CC BY
8
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
Г. А. Басхаева, Б. В. Бидерман, Е. Н. Паровичникова, О.А. Гаврилина, Ю. О. Давыдова, И.В. Гальцева
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский медицинский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
ОПРЕДЕЛЕНИЕ МУТАЦИОННОГО СТАТУСА ГЕНА IKZF1 ПРИ ВКЛЕТОЧНЫХ ОСТРЫХ ЛИМФОБЛАСТНЫХ ЛЕЙКОЗАХ ВЗРОСЛЫХ
Введение. В ряде исследований показано, что при В-клеточном остром лимфобластном лейкозе (В-ОЛЛ) мутации в гене IKZF1 и пер-систенция минимальной остаточной болезни (МОБ) являются ключевыми факторами неблагоприятного прогноза.
Цель. Оценить результаты лечения и клиренс МОБ у взрослых больных В-ОЛЛ в зависимости от наличия внутригенных делеций гена IKZF1 при использовании неинтенсивного, но постоянного цитостатического воздействия.
Материалы и методы. В исследование включено 67 взрослых пациентов, из них 49 больных Ph-негативным (Ph«-») и 18 — Ph-позитивным (Ph«+») В-ОЛЛ. В первой группе лечение проводили по протоколам ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016 (с августа 2009 по август 2017, медиана наблюдения — 18,1 мес (1,5-93,4 мес), медиана возраста — 29 лет (17-56), соотношение мужчины: женщины (19:30)); во второй группе лечение проводили по протоколам ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2012 в сочетании с ингибиторами тирозинкиназ (ИТК) (с февраля 2010 по август 2017, медиана наблюдения — 21,2 мес (3,53-91,77 мес), медиана возраста — 31,5 год (17-68), соотношение мужчины: женщины (9:9)). Молекулярный анализ делеций гена IKZF1 проводили методом мультиплексной флуоресцентной ПЦР, специфичной к «горячим точкам» внутригенных делеций. Исследование МОБ выполнено 21 пациенту методом 6-цветной проточной цитометрии (чувствительность 0,01 %) с использованием антител против: CD19 APC, CD10 PE, CD34 PE-Cy7, CD38 FITC, CD45 PerCP, CD20 APC-H7 и CD58 FITC. Минимальная чувствительность составляла 0,01 %. Контрольные точки для исследования МОБ — 70-й день (окончание II фазы индукции) и 133-й день (окончание III фазы консолидации). Исследование МОБ химерного транскрипта BCR-ABL1 у больных Ph«+» В-ОЛЛ проводили с помощью ПЦР в режиме реального времени с чувствительностью 10-4 на 70-й день терапии (окончание индукционной фазы лечения). МОБ-негативный статус
устанавливали при количестве химерного транскрипта менее 0,01 %.
Результаты. У больных РЬ«+» ОЛЛ частота обнаружения делеций составила 55%, что было достоверно выше по сравнению с 18% при РЬ«-» ОЛЛ (р=0,0097). Анализ спектра различных вариантов делеций при РЬ«-» ОЛЛ показал, что наиболее часто встречается Д4-7 (55 %), Д2-8 выявлена у 33% больных, а каждый из вариантов Д2-7 и Д4-8 был представлен у 22% больных с делециями. При РЬ«+» ОЛЛ с одинаковой частотой выявлялись Д4-7, Д2-7 — у 44% больных и Д4-8, Д2-8 — у 11 % больных. При анализе клинико-лабораторных показателей в дебюте заболевания практически у половины (44 %) больных с делецией 1К1П наблюдалась коэкспрессия миелоидных антигенов СБ13 и СЭ33 на бластных клетках, в то время как у больных без делеции оба маркера одновременно были выявлены только у 2,5 % больных (р=0,009). Эффективность терапии больных РЬ «-» В-ОЛЛ по протоколам ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016 существенно не отличалась у больных с наличием делеций 1К1П и без них: полная ремиссия (ПР) была достигнута у 89% и 95 %, 3-летняя общая выживаемость (ОВ) у больных с делецией составила 100 % (п=9), без делеции — 75,8 % (п=40) (р = 0,149). Безрецидивная выживаемость (БРВ) среди пациентов с делециями и без них составила 80 % (п=8) и 70,9 % (п=36) (р=0,693), а вероятность развития рецидива (ВРР) — 20% и 26,6 %, соответственно (р=0,830). МОБ на +70 день терапии была обнаружена у 100 % больных РЬ«-» В-ОЛЛ с делециями 1К1Р1 и у 26,6 % без них (р=0,0024), на + 133 день терапии — у 83 % и 23 % (р=0,0134) соответственно. У больных РЬ«+» В-ОЛЛ наличие делеции 1К1П не оказывало достоверного влияния на частоту достижения молекулярной ремиссии на +70/+133 дни терапии и на долгосрочные результаты: у больных В-ОЛЛ с делециями 1KZ.F1 5-летняя Ов составила 60 % (п=10), без делеций — 42 % (п=8) (р=0,41); БРВ — 25% (п=10) и 33 % (п=7) (р=0,96), ВРР — 50 % (п=10) и 50 % (п=7) (р=0,92), соответственно.
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
Выводы. У больных с внутригенными де-лециями гена IKZF1 значительно чаще детектируется МОБ на разных этапах терапии по сравнению с больными без делеций гена ¡К1П. Внутригенные делеции гена ¡К2П не являются
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
факторами неблагоприятного прогноза у больных В-ОЛЛ при использовании неинтенсивного, но постоянного цитостатического воздействия, применяемого в протоколах Российской исследовательской группы по изучению ОЛЛ.
И. Р. Бексеитова, Ж. К. Буркитбаев, С. А. Абдрахманова, А. А. Турганбекова, К.Х. Жангазиева
Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения «Научно-производственный центр трансфузиологии» Министерства здравоохранения Республики Казахстан, Астана
КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ГЕМОПОЭТИЧЕСКОГО ХИМЕРИЗМА ПОСЛЕ РОДСТВЕННОЙ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ
Введение. Степень совместимости пациента и потенциального донора по НЬА-системе является важным фактором, ассоциированным с клиническим исходом аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.
Изучение динамики приживления трансплантата и ее связи с осложнениями играет важную роль в правильной оценке состояния больного и проведении дальнейшего лечения. Количественный мониторинг химеризма после аллогенной ТГСК молекулярными методами стал обязательным диагностическим инструментом для определения степени приживления трансплантата или его отторжения, а также предсказания рецидива основного заболевания.
Цель. Определить значение анализа донорского химеризма у пациентов после алло-ТГСК для определения риска развития рецидива.
Материалы и методы. Проанализировали результаты обследования 31 пациента после алло-ТГСК от родственных доноров с 2013 по 2017 гг., выполненных в клиниках «Национальный центр онкологии и трансплантологии», «Национальный научный центр материнства и детства» г. Астана. Оценку химеризма проводили методом STR-ПЦР с оценкой полиморфизма последовательности гипервариабельных участков геномной ДНК. Идентификация аллелей осуществлялась с помощью программы СЫшегМагкег версии 3.1.0. Результаты оценивали с использованием дескриптивных статистик, непараметрического 2-стороннего критерия, отношения шансов (ОШ) и 95% доверительного интервала (ДИ 95 %).
Результаты. Среднее значение возраста доноров составило 21 год (диапазон от 7 до 59 лет), пациентов — 23 года (диапазон
от 1 до 47 лет). Распределение по половому признаку среди пациентов: мужчины 12 (38,7 %), женщины 19 (61,3 %), среди доноров — 16 (51,6 %) и 15 (48,4 %), соответственно. У большей части реципиентов (19 (61,3 %)), число совпадений по НЬА генам с донором составляло 9 и менее из 10, тогда как совпадение 10 из 10 наблюдалось у 12 пациентов (38,7 %). Преобладали пациенты с различными вариантами острого миелобластного лейкоза (18 человек (58,6 %)). Для оценки приживления ТГСК были выбраны 15 гипервариабельных участков ДНК и гены для идентификации пола. По степени значимости локусы распределялись в следующем порядке: 0381358/0281338 > 078820/0138317 > 0881179/С5Р1Р0/016Б539/ 05Б818/РСА > 019Б433 > 021S11/TP0X/AMEL > ТН01/УША > 018851. По первичным результатам количество информативных локусов между парами донор/реципиент составило 2-11 (среднее значение — 6,5, медиана — 7). По результатам первичного анализа определения гемопоэтического химеризма полный донорский химеризм наблюдался у 16 пациентов, что составило 51,6 %. Смешанный донорский химеризм отмечался у 11 пациентов (35,4%). Неприживление наблюдалось у 4 пациентов, где у 3 пар степень сочетания НЬА было 5/10 и одна пара с НЬА совместимостью 10/10. Полный донорский химеризм больше наблюдался среди пар с сочетанием 5/10 по системе НЬА, смешанный — 10/10. Однофакторный анализ показал выраженную зависимость между степенью соответствия НЬА 10/10 и первичным определением химеризма с исходом со смешанным донорским химеризмом, что в остальных группах не были
