CC BY
38
J
УДК: 615:633.877.3
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-4-56-61
DETERMINATION OF THE AMINO ACID COMPOSITION OF MEADOW SAGE (SALVIA PRATENSIS L.), WHICH GROWS IN THE TERRITORY OF RSO-ALANIA
Kusova R.D., Sidakova T.M.
North Ossetian state University named after Kosta Levanovich Khetagurov», Vladikavkaz, Russian Federation
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ШАЛФЕЯ ЛУГОВОГО (SALVIA PRATENSIS L.), ПРОИЗРАСТАЮЩЕЙ НА ТЕРРИТОРИИ РСО-АЛАНИЯ
Кусова Р.Д., Сидакова Т.М.
ФГБОУ ВО «Северо-Осетинский государственный университет имени Коста Левановича Хетагурова», г. Владикавказ, Российская Федерация
Abstract. Medicinal plants continue to occupy a significant place in the Arsenal of medicinal products. Among the medicinal plants used in folk medicine, there are such pharmacological properties of which are scientifically confirmed, and which play an important role in the treatment and prevention of diseases. Promising sources of effective and safe natural antimicrobial, anti-inflammatory and wound-healing medicines are representatives of the family Yasnotkovyh (Lamiaceae). Of scientific interest is the grass of meadow sage (Salvia pratensis L.), which grows on the territory of the RSO-Alania. The article presents the results of a study of the qualitative and quantitative content of amino acids in the grass of meadow sage (Salvia pratensis L.), which grows in the territory of RSO-Alania. To quantify the amino acid composition of sage grass, an amino acid analyzer -AAA 400 was used. The object of the study was the above-ground part of meadow sage growing on the territory of RSO-Alania. When determining the qualitative composition and quantitative content of the herb, 16 amino acids were identified, 9 of which are irreplaceable.
Keywords: sage grass, amino acid composition, amino acids, biologically active substances, medicinal plants
Аннотация. Лекарственные растения продолжают занимать значимое место в арсенале лечебных средств. Среди лекарственных растений, используемых в народной медицине, есть такие фармакологические свойства которых научно подтверждены, и которые играют важную роль в лечении и профилактике заболеваний. Перспективными источниками эффективных и безопасных природных антимикробных, противовоспалительных и ранозаживляющих лекарственных средств являются представители семейства Яснотковых (Lamiaceae). Научный интерес представляет трава шалфея лугового (Salvia pratensis L.), произрастающая на территории РСО-Алания. В статье представлены результаты исследования качественного и количественного содержания аминокислот в траве шалфея лугового (Salvia pratensis L.), произрастающая на территории РСО-Алания. Для количественного определения аминокислотного состава травы шалфея лугового использовали аминокислотный анализатор - ААА 400. Объектом исследования служила надземная часть шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания. При определении качественного состава и количественного содержания в траве выявлено 16 аминокислот, 9 из которых незаменимые.
Ключевые слова: трава шалфея лугового, аминокислотный состав, аминокислоты, биологически активные вещества, лекарственные растения.
REFERENCES
[1]. Bidarova F.N. Issledovanie aminokislotnogo sostava pyl'cy sosny obyknovennoj (pinus sylvestris l.), proiz-rastajushhej na territorii RSO-Alanija / T.M.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
[1]. Бидарова Ф.Н. Исследование аминокислотного состава пыльцы сосны обыкновенной (pinus sylvestris l.), произрастающей на территории
Medical & pharmaceutical journal "Pulse" | Медико-фармацевтический журнал "Пульс"
Sidakova, M.T. Kisieva // Mezhdunarodnyj zhurnal prikladnyh i fundamental'nyh issledovanij - 2017. -№12. - S.267-271.
[2]. Drozdova I.L. Izuchenie aminokislotnogo sostava travy korostavnika polevogo / I.L. Drozdova, N.N.Denisova // Tradicionnaja medicina. - 2012. -№29(31). - S.49-51.
[3]. Nikiforov L.A., Belousov M.V., Fursa N.S. Izuchenie aminokislotnogo sostava rjaski maloj (Lemna minor L.). // Bjulleten' sibirskoj mediciny. №5. 2011. S. 7477.
[4]. Oleshko G.I., Jarygina T.I., Zorina E.V., Resh-etnikova M.D. Razrabotka unificirovannoj metodiki kolichestvennogo opredelenija symmy svobodnyh aminokislot v lekarstvennom rastitel'nom syr'e i jek-stakcionnyh preparatah // Farmacija.2011. №3. S. 1417
[5]. 5.Jegamberdyev, B.N. Perspektivy primenenija go-meopaticheskogo shalfeja v prakticheskoj medicine / B.N. Jegamberdyev, A.V. Streljaeva, T.A. Shheglova //Gomeopaticheskij ezhegodnik. Sbornik materialov Moskovskoj mezhdunarodnoj gomeopaticheskoj kon-ferencii: «Razvitie gomeopaticheskogo metoda v sov-remennoj medicine» - M., 2014. S.142 - 130.
РСО-Алания / Т.М. Сидакова, М.Т. Кисиева // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований - 2017. - №12. -С.267-271.
[2]. Дроздова И.Л. Изучение аминокислотного состава травы короставника полевого / И.Л. Дроздова, Н.Н.Денисова // Традиционная медицина. - 2012. - №29(31). - С.49-51.
[3]. Никифоров Л.А., Белоусов М.В., Фурса Н.С. Изучение аминокислотного состава ряски малой (Lemna minor L.). // Бюллетень сибирской медицины. №5. 2011. С. 74-77.
[4]. Олешко Г.И., Ярыгина Т.И., Зорина Е.В., Решетникова М.Д. Разработка унифицированной методики количественного определения сыммы свободных аминокислот в лекарственном растительном сырье и экстакционных препаратах // Фармация.2011. №3. С. 14-17
[5]. Эгамбердыев, Б.Н. Перспективы применения гомеопатического шалфея в практической медицине / Б.Н. Эгамбердыев, А.В. Стреляева, Т.А. Щеглова //Гомеопатический ежегодник. Сборник материалов Московской международной гомеопатической конференции: «Развитие гомеопатического метода в современной медицине» - М., 2014. С.142 - 130.
Authors ' contributions. Kusova R. D.-concept and design of the research, writing the text; Sudakova T. M.-collection and processing of materials, statistical data processing, literature review, writing the text. Conflict of interest statement. The authors declare that there is no conflict of interest.
Kusova R. D.-PIN code: 7465-0882; ORCID ID: 0000-0002-7541-8992; Research interests. the study of medicinal plant raw materials, published more than 50 works, including in the Higher Attestation Commission 19.
Sudakova T. M. -SPIN code: 9846-6545; ORCHID ID: 0000-0001-7274-4365; Research interests. study of medicinal plant raw materials, published more than 20 works, 4 of them in the Higher Attestation Commission.
Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Кусова Р.Д. - концепция и дизайн исследования, написание текста; Сидакова Т.М.— сбор и обработка материалов, статистическая обработка данных, обзор литературы, написание текста.
Кусова Р.Д. — SPIN-код: 7465-0882; ORCID ID: 0000-0002-7541-8992; Сфера научных интересов. изучение лекарственного растительного сырья, опубликовано более 50 работ, из них в ВАК.19
Сидакова Т.М.-SPIN-код:9846-6545; ORCID ID: 0000-0001-7274-4365; Сфера научныш интересов. изучение лекарственного растительного сырья, опубликовано более 20 работ, из них в ВАК 4.
Введение. Во всем мире для современной медицины и фармации представляют практический интерес изучение лекарственных растений, применяемых в народной медицине. Лекарственные растения продолжают занимать значимое место в арсенале лечебных средств. Среди лекарственных растений, используемых в народной медицине, есть такие фармакологические свойства которых научно подтверждены, и которые играют важную роль в лечении и профилактике заболеваний.
Целебное действия растительного сырья обусловлено наличием в сырье различных
химических веществ. В дикорастущих растениях в различных количествах содержатся аминокислоты, дубильные вещества, флавоноиды, органические кислоты, слизи, смолы, эфирные масла, и другие биологически активные соединения, благодаря которым обусловлен их терапевтический эффект [1,2].
Перспективными источниками эффективных и безопасных природных антимикробных, противовоспалительных и ранозаживляющих лекарственных средств являются представители семейства Яснотковых (Lamiaceae). Научный интерес представляет трава шалфея лугового (Salvia
pratensis L.), произрастающая на территории РСО-Алания.
В роду шалфеев, шалфей луговой является одним из наиболее распространённых по произрастанию на территории Республики Северная Осетия - Алания. [3,4].
Сальвия луговая (S. pratensis) с фиолетовыми или розовыми цветками, цветет в первой половине лета. Шалфей луговой или Сальвия ( Salvia pratensis) —вид рода Шалфей семейства Яснотковые - это многолетнее, травянистое растение, широко произрастающая на Северном Кавказе, а также на территории Республики Север-ная-Осетия Алания. Растение обладает несколькими отличительными признаками - это характерный пряный запах, горько-пряный вкус и губчатые соцветия. В научной медицине широко используется шалфей лекарственный, который в диком виде реже встречается в Республике Сереная Осетия - Алания. На территории республики шалфей луговой встречается на открытых лесных полянках, полях, оврагах, на открытых, солнечных местах [4,5].
Согласно литературным данным, шалфей луговой имеет небольшое количество фитанцидов и эфирных масел, в отличие от шалфея лекарственного, но тем не менее содержит богатый комплекс других биологически активных соединений. С латинского языка растение переводится, как «здоровый» [2,3]. Растение наделено огромным количеством полезных свойств.
Шалфей луговой обладает мочегонным, отхаркивающим, спазмолитическим, противовоспалительным, антибактериальным, тонизирующим, ранозаживляющим свойствами, болеутоляющим, вяжущим, эстрогенным, дезинфицирующим, гемостатическим, общеукрепляющим, кровоостанавливающим, фунгицидным, гипотоническим действиями. Высота растения составляет около 70 см.
Наряду с нуклеиновыми кислотами, углеводами и липидами, аминокислоты участвуют во всех жизненных процессах.
Аминокислоты являются необходимыми для живых организмов соединениями, участвующие в синтезе специфических тканевых белков, ферментов, сложных углеводов, гормонов, жиров и других соединений. Некоторые аминокислоты показаны в профилактике и лечении многих заболеваний.
Исходя их этого, дикорастущие лекарственные растения содержащие аминокислоты, представляют большой интерес.
На сегодняшний день физико-химические методы анализа являются наиболее точными и информативными при контроле качества лекарственных препаратов, содержащих аминокислоты. Изучение качественного и количественного состава аминокислот в траве шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания, имеет практическое значение и вызывает научный интерес [1,2,3].
Цель исследования - изучение аминокислотного состава травы шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания с использованием современных физико-химических методов анализа.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования служила надземная часть шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания, заготовленная в июле 2019 г. Траву шалфея лугового заготавливали в двух районах РСО-Алания - Алагирском (с.Зинцар), и Правобережном (с.Заманкул). Плотность зарослей травы произрастающей в с.Зинцар была выше, чем плотность зарослей, произрастающей на предгорных участках с. Заманкул. Площадь распространения зарослей была больше в с. За-манкул. Сырье сушили естественным способом в тени при температуре 250С. В связи с влажными климатическими условиями Алагирского района РСО-Алания (с.Зицар), трава шалфея лугового заготовлена в данном районе более поздний срок, чем сырье произрастающее в с. Заманкул Правобережного района РСО-Алания.
Физико-химические методы анализа, согласно литературным данным, являются наиболее экспрессными, чувствительными и информативными при анализе лекарственных растений. Для количественного определения аминокислотного состава травы шалфея лугового использовали узкоспециализированный автоматизированный жидкостный хроматограф с компьютерным управлением, оснащённым постколоночной детекторной системой - аминокислотный анализатор - ААА 400 производства ИНГОС Чехия [4,5].
Для анализа аминокислот в пенициллино-вый флакон на 20 мл вводили 0,2 г образца травы шалфея лугового (точная навеска на аналитических весах), замет доливали до верха 6 нормальной HCl, закрыли крышкой, и поместили в сушильный шкаф на 23 часа при температуре 110°С.
По окончании гидролиза, ампулы охлаждали до комнатной температуры. Затем выпаривали до суха в ротационном испарителе, далее добавляли 5 мл воды, и снова выпаривали. Данную процедуру повторяли 2 раза. К сухому остатку после выпаривания добавляли 50 мл буферным раствором (рН - 2,2). Перед тем, как ввести в ионообменную колонку фильтровали образец сырья из травы шалфея лугового согласно методикам через 0,2 мкм шприцевый фильтр [4,5]. Анализ аминокислот проводили по следующим стандартным условиям:
• использовали ступенчатый градиент
• скорость потока буферных растворов 0,3 мл/мин
• скорость потока нингидринового реактива 0,2 мл/мин
2 «ОН
С- ооооо —
я
3
« К
ä л
S-кг
i—
• детектирование в УФ областях 440 и 570 нм
• температуры термостата реактора - 121°С
Площади пиков идентифицированных аминокислот, рассчитанные прибором, использовали для количественной оценки.
Результаты исследования и их обсуждение. Расчет количественного содержания аминокислот в траве шалфея лугового.
Заданные количества стандартного и испытуемого раствора вводили в колонку аминокислотного анализатора через дозировочную петлю (100 мкл). Далее рассчитывали площади пиков испытуемого и стандартного растворов, затем по формуле проводили расчет концентрации каждой аминокислоты в процентном соотношении (рис.1).
——И ■
¡s в к- e г • i гг ££ S
Рис.1 - Аминограмма шалфея лугового (Salvia pratensis L.), произрастающего на территории РСО-Алания выданная прибором - ААА 400
Fig.l-Aminogram of meadow sage (Salvia pratensis L.) growing on the territory of RSO-Alania issued by the device-AAA 400
Результаты оценки аминокислотного состава травы шалфея лугового представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание аминокислот в траве шалфея лугового
Наименование аминокислоты Содержание в образце травы шалфея лугового, %
Аспарагиновая кислота (Asp) 1,20
Треонин (Thr) 0,59
Серин (Ser) 0,59
Глютаминова кислота (Glu) 1,51
Пролин (Pro) 0,68
Глицин (Gly) 0,69
Аланин (Ala) 0,77
к
J
Валин (Val) 0,73
Метионин (Met) 0,14
Изолейцин (Iie) 0,55
Лейцин (Leu) 1,12
Тирозин (Tyr) 0,72
Фенилаланин (Phe) 0,69
Гистидин (His) 0,31
Лизин (Lys) 0,62
Аргинин (Arg) 0,72
Сумма аминокислот, % 11,63
Сырой протеин, % 13,39
The result of evaluating the amino acid composition of sage grass is presented in table 1.
Table 1
Content of amino acids in sage grass
The content of amino acids in a sample of sage grass was named, %
Name of the amino acid The contents in the grass of the meadow sage, %
Aspartic acid (ASP) 1.20
Threonine (Th) 0.59
Serine (Ser) 0.59
Glutamic acid (Glu) 1.51
Proline (Pro) 0.68
Glycine (Gly) 0.69
Alanine (Ala) 0.77
Valine (Val) 0.73
Methionine (Met) 0.14
Isoleucine (III) 0.55
Leucine (Leu) 1.12
Tyrosine (Tyr) 0.72
Phenylalanine (Phe) 0.69
Histidine (His) 0.31
Lysine (Lys) Of 0.62
Arginine (Arg) 0.72
Sum of amino acids, % 11.63
Crude protein, % 13.39
Данные, представленные в таблице, свидетельствуют о содержании аминокислот в траве шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания. При определении качественного состава и количественного содержания в траве выявлено 16 аминокислот, 9 из которых незаменимые. Незаменимые аминокислоты представлены в траве шалфея луговго следующими видами: валин, треонин, метионин, изолейцин, лейцин, фенилаланин, гистидин, лизин и аргинин.
Среди идентифицированных аминокислот установлено наличие гетероциклических и ароматических аминокислот. Также определены алифатические аминокислоты, которые представлены 8 моноаминокарбоновыми кислотами (аланин, валин, лейцин, глицин). В сырье преобладает
глютаминовая кислота, аспарагиновая кислота и аргинин. Наибольшее количество составила глю-таминовая кислота (1,51%) . Глютаминовая кислота дает хороший эффект при некоторых заболеваниях нервной системы: олигофрении, психозов, реактивных состояний, неврозов, эпилепсии. Она также является глюкагенной аминокислотой. Ее введение ликвидирует гипогликемическое состояние, вызванное инсулином. Гистидин часто применяют у лиц с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (гепатитами, язвенной болезнью желудка), так как он несколько повышает секрето-ную и моторную функцию желудочно-кишечного тракта. У больных атеросклерозом гистидин улучшает показатели липидного обмена.
Выводы. Определено содержание суммы аминокислот в траве шалфея лугового,
произрастающего на территории РСО-Алания. Полученные результаты свидетельствуют о том, что трава шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания, является богатым источником аминокислот, которые играют важную роль в организме человека.
В результате исследования определено наличие 16 аминокислот, из которых 9 являются
незаменимыми. Полученные результаты показывают о перспективе дальнейшего изучения травы шалфея лугового, произрастающего на территории РСО-Алания с целью расширения сырьевой базы лекарственных растений, а также полученные данные могут быть использованы при разработке методик качества лекарственных средств, полученных из этого вида сырья.
Ответственная за переписку: Сидакова Тамара Маирбековна - кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармации ФГБОУВО «Северо-Осетин-ский государственный университет имени Коста Левановича Хетагурова»
г.Владикавказ, e-mail:toma-t-84@mail. ru
Corresponding Author: Tamara Mairbekovna Sidakova-candidate of pharmaceutical Sciences, associate Professor of the Department ofpharmacy, North Ossetian state University named after Kosta Levanovich Khetagurov, Vladikavkaz, e-mail:toma-t-
84@mail.ru
