CC BY
6
УДК 614.31:63:615.285.7:547.495.1
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭПТАМА И ТИЛЛАМА В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ МЕТОДОМ ГАЗО-ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
В. И. Куликов, А. М. Ботвиньева, И. Н. Сиденко
Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт. Минск
В настоящее время в сельском хозяйстве начинают применяться препараты из группы производных карбаминовой кислоты. К ним относятся, в частности, эптам и тиллам.
(О^Ну)^ С - GjHJ О
S-этил-ди-н-пропилтиокарбамат (эптам).
L.4H9
II
о
Нводоструйному насосу
Б-н-пропил-М-этил-Ы-н-бутилтиокарбамат (тиллам).
С целью гигиенического нормирования остаточного количества эпта-ма и тиллама в продуктах питания назрела необходимость в разработке чувствительного метода определения этих препаратов. Наиболее перспективным в этом отношении является метод газожидкостной хроматографии. Единственная работа, в которой газовая хроматография применена для определения остаточного количества эптама в почве, выполнена Hyghes и Freed в 1961 г. на хроматографе с микро-кулонометрическим детектором. Методика анализа препаратов эптама и тиллама газожидкостной хроматографией описана также Г. Г. Патчеттом с соавт.
Нами газо-жидкостная хроматография была использована для одновременного определения остаточного количества эптама и тиллама в свекле и картофеле. Анализ проводили на газовом хроматографе марки ^^^^^^^^^^^ GCHF-18,2 фирмы Willy Giede (ГДР) с детек-
тором по теплопроводности. Колонка из не-ржавеющей стали длиной 1 м и внутренним г V N диаметром 6 мм была заполнена дезактивиро-
ванным диатомитовым кирпичом ИНЗ-600 (0,25—0,50 мм) с 15% полиэтиленглико-ля-2000.
Измельченный кирпич прокаливали 3 часа в муфельной печи при 1000°. Отмытый водой от пыли кирпич нагревали в течение часа с соляной кислотой (2:1) в кипящей водяной бане и промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции. Затем в продолжение того же времени его обрабатывали 10% раствором КОН при комнатной температуре, отмывали дистиллированной водой до слабощелочной реакции (pH 8) и высушивали при 150—200° в течение 5 часов. Жидкую фазу наносили в приборе, собранном по схеме, приведенной на рис. 1.
Необходимое для заполнения колонки количество дезактивированного диатомитового кирпича ИНЗ-600 (0,25—0,50 мм) засыпали в круглодонную
Рис. 1. Прибор для нанесения жидкой фазы на твердый носитель.
/ — электроплитка; 2 — водяная баня; 3 — круглодоннаи колба на I л; 4 — резиновая трубка с 2 стеклянными трубками.
колбу, в стеклянном стаканчике взвешивали жидкую фазу полиэтиленгли-коль-2000 (15% веса твердого носителя) и растворяли навеску в хлороформе, взятом в количестве, необходимом для полного смачивания твердого носителя. Полученный раствор вливали в круглодонную колбу, которую закрывали пробкой с 2 стеклянными трубками (см. рис. 1), более короткую из них присоединяли к водоструйному насосу и погружали колбу в горячую водяную баню. Колбу периодически вынимали и энергично встряхивали; использование водоструйного насоса способствовало более быстрому удалению из нее паров растворителя. Процесс продолжали до получения сухого, легко сыпучего наполнителя. Перед проведением анализов колонка кондиционировалась при 190° в течение 6 часов. Условия анализа были следующие: газ-носитель водород (течи в системе недопустимы! Взрывоопасно!), скорость потока 100 мл/мин, температура испарителя, колонки и детектора 165°, ток моста 240 ма. Количественное определение содержания препаратов производили по высотам пиков.
Предварительными опытами было установлено время удерживания каждого пестицида при указанных условиях анализа: время удерживания эптама 3 мин., тиллама 4 мин. Относительное время удерживания тиллама по эптаму 1,33. Типичная хроматограмма разделения названных гербицидов приведена на рис. 2.
Подготовку проб свеклы проводили следующим образом. Навеску продукта 400 г заливали водой (1 л), добавляли 25 мл ледяной уксусной кислоты и отгоняли эптам и тиллам с водяным паром; затем извлекали пестициды из воды петролейным эфиром, экстрагируя дважды порциями по 20 мл\ последний высушивали безводным Ыа2504, отгоняли растворитель в колбочках с конусообразным дном на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяли в 0,2 мл изооктана и 50 мкл экстракта вводили микрошприцем в хроматограф. Для установления точности определения анализируемых пестицидов в навеску свеклы, помещенную в колбу, вносили смесь эптама и тиллама (по 20 мкг каждого) в виде стандартных растворов, содержащих по 100 мкг того и другого пестицида в 1 мл. Средняя чувствительность определения была равна 0,01 мг/кг, средний процент обнаружения составлял 93,5. Катарометр позволял детектировать 1—2 мкг эптама и тиллама в пробе.
Исследования проб свеклы, обработанной эптамом, показали, что остаточное количество пестицида в ней варьировало от 0,05 до 0,1 мг/кг.
При изучении остаточного количества эптама и тиллама в клубнях картофеля в описанную выше методику была дополнительно введена очистка эфирного экстракта на хроматографической колонке, заполненной окисью алюминия. Проведены также опыты по определению содержания эптама и тиллама в тканях затравленных животных. Гербициды извлекали из животных тканей перегонкой с водяным паром, как при анализе свеклы, с той разницей, что навеска ткани составляла 1 г и соответственно уменьшались объемы всех прочих применяемых реактивов.
Выводы
1. Предлагаемый метод определения эптама и тиллама в свекле является непродолжительным по времени (анализ занимает 2—3 часа), а также более чувствительным, чем колориметрический.
2. Применение пламенно-ионнзационного детектора, как показали наши последние исследования, позволит повысить чувствительность определения указанных препаратов до 0,1—0,2 мкг/кг продукта.
1
—I-1-1-
0 3 6 мин.
Рис. 2. Хроматограмма смеси эптама и тиллама. Пики: / — растворитель; 2 — эптам; 3 — тиллам.
ЛИТЕРАТУРА
П а т ч е т т Г. Г., Б а т ч е л д е р Г. Г., М е н н Дж. В кн.: Методы анализ» пестицидов. М., 1967, с. 256.— Н у g h е s R. Е., F г е е d V. Н., J. Agricult. Food Chem., 1961, v. 9, p. 381.
Поступила S/VI 11 1969 г.
ОБЗОРЫ
УДК в38.394<047>
О НОВОМ БИОЛОГИЧЕСКОМ АГЕНТЕ ЕСТЕСТВЕННОГО САМООЧИЩЕНИЯ ВОДЫ ВОДОЕМОВ
Канд. мед. наук Р. М. Абиева (Москва) Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
В области гигиены воды и санитарной охраны водоемов продолжает оставаться актуальным изучение процессов самоочищения воды от патогенной микрофлоры и факторов, которые могут оказывать влияние на эти процессы. Представляет интерес изыскание биологических агентов, способствующих этим процессам.
В последние годы в научной литературе широко обсуждается вопрос о бделловибрио бактериоворус как микроорганизме, способствующем процессу самоочищения водоемов. В 1952 г. наблюдения Guelin за прояснением бактериальной взвеси, приготовленной в различных пробах, позволили сделать вывод о бактерицидности воды, не связанной с феноменом бактериофагии. Проба сточной воды, мутная от взвешенных в ней бактерий, начинает спонтанно проясняться, становясь через несколько дней совершенно прозрачной. Внесенные в эту воду патогенные микроорганизмы (Salmonella typhi; Shigella paradysenterac, E. coli, Vibrio cholerae, CI. perfringens) в количестве 1—2 млрд. в 1 мл, почти не замедляли просветления воды. Проба воды различного происхождения обладает аналогичными свойствами и более или менее просветляет бактериальную взвесь. Просветление пробы в большинстве случаев происходит за 3—7 дней. Этот процесс протекает активнее в наиболее загрязненных водах. При нанесении такой пробы на агар с газоном тифозной палочки в течение 2—3 суток образуются бляшки разной величины с неправильными краями. Фазовоконтрастная микроскопия этих бляшек указывает на разрушение бактериального газона в месте размножения паразита в виде тонких, слегка изогнутых палочек. Зону лизиса окружают деформированные бактериальные элементы. Просветление бактериальной взвеси в воде и образование бляшек не имеют ничего общего с классическим процессом бактериофагии (Guelin и соавт., 1967).
Бактериофаг развивается исключительно за счет молодых размножающихся бактерий; лизис культур фагом или появление литических пятен на бактериальном газоне отмечается через несколько часов на обычных лабораторных средах. В то же время просветление бактериальной взвеси в воде и появление бляшек на агаре наблюдается не раньше чем через 40— 48 часов, причем это явление происходит одинаково при внесении как живых, так и убитых бактерий. Эти наблюдения указывают на живую природу
