CC BY
112
3. Volkova O.V., Eletskii Yu.K. Osnovy gistologii s gistologicheskoi tekhnikoi (The basis of histology with histological technique), M., Meditsina, 1982, 304 p.
4. Grechko V.V., Khonin G.A. Sravnitel'naya gistologicheskaya kharakteristika myshts pal'tsev kur (Comparitive histological characteristics of the hen finger muscles), Vestnik veterinarii, 2013, No. 3 (66), pp. 38-39.
5. Gurova N.I. O razvitii mezhrebernoi muskulatury u zarodysha korovy (About the development of the intracostal muscle in bovine foetus), Tr. In-ta morfologii zhivotnykh im. A.N. Severtsova, M, Izd-vo AN SSSR, 1960, Vyp. 29, pp. 75104.
6. Danilova L.V. K voprosu o razvitii muskulatury zadnei konechnosti u zarodysha korovy (To the issue of muscles development in the caudal leg of bovine foetus), Tr. in-ta morfologii zhivotnykh im. A.N. Severtsova, M, Izd-vo AN SSSR, 1960, Vyp. 29, pp. 34-74.
7. Zherebtsov N.A. K voprosu morfologii volokon nervov skeletnykh myshts u nekotorykh domashnikh zhivotnykh (To the issue of morphology of the skeletal muscle nerves fibres in several domestic animals), Uchenye zapiski Kazanskogo veterinarnogo instituta, 1961, T. 80, pp. 173-177.
8. Solov'ev V.A. Morfogistokhimicheskaya kharakteristika mionov zhevatel'noi myshtsy mlekopitayushchikh i che-loveka (Myones' morphohistochemical characteristics of mammalian and human masticatory muscles), Arkhiv anatomii, 1982, No. 10 (83), pp. 65-71.
9. Stroikov A.A. Khod, vetvlenie i vnutristvol'noe stroenie nervov nosovoi polosti loshadi (Nerves srtucture, branching out and intratrunk morphology of the horse nasal cavity nerves), Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo uni-versiteta, 2012, No. 4 (36), Ch. 1, pp. 83-87.
10. Suvorova L.V. O razvitii dvigatel'nykh nervnykh okonchanii pishchevoda krolika (About development of rabbits' oesophagus motor nerve terminals), Arkhiv anatomii, 1965, No. 6 (48), pp. 87-97.
11. Khonny O.A. Razvitie vnutrimyshechnykh nervov goleni cheloveka v prenatal'nom ontogeneze (Development of the intramusclar nerves in human shin in prenatal ontogenesis), Myshechnaya aktivnost' i zhiznedeyatel'nost' cheloveka i zhivotnykh, Tr. instituta evolyutsionnoi morfologii i ekologii zhivotnykh AN SSSR, M, Izd-vo AN SSSR, 1986, pp. 219-228.
12. Shumakov G.F. Bystraya okraska mielinovykh obolochek nervnykh volokon (Quick colouring of the nerve fibers myelin cover), Arkhiv anatomii, 1980, No. 8, pp. 36-39.
13. Appel H.-J. Motor activity and caliber of myelinated axones: a morphometric study on the schiatic nerve, Int. J. Sports Med., 1981, Vol. 1, No. 1, pp. 37-41.
14. Dall P.D., Thomax E., Curi P.R. Postnatal growth of skeletal muscle fibres of the rat, Gegenbaurs Morph. Jahrb., 1984, Vol. 130, No. 6, pp. 827-834.
15. Nakaima J., Kidokoro J., Clier F.G. The development of functional neuro-muscular junctions in vitro: an ultrastructural and physiological study, Develop. Biol., 1980, Vol. 77, No. 1, pp. 52-72.
УДК 619: 615.032: 614.9: 615.211:
ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ГАБАПЕНТИНА, ЗОЛЕТИЛА 100 И КСИЛЫ ДЛЯ АНАЛЬГЕЗИИ И СЕДАЦИИ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЭКСПЕРИМЕНТА
В. А. Зименков, аспирант, ФГБОУ ВО Пермский ГАТУ, ул. Петропавловская, 23, Пермь, Россия, 614990 E-mail: oknoperm@gmail.com
Аннотация. В статье описан опыт использования Габапентина, Золетила 100 и Ксилы для седации и анальгезии лабораторных мышей с целью снижения дистресса, страданий и боли при заборе крови, путем ампутации кончика хвоста. В опыте были использованы половозрелые особи женского пола, возрастом 3-4 месяца и весом 22-25 г, которые были поделены на четыре
экспериментальных группы по 10 мышей в каждой. Так как забор крови в любом случае сопровождается болью, обязательной для всех четырех групп было равномерное получение (в течение суток до опыта) перорально Габапентина, растворенного в воде, в дозе около 1500 мг/кг. Дополнительно к Габапентину, второй группе проводилась внутримышечная (в/м) инъекция Золетила 100 в дозе 20 мг/кг, третьей группе добавлялась подкожная (п/к) инъекция Ксилы в дозе 5 м/кг, а четвертой группе - комбинация препаратов Ксила + Золетил 100 внутримышечно в дозах 5 мг/кг и 10 мг/кг соответственно. Оценены временные параметры седации и анальгезии в зависимости от доз и комбинаций препаратов у подопытных животных. При анализе результатов рекомендована оптимальная схема седации мышей: голодная диета 4-6 часов; Га-бапентин 1500 мг/кг в сутки перорально (п/о) с водой в поилке, начиная за 24 часа до манипуляции; Золетил 20 мг/кг внутримышечно, непосредственно перед забором крови. Такой схемой достигается хорошая анальгезия, быстрый вход в седативное состояние, достаточное время для проведения манипуляций с животным, а также относительно быстрый выход из состояния наркоза.
Ключевые слова: Габапентин, Золетил 100, Ксила, лабораторная мышь, эксперимент, боль, седация, анальгезия.
Введение. Лабораторная мышь на сегодняшний день является самым востребованным модельным животным для постановки опытов т уыо. Более 60% всех экспериментов в фармакологии проводятся на этих животных. Благодаря лабораторной мыши сделано немало открытий в области бактериологии, токсикологии, в мутагенных и канцерогенных исследованиях [1].
К сожалению, почти любой эксперимент, связанный с исследованиями т у1уо, сопряжен с дистрессом, страданием и болью у лабораторных животных. Поэтому важно надлежащие содержание, уход за живыми моделями, используемыми в экспериментальных и других научных целях согласно Европейской конвенции по защите позвоночных животных от 2004 года, на основании которой в Российской федерации был принят соответствующий ГОСТ 33216-2014 «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила содержания и ухода за лабораторными грызунами и кроликами». При манипуляциях, связанных с болью, необходимо обеспечить адекватную анальгезию, седацию или анестезию у лабораторных мышей. По данным различных источников, у грызунов можно использовать несколько препаратов для анестезии
и анальгезии, в основном ингаляционного применения. А так как доступ к этим препаратам на данный момент ограничен, было принято решение использовать доступные неингаляционные средства [1-4].
Целью нашей работы является определить оптимальное сочетание и режим дозирования обезболивающих и седативных препаратов, обеспечивающих адекватную анальгезию и непродолжительную седацию у лабораторных мышей.
Методика. Объектом исследования служили лабораторные мыши - альбиносы возрастом 3-4 месяца и весом 22-25 граммов, всего 40 особей - самок. Животные содержались в пластиковых прозрачных ящиках размером по полу 30 на 40 см и высотой 25 см, по 10 мышей в каждом. Температура в помещении 22-24 градуса Цельсия при относительной влажности 45-60 % [3]. Кормление производилось готовыми рационами для грызунов Little One, вода в постоянном доступе. Перед опытом животные содержались на голодной диете 4-6 часов. В качестве лекарственных средств нами были использованы: Габапентин Канон, действующее вещество габапентин 300 мг/капсула, Ксила, действующее вещество ксилазина гидрохлорид 20 мг/мл и Золетил 100, дей-
ствующие вещества золазепама гидрохлор ида и тилетамина гидрохлорида по 50 мг/мл [5, 6]. Животные были поделены на 4 группы одного пола, по 10 самок в каждой. Каждая из групп, по гуманным соображениям, в обязательном порядке получала перорально
Препараты дозировались следующим образом: содержимое капсулы Габапентина 300 мг растворялось в воде 20 мл, полученный раствор помещался в поилку, доза на одну особь составляла примерно 1500 мг/кг [8, 9].
По данным различных источников, средняя доза Золетила 100 для мышей составляет 20 мг/кг, то есть на особь весом 25 граммов получается Д (доза) = 20/1000*25 = 0,5 мг. Так как в 1 мл Золетила 100 - 100 мг действующих веществ, точный набор в шприц требуемой дозы затруднен, поэтому в 1мл препарата добавляли раствор NaCl 0,9 % в количестве 24 мл, полученная смесь имеет концентрацию: в одном мл 4 мг действующих веществ. С Ксилой поступали подобным образом. Средняя доза составляет 5 мг/кг, таким образом на одну мышь 0,125 мг, к одному мл Ксилы добавляли 9 мл изотонического физраствора и получали смесь 2 мг в одном мл [5, 6, 10-12].
Внутримышечную инъекцию производили в заднюю поверхность бедра, удерживая животное за хвост, шприцом 1 мл с иглой размером 27G, подкожно - аналогичным шприцом с иглой 25 G в область лопаток [3,
4].
Оценка результатов производилась по следующим критериям:
1. Боль, которая может возникнуть при заборе крови путем ампутации кончика хво-
Габапентин, который добавлялся в поилку за 24 часа до опыта, так как забор крови путем ампутации кончика хвоста сопровождается болью [7]. Особям трех из четырех групп дополнительно проводилась инъекция препарата для седации (табл. 1).
ста. Как правило мышь обозначает боль вокализацией, а именно своеобразным писком, таким образом у этого критерия два результата «да» (есть вокализация), «нет» (нет вокализации) [1, 3, 4].
2. Уровень седации. Условно выделяем 4 уровня: 1 - животное в сознании, 2 - животное в сознании, малоподвижно, 3 - животное в сознании неподвижно, 4 - животное без сознания.
3. Время входа в седативное состояние.
4. Время продолжительности седации.
Результаты. Во время проведения эксперимента ни одно животное из всех групп не ответило вокализацией на ампутацию кончика хвоста, таким образом можно с высокой долей вероятности утверждать, что процедура забора крови для мышей проходила безболезненно. Также можно отметить, что все схемы седации оказались достаточно безопасными для мышей, не зафиксированы летальные исходы, и не было травмированных особей вследствие инъекций. Интересно, что Габапентин не вызывает седации у грызунов, даже в дозе 1500 мг/кг, но является хорошим средством для анальгезии и купирования дистресса. Животные становятся более спокойными, идут на контакт с человеком, а при постановке инъекции, заборе крови, не испытывают стресс, боль и страдания (табл. 2)
Таблица 1
Схема научно-исследовательского опыта (п=10)
Группа Дозы и комбинации препаратов
1 Габапентин 1500 мг/кг, п/о
2 Габапентин 1500 мг/кг, п/о, Золетил 100, 20 мг/кг, в/м
3 Габапентин 1500 мг/кг, п/о, Ксила, 5 мг/кг, п/к
4 Габапентин 1500 мг/кг, п/о, Золетил100, 10 мг/кг+Ксила 5 мг/кг, в/м
Таблица 2
Данные эксперимента по анальгезии и седации лабораторных мышей
Группа Боль Уровень се- Время входа в седативное Продолжительность седа-
дации состояние (мин) ции (мин)
1 нет 1 - -
2 нет 4 <1 10-20
3 нет 2,3 3-5 20
4 нет 4 <1 30-50
Анализируя данные таблицы 2, можно сделать вывод, что, казалось бы, достаточно использовать Габапентин в моно -режиме, но в этом случае затруднены манипуляции с животным, требуется фиксация, обязателен помощник. Недостатком схемы Габапентин + Ксила (3 группа животных) является слабый уровень седации, а побочным эффектом комбинации препаратов для седации Га-бапентин + Золетил 100 + Ксила является продолжительное время анестезии, а также дополнительный расход времени на подготовку смеси (группа 4). Комбинация препаратов Габапентин + Золетил 100 (группа 2) вызывала у животных быстрый вход в седа-
тивное состояние, которое в среднем продолжалось около 15 минут.
Выводы. Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что оптимальной схемой седации для забора крови у лабораторных мышей является сочетание Габапентина перорально 1500 мг/кг, равномерно в течение суток перед забором крови, плюс Золетил 100 внутримышечно в дозе 20 мг/кг, которая была опробована на второй опытной группе. Эта схема обеспечивает хорошую анальгезию, быстрый вход в седа-тивное состояние, достаточное время для проведения манипуляций с животными, а также относительно быстрый выход из состояния наркоза.
Литература
1. Suckow M.A., Danneman P., Brayton C. The laboratory mouse. London: CRC Press, 2001. 168 р.
2. Дональд К., Пламб Фармакологические препараты в ветеринарной медицине / Пер. с англ. Е. И. Осипова. М.: «Аквариум ЛТД», 2002. 856 с.
3. Baumans V., Stafleu F.R., Bouw J. Testing housing systems for mice- the value of a preference test // Zeitschrift fur Versuchstierkunde. 1987. № 29. Р. 9-14.
4. Morton D.B. Adverse effects in animal and their relevance to refining scientific procedures // Alternatives to laboratory animals. 1990. № 18. С. 29-39.
5. Кадомцев Д. В., Пасечникова Е. А., Голубев В. Г. Золетил-ксилазиновый наркоз в экспериментах у крыс // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2015. № 5-1. С. 56-57.
6. Фатеева Е. И., Чернов А. С., Телегин Г. Б. Общие принципы анестезии и аналгезии лабораторных животных // Международный вестник ветеринарии. 2014. № 2. С. 97-103.
7. Метод забора крови у животных / А. В. Дьякон [и др.] // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2013. № 11-2. С. 84-85.
8. Molecular basis for the dosing time-dependency of anti-allodynic effects of gabapentin in a mouse model of neuropathic pain / N. Kusunose [et al.] // Molecular Pain. 2010. Т. 6. Р. 83.
9. Neurochemical actions of gabapentin in mouse brain / J. P. Leach [et al.] // Epilepsy Research. 1997. Т. 27. № 3. Р. 175-180.
10. Hedenqvist P., Hellebrekers L. J. Hand- book of laboratory animal science. Laboratory Animal Analgesia, Anesthesia and Euthanasia. L.J., London.: CRC Press., 2003. 548 р.
11. Hankenson F. C. Critical Care Management for Laboratory Mice and Rats. London.: CRC Press., 2013. 271 р.
12. Evaluation of a combination of tiletamine and zolazepam as an anesthetic for laboratory rodents / Silverman J. [et al.] // Laboratory Animals Science. 1983. № 33(5). Р. 457-60.
EXPERIENCE OF USING GABAPENTIN, ZOLETIL 100 AND XYLA FOR ANALGESIA AND SEDATION OF LABORATORY MICE IN THE EXPERIMENT
V. A. Zimenkov, Postgraduate student Perm State Agro-Technological University 23, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia E-mail: oknoperm@gmail.com
ABSTRACT
The article describes the experience of using Gabapentin, Zoletil 100 and Xyla for sedation and analgesia of laboratory mice in order to decrease distress, anguish and pain after blood draw by cutting off the tip of the tail. During the experiment mature female mice, 3 -4 months old, weight 22-25 g were used. They were divided into four experimental groups, 10 mice in each. Since blood draw is in any case accompanied by pain, it was necessary for all four groups to take Gabapentin diffused in water perorally (po), dose 1500 mpg (24 hours prior to procedure). Second group additionally got Zoletil 100 injection - 20 mpg intramuscularly (im), third group additionally got Xyla injection subcutaneously (sc), dose 5 mpg, fourth group got combination of Xyla and Zoletil 100 im, doses 5 and 10 mpg, respectively. Time parameters of sedation and analgesia depending on dose size and drugs' combinations in experimental animals were assessed. The anal y-sis of results shows that optimal sedation procedure includes: absolute diet - 4-6 hours, Gabapentin - 1500 mpg/day po with water in drinking bowl starting from 24 hours prior to procedure, Zoletil 100 - 20 mpg im, right before the blood draw. Using this procedure good analgesia, quick entrance into sedative state, enough time to make procedures with mice, and relatively quick anesthesia recovery are attained.
Key words: Gabapentin, Zoletil 100, Xyla, laboratory mouse, experiment, pain, sedation, analgesia.
References
1. Suckow M.A., Danneman P., Brayton C. The laboratory mouse. London, CRC Press, 2001, 168 p.
2. Donal'd K., Plamb Farmakologicheskie preparaty v veterinarnoi meditsine (Pharmacological preparations in veterinary medicine), Per. s angl. E. I. Osipova, M., «Akvarium LTD», 2002, 856 p.
3. Baumans V., Stafleu F.R., Bouw J. Testing housing systems for mice- the value of a preference test, Zeitschrift fur Versuchstierkunde, 1987, No. 29, pp. 9-14.
4. Morton D.B. Adverse effects in animal and their relevance to refining scientific procedures, Alternatives to laboratory animals, 1990, No. 18, pp. 29-39.
5. Kadomtsev D. V., Pasechnikova E. A., Golubev V. G. Zoletil-ksilazinovyi narkoz v eksperimentakh u krys (Zoletil-xylazine anesthesia in experiments in rats), Mezhdunarodnyi zhurnal prikladnykh i fundamental'nykh issledovanii, 2015, No. 5-1, pp. 56-57.
6. Fateeva E. I., Chernov A. S., Telegin G. B. Obshchie printsipy anestezii i analgezii laboratornykh zhivotnykh (General principles of anesthesia and analgesia of laboratory animals), Mezhdunarodnyi vestnik veterinarii, 2014, No. 2, pp. 97-103.
7. Metod zabora krovi u zhivotnykh (Method of blood sampling in animals), A. V. D'yakon [i dr.], Mezhdunarodnyi zhurnal prikladnykh i fundamental'nykh issledovanii, 2013, No. 11-2, pp. 84-85.
8. Molecular basis for the dosing time-dependency of anti-allodynic effects of gabapentin in a mouse model of neuropathic pain, N. Kusunose [et al.], Molecular Pain, 2010, T. 6, pp. 83.
9. Neurochemical actions of gabapentin in mouse brain, J. P. Leach [et al.], Epilepsy Research, 1997, Т. 27, No. 3, pp. 175-180.
10. Hedenqvist P., Hellebrekers L. J. Hand- book of laboratory animal science. Laboratory Animal Analgesia, Anesthesia and Euthanasia, L.J., London, CRC Press., 2003, 548 p.
11. Hankenson F. C. Critical Care Management for Laboratory Mice and Rats, London, CRC Press., 2013, 271 p.
12. Evaluation of a combination of tiletamine and zolazepam as an anesthetic for laboratory rodents, Silverman J. [et al.], Laboratory Animals Science, 1983, No. 33(5), pp. 457-60.
УДК 636.2.082.31(470.51)
МОЛОЧНАЯ ПРОДУКТИВНОСТЬ И ДОЛГОЛЕТИЕ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КРОВНОСТИ ПО ГОЛШТИНСКОЙ ПОРОДЕ
Е. Н. Мартынова, д-р с.-х. наук, профессор; В. Ю. Якимова, аспирант, ФГБОУ ВО Ижевская ГСХА, ул. Студенческая, 11, Ижевск, Россия, 426069 E-mail: valentina.yaki@yandex.ru
Аннотация. Изучены молочная продуктивность и продуктивное долголетие высокопродуктивных коров разного уровня продуктивности в зависимости от кровности по голштинской породе. Для проведения исследований была отобрана группа коров, выбывших с 2012 по 2017 гг., с законченной лактацией. Анализ молочной продуктивности высокопродуктивных коров по наивысшей лактации, в зависимости от доли кровности по голштинской породе, не выявил достоверной разницы по удою. Среди коров-рекордисток наблюдается с увеличением доли кров-ности по голштинской породе достоверное повышение удоя за 305 дней максимальной лактации. Так, в целом по исследуемому поголовью разница составила 321,4 кг (Р<0,05), в СПК (колхоз) «Удмуртия» 661,8 кг (Р<0,05). Выявлено достоверное понижение массовой доли жира в молоке у высокопродуктивных коров на 0,14 % (Р<0,05). С повышением кровности по голштинской породе в среднем по изучаемому поголовью отмечается снижение срока использования коров на 2,32-2,04 лактации (Р<0,01), с 5,85 до 3,53 лактаций - у высокопродуктивных коров и с 6,32 до 4,28 лактаций - у коров-рекордисток. Пожизненный удой высокопродуктивных коров и коров-рекордисток с ростом доли кровности по голштинской породе снижался. Так, у коров с кровностью 88,0 % и более он был меньше на 13073,2-11370,5 кг соответственно по сравнению с коровами с долей кровности 50,0-74,0 %. По исследуемому поголовью наблюдается снижение среднего возраста полных лет жизни, срока продуктивного использования, количества дойных дней и среднего удоя на 1 день жизни с увеличением кровности по голштинской породе.
Ключевые слова: высокопродуктивные коровы, коровы-рекордистки, молочная продуктивность, кровность, продуктивное долголетие, пожизненный удой.
