей систем [3]. В. П. Балуда [1] приводит перечень патологических состояний, включающий около 50 названий (в том числе травматичные хирургические вмешательства, кровотечения и коллапс), при которых имеет место локальное или рассеянное внутрисосудистое свертывание.
В патогенезе ГГКС главная роль отводится активированному тромбопластину, который содержится во всех тканях организма. Выброс его в кровоток, вызывающий гиперкоагуляцию, происходит при повреждении сосудистой стенки, разрушении лейкоцитов, эритроцитов, при возбуждении парасимпатических и симпатических отделов нервной системы при различных патологических состояниях. Возникающая гиперкоагуляция сменяется фазой вторичной гипокоагуляции, которая обусловлена многими причинами: потреблением факторов свертывания, повышением антико-агуляциониой активности крови за счет деградации фибрина, образованием комплексных соединений гепарина с фибриногеном и др. [7]. Клинические фазы ГГКС выражаются в чередовании тромботических и геморрагических проявлен ий.
При интоксикации различными химическими соединениями как в эксперименте, так и в клинике, как правило, развиваются нарушения свертывания крови, которые могут быть отнесены к ГГКС. Характерно, что нарушения гемостаза нередко фиксируются раньше других клинических проявлений [4, 5]. Считается, что выявление ГГКС как неспецифической реакции организма подопытных животных на интоксикацию может служить чувствительным интегральным тестом в токсикологических исследованиях.
Причинами ГГКС у животных контрольной группы могли быть нарушения целостности сосудистой стенки и крово-потеря при взятии крови путем подъязычной венесекции.
Очевидно, в условиях нашего эксперимента изменения показателей ТЭГ у животных опытных групп являются следствием наложения аналогичных клинических проявлений ГГКС как реакции на повреждение сосудистой стенки и кровопотерю и специфического действия изучаемых веществ на систему гемостаза. Дифференцировка этих реакций в данных условиях весьма затруднительна. Необходимо отметить, что значимость для развития ГГКС такого воздействия, как взятие крови, определяется в первую очередь соотношением массы тела подопытных животных и степени повреждающего вмешательства. Так, для крыс взятие 3 мл крови (что составляет около 20 % объема циркулирующей крови), а также перерезка относительно крупной подъязычной вены достаточны для развития рассматриваемого синдрома. Можно предположить, что взятие такого же количества крови, например, у кроликов из ушной вены путем венепункции не вызовет выраженной реакции системы гемостаза. В этом случае изменения ТЭГ у животных опытных групп могут расцениваться только как реакция на интоксикацию.
Колебание показателей ТЭГ у крыс контрольной группы затруднило анализ и трактовку изменений систем гемостаза иод действием изучавшихся веществ. Для выявления их специфического действия по показателям ТЭГ мы
/4 2
50 -
10 ~
-ю -
-50 -
Рис. 2. Динамика отклонений от контроля показателей ТЭГ в подостром опыте под действием ИКК.
По оси абсцисс — продолжительность опыта (в мед); но оси ординат—отклонения от контроля (в %)• / — время реакции; 2 — время коагуляции; 3 — специфический показатель коагуляции; 4 —
максимальная амплитуда ТЭГ.
рассчитали процентное отклонение каждого показателя от контроля. На рис. 2 представлена динамика отклонений от контроля показателей ТЭГ под действием наиболее токсичного из изучавшихся веществ — инденкарбоновой кислоты (ИКК) в подостром опыте при суточной дозе 500 мг/кг. В подостром опыте установлено, что ИКК не обладает однонаправленным действием на систему гемостаза. Отмечено колебание направленности отклонений показателей ТЭГ относительно контроля, свидетельствующее о гипокоагуляции в течение 2—4 нед опыта (достоверное повышение временных показателей ТЭГ и снижение максимальной амплитуды ТЭГ) и о гиперкоагуляции на 5-й неделе затравки (снижение временных показателей и достоверное повышение амплитуды ТЭГ). Данные нарушения гемостаза представляется возможным гипотетически связать с нарушениями кроветворной системы организма (с динамикой содержания тромбоцитов в крови), а также с нарушением белково-образующей функции печени, от которой непосредственно зависит синтез факторов свертывания, участвующих в I—2 его фазах.
Для уточнения данного предположения в хроническом санитарно-токсикологическом эксперименте изучалось действие ИКК на систему гемостаза не только по показателям ТЭГ, но и по показателю протромбинового времени, отражающему одновременно и состояние белково-образующей функции печени. В условиях хронического эксперимента с ИКК нами обнаружено изменение активности печеночных ферментов, что свидетельствует о наличии синдрома нарушения целостности гепатоцита как одного из признаков возможного токсического поражения печени, следствием чего можег быть нарушение синтеза факторов свертывания в печени. Сходная динамика изменения протромбинового времени и времени реакции, а именно стойкое достоверное снижение этих показателей относительно контроля в течение первых 3 мес затравки, свидетельствующее о гиперкоагуляции под действием ИКК, отражает нарушения прежде всего 1-й фазы свертывания крови, синтез факторов которой происходит в печени.
Как и в подостром эксперименте, нарушения гемостаза под действием ИКК отмечены на фоне выраженного ГГКС, наиболее заметного при анализе динамики изменения суммарного времени реакции и коагуляции (И+К). У животных контрольной группы фаза стойкой гиперкоагуляции, развивающаяся постепенно на протяжении 1—2 мес опыта (К + К снижается почти на 40 % относительно фонового показателя), сменяется на 3-м месяце фазой гипокоагуляции, которая, однако, недолговременна, в результате повторных ежемесячных венесекций вновь наблюдается значительная гиперкоагуляция (снижение И + К на 60 % относительно фона). Чередование фаз синдрома наблюдается у крыс контрольной группы на протяжении всего хронического опыта. Выравнивание показателей ТЭГ с уровнем фона происходит на 6-м месяце опыта.
Результаты исследований позволяют сделать вывод о том, что система гемостаза заслуживает пристального внимания при проведении токсикологических исследований в связи с универсальностью и неспецифичностью ее изменений, а также зависимостью от состояния многих систем и органов. Выявлена возможность анализа специфического звена действия ИКК на систему гемостаза на фоне развития ГГКС в результате повреждения сосудов и кровопо-тери при взятии крови у животных. В то же время в этих условиях не представляется возможным выделить ГГКС как неспецифическую реакцию на интоксикацию. Следовательно, выявление ГГКС не может служить интегральным тестом состояния организма при взятии крови путем подъязычной венесекции у таких мелких лабораторных животных, как крысы.
№ 2. — С. 3
Литература
1. Балуда В. П.// Пат. физиол. — 1977. -13.
2. Болдырев А. В., Мяснянкина Л. М. // Эпидемиология, клиника, диагностика и профилактика антропонозных и зоонозных инфекций. — Астрахань, 1982. — С. 152— 154.
3. Жаденов И. И., Солун Е. Н. // Тромбозы и эмболии в травматологии и ортопедии. — Л., 1981. — С. 3—9.
4. Карпенко В. Н. // Врач. дело. — 1975. — № 1. — С. 140— 142.
5. Карпенко В. Н. // Там же. — 1981. — № 12.— С. 103— 106.
6. Коваленко И. И. // Гигиена внешней и производственной среды. — Харьков, 1982. — С. 26—28.
7. Кузник Б. И., Патеюк В. Г. // Пробл. гематол. —
1979. — № 7. —С. 34—39.
8. Кузник Б. И., Красик Я. Д., Патеюк В. Г. и др. // Физиология и патология системы гемостаза. — Чита,
1980.— С. 95—104.
9. Мачабели М. С. Вопросы клинической коагулологии. — Тбилиси, 1962.
10. Тумко Г. В., Шихман С. М.//Мед. паразитол.— 1980. —№ 5. —С. 12—16.
11. Якунин Г. А. Современные методы анализа тромбоди-намограммы: Метод, пособие. Ч. 1. —М., 1973.
Поступила 12.01.87
