Научная статья на тему 'Определение иммуноглобулинов ротовой жидкости при хроническом воспалительном процессе в пародонте'

Определение иммуноглобулинов ротовой жидкости при хроническом воспалительном процессе в пародонте Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
529
153
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Определение иммуноглобулинов ротовой жидкости при хроническом воспалительном процессе в пародонте»

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ

Следует помнить, что объем знаний в медицине удваивается каждые три года. Однако повышение квалификации медицинские сестры проходят один раз в пять лет, следовательно, несколько лет до очередного цикла обучения медицинские сестры работают с явно устаревшими знаниями. Возникает необходимость ориентировать медицинских сестер на непрерывное последипломное образование, на такие его формы, которые позволили бы интегрировать в практическую деятельность необходимый объем новых знаний.

Мы считаем, что предложенные мероприятия по развитию последипломного образования позволят без больших материальных затрат обеспечить наше здравоохранение высококачественными специалистами, а нашим пациентам гарантировать качественные уход и лечение.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Состояние последипломной подготовки сестринского дела исследовано с позиции удовлетворенности формами и видами последипломного обучения. 56,8 % специалистов выделяют приоритетную форму последипломного образования на базах отделений дополнительного образования образовательных

учреждений. Важное значение при проведении обучения на отделении дополнительного образования имеет выявление исходного уровня знаний и умений специалистов, что позволяет в процессе обучения скорректировать программу последипломной подготовки с учетом выявленных дефектов знаний средних медицинских работников. Экспертиза качества исходного и конечного уровня теоретических знаний и практических навыков медицинских сестер показала достоверно высокие результаты по всем разделам Государственного образовательного стандарта последипломной подготовки. Повышению качества знаний специалистов способствует внедрение активных методов обучения в учебном процессе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное исследование позволяет объективно оценить уровень знаний специалистов сестринского дела. Анализ состояния последипломной подготовки специалистов выявил высокие показатели потребности в обучении сестринских кадров. Для удовлетворения потребности в последипломной подготовке созданы интегрирующие программы обучения и внедрены активные методы обучения.

Мун С.А., Киселева Е.А.

Институт экологии человека СО РАН, Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВОСПАЛИТЕЛЬНОМ ПРОЦЕССЕ В ПАРОДОНТЕ

Термин «иммунная система слизистой» (ИСС) объединяет факторы иммунологической реактивности, которые имеются на слизистой оболочке ротовой полости, и функционирует в известной степени независимо от компонентов системного иммунитета, что обеспечивается своеобразием структурной организации.

Основной отличительной особенностью ИСС является комитированность В-лимфоцитов, ассоциированных со слизистой оболочкой, к синтезу SIgA [1].

SIgA — уникальный по своим структурно-функциональным особенностям в ряду антител других классов, является основным иммуноглобулином секретов слизистых оболочек. С учетом его полифункциональности (неспецифическая «экранизация» эпителиальных покровов и антигенспецифическая антибактериальная и противовирусная защита) понятна его общебиологическая значимость в поддержании гомеостаза на уровне слизистых оболочек.

Специфическими факторами местной защиты, т.е. направленными против конкретного агента, являются иммуноглобулины. Наибольшее представительство в полости рта имеет SIgA, который состоит из двух мономеров и секреторного компонента ^С), являющегося гликопротеином. Биологическая функция SC — компенсировать устойчивость к протеолизу [2].

Наиболее распостранен взгляд на синтез SigA, как на комплексный процесс взаимодействия двух клеточных систем. Молекула IgA синтезируется как мономер, однако из плазмоцита секретируется в виде димера, в котором субъединицы связаны ,1-цепью.

Эта молекула IgA связывается рецептором иммуноглобулинов на базальной поверхности эпители-оцита. Комплекс IgA-рецептор эндоцитируется, транспортируется на апикальную поверхность эпители-оцита и экзоцитируется, во время чего происходит расщепление рецептора с образованием секреторного компонента, а комплекс поступает в секрет на поверхности эпителиальной клетки, внутри ее или в просвете протока слюнной железы [3].

SIgA внедряется в зубную бляшку и пелликулу, в результате чего уменьшается фиксация микроорганизмов на поверхности зуба и ускоряется их фагоцитоз нейтрофилами. Полимерные иммуноглобулины класса А, соединенные посредством ,1-цепи в единую структуру с секреторным компонентом, представляют собой уникальный пример эволюционной адаптации иммуноглобулинов на слизистых покровах для эффективного функционирования в условиях постоянного воздействия антигенов различной природы.

Эта особенность SIgА обусловлена следующими его свойствами: 1) устойчивость к деградирующему

. и № 4 2005 135

в Кузбассе

АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ КЛИНИЧЕСКОЙ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ, МЕДИЦИНСКОЙ НАУКИ И ОБРАЗОВАНИЯ

действию протеаз; 2) выраженный аффинитет к поверхности слизистой оболочки; 3) наличие особой четвертичной структуры, благодаря которой эти антитела обладают поливалентностью. Имеются данные о том, что молекулы SIgА прикрепляются к слизистым покровам за счет специфического взаимодействия с цистеином, постоянно присутствующим в слизи [3].

Другие классы иммуноглобулинов (^М, ^Е, IgG ) в полости рта малочисленны, их функция проявляется в случае дефицита SIgА.

Система секреторных иммуноглобулинов обеспечивает интенсивный, но не продолжительный иммунный ответ и не формирует клеток иммунологической памяти. Она препятствует контакту АТ с плазматическими ^О и ^М, активирует систему комплемента с образованием мембраноатакующего комплекса С5-С9 [4].

Цель исследования — определить количественное содержание в смешанной слюне SIgА и присутствующих сывороточных ^А А и ^О.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Диагностика секреторного иммуноглобулина А ^^А) в слюне осуществлял^ с помощью наборов реагентов SIgA-ИФА-БЕСТ-стрип для количественного определения SIgА в биологических жидкостях человека твердофазным методом иммуноферментно-го анализа. Используемый твердофазный метод им-муноанализа основан на принципе «сэндвича». Анализ проводится в две стадии. На первой стадии калибровочные пробы с известной концентрацией SIgA и исследуемые образцы инкубируются в лунках стри-пированного планшета с иммобилизованными монок-лональными антителами (МКАТ) к секреторному компоненту SIgA. Затем планшет отмывается. На второй стадии связавшийся в лунках SIgA выявляют конъюгатом МКАТ к а-цепи иммуноглобулина с пе-роксидазой хрена. После отмывания избытка конъю-гата образовавшиеся иммунные комплексы «иммобилизованные МКАТ — SIgA — конъюгат» определяют ферментативной реакцией пероксидазы с перекисью водорода в присутствии хромогена. Интенсивность окраски хромогена пропорциональна концентрации SIgA в анализируемом образце. Концентрацию SIgA определяют по калибровочному графику. Калибровочные пробы SIgA стандартизированы относительно препарата SIgA человека [5].

Определение иммуноглобулина А (IgA) и иммуноглобулина О (^О) в слюне проводили с использованием диагностических моноспецифических сывороток против ^А и ^О, ^М человека. Перед употреблением сухую сыворотку и контрольный образец растворяли добавлением в каждую ампулу 0,5 мл дистиллированной воды. Препараты должны растворяться в течение 5 минут. Количественное определение искомого иммуноглобулина проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле. В основу исследования положен метод Манчини, который основан на измерении диаметра кольца преципитации, образующегося при внесении исследуемого препа-

рата в лунки, вырезанные в слое агара, в котором предварительно диспергирована моноспецифическая сыворотка. В стандартных условиях опыта диаметр кольца преципитации прямо пропорционален концентрации исследуемого иммуноглобулина. Содержание искомого иммуноглобулина в исследуемых образцах определяли относительно контрольного образца с известной концентрацией этого иммуноглобулина.

На стеклянную пластинку (90 x 120 мм), покрытую тонкой агаровой пленкой, помещали латунную П-образную рамку толщиной 1 мм, сверху покрывали второй стеклянной пластинкой, смоченной гидрофобной жидкостью, и скрепляли зажимами. Пространство между пластинками заливали смесью агара и моноспецифической сыворотки равномерным слоем в количестве 9 мл. Для получения смеси 3 % агар в веронал-мединаловом буферном растворе в концентрации 0,1 моль/дм3 (рН 8,56) смешивали при температуре 55-57°С равным объемом сыворотки против иммуноглобулина, взятого в таком разведении, чтобы конечная концентрация соответствовала рабочему разведению, указанному на ампуле. Сыворотку против искомого иммуноглобулина разводили в веронал-мединаловом буферном растворе в концентрации 0,1 моль/дм3 (рН 8,56).

После застывания смеси верхнее стекло снимали. В слое агара пробойником вырезали лунки диаметром 2 мм на расстоянии 15 мм одна от другой. В первый ряд лунок микрошприцем вносили по 2 мкл контрольного образца — очищенного иммуноглобулина в разведениях 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, в остальные лунки — исследуемую слюну. Пластины выдерживали во влажной камере в течение 24-48 часов при температуре 16-20°С. Оценку линий и колец преципитации, соответствующих искомому иммуноглобулину, проводили через 48 часов.

В реакции радиальной иммунодиффузии в геле при взаимодействии сыворотки с иммуноглобулином, содержащим 1-2 мг белка, должны образовываться кольца преципитации. Пластины окрашивали. После окраски, на пластинах с РИД измеряли диаметр колец преципитации. Окрашенные пластины сканировали, затем вводили к компьютерную программу Ехсе1, где по количеству пикселей (точек на кольце преципитации) вычисляли диаметр кольца. Строили график, где на оси ординат квадраты радиусов колец преципитации в миллиметрах, полученные с разными разведениями контрольного образца, а на оси абсцисс — соответствующие этим кольцам концентрации контрольного образца иммуноглобулина в мг/мл [5].

Значение концентрации иммуноглобулина определяли по таблице, рассчитанной для каждой серии диагностикумов, с использованием компьютерного анализа и стандартов, рекомендуемых ВОЗ.

РЕЗУЛЬТАТЫ

SIgA является уникальным примером эволюционной адаптации иммуноглобулинов для эффективного функционирования у условиях постоянного воз-

№ 4 2005 ^УПвощина

в Кузбасс

О^Аедици

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ

действия антигенов различной природы, способным нейтрализовать их без участия комплемента. ИСС находится в тесном взаимодействии с эпителиальными, нервными, мышечными и стромальными клетками. Нарушения этих взаимодействий ведут к развитию хронического воспаления.

Объекты исследования показателей местного иммунитета ротовой полости — 30 пациентов с хроническим катаральным гингивитом и 25 практически здоровых доноров с интактным пародонтом. Значение количественного содержания в смешанной слюне SIgA (0,38 ± 0,09) при хроническом катаральном гингивите достоверно ниже, чем в группе здоровых (0,63 ± 0,15). А количество сывороточных иммуноглобулинов A (0,32 ± 0,03) и G (0,67 ± 0,03) при гингивите достоверно увеличено, по сравнению с контролем.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В работе было исследовано содержание SIgA в смешанной нестимулированной слюне у практически здоровых индивидуумов и у пациентов с хроническим катаральным гингивитом. Полученные результаты согласуются с данными других исследователей и свидетельствуют о снижении концентрации SIgA в слюне при хроническом катаральном гингивите,

как и при наличии других патологических процессов в пределах ротовой полости.

Полученные результаты позволили предположить, что нарушение синтеза и снижение секреции SIgA при хроническом катаральном гингивите является определяющим иммунологическим фактором.

Повышенный уровень содержания сывороточных IgA, IgG является компенсаторной реакцией, позволяющей локализовать участок воспаления и, тем самым, предотвратить нарушение иммунореактивнос-ти на уровне целого организма.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Боровский, Е.В. Биология полости рта /Е.В. Боровский, В.К. Леонтьев. - М., 1991. - 42 с.

2. Иванюшенко, Т.П. Комплексное изучение механизмов развития хронического воспаления при пародонтите /Т.П. Иванюшенко, Л.В. Ганковская, Л.В. Ковальчук //Стоматол. - 2000. - № 4. -С. 13-15.

3. Карсонова, М.И. Лимфоидные образования слизистых оболочек: принцип топической иммунизации /М.И. Карсонова, Б.В. Пине-гин //Иммунол. - 2003. - № 6. - С. 359-363.

4. Хаитов, Р.М. Иммунология /Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Си-дорович. - М., 2000. - С. 71-90.

5. Ярилин, А.А. Основы иммунологии /А.А. Ярилин. - М., 1999. -С. 45-67.

Муравьева Г.М., Ведмедь Г.Н.

Областной клинический госпиталь для ветеранов войн,

г. Кемерово

НЕЙРОРЕАБИЛИТАЦИЯ В СИСТЕМЕ ОКАЗАНИЯ ПОМОЩИ УЧАСТНИКАМ БОЕВЫХ ДЕЙСТВИЙ В ЧЕЧЕНСКОЙ РЕСПУБЛИКЕ НА БАЗЕ КЕМЕРОВСКОГО ОБЛАСТНОГО КЛИНИЧЕСКОГО ГОСПИТАЛЯ ДЛЯ ВЕТЕРАНОВ ВОЙН

Психотравмирующие события, перенесенные военнослужащими на территории Чеченской республики, имеют более негативный характер, чем пережитые военнослужащими в Афганистане. Поэтому вопросы психологической и неврологической реабилитации указанного контингента приобретают важное значение. Ежегодно число лиц указанного контингента, получающих стационарное лечение в госпитале, увеличивается, с 6 человек в 1999 г. до 144 в 2004 г. Всего за пять лет в госпитале пролечены 272 участника боевых действий в Чеченской республике, из них 158 человек (68,6 %) в отделении неврологии. Неврологическое отделение в составе госпиталя оказывает нейрореабилитацию участникам БД с 1999 г. и накопило некоторый опыт работы.

В 2004 г. в госпитале разработан реабилитационный модуль медико-психологической коррекции участников локальных современных вооруженных конфликтов, который состоит из амбулаторного и стационарного этапов. Работа проводится в сотрудничестве с Департаментом социальной защиты АКО,

Областным Домом ветеранов, областным медико-социальным экспертным центром, а также с общественными организациями ветеранов боевых действий.

Амбулаторный этап

В консультативной поликлинике госпиталя имеется база данных на участников боевых действий современных войн, исходя из которой, им регулярно рассылаются приглашения для проведения диспансеризации, отбора на стационарное санаторное лечение. Проводится анкетированный мониторинг состояния здоровья участников боевых действий с участием терапевта, невролога, хирурга, психотерапевта и психолога.

Стационарный этап

На базе неврологического отделения выделено 20 коек (50 %) для проведения нейрореабилитации данного контингента, с учетом развития в результате боевых действий различной степени тяжести посттравматического стрессового расстройства, чаще всего в сочетании с черепно-мозговыми травма-

. и № 4 2005 137

в Кузбассе 1 *

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.