CC BY
47
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Определение антител к вирусу SARS-СoV-2 у пациентов с новой коронавирусной инфекцией
Федеральное государственное автономное научное учреждение «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), 108819, г. Москва, Российская Федерация
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), 119991, г. Москва, Российская Федерация
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 125993, г. Москва, Российская Федерация
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский институт гриппа имени А.А. Смородинцева» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 197376, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Центральная клиническая больница Российской академии наук», 117593, г. Москва, Российская Федерация
Общество с ограниченной ответственностью «Биопалитра», 197350, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
Общество с ограниченной ответственностью «Научно-производственная фирма ЛИТЕХ» 107023, г. Москва, Российская Федерация Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 197022, г. Санкт-Петербург, Российская Федерация
Игнатьев Г.М.1, Козловская Л.И.1, 2, Мефед К.М.1, Волок В.П.1, Белялетдинова И.Х.1, Еровиченков А.А.1, 3, Даниленко Д.М.4, Алешенко Н.Л.5, Клотченко С.А.4, Максимов Н.Л.6, Артемов Е.К.7, Пиняева А.Н.1, Лиознов Д.А.4, 8, Ишмухаметов А.А
1, 2
i
2
3
4
5
6
7
8
С0УЮ-19, вызванный новым вирусом БАК5-СоУ-2, создает серьезные проблемы для глобального общественного здравоохранения. Обнаружение антител в сыворотке крови является одним из важных методов диагностики пациентов с С0УЮ-19.
Цель исследования - изучение динамики появления вируснейтрализующих антител и антител к белкам вируса БАК5-СоУ-2 в сыворотках крови больных С0УЮ-19.
Материал и методы. Исследовали сыворотки крови 4 групп людей: интактных доноров (сыворотки крови взяты в 2016-2019 гг.), больных с лабораторно подтвержденным диагнозом «острая респираторная вирусная инфекция», больных гриппом (выявлены антитела к вирусу гриппа) и пациентов с подтвержденным методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) диагнозом «С0УЮ-19». Сыворотки крови исследовали методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием коммерческих наборов для определения ^ к белкам БАК5-СоУ-2 (И, Б), суммарных антител к рецептор-связывающему домену (КВЭ) белка Б и с помощью реакции нейтрализации (РН).
Результаты и обсуждение. В парных сыворотках крови людей из 1-3-й групп методом ИФА и при постановке РН антитела к БАК5-СоУ-2 не выявлены. На момент госпитализации пациентов с С0УЮ-19
Ключевые слова:
COVID-19; антитела к белкам SARS-CoV-2; вируснейтрализу-ющие антитела к SARS-CoV-2
в сыворотках крови 12 (19%) больных антитела к SARS-CoV-2 при их определении методами РН и ИФА отсутствовали. В сыворотках крови, взятых спустя 4-9 сут после госпитализации, выявлены вируснейтра-лизующие антитела и антитела хотя бы к 1 белку вируса в ИФА.
Заключение. На момент госпитализации у подавляющего числа больных был сформирован иммунный ответ к вирусу SARS-CoV-2. В динамике наблюдения уровни антител к белкам SARS-CoV-2 повышались, в большей степени к RBD.
Финансирование. Работа выполнена в рамках государственного задания № АААА-А20-120081790043-5. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Игнатьев Г.М., Ишмухаметов А.А., Максимов Н.Л., Артемов Е.К., Лиознов Д.А.; сбор материала - Алешенко Н.Л., Даниленко Д.М., Клотченко С.А.; обработка материала, статистическая обработка данных, написание текста статьи - Козловская Л.И., Мефед К.М., Волок В.П., Пиняева А.Н.; редактирование - Белялетди-нова И.Х., Еровиченков А.А.; утверждение окончательного варианта статьи - Игнатьев Г.М., Ишмухаметов А.А.; ответственность за целостность всех частей статьи - Козловская Л.И., Игнатьев Г.М.
Для цитирования: Игнатьев Г.М., Козловская Л.И., Мефед К.М., Волок В.П., Белялетдинова И.Х., Еровиченков А.А., Даниленко Д.М., Алешенко Н.Л., Клотченко С.А., Максимов Н.Л., Артемов Е.К., Пиняева А.Н., Лиознов Д.А., Ишмухаметов А.А. Определение антител к вирусу SARS-CoV-2 у пациентов с новой коронавирусной инфекцией // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2022. Т. 11, № 1. С. 21-27. DOI: https://doi.org/10.33029/2305-3496-2022-11-1-21-27 Статья поступила в редакцию 19.07.2021. Принята в печать 10.01.2022.
Determination of antibodies to SARS-CoV-2 in patients with coronavirus infection
Ignatyev G.M.1, Kozlovskaya L.I.12, Mefed K.M.1, Volok V.P.1, Beiyaietdinova I.Kh.1, Erovichenkov A.A.1,3, Daniienko D.M.4, Aieshenko N.L.5, Kiotchenko S.A.4, Maksimov N.L.6, Artemov Е.К.7, Piniaeva A.N.1, Lioznov D.A.48, Ishmukhametov A.A.1 2
1 Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences, 108819, Moscow, Russian Federation
2 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of Ministry of Healthcare of the Russian Federation (Sechenov University), 119991, Moscow, Russian Federation
3 Russian Medical Academy of Continuing Professional Education of Ministry of Healthcare of the Russian Federation, 125993, Moscow, Russian Federation, 125993, Moscow, Russian Federation
4 Smorodintsev Research Institute of Influenza, Ministry of Healthcare of the Russian Federation,197376, Saint Petersburg, Russian Federation
5 Central Clinical Hospital of the Russian Academy of Sciences, 117593, Moscow, Russian Federation
6 Biopalitra, LLC, 197350, Saint-Petersburg, Russian Federation
7 Lytech Co. Ltd., 107023, Moscow, Russian Federation
8 Academician I.P. Pavlov First St. Petersburg State Medical University of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation, 197022, Saint Petersburg, Russian Federation
COVID-19, caused by the novel SARS-CoV-2 virus, poses major challenges for global public health. The detection of antibodies in blood serum is one of the important methods for diagnostics of COVID-19 patients.
The main aim was to study the dynamics of the appearance of neutralizing antibodies and antibodies to the SARS-CoV-2 proteins in COVID-19 patients sera.
Material and methods. The blood sera of four groups of people were studied: "intact" donors (blood sera were collected in 2016-2019); patients with a laboratory-confirmed diagnosis of acute respiratory viral infection; patients with influenza (antibodies to the influenza virus have been identified) and patients with a PCR confirmed diagnosis of COVID-19. Blood sera were analyzed in ELISA with commercial kits for detection of IgG to SARS-CoV-2 (N, S) proteins and total antibodies to RBD of protein S and in neutralization test (NT).
Results and discussion. Antibodies to SARS-CoV-2 were not detected in paired blood sera of people from groups 1-3 by ELISA and NT. At the time of hospitalization of patients with COVID-19 in the sera of 12 (19%) patients antibodies to SARS-CoV-2 were absent when they were determined by NT and ELISA. In blood sera taken 4-9 days after hospitalization, neutralizing antibodies and antibodies to at least one viral protein were detected in ELISA.
Conclusion. At the time of hospitalization, the overwhelming majority of patients had a humoral immune response to the SARS-CoV-2. In the dynamics of observation, the levels of antibodies to SARS-CoV-2 proteins increased, to a greater extent to RBD.
Keywords:
COVID-19; antibody against SARS-CoV-2 proteins; virus neutralizing antibodies
Funding. The work was carried out within the framework of work on the theme ofthe State Assignment No. AAAA-A20-120081790043-5. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Contribution. Research concept and design - Ignatiev G.M., Ishmukhametov A.A., Maksimov N.L., Artemov E.K., Lioznov D.A.; collection of material - Aleshenko N.L., Danilenko D.M., Klotchenko S.A.; material processing, statistical data processing, writing the text of the article - Kozlovskaya L.I., Mefed K.M., Volok V.P., Pinyaeva A.N.; editing - Belyaletdinova I.Kh., Erovichenkov A.A.; approval of the final version of the article - Ignatiev G.M., Ishmukhametov A.A.; responsibility for the integrity of all parts of the article - Kozlovskaya L.I., Ignatiev G.M.
For citation: Ignatyev G.M., Kozlovskaya L.I., Mefed K.M., Volok V.P., Belyaletdinova I.Kh., Erovichenkov A.A., Danilenko D.M., Aleshenko N.L., Klotchenko S.A., Maksimov N.L., Artemov E.K., Piniaeva A.N., Lioznov D.A., Ishmukhametov A.A. Determination of antibodies to SARS-CoV-2 in patients with coronavirus infection. Infektsionnye bolezni: novosti, mneniya, obuchenie [Infectious Diseases: News, Opinions, Training]. 2022; 11 (1): 21-7. DOI: https://doi.org/10.33029/2305-3496-2022-11-1-21-27 Received 19.07.2021. Accepted 10.01.2022.
Первые случаи новой коронавирусной инфекции (COVID-19) были зарегистрированы в конце 2019 г. [1]. Этиологический агент был идентифицирован как p-коронавирус, генетически был сходен с возбудителем тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) и, таким образом, был назван SARS-CoV-2 [2]. Из-за быстрого роста числа случаев и широкого неконтролируемого распространения по всему миру Всемирная организация здравоохранения объявила пандемию COVID-19 [3]. Быстрое выявление этиологического агента, информации о генетической последовательности вируса и свободный доступ к ней привели к скорой доступности диагностических тест-систем на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в реальном времени [4]. Молекулярно-генети-ческая диагностика позволяет провести лабораторное подтверждение заболевания, в то же время серологические исследования позволяют провести эпидемиологическое расследование, дифференцировать случаи бессимптомного течения, изучить тяжесть заболевания и механизмы формирования гуморального противовирусного иммунитета. Эти исследования также важны и необходимы для оценки результатов испытаний вакцинных препаратов.
Вирион SARS-CoV-2 оболочечный, он содержит 4 структурных белка: многодоменный гликопротеин шипика (spike) S; нуклеопротеин N, ассоциированный с РНК-геномом вируса; мембранный белок М и малый оболочеч-ный белок Е - встроенные в липидную оболочку. Белок S определяет первые этапы репликативного цикла вируса: взаимодействие с рецептором АСЕ2 (субъединица S1 через рецептор-связывающий домен RBD), слияние мембран вири-она и клетки (субъединица S2) и проникновение нуклео-капсида в цитоплазму. Белки S и N являются основными иммуногенами [4, 5].
Цель исследования - изучение динамики появления вируснейтрализующих антител (ВНА) и антител к белкам вируса SARS-CoV-2 в сыворотках крови больных COVID-19.
Материал и методы
На антитела к N- и S-белкам вируса SARS-CoV-2 проведено тестирование 189 сывороток крови 4 разных групп людей. В 1-ю группу включено 30 сывороток, собранных в 2016 и 2017 гг. от людей в возрасте 20-60 лет в рамках
Национальной программы серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики. Во 2-ю группу - 23 сыворотки, полученные до мая 2019 г. от больных с лабораторно подтвержденным диагнозом «острая респираторная вирусная инфекция» (ОРВИ). Из них возбудителями инфекции в 3 случаях был респираторно-син-цитиальный вирус; в 12 - риновирусы; в 1 - аденовирус; в 2 - метапневмовирус; вирусы парагриппа - в 2 случаях (1-го и 4-го типа); коронавирусы (сезонные) - 3, из них 2 - Е229, 1 - ОС43. Лабораторное выявление этиологического агента ОРВИ проводили на клиническом материале методом ПЦР с гибридизационно-флюорес-центной детекцией продуктов амплификации с использованием «АмплиСенс ОРВИ-скрин^Ь (кат. номер 1}-У57). В 3-ю группу включено 10 сывороток, отобранных у вакцинированных людей, содержащих антитела к вирусу гриппа по результатам реакции торможения гемагглютинации со штаммами вируса гриппа типа А (Н1И1, Н3И2) и типа В (штаммы линий Виктория и Ямагата). В 4-ю группу - 126 сывороток от 63 пациентов с диагнозом «новая коронавирусная инфекция С0УШ-19». Все больные находились в условиях стационарного лечения. У всех больных был хотя бы 1 положительный результат ПЦР с детекцией в реальном времени, полученный из носоглоточных смывов. Диагноз «новая коронавирусная инфекция ШУШ-19» был подтвержден результатами компьютерной томографии.
Сыворотки крови были получены от больных в динамике лечения: 1-я сыворотка - на 1-2-е сутки после госпитализации, 2-я сыворотка - через 4-9 сут после получения первой (интервал между отбором сывороток составил 6,11+0,10 дня). В исследовании использовали парные сыворотки.
Для участия в исследовании получено письменное информированное согласие от всех субъектов или их законных представителей в клинических учреждениях, в которых проводили сбор и первичную обработку сывороток.
Иммуноферментный анализ (ИФА) проводили с использованием коммерческих наборов для определения 1дС к белкам БАКБ-СоУ-2: нуклеокапсида N и спайка Б (ООО НПФ «Литех»), а также суммарных антител к (ООО «Биопалитра»), согласно инструкциям производителей. Результаты ИФА представляли в виде индекса антител, рассчитанного согласно инструкциям производителей.
Авидность антител определяли, как описано ранее [9, 10].
Для проведения реакции нейтрализации (РН) использовали штамм ПИК35 SARS-CoV-2 (GISAID ID EPI_ISL_428852), выделенный из назофарингеального мазка больного COVID-19. Штамм прошел 4 последовательных пассажа в культуре клеток Vero. Штамм вызывал цитопатическое поражение клеток.
Для проведения РН использовали 2-кратные разведения сыворотки крови, смешивали их с вирусом в дозе 50-200 ТЦД501 в соотношении 1 : 1 для получения серии из 8 разведений, начиная с 1 : 8.
Сыворотки крови с внесенным штаммом вируса инкубировали в течение 1 ч при 37 °С, после чего 100 мкл смеси добавляли к монослою клеток Vero в 2 параллелях.
Контроль: титрование положительной и отрицательной референс-сывороток, а также титрование вносимой дозы вируса. Цитопатическое действие вируса оценивали визуально на 5-е сутки после заражения. Расчет титра антител проводили по формуле Кербера [11]. Сыворотки крови, которые в разведении 1 : 8 не вызывали нейтрализацию вируса, считали отрицательными.
Статистическая обработка: рассчитаны экстенсивные показатели, средние логарифмические значения индексов в ИФА, для реакции нейтрализации - средние геометрические титры (СГТ для РН) и их стандартные отклонения с использованием программы OriginPro 8 (OriginLab Corporation, USA).
Результаты и обсуждение
При проведении ИФА сывороток крови из 1-3-й групп антитела к белкам N, S и RBD вируса SARS-CoV-2 не выявлены. Сыворотки крови пациентов 1-3-й групп в РН со штаммом ПИК35 SARS-CoV-2 (GISAID ID EPI_ISL_428852) также показали отрицательные результаты (титр антител ниже порога определения, <1 : 8). Изученные сыворотки крови были
отрицательными как в РН, так и в ИФА, что свидетельствует о специфичности тестов, используемых для определения антител к белкам вируса SARS-CoV-2.
Результаты тестирования сывороток крови на антитела к различным структурам SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19 представлены в таблице.
На момент госпитализации только у 12 (19,0%) больных антитела к SARS-CoV-2 в сыворотках крови отсутствовали. У 2 (3,2%) пациентов не выявлены антитела ни в одной из используемых тест-систем ИФА, но обнаружены ВНА. У большинства пациентов (49 человек, 77,8%) в ИФА определены антитела к белкам вируса SARS-CoV-2, в 26 сыворотках крови выявлены антитела сразу к нескольким белкам вируса. При этом 25 из этих сывороток крови обладали вируснейтрализу-ющей активностью.
Всего из 38 первых сывороток крови, обладающих вирус-нейтрализующей активностью, 36 были положительными в реакции ИФА как минимум к одному из белков вируса SARS-CoV-2 (94,7% сывороток крови, положительных в РН, были положительными в ИФА). Из 36 сывороток крови положительных в ИФА и РН 28 (77,7%) были положительными в ИФА с белком RBD.
Во всех исследованных повторных сыворотках крови выявлена вируснейтрализующая активность и они были положительными хотя бы в одной из ИФА тест-систем. Следует отметить, что антитела к белку RBD выявлены во всех 63 сыворотках крови. Из них 55 сывороток были положительными в ИФА на антитела к белкам N1, S и RBD, 4 - положительны на белки N и RBD, 3 - положительны к белкам S и RBD и 1 - только к RBD.
Из данных, представленных на рисунке, следует, что значения уровня антител, определенных в ИФА ко всем белкам, увеличивались в динамике наблюдения, при этом в большей степени это относится к антителам к RBD. Рассчитанный средний геометрический титр ВНА также увеличивался
Результаты тестирования сывороток крови на антитела к SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19
Показатель Время забора сывороток крови у больных COVID-19
на момент госпитализации (1) через 4 -9 дней госпитализации (2)
количество положительных из них с ВНА количество положительных из них с ВНА
результатов (в ИФА и РН) результатов (в ИФА и РН)
абс. 1 % абс. 1 % абс. 1 % абс. 1 %
IgG N 10 15,9 3 4,7 0 0 0 0
IgG S 2 3,2 0 0 0 0 0 0
АТ RBD 9 14,3 6 9 1 1,6 1 1,6
IgG N + RBD 7 11,1 6 9,5 4 6,3 4 6,3
IgG N + S 5 7,9 5 7,9 0 0 0 0
IgG N + S + RBD 14 22,2 14 И 22,2 55 87,3 55 j 87,3
IgG S + RBD 2 3,2 2 3,1 3 4,8 3 4,8
ВНА 2 3,2 2 3,1 0 0 0 0
Отрицательный результат 12 19,0 0 0 0 0 0 0
Всего 63 38 63 63
Примечание. ^О N - антитела класса ^О к белку Ы; ^О Б - антитела класса ^О к белку Б; АТ ЯБй - суммарные антитела к ре-цептор-связывающему домену белка Б; РН - реакция нейтрализации; ВНА - вируснейтрализующие антитела; ИФА - иммунофер-ментный анализ.
1 ТЦД50 - тканевая цитопатогенная доза, вызывающая гибель 50% тест-объектов. - Прим. ред.
Результаты выявления в динамике вируснейтрализующих антител и антител к белкам SARS-CoV-2 в сыворотках крови больных С0^-19
А - титры ВНА к штамму ПИК35 вируса 8АНБ-СоУ-2; В - индексы суммарных антител к белку ЯВй в ИФА; С - индексы антител класса ^ к белку нуклеокапсида N в ИФА; О - индексы антител класса ^ к белку Б в ИФА. * - доля негативных сывороток крови на момент первого взятия указана цифрой на графике; титр негативных сывороток <1: 8 принят равным нулю для удобства представления; точка 1 - 1-2-е сутки после госпитализации, точка 2 - 4-9-е сутки после госпитализации.
в динамике от 0,86+0,81 до 2,14+0,55 1д. При оценке авид-ности антител в первых сыворотках крови этот показатель составлял 0-11%, а во вторых - 13-31%.
В ходе проведенного исследования было показано, что сыворотки крови людей, перенесших вирусные респираторные инфекции, а также сыворотки крови так называемых интактных доноров, полученных до декабря 2019 г., в использованных тест-системах ИФА с белками вируса БА1КБ-СоУ-2 и в РН дали отрицательный результат. Это подтверждает специфичность разработанных тест-систем и отсутствие циркуляции БА1КБ-СоУ-2 в тот период среди населения, по крайней мере среди участников 1-3-й групп исследования.
Известно, что сроки появления антител к БА1КБ-СоУ-2, определяемых в РН и в ИФА, варьируют от 2 до 11 дней [4-8]. При этом чувствительность тест-систем ИФА выше, если в качестве иммуносорбента использовали домен 1КВ0 белка Б. С наличием антител к 1КВ0 БА1КБ-СоУ-2 связывают и вируснейтрализующую активность сывороток крови [4, 6]. Отмечено, что вируснейтрализующая активность сывороток крови коррелирует с тяжестью заболевания: чем тяже-
лее протекает ШУШ-19, тем выше вируснейтрализующая активность сыворотки крови больного [5-8]. Показано, что к моменту клинического подтверждения диагноза С0УШ-19 у больных имеются антитела (определяемые как в ИФА, так и в РН), но их активность быстро снижается [5-8].
Заключение
Длительность и сроки инкубационного периода болезни у больных, включенных в исследование, было сложно установить, но каждому из них при поступлении был выставлен диагноз С0УШ-19. На фоне признаков пневмонии, высокой температуры тела и сниженной сатурации (Бр02) у 77,7% больных обнаружены специфические антитела к возбудителю, определяемые в ИФА, а у 60,3% выявлены ВНА. Таким образом, на момент госпитализации у подавляющего числа больных был сформирован иммунный ответ к вирусу БА1КБ-СоУ-2. Спустя короткий период (4-9 сут) у всех больных сформировались антитела, обладающие вируснейтрализу-ющей активностью и взаимодействующие с доменом 1КВ0 белка Б вируса.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Игнатьев Георгий Михайлович (George M. Ignatyev)* - доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора производственного направления ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва, Российская Федерация
E-maiL: marburgman@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-9731-3681
Козловская Любовь Игоревна (Liubov I. Kozlovskaya) - кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории полиомиелита и других энтеровирусных инфекций с референс-центром ВОЗ по надзору за полиомиелитом ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), доцент кафедры организации и технологии производства иммунобиологических препаратов Института трансляционной медицины и биотехнологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Российская Федерация E-maiL: Lubov_i_k@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-3029-1035
Мефед Кирилл Михайлович (Kirill M. Mefed) - кандидат биологических наук, заместитель начальника управления качества ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва, Российская Федерация E-maiL: mefoyd@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-7335-1982
Волок Виктор Петрович (Viktor P. Volok) - научный сотрудник лаборатории полиомиелита и других энтеровирусных инфекций с референс-центром ВОЗ по надзору за полиомиелитом ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва, Российская Федерация E-maiL: viktor.p.v@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-9659-723X
Белялетдинова Ильмира Халитовна (Ilmira Kh. Belyaletdinova) - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник клинического отделения вирусных нейроинфекций ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва, Российская Федерация E-maiL: beLyaLetdinova_i@.maiL.ru https://orcid.org/0000-0003- 1630-5282
Еровиченков Александр Анатольевич (Alexander A. Erovichenkov) - доктор медицинских наук, профессор, заведующий клиническим отделением вирусных нейроинфекций ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), профессор кафедры инфекционных болезней ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, Москва, Российская Федерация E-maiL: aLexerov1@maiL.ru https://orcid.org/0000-0002-5087-6946
Даниленко Дарья Михайловна (Darya M. Danilenko) - кандидат биологических наук, заместитель директора по научной работе ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-maiL: daria.daniLenko@infLuenza.spb.ru https://orcid.org/0000-0001-6174-0836
Алешенко Наталья Леонидовна (Natalia L. Aleshenko) - заведующий клинико-диагностической лабораторией ФГБНУ ЦКБ РАН, Москва, Российская Федерация E-maiL: nL.aLeshenko@gmaiL.com https://orcid.org/0000-0003-4891-9959
Клотченко Сергей Анатольевич (Sergey A. Klotchenko) - кандидат биологических наук, заведующий лабораторией разработки молекулярных диагностических систем ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-maiL: fosfatik@maiL.ru https://orcid.org/0000-0003-0289-6560
Максимов Николай Львович (Nikolai L. Maksimov) - директор ООО «Биопалитра», Санкт-Петербург, Российская Федерация
E-maiL: ceo@biopaLitra.com https://orcid.org/0000-0002-9834-0614
Артемов Евгений Константинович (Eugeny K. Atremov) - начальник отдела производства диагностических тест-систем ООО «Научно-производственная фирма ЛИТЕХ», Москва, Российская Федерация E-maiL: evkoar@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-6786-6357
* Автор для корреспонденции.
Пиняева Анастасия Николаевна (Anastasia N. Piniaeva) - начальник Управления разработки и внедрения инновационных и полупромышленных технологий ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), Москва, Российская Федерация
E-mail: pinyaeva_an@chumakovs.su https://orcid.org/0000-0001-5381-2393
Лиознов Дмитрий Анатольевич (Dmitry A. Lioznov) - доктор медицинских наук, профессор, директор ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Минздрава России, заведующий кафедрой инфекционных болезней и эпидемиологии ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. И.П. Павлова Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация E-mail: dmitry.lioznov@influenza.spb.ru https://orcid.org/0000-0003-3643-7354
Ишмухаметов Айдар Айратович (Aydar A. Ishmukhametov) - член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, профессор, генеральный директор ФГАНУ «ФНЦИРИП им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита), заведующий кафедрой организации и технологии производства иммунобиологических препаратов Института трансляционной медицины и биотехнологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Российская Федерация E-mail: ishmukhametov@chumakovs.su https://orcid.org/0000-0001-6130-4145
ЛИТЕРАТУРА
1. Zhou P., Yang X.L., Wang X.G., Hu B., Zhang L., Zhang W. et al. A pneumonia outbreak associated with a new Coronavirus of probable bat origin // Nature. 2020. Vol. 579, N 7798. P. 270-273. DOI: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2012-7
2. Coronaviridae Study Group of the International Committee on Taxonomy of Viruses. The species Severe acute respiratory syndrome-related Coronavirus: classifying 2019-nCoV and naming it SARS-CoV-2 // Nat. Microbiol. 2020. Vol. 5, N 4. P. 536-544. DOI: https://doi.org/10.1038/s41564-020-0695-z
3. WHO Director-General's opening remarks at the media briefing on COVID-19, 11 March 2020. World Health Organization, 11 March 2020. https://www.who.int/ dg/speeches/detail/who-director-general-s-opening-remarks-at-the-media-briefing-on-covid-19---11-march-2020
4. Okba N.M.A., Müller M.A., Li W., Wang C. et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2-specific antibody responses in coronavirus disease patients // Emerg. Infect. Dis. 2020. Vol. 26, N 7. P. 1478-1488. DOI: https://doi.org/10.3201/ eid2607.200841
5. Meyer B., Drosten C., Müller M.A. Serological assays for emerging coronavi-ruses: challenges and pitfalls // Virus Res. 2014. Vol. 194. P. 175-183. DOI: https:// doi.org/10.1016/j.virusres.2014.03.018
6. Wu F., Wang A., Liu M., Wang Q. et al. Neutralizing antibody responses to SARS-CoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications // me-dRxiv. 2020.03.30.20047365. DOI: https://doi.org/10.1101/2020.03.30.20047365
7. Amanat F., Stadlbauer D., Strohmeier S., Nguyen T.H.O. et al. A serological assay to detect SARS-CoV-2 seroconversion in humans // Nat. Med. 2020. Vol. 26, N 7. P. 1033-1036. DOI: https://doi.org/10.1038/s41591-020-0913-5
8. Zhao J., Yuan Q., Wang H., Liu W. et al. Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019 // Clin. Infect. Dis. 2020. 2020. Vol. 71, N 16. P. 2027-2034. DOI: https://doi.org/10.1093/cid/ciaa344
9. Narita M., Yamada S., Matsuzono Y., Itakura O. et al. Immunoglobulin G avidity testing in serum and cerebrospinal fluid for analysis of measles virus infection // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1996. Vol. 3, N 2. P. 211-215. DOI: https://doi.org/10.1128/ cdli.3.2.211-215.1996
10. Atrasheuskaya A.V., Kulak M.V., Neverov A.A., Rubin S., Ignatyev G.M. Measles cases in highly vaccinated population of Novosibirsk, Russia, 2000-2005 // Vaccine. 2008. Vol. 26, N 17. P. 2111-2118. DOI: https://doi.org/10.1016Zi.vac-cine.2008.02.028
11. Karber G. Beitrag zur kollecktiven Behandlung pharmakologischer Reihenversuche // Arch. Exptl. Pathol. Pharmakol. 1931. Vol. 162. P. 480-483.
REFERENCES
1. Zhou P., Yang X.L., Wang X.G., Hu B., et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature. 2020; 579 (7798): 270-3. DOI: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2012-7
2. Coronaviridae Study Group of the International Committee on Taxonomy of Viruses. The species Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus: classifying 2019-nCoV and naming it SARS-CoV-2. Nat Microbiol. 2020; 5 (4): 536-44. DOI: https://doi.org/10.1038/s41564-020-0695-z
3. WHO Director-General's opening remarks at the media briefing on COVID-19, 11 March 2020. World Health Organization, 11 March 2020. https://www.who.int/ dg/speeches/detail/who-director-general-s-opening-remarks-at-the-media-briefing-on-covid-19---11-march-2020
4. Okba N.M.A., Müller M.A., Li W., Wang C., et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2-specific antibody responses in coronavirus disease patients. Emerg Infect Dis. 2020; 26 (7): 1478-88. DOI: https://doi.org/10.3201/ eid2607.200841
5. Meyer B., Drosten C., Müller M.A. Serological assays for emerging corona-viruses: challenges and pitfalls. Virus Res. 2014; 194: 175-83. DOI: https://doi. org/10.1016/j.virusres.2014.03.018
6. Wu F., Wang A., Liu M., Wang Q., et al. Neutralizing antibody responses to SARS-CoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications. medRxiv. 2020.03.30.20047365. DOI: https://doi.org/10.1101/2020.03.30.20047365
7. Amanat F., Stadlbauer D., Strohmeier S., Nguyen T.H.O., et al. A serological assay to detect SARS-CoV-2 seroconversion in humans. Nat Med. 2020; 26 (7): 1033-6. DOI: https://doi.org/10.1038/s41591-020-0913-5
8. Zhao J., Yuan Q., Wang H., Liu W., et al. Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019. Clin Infect Dis. 2020: ciaa344. DOI: https://doi.org/10.1093/cid/ciaa344
9. Narita M., Yamada S., Matsuzono Y., Itakura O., et al. Immunoglobulin G avidity testing in serum and cerebrospinal fluid for analysis of measles virus infection. Clin Diagn Lab Immunol. 1996; 3 (2): 211-5. DOI: https://doi.org/10.1128/ cdli.3.2.211-215.1996
10. Atrasheuskaya A.V., Kulak M.V., Neverov A.A., Rubin S., Ignatyev G.M. Measles cases in highly vaccinated population of Novosibirsk, Russia, 2000-2005. Vaccine. 2008; 26 (17): 2111-8. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.02.028
11. Karber G. Beitrag zur kollecktiven Behandlung pharmakologischer Reihenversuche. Arch Exptl Pathol Pharmakol. 1931; 162: 480-3.
