CC BY
26
Е. И. Рабинович, С.В.Поволоцкая, В.А. Турдакова, С. Н. Соколова
ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЦИКЛИЧЕСКИХ НУКЛЕОТИДОВ В КАЧЕСТВЕ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ИНДИВИДУАЛЬНОГО
КАНЦЕРОГЕННОГО РИСКА
ФГУП Южно-Уральский Институт биофизики (ЮУрИБФ) ФМБА России,
г. Озерск
E.I.Rabinovich, S.V.Povolotskaya, V.A.Turdakova, S.N.Sokolova
EXPERIENCE OF USING CYCLIC NUCLEOTIDES AS MOLECULAR-BIOLOGICAL MARKERS OF THE INDIVIDUAL CARCINOGENIC RISK
FSUE Southern Urals biophysics institute (SUB!) FMBA, Russia, Ozyorsk
Ключевые слова: цАМФ, цГМФ, канцерогенез, ионизирующее излучение, группы повышенного онкологического риска.
Keywords: cAMP, cGMP, carcinogenesis, ionizing radiation, groups of raised oncological risk.
Цель: клиническое испытание информативности молекулярного биомаркера — соотношения цАМФ/цГМФ — для прогнозирования злокачественных опухолей в когорте профессиональных работников ПО «Маяк». Данный маркер является основой разработанного нами метода доклинической диагностики опухолевого роста у экспериментальных животных (Патент 1 704 563 СССР, МКИ 5(7 01 N33/48. Способ обнаружения опухолевого процесса у экспериментальных животных. 1992 г.).
Материалы и методы: Протокол исследования предусматривал формирование группы мониторинга (на основании наличия сверхнормативного радиационного воздействия в процессе профессиональной деятельности на ПО «Маяк»); проведение биохимического мониторинга по тесту соотношения цАМФ/цГМФ в моче (1 раз в 6 мес); выделение подгруппы лиц с устойчиво повышенным тестом цАМФ/цГМФ (положительный тест).
Результаты: Регистрация положительного теста цАМФ/цГМФ позволила из группы мониторинга (282 человека) выделить «Тест-положительную группу», численностью 48 человек. К концу 7-летнего периода наблюдения кумулятивный выход злокачественных опухолей в «Тест-положителъной группе» достоверно превышал таковой в остальной части обследованного контингента в 3 раза (относительный риск развития ЗНО составил 3,2; ДИ = 1,2—8,4). При этом положительным тестом сопровождались 100% гемобластозов (хронический лимфолейкоз и острый миелолейкоз), 50% базалиом и 25% солидных опухолей. Выводы: Устойчиво повышенное соотношение цАМФ/цГМФ в моче можно рассматривать в качестве прогностического биомаркера для разделения пациентов на категории с различной степенью вероятности возникновения онкологической патологии. Внедрение теста в клиническую практику позволит в конечном итоге увеличить количество лиц с выявленными опухолями на ранних стадиях, что является важным целевым индикатором совершенствования диагностики злокачественных опухолей среди персонала ядерно-опасных предприятий.
Objective: clinical study of molecular marker information capacity — cAMP/cGMP ratio — for prognostication of malignant neoplasms in Mayak PA workers cohort. This marker is a base of our developed method ofpreclinical diagnostics of tumor growth in experimental animals (Patent 1 704 563 USSR, IPC 5G 01 N33/48. Method of neoplastic process detection in experimental animals, 1992). Materials and methods: research protocol provided creation of a limited monitoring group with high cancer risk (282 persons) among Mayak PA workers; biochemical monitoring on test of cAMP to cGMP ratio (cAMP/cGMP) in urine (once per 6 months); selection of a subgroup including ■ individuals with a positive (stable increased) test. Results: Registration of cAMP/cGMP positive test made it possible to select a "Positive test group " (48 individuals) from the monitoring group. By the end of 7-year period offollowing-up, cumulative number of malignant neoplasms for the "Positive test group " had been significantly 3 times greater than for the other part of examined contingent (relative risk of cancer development was 3.2; Cl = 1.2- 8.4). At that, positive test was registered for 100% hemoblastoses (chronic lymphatic leukemia and acute myeloid leukemia), 50% basaliomas and 25% solid tumors.
Conclusion: Stable increased cAMP/cGMP ratio in urine can be considered as a prognostic biomarker aimed to divide patients into categories with different level of cancer probability. Practical application of this test will enable to increase number of persons with tumors diagnosed at earlier stage. It is an important targeted indicator of diagnostics improvement of malignant neoplasms for personnel from nuclear-hazardous plants.
Введение
Решение проблемы активного и раннего выявления злокачественных опухолей тесно связано с изучением различных факторов онкогенеза и поиском критериев, позволяющих выделять среди населения «группы риска» развития злокачественных новообразований (ЗНО). Одним из канцерогенных факторов является воздействие на организм ионизирующего излучения. На этом основании профессиональные работники ПО «Маяк» представляют «группу риска» развития онкозаболеваний, что подтверждено
многолетними клиническими и
эпидемиологическими исследованиями сотрудников ЮУрИБФ [7]. Однако эпидемиологические факторы риска представляют собой только показатели степени вероятности развития патологии. Поиск маркеров не только повышенной вероятности, но и признаков ранних стадий заболевания остается главной задачей исследователей. Основные
инструментальные методы диагностики злокачественных опухолей (рентгенологический, эндоскопический, ультразвуковой и др.), которые используют в практическом здравоохранении, как правило, отображают уже сформировавшиеся морфоло
гические изменения в больном органе. Кроме того, методы лучевой диагностики при систематическом применении являются далеко не безвредными для организма в связи с радиационной нагрузкой. Ни один из известных сывороточных онкомаркеров не используется для предсказательных целей или доклинической диагностики из-за их низкой информативности на ранних стадиях заболевания.
Как известно, злокачественные опухоли, возникающие в результате суммирования генетических ошибок, характеризуются неограниченным пролиферативным потенциалом клеток в сочетании с нарушениями клеточной дифференцировки, замедлением процессов программируемой клеточной гибели (апоптоза), клеточной атипией и другими параметрами [5]. Показано, что транс -формированные клетки, в отличие от нормальных, утрачивают способность к восприятию сигналов организма-хозяина, доставляемых к клеткам в виде гуморальных факторов и направленных на прекращение пролиферации [5]. В последнее время в клинической медицине активно изучаются различные молекулярно-биологические показатели, изменяющиеся при возникновении или профессии гиперпластического про
цесса. К ним относятся иммуногистохими -ческие и молекулярно-генетические маркеры, показатели пролиферативной активности, клеточной атипии, апоптоза, ангиогенеза [3,14,16].
В ряду клеточных событий на прекан-церогенной стадии важное место принадлежит изменениям циклического 3':5'-аде-
нозинмонофосфата (цАМФ) и циклического 3':5'гуанозинмонофосфата (цГМФ), тесно связанных с функционированием генома [2,12]. Являясь вторичными мессенджерами гормонального сигнала, цАМФ и цГМФ оказывают координированное влияние на многие биохимические процессы, что определяется как «штейотипическая» программа клетки. Так, например, в нормальных условиях снижение соотношения цАМФ/цГМФ является для клеток позитивным сигналом, вызывающим клеточную пролиферацию и угнетающим клеточную дифферен- цировку [13]. Интерес к циклическим нуклеотидам (ЦН) как к соединениям, потенциально важным в диагностике злокачественных
новообразований, возник в связи с особой ролью цАМФ и цГМФ в неопластической трансформации клеток. Имеется
экспериментальный материал о том, что цАМФ в комплексе со специфическим рецепторным белком взаимодействует с про- моторными участками генома, индуцируя или дерепрессируя активность различных генов [13]. Накопленные научные факты послужили теоретической основой для разработки нами метода доклинической диагностики
опухолевого роста у экспериментальных животных, который был запатентован в 1992 г. [10]. При этом в качестве теста рассматривалось соотношение цАМФ/цГМФ, как один из интегральных показателей регуляции проведения экстрацеллюлярного сигнала к клеточному ядру. Было установлено, что устойчивое увеличение соотношения между цАМФ/цГМФ в моче, может служить маркером индукции опухолевого процесса. С помощью данного теста в специальном «слепом» исследовании оказалось воз
можным сделать прогноз развития опухоли почти у 87% животных за 4-6 мес. до морфологической диагностики [6]. Для оценки диагностической информативности теста были рассчитаны принятые статистические критерии: показано, что тест обладает высокой диагностической чувствительностью (85%), удовлетворительной диагностической эффективностью (68%); предсказательная ценность результата составила 73 % [ 11 ].
В настоящей работе приводятся результаты пилотного клинического испытания информативности молекулярного биомаркера — соотношения цАМФ/цГМФ — для прогнозирования ЗНО среди части когорты профессиональных работников ПО «Маяк», которые имеют высокую степень риска развития онкологических заболеваний в связи с работой в условиях сверхнормативного радиоактивного воздействия. Следует отметить, что существенное преимущество испытуемого нами биомаркера состоит в полном отсутствии инвазивно- сти для человека, так как исследуемым субстратом является моча. Это позволяет проводить динамическое наблюдение за пациентами в амбулаторных условиях.
Материалы и методы
Исследование носило продольный, проспективный характер. Протокол исследования предусматривал формирование группы мониторинга, проведение мониторинга по молекулярно-биологическому маркеру,
выделение группы лиц повышенного онкологического риска, наблюдение за группой мониторинга для регистрации возникших злокачественных опухолей.
Критерии формирования группы мониторинга
Критерием для отбора лиц в группу мониторинга явилось наличие зарегистрированного радиационного воздействия в процессе профессиональной деятельности на ПО «Маяк» в дозах, превышающих предельно допустимые (согласно НРБ-99/2009), что приводит к увеличе
нию канцерогенного риска [8]. Вне зависимости от зарегистрированной дозы облучения в группу были включены лица с профессиональными заболеваниями (хроническая лучевая болезнь, пневмосклероз, лучевой дерматит). Критерием исключения было наличие злокачественных
новообразований, диагностированных до начала обследования. Выделение работников, соответствующих данным критериям, проводилось по спискам лиц с известным профессиональным маршрутом. Приглашение работающих к участию в обследовании проводили в период ежегодного медицинского осмотра; лиц, находящихся на пенсии, приглашали по телефону или в письменном виде.
Порядок проведения биохимического мониторинга
Биохимический мониторинг сформи -рованной группы состоял в периодическом исследовании мочи на содержание ЦН (примерно 1 раз в 6 мес.). К обследованию допускали лиц без острых респираторных и обострения хронических заболеваний. В процессе каждого «раунда» обследования у пациентов отбирали аликвоту утренней порции мочи (примерно 3 мл), фильтровали через бумажный фильтр, стабилизировали смесью хлороформ-вода (2:1) и трис- ЭДТА-НСЬ-буфером. При невозможности проведения анализа в этот же день аликвоты хранили в замороженном виде при —30°С. Определение цАМФ и цГМФ проводили радиоиммунным методом при помощи тест-наборов фирмы "Amersham" (Великобритания) согласно инструкциям, приложенным к наборам, с последующим измерением радиоактивности проб, меченных изотопом трития (3Н), на сцинтилля- ционном счетчике. Результаты всех обследований регистрировали в специально разработанных формах с последующим внесением в базу данных Microsoft SQL Server.
В ходе мониторинга и в течение 2-х лет после его окончания с целью регистрации вновь появившихся онкологиче
ских заболеваний проводили изучение медицинской документации (амбулаторные карты, первичные документы онкологического кабинета, истории болезней).
Подходы к выделению «Тест-положительной» группы
Условием, в соответствии с которым пациента включали в «Тест- положительную» группу, являлось наличие положительного ЦН-теста (отношения цАМФ/цГМФ). ЦН-тест считали положительным, если его значение равнялось или превышало
дискриминационную величину и
регистрировалось не менее 3 раз за период мониторинга.. Как известно,
дискриминационная величина (или граница решения) в лабораторной практике используется для разделения результатов на положительные (патология) и отрицательные (норма) [4]. При разработке в эксперименте способа прогнозирования развития
злокачественных опухолей [10] нами была определена дискриминационная величина (Д в виде:
Д = М + у где
М — среднеарифметическая величина соотношения цАМФ/цГМФ у индивидуумов контрольной группы, А — средне-квадратическое отклонение.
Для установления дискриминационной величины были определены референтные значения циклических нуклеотидов. С этой целью методом случайной выборки была сформирована группа контроля из 70 человек, не контактировавших с источниками ионизирующего излучения в своей профессиональной деятельности. При формировании группы пользовались критериями, приведенными в рекомендациях Скандинавского общества клинической химии и физиологии и методических рекомендациях по разработке референтных величин лабо -раторных показателей [9]. Известно, что целый ряд заболеваний (так называемые «мешающие» заболевания) сопровождается изменением уровней циклических нуклеоти
дов во внеклеточной жидкости, как в сторону повышения, так и снижения. Большую роль цАМФ и цГМФ играют в патогенезе аллергических, аутоиммунных и эндокринных заболеваний, что сказывается на выделении их с мочой [12]. Заболевания почек, сопровождающиеся нарушением функции, также влияют на экскрецию циклических нуклеотидов. В связи с этим, критерием ис -ключения из группы контроля было наличие одного из «мешающих заболеваний».
Согласно формуле, приведенной выше, дискриминационная величина для ЦН-теста составила 8,75 уел. ед. (М= 6,39 усл.ед., 5= 2,36).
Статистический анализ проводили с использованием методов вариационной статистики. Относительный риск развития злокачественных опухолей между группами рассчитывали как отношение шансов [ 1 ].
Результаты и обсуждение
Группа, сформированная из персонала ПО «Маяк», включала около 500 человек. Динамическое обследование по ЦН- тесту проводили в течение 5 лет, при этом начало мониторинга для участников обследования было не одновременным, поэтому количество «раундов» обследования составило у разных индивидуумов от 2 до 7. Для статистического анализа были выделены 282 человека, обследованных не менее 3 -х
раз по ЦН-тесту в течение 2-х и более лет.
Регистрация положительного ЦН- теста (значение цАМФ/цГМФ = или > дискриминационной величины, кратность повторения не менее 3-х раз) позволила из группы мониторинга выделить «Тест-пол
/гт^плис\ л о
ожительную (Т ) группу», численностью 48 человек, что составляет 17% от всей группы мониторинга. Исходя из ранее
постулированной концепции [6],
предполагалось, что лица с устойчиво высоким соотношением цАМФ/цГМФ имели более высокую вероятность развития
злокачественных новообразований по сравнению с теми, у которых тест оставался ниже дискриминационной величины — «Тест-нулевая (Т°) группа».
Обе группы были близки по возрасту: средний возраст на начало мониторинга составлял 60,2± 1,3 года и 70,1±9,0 лет для мужчин и 67,9±1,1лет и 67,7±0,6 лет для
тплюс гт^О
женщин в «Т —группе» и «Т°—группе» соответственно. В каждой из групп представительство мужчин было больше, чем женщин (76% против 24%). От момента начала контакта с радиационным фактором прошло не менее 40 лет. Из таблицы 1 следует, что доля лиц с различными сценариями облучения в обеих группах была близкой; мало отличались и средние значения суммарных доз внешнего облучения и содержания инкорпорированных радионукли-
Таблица 1
Некоторые дозиметрические характеристики группы мониторинга
«Т"лкх-группа» (48 чел.) «Т"-группа» (234 чел.) /
Мужчины Женщины Мужчины Женщины
Всего «=34 «=14 «=192 II 2
Подверглись только внешнему облучению, чел. 7(14,5%) 34(14,5%)
Подверглись только внутреннему облучению, чел. 2(4,2%) 11 (4,7%)
Подверглись сочетанному облучению, чел. 39(81,3%) 187 (80%)
Облучение не зарегистрировано 0 2(0,8%)
Проф. заболевание 21(44%) 90(38%)
Средняя доза внешнего облучения, сГр 104+26,9 п= 32 210,7+46,6 «=14 132,6+10,7 «=180 186,4+21,9 «=41
Среднее содержание 239Ри, кБк 4,45+1,3 п=32 1,18+0,4 «=9 3,0+0,23 «=171 2,9+0,97 «=27
дов (преимущественно Ри) на организм.
Обращает внимание, что в обеих группах значительная часть лиц имела сочетанное радиационное воздействие. В структуре профессиональных заболеваний
преимущественной являлась хроническая лучевая болезнь (84%), доли профпневмо -склероза и профдерматита были примерно равными (8,5% и 7,5% соответственно).
К концу 7-летнего периода наблюдения суммарно в обеих группах было зарегистрировано 16 злокачественных опухолей (табл.2), из них 6 новообразований развились в группе с положительным ЦН-тестом и 10 опухолей — в группе без повышения данного показателя. В структуре злокачественных новообразований в обеих группах преобладали солидные опухоли (75%), среди которых, наибольшую долю составляли
новообразования легкого. Следует отметить, что диагностика ЗНО проводилась независимыми методами без учета результатов биохимического мониторинга.
Как видно, к концу 7-летнего периода наблюдения кумулятивный выход злокачественных опухолей в «Т плюс—группе» достоверно превышал таковой в остальной части обследованного контингента в 3 раза (относительный риск развития ЗНО составил 3,2; ДИ = 1,2-8,4). При этом положительным тестом сопровождались 100% гемобластозов (хронический лимфо- лейкоз и острый миелолейкоз), 50% база- лиом и 25% солидных опухолей.
В литературе приводятся сведения о значении величины суммарной дозы облучения для развития опухолей, об увели
чении выхода опухолей с возрастом, о половых различиях некоторых видов раковых опухолей [8]. Однако сравниваемые группы были идентичны по возрастно-половому составу и по дозиметрическим характеристикам, что не позволяет связать разницу в выходе опухолей в обеих группах с вышеперечисленными факторами. В процессе работы нами была собрана информация об основных хронических заболеваниях у каждого индивидуума. Особое внимание было уделено «мешающим» заболеваниям, которые могли стать источником ложноположительных или ложноотрицательных результатов [12]. К «мешающим» заболеваниям относят бронхиальную астму, сахарный диабет, ревматизм, атопический дерматит, и другие аутоиммунные и аллергические заболевания; болезни почек, сопровождающиеся
хронической почечной недостаточностью, некоторые нарушения обмена веществ, в частности, обмена пуриновых нуклеотидов (подагра, подагрический артрит). Анализ данных после исключения всех лиц с «мешающими» заболеваниями показал, что различия между обеими группами в частоте выхода злокачественных опухолей стали еще более явными (табл.З).
Помимо регистрации факта устойчивого повышения ЦН-теста интерес представляет динамика теста в период мониторинга. К сожалению, срок наблюдения в нашем исследовании был, как правило, гораздо короче, чем латентный период развития большинства злокачественных опухолей, в связи с этим мы смогли проследить динамику теста от начала мониторинга до
Таблица 2
Кумулятивный выход ЗНО в «Т"ли,с-группе» и «Т°-группе»
Период наблюдения за выходом ЗНО (от начала мониторинга) «Тпг"°с-труппа» (я=48) «Т°-группа» (я=234) Отношение шансов (95%-ный доверительный интервал)
Число лиц со ЗНО % Число лиц со ЗНО %
5 лет 2 4,2 7 3,0 1,4 (0,3-6,6)
6 лет 4 8,3 7 3,0 3,0 (0,9-9,8)
7 лет 6 12,5* 10 4.3 3,2(1,2-8,4)
Примечание *—различия статистически значимы, р<0,05
Таблица 3
Выход злокачественных опухолей с учетом «мешающих» заболеваний
Группы мониторинга «Т"люс-группа» «Т°-группа»
п % п %
Всего 282 человека
Из них по группам 48 234
Число злокачественных опухолей 6 12,5* 10 4,3
Без «мешающих» заболеваний 201 человек
Из них по группам 35 166
Число злокачественных опухолей 6 17,1* 6 3,6
Примечание. * — раззшчия между группами статистически значимы, р
развития опухолей только у пятерых пациентов. Варианты «поведения» ЦН-теста были различны. В качестве примера на рисунке приведена динамика ЦН-теста для двух пациентов с выявленным в процессе мониторинга раком легкого (см.рисунок).
Больной К. В процессе биохимического обследования зарегистрировано три
положительных ЦН-теста, первоначальное повышение цАМФ/цГМФ отмечено еще за 27 мес до диагностики медиасти- нального рака легкого. Смерть больного К. наступила через 3 года после обнаружения новообразования.
Больной С. Повышения ЦН-теста не зарегистрировано, более того за несколько месяцев до установки диагноза соотношение цАМФ/цГМФ существенно снижалось (в 3 раза ниже средней величины). Примерно спустя 27 месяцев от начала мониторинга выявлен центральный рак нижне-долевого бронха. Смерть больного С. наступила через
< 0,05.
3 месяца после обнаружения опухоли.
В экспериментальных условиях динамика соотношения циклических нуклеотидов в моче имела, как правило, фазный характер. Так, повышение ЦН-теста, наблюдавшееся на начальных стадиях наблюдения, сменялось снижением его до нормы или ниже незадолго до явной клинической манифестации и гибели животных [6]. Подобные сведения о динамике экскреции циклических нуклеотидов с мочой имеются и в литературе [18]. В связи с этим нами было высказано предположение о том, что противоречивость литературных данных об информативности ЦН для диагностики он-копатологии обусловлена отсутствием динамического наблюдения за пациентами [6]. Результаты однократных определений ЦН в-моче могут отражать различные периоды развития опухолевого процесса, что влечет за собой неоднозначность интерпретации. Действительно, можно предпо
Ч ш с;
■ -------------------------. !4 12 10
■ Больной К Л 8 к
X больной С. ■ 6 и
-------Д-М+б в
X
, 4 и
XX с
с
30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5 0 0 0
Срок до выявления опухоли, мес
Рис. 1. Динамика соотношения цАМФ/цГМФ у больного К. («Т1"1*-группа») и больного С. («Т'-группа»)
перед выявлением рака легкого
ложить, что в приведенных выше случаях мониторинг охватил различные фазы опухолевой прогрессии. Накопление сведений о поведении ЦН-теста при гиперпластиче- ском процессе может иметь значение для углубления знаний о молекулярных механизмах опухолевого роста.
Заключение
Результаты данного пилотного исследования свидетельствуют о том, что у лиц с устойчиво повышенным соотношением цАМФ/цГМФ, относительный риск развития злокачественных опухолей примерно в 3 раза выше, чем у лиц без положительного теста. При этом данный тест не проявляет специфичность по отношению к каким-либо конкретным локализациям, но его возрастание может свидетельствовать о состоянии «онкологического неблагополучия» в организме. Преимущество данного исследования состоит в том, что апробируемый тест был применен для когорты повышенного онкологического риска, уже сформированной на основании эпидемиологического критерия — воздействия ионизирующего излучения в
профессиональных условиях, в период работы на ПО «Маяк. Известно, что диспансеризация групп с высоким преваленсом заболеваний требует на первом этапе применения чувствительных методов, которые позволяют с большой степенью достоверности провести «сужение» групп риска и перейти к установке диагноза с помощью высокоспецифичных методов.
В настоящее время ясно, что ни один из известных биологических маркеров не может претендовать на самостоятельную роль предиктора рака. Часть содержащихся в системной циркуляции онкомаркеров зависит от присутствия в организме опухолевой ткани, другие определяются воздействием иных факторов, предрасполагающих к развитию рака. В мае 2005г. на 58-ой Ассамблее ВОЗ была принята
новая стратегия профилактики злокачественных новообразований [17]. Одной из ключевых позиций в этом документе явилось обоснование необходимости разработки целого комплекса тестов и показателей повышенного риска ЗНО. С этой точки зрения исследование связи между циклическими нуклеотидами и развитием злокачественных опухолей становится инновационным в плане разработки дополнительного предсказательного теста онкологических заболеваний. Нам представляется, что положительный ЦН-тест можно рассматривать в качестве прогностического биомаркера, позволяющего разделить пациентов на категории с различной степенью вероятности возникновения онкологической патологии [15]. Необходимо продолжение клинической апробации ЦН -теста для уточнения параметров чувствительности и специфичности, сроков между регистрацией позитивного ЦН-теста и развитием клинических и морфологических признаков опухолей. Внедрение теста в клиническую практику позволит в конечном итоге увеличить количество лиц с выявленными опухолями на ранних стадиях, что является важным целевым индикатором совершенствования диагностики
злокачественных опухолей среди персонала ядерно-опасных предприятий.
Приносим благодарность профессору ^ А.Кошурниковой за предоставление архивных дозиметрических данных, использованных в настоящей работе.
Литература
1. Альбом А., Норелл С. Введение в со -временную эпидемиологию. / Пер. с англ. И. Боня. // Таллинн, 1996. — 54с.
2. Берштейн Л.М. Практическое и теоре-тическое значение изучения системы циклических нуклеотидов у онкологических больных // Вопр. онкол. — 1986. -Т. 32. -№1.-С. 115-116.
3. Божок A.A., Семиглазов В.Ф., Семи-глазов В.В. и др. Прогностические и предсказательные факторы при раке молочной железы // Вопр. онкол. — 2005. -Т. 51.- №4. - С. 434-443.
4. Делекторская JI.H., Пименова Л.М.. Кадашева О.Г. Оценка информативности лабораторных тестов // Клин. лаб. диагн. -1992. -№1-2. - С. 49 - 58.
5. Имянитов Е.И. Молекулярные механизмы опухолевого роста // Вопр. онкол. - 2010. -Т. 56. - №2. - С. 117-128.
6. Кисельгоф (Рабинович) Е.И., Лемберг
B.К., Мушкачева Г.С. Соотношение между циклическими нуклеотидами мочи при динамическом исследовании у крыс с радиогенными опухолями // Радиобиология. - 1991. - Т. 31. - № 2 .-С. 227-231.
7. Кошурникова H.A., Окатенко П.В., Шильникова Н.С., Кузнецова И.С., Сокольников М.Э. Медицинские последствия профессионального облучения (Уровни онкосмертности среди персонала основных производств ПО «Маяк») // Медицина экстремальных ситуаций. — 2006. - № 2 (16). - С.5—14.
8. Кошурникова Н.А., Окатенко П.В., Сокольников М.Э., Василенко Е.К., Хохряков В.В. Медицинские последствия профессионального облучения: канцерогенный риск в когорте персонала ПО «Маяк» // Мед. радиол, и ра- диац. безопасность. — 2008. — Т. 53. — № 3. -
C. 23 - 33.
9. Меньшиков В.В., Пименова Л.М. Метод. рекомендации по разработке референтных величин лабораторных показателей. — М. - 1983. — С.7
10. Патент 1 704 563 СССР, МКИ 5G 01 N 33/48. Способ обнаружения опухолевого процесса у экспериментальных животных // Мушкачева Г.С., Кисельгоф (Рабинович) Е.И., Лемберг В.К.
(СССР).-№4 258 225. Заяв.08.06.87. Опубликовано 1992.-Бюл. №1.
11. Рабинович Е.И., Соколова С.Н. Информативность теста соотношения циклических нуклеотидов при прогнозировании злокачественных опухолей в эксперименте // Вопр. онкол. — 1996. -Т. 42. -№4. -С. 45-48.
12. Федоров Н.А. Биологическое и клини-ческое значение циклических нуклеотидов. / М.: Медицина, 1979. — 184 с.,
13. Федоров Н.А., Радуловацкий М.Г., Че-хович Г.Е. Циклические нуклеотиды и их аналоги в медицине. / М.: Медицина, 1990.
- 192с.
14. Шатохин С.Н., Шабалин В.Н. Маркеры злокачественного роста в морфологической картине биологических жидкостей человека // Вопр. онкол.— 2010,—Т.56,— №3.—С.293-300
15. Gospodarowicz М. К., O'Sullivan В. Prognostic factors in Cancer- 2nd edition-N.Y.: Wiley-Liss, 2001.-P. 17-35
16. Nathanson V.L., Wooster R., Weber B.L. Breast cancer genetics: what we know and what we need // Nat. Med.— 2001,— V. 7,-P. 552-556.,
17. Nieburg H.E. Cancer prevention and control strategy resolution adopted by the 58-th-World Health Assambly, Geneva, May 25, 2005 // Cancer Detect. Prevent. -2005.-V. 29.
- P. 403-404
18. Murad F., Kimura H., Hopkins H.A. et.al. Increased urinary excretion of cyclic guanosin monophosphate in rate bearing Morris hepatoma 9924A // Science. — 1975. - V. 190. - No 4209. - P. 58-60
Рабинович Евгения Израиловна 456780, Озерское шоссе, 19, ФГУП ЮУрИБФ ФМБА России Тел.: (35130) 74447 e-mail: lab8@subi.su
