Section 5. General biology
Section 5. General biology
https://doi.org/10.29013/ELBLS-20-4-68-71
Guliyev Mahir Isa, Senior teacher of Department of Histology, Cytology and Embryology; Azerbaijan Medical University E-mail: mahir-quliyev-65@mail.ru
Israfilova Sabina Aliaga, assistant of Department of Histology, Cytology and Embryolog; Azerbaijan Medical University E-mail: israfilovi0506@mail.ru Aliyarbekova Aygun Aliyar, assistant of Department of Histology, Cytology and Embryology; Azerbaijan Medical University. E-mail: alyarbayova@gmail.com
THE DEFINITION OF EFFECTIVE DOSE OF "SUMAKH FRUIT EXTRACT" FOR CORRECTION THE GENOTOXICITY OF CHEMICALS IN THE PROCESS OF ARTIFICIAL MUTATION IN PLANTS
Abstract: To determine the effective dose of sumakh fruit extract as a modifier during artificial mutagenesis, dry onion seeds were soaked for 3 hours in a test dose of a solution with sumac fruit extract, then either MNG (5 mcg/ml) or NMM (0.02%) was added to this medium. Doses of mutagens were selected by calculating aquatoxicity their mutagenic effect.
From the results of the experiment, it was found that when exposed to MNG and NMM, a dose of sumac fruit extract equal to 0.01 mcg/ml most effectively protects the genome.
Keywords: correction the genotoxicity of chemicals, antimutagens, sumakh fruit extract.
Гулиев Махир Иса оглу, ведущий преподаватель кафедры Гистологии, цитологии и эмбриологии; Азербайджанский медицинский университет E-mail: mahir-quliyev-65@mail.ru Исрафилова Сабина Алиага кызы, ассистент кафедры, Гистологии, цитологии и эмбриологии, Азербайджанский медицинский университет E-mail: israfilovi0506@mail.ru Алиярбекова Айгюн Алияр кызы ассистент кафедры Гистологии, цитологии и эмбриологии, Азербайджанский медицинский университет E-mail: alyarbayova@gmail.com
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОЙ ДОЗЫ «ЭКСТРАКТА
ИЗ ПЛОДОВ СУМАХА» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ГЕНОТОКСИЧНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ПРОЦЕССЕ ИСКУССТВЕННОЙ МУТАЦИИ У РАСТЕНИЙ
Аннотация: Для определения эффективной дозы экстракта из плодов сумаха, как модификатора при искусственном мутагенезе сухие семена репчатого лука 3 часа были вымочены в испытуемой дозе раствора с экстрактом из плодов сумаха, далее к данной среде добавлялся либо МННГ (5 мкг/ мл), либо НММ (0,02%). Дозы мутагенов были выбраны путем вычисления эквитоксичности их мутагенного воздействия. Из результатов опыта выяснилось, что при воздействии МННГ и НММ доза экстракта из плодов сумаха равная 0,01 мкг/мл наиболее эффективно защищает геном.
Ключевые слова: коррекция генотоксичности химических веществ, противомутагены, экстракт из плодов сумаха.
Начиная со второй половины прошлого века ведется поиск корректоров, способных противостоять вредному воздействию мутагенных и канцерогенных веществ в процессах мутаций синтетического и натурального происхождения. В данном направлении особого внимания заслуживают натуральные вещества растительного происхождения.
В данном исследовании была произведена апробация широкого диапазона дозы «экстракта из
плодов сумаха» как модификатора искусственного мутагенеза, сохранившего натуральные вещества растительного происхождения, а так же определение его наиболее эффективной дозы.
Для объективной оценки его эффективности в защите генома, была изучена противомутагенно активная доза экстракта из плодов сумаха при воздействии мутагенных веществ, различающихся по природе, типу, по механизму взаимодействия с наследственными субстратами.
Таблица 1. Определениепротивомутагенной активности экстракта из плодов сумаха в клетках апикальной меристемы ростков семян репчатого лука
м л к 0) Варианты опыта Доза экст- Все иссле- Частота аберрации хромосом td Р
<ч rt н $ ракта, мкг/ мл дуемые клетки п М ± m Соответственно кон-тролю Соответственно мута-гену Соответственно кон-тролю Соответственно мута-гену ФЭП
Контроль 0 925 32 3,46 ± 0,60 - - - - -
? я МННГ 0 911 105 11,53 ± 1,06 9,53 - <0,001 - -
I < 5 S 0,001 854 54 6,32 ± 0,83 2,80 3,89 <0,01 <0,001 0,45
[ 1 0,01 893 46 5,15 ±0,74 1,78 4,95 >0,05 <0,001 0,55
'г ^ 8 1 Экстракт сумаха + ОД 876 57 6,51 ±0,83 2,90 3,75 <0,01 <0,001 0,44
5 а 1,0 902 64 7,09 ± 0,85 3,49 3,26 <0,001 <0,01 0,39
Н м н4 * м К и Щ 10 878 69 7,86 ±0,91 4,07 2,64 <0,001 <0,01 0,32
МННГ
Е 8 1s 100 881 75 8,51 ±0,94 4,55 2,14 <0,001 <0,05 0,26
нмм 0 906 112 12,36 ± 1,09 7,18 - <0,001 - -
1 S н «в а> Я г = о И м «J О 0,001 901 55 6,10 ±0,80 2,64 4,64 <0,01 <0,001 0,51
Экстракт сумаха + 0,01 887 49 5,52 ± 0,77 2,12 5,14 <0,05 <0,001 0,55
0,1 911 61 6,69 ± 0,83 3,16 4,14 <0,01 <0,001 0,46
* 1 Н Я в < 1,0 896 66 7,37 ± 0,87 3,69 3,56 <0,001 <0,001 0,40
X НММ 10 884 73 8,26 ± 0,93 4,36 2,87 <0,001 <0,01 0,33
100 897 82 9,14 ±0,96 4,98 2,21 <0,001 <0,05 0,26
Опыты были проведены на свежих семенах репчатого лука. В качестве мутагена использовался МННГ (метилнитрозогуанидин) и НММ (нитрозометилмочевина). На данном этапе опыта испытуемые дозы экстракта добавлялись к объекту до мутагена.
В опытах, проведенных на растительных объектах сухие семена репчатого лука, 3 часа были вымочены в растворе экстракта из плодов сумаха, далее к данной среде добавлялся либо МННГ (5 мкг/мл), либо НММ (0,02%). После того как остатки мутагена промывались семена, до окончания фиксации были инкубированы в воде. Далее был проведен анализ частоты хромосомной аберрации апикальной меристемы клеток ростков.МННГиНММ являясь моно- и полифункциональными алкилирующими соединениями, являются мутагенами прямого типа, т.е. в начальной форменаходятся во взаимодействии с ДНК-мишенью.
При выборемоделей мутагенов, так же учитывался спектр образуемых ими типов первичного повреждения молекул ДНК. Т. о. МННГ и НММ являясь донорами алкильных групп, образуют первичные повреждения нуклеотидного типа.
Исследования экстракта из плодов сумаха в широкого диапазона дозе на семенах репчатого лука показало, что применение экстракта до мутагена
понижает генотоксичностьалкилирующих мутагенов (табл. 1). В данной серии опытов выяснилось, что при воздействии МННГ (5мкг/мл) иНММ (0,02%) (дозы были выбраны путем вычисления эквитоксичности их мутагенного воздействия) использование экстракта сумаха в дозе 0,01мкг/ мл защищает геном в максимальной степени.
M - частота хромосомной аберрации, N - все изученные клетки, п- хромосомная абберация, m - ошибка, tg - погрешность, P - уровень значимости.
Способ вычисления:
п * 100%
M = ■
N
M = .
tg =
M * (100 - M) ' N ; М 2 - М1
\1т12
m2
М - частота мутаций; М2 - частота мутаций опытного варианта;
М1 - частота мутаций контрольного варианта; М12 - ошибка варианта контроля; М22 - ошибка варианта опыта.
I — с
ФЭП - ——. ФЭП - Фактор эффективности I
противомутагена, 1- первичный (предыдущий), с - последующий (определяется при помощи деления разности первичного и модифицированного уровней мутации на первичный показатель).
Список литературы:
1. Агабейли Р. А. Антиоксиданты и антиоксидантные ферменты в регуляции мутационного процесса. -Дис.д.н.б.- Баку, 1991.-256 с.
2. Furukawa H., Vegetables as antimutagenes \\ Bull of Genetics Society of Canada.1994. - V. 25. - № 1. - 16 p.
3. Gichner T., Pospisil F., Volkeova V. et. al. gallic and tannic acids inhibit the mutagenicity of a direct acting mutagen MNNG \\ Biol. Plant. 1986. - V. 28. - № 5. - P. 386-390.
4. Gruter A., Friederich U., Wurgler F. E. Antimutagens in mushrooms \\ Mutat. Res. Environ. Mutagenes and Related Subj.1987. - V. 182. - № 5. - 281 p.
5. Grover J.S., Bala S. Antimutagenic activity Terminalia chebula (myroblan) is Salmonella typhimirium \\ Indian J., Exp. Biol. 1992. - V. 30. - № 4. - P. 339-341.