CC BY
17
Литература
1. Дюйзен И.В., Калиниченко С.Г., Охотин В.Е., Мо-тавкин П.А.// Морфология. — 1998. — Т. 113, вып. 1. — С. 47-51.
2. Нейроонтогенез: Серия «Проблемы биологии развития» — М.: Наука, 1985.
3. Охотин В.Е., Калиниченко С.Г.// Морфология. — 2002. — Т. 121, вып. 1. — С. 7-26.
4. AngL.C., ShulD.D.//Brain Res. — 1995. — Vol. 674. — P. 329-335.
5. Judas M., Sestan N, Kostovic I.//Microsc. Res. Tech. — 1999. — Vol. 45. — P. 401-419.
6. Kostovic I., Rakic P.// J. Neurocytol. — 1980. — Vol. 9. — P. 219-242.
7.Marin-Padilla M.//Cerebral cortex. — Vol.7: Development and maturation of cerebral cortex. — New York: Plenum Press, 1988. — P. 1-34.
8. Mizukawa K., VincentS.R., McGeerP.L., McGeerE.G.// Brain Res. — 1988. — Vol. 461. — P. 274-281.
9. Prast H, Athineos P.//Progr. Neurobiol. — 2001. — Vol. 64, No. 1. — P. 51-68.
10. Valverde F., Facal-Valverde M.V.//J. Comp. Neurol. — 1988. — Vol. 269. — P. 168-192.
11. Vincent S.R., Kimura H.// Neuroscience. — 1992. — Vol. 46. — P. 755-784.
Поступила в редакцию 11.05.04.
CO-LOCALIZATION OF SEROTONIN AND NITROOXIDESYNTHASE IN NEURONS OF SUBCORTICAL WHITE SUBSTANCE OF HUMAN BRAIN S.V. Khrulev, I.V. Duizen Vladivostok State Medical University
Summary — Localization of neuronal nitrooxidesynthase, serotonin and NADPH-diaphorase has been examined in cerebral cortex of fetuses (26-28 weeks), newborns and adults. In the subcortical white substance, as is shown, there is a nitroxydergic neuron population, a number and activity of which are unequal at different stages of neuroontogenesis. In an antenatal period a part of the nitroxydergic neurons synthesizes the serotonin and forms the neurovascular bonds.
Pacific Medical Journal, 2004, No. 2, p. 23-26.
УДК 611.89:611.843.1]:618.29 Н.Ю. Матвеева, Н.Е. Романова
ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ РАЗЛИЧИЯ ГАНГЛИОНАРНОГО СЛОЯ СЕТЧАТКИ ГЛАЗА ПЛОДОВ ЧЕЛОВЕКА
Владивостокский государственный медицинский университет
Ключевые слова: сетчатка, ганглионарные клетки.
В процессе развития нервной системы образуется избыточное количество нейронов. Сокращение их числа происходит за счет апоптоза — запрограммированной гибели клеток [3, 10, 14]. В разных областях мозга физиологической гибели подвержены от 15 до 85% нейронов исходной популяции [5, 7]. Что касается сетчатки глаза человека, то соответствующие данные здесь отсутствуют. На сегодняшний день имеется незначительное число работ, посвященных морфологическому исследованию сетчатки глаза человека [1, 6, 9, 11]. Данные о структуре сетчатки и ее развитии получены в основном на животных [4, 8, 12, 13].
Цель нашего исследования заключалась в том, чтобы путем морфометрического анализа установить число клеток в ганглионарном слое сетчатки у плодов различных сроков развития и на основе полученных данных показать наличие или отсутствие физиологической гибели клеток.
В работе использовался материал, полученный при медицинских абортах. Исследовано 5 глаз, взятых на 10-12-й, и 5 глаз, взятых на 25-28-й неделях внутриутробного развития. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине 2-3 недели. Время
фиксации определялось размерами глаза. Исследования проводились на серийных парафиновых срезах толщиной 5 мкм, окрашенных гематоксилином и эозином и толуидиновым синим по Нисслю. В качестве специфической пробы на ДНК использовали метод Фельгена и Россенбекка. Морфометрический анализ изображения проводили с использованием компьютерной программы Adobe PhotoShop 5.0. Ввод изображения осуществляли через телевизионную систему на базе микроскопа Vickers М 85. Математическая обработка данных осуществлялась с использованием пакета статистических программ BIOSTAT.
У плодов до 12 недель при окраске гематоксилином и эозином ядра клеток были четко дифференцированы, округлые, располагались густо, содержали плотно упакованный хроматин. В некоторых ядрах определялось базофильное ядрышко. Среди массы большинства «нормальных» встречались ядра с нарушением структуры и локализации хроматина. Из них можно выделить четыре основных типа:
1. Грубые глыбки хроматина интенсивно окрашены, локализованы по полюсам ядра; центральная часть ядра просветлена;
2. Ядро набухшее, просветлено и увеличено в размере. Хроматин мелко диспергирован, рассредоточен по ядру, слабо воспринимает основные красители. По сравнению с ядрами, которые были приняты за норму, содержание хроматина резко снижено;
3. Ядро увеличено в размерах, хорошо контурируется ядерная оболочка, редкие пылевидные зерна хроматина находятся у ее края. Большая часть ядра выглядит оптически пустой;
4. Ядро точечных размеров, пикнотичное, интенсивно синее, с плотно упакованным хроматином.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
27
Ширина ганглионарного слоя в разных местах сетчатки колебалась от 225,46 до 767,67 мкм; в среднем — 397,12±9,6 мкм (рис. 1, а). При реакции на ДНК ядра с четкими границами и различной плотностью хроматина встречались реже, чем на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином. В одних ядрах глыбчатый хроматин лежал на полюсах, в других был распределен более или менее равномерно по кариоплазме. Встречались ядра, где хроматин занимал часть ядра и располагался в виде полулуний. Ширина ганглионарного слоя по сравнению с препаратами, окрашенными гематоксилином и эозином, значительно уменьшалась и колебалась от 79,69 до 349,36 мкм и в среднем составляла 199,44±6,1 мкм (рис. 1, б).
Разница в ширине ганглионарного слоя, окрашенного гематоксилином и эозином и при реакции на ДНК — 197,68 мкм, что составляло 49,7%. Прямой подсчет концентрации клеточных элементов на 1 мм2 показал, что при окраске гематоксилином и эозином на данной площади было 472±12 клеток, а при реакции Фельгена-Россенбекка — 312±9. Разница составила 160 клеток, т.е. в 33,8% клеток ДНК не выявлялось.
У плодов 25-28 недель при окраске гематоксилином и эозином выявлялись наружный и внутренний ядерные слои и слой, соответствующий ганглионар-ному. В нем были видны клетки с округлыми и овальными ядрами различной величины и с разной плотностью хроматина. По сравнению с предыдущим сроком количество их уменьшалось, т.е. ганглионар-ный слой был сильно прорежен. В клетках здесь иногда встречались довольно крупные круглые ядра с низкой плотностью хроматина. Изредка регистрировались ядра с незначительным содержанием мелкодисперсного хроматина. Ширина ганглионарного слоя колебалась от 150,40 до 386,59 мкм, в среднем 244,83±5,8 мкм (рис. 1, в).
При окраске по методу Фельгена-Россенбекка ДНК-позитивные структуры располагались вдоль ядерной мембраны в виде кольца или полукольца. В некоторых клетках конденсированный хроматин занимал всю площадь ядра. Ширина ганглионарного слоя здесь колебалась от 65,49 до 272,4 мкм и в среднем составляла 127,9±4,98 мкм (рис. 1, г). Различия в площади, занимаемой клетками при окраске гематоксилином и эозином и по Фельгену-Россенбекку, составляет 47,7%, что косвенно указывало на потерю клеток в ганглионарном слое. Концентрация клеток на 1 мм2 при окраске гематоксилином и эозином была 316±11, а при реакции на ДНК — 192±8. Разница в содержании составила 124 клетки или 39,2%.
Независимо от метода окраски содержание ядер в ганглионарном слое у плодов 25-28 недель было значительно меньше по сравнению с 10-12-неде-льными плодами. Это свидетельствовало о том, что в процессе развития ганглионарный слой сетчатки
. 4
Рис. 1. Сетчатка глаза человека в онтогенезе. а, б — 12 недель, в,г — 25 недель; а, в — окраска гематоксилином и эозином, в, г — окраска по Фельгену-Россенбекку, х280.
теряет определенное количество клеток. Однако изменение концентрации возможно не только путем онтогенетической гибели клеток, но и за счет увеличения размеров глаза. Поскольку у плодов 10-12 и 25-28 недель имеются существенные различия между числом клеток, окрашенных гематоксилином и эозином и по Фельгену-Россенбекку, при наличии явно измененных ядер можно сделать вывод о гибели клеток в онтогенезе. Для решения вопроса о механизмах гибели нейронов глаза (апоптоз или некроз) [2, 5, 7, 15] требуются дополнительные исследования.
Литература
1. Белушина Н.Н., Хасан Хамад Али, Северин С.Е.// Вопросы биол. мед. и фарм. химиии. - 1998. - № 4. -С. 15-23.
2. Волянский Ю.Л., Колотова Т.Ю., Васильев Н.В.// Успехи современной биологии. - 1994. - Т. 114, вып. 6. - С. 679-692.
3.Демин С.Ю // Цитология. - 1999. - № 1. - С. 66-86.
4.Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). - М.: Медицина, 2001.
5. Мотавкин П.А. Введение в нейробиологию. - Владивосток: Медицина ДВ, 2003.
6. Новиков В.С. Программированная клеточная гибель. - СПб.: Наука, 1996.
УДК 616.711-001-089.84 Е.П. Костив
ПУТИ ОПТИМИЗАЦИИ ОРТОПЕДИЧЕСКОЙ ПОМОЩИ ПАЦИЕНТАМ С ПОВРЕЖДЕНИЯМИ ГРУДНОГО И ПОЯСНИЧНОГО ОТДЕЛОВ ПОЗВОНОЧНИКА
Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток)
Ключевые слова: позвоночник, транспедикулярный остеосинтез, реконструкция.
Проблема лечения позвоночной спинно-мозго-вой травмы становится все более актуальной вследствие огромного социального и медицинского значения этого тяжелого недуга. Зачастую фатальна и драматична травма позвоночника и спинного мозга. Полная утрата работоспособности, многоэтапное лечение, нарушение социальных и бытовых стереотипов в дальнейшем дезориентируют весь социум вокруг такого больного, нанося невосполнимый урон обществу. При этом следует учесть, что основную часть пострадавших составляют лица наиболее трудоспособного возраста [3].
В большей степени травме подвергаются грудной и поясничный отделы позвоночника. К.И. Шапиро и др. [7] установили, что перелом позвоночника
7. Пальцев М.А.// Вестник РАМН. - 2002. - Т. 72, № 1. - С. 13-21.
8. Рева Г.В. Развивающийся глаз. - Владивосток, 1998.
9. ЦыпленковаВ.Г.//Арх. пат. -1996. - № 5. -С. 71-74.
10. Чанчиков Г.Ф.// Офтальм. журн. - 1990. - № 1. -С. 49-51.
11. Ярилин А.А.//Пат. физиол. -1998. - № 2. - С. 38-48.
12. Fessus L.D.// Europ. J. Cell Biol. - 1991. - Vol. 56. -P. 170-171.
13. Eversole-Cirel P., Chen J., Simon M.//Invest. Ophthalm. and Visual Science. - 2002 - Vol. 43. - P. 1636-1644.
14. Fan G, Steer C.J.// Apoptosis. - 1999. - Vol. 4, No. 1. - P. 21-29.
15. Michele C., Provis J.// Compar. Neurol. - 1999. -Vol. 413, № 2. - P. 198-208.
Поступила в редакцию 15.05.04.
ONTOGENETIC DIFFERENCES OF GANGLIONARY LAYER OF RETINA OF HUMAN FETUSES N.Yu. Matveeva, N.E. Romanova Vladivostok State Medical University
Summary — The authors studied the eye retina of the human fetuses at 10-12 and 25-28 weeks of antenatal development. Having applied histochemical and morphometric methods of examination, they showed the decrease of cells in range of more than by 30%. Furthermore, a role of necrosis and apoptosis in rearrangement of the eye tissues in ontogenesis is considered as well.
Pacific Medical Journal, 2004, No. 2, p. 26-28.
с повреждением спинного мозга приводит к инвалидности в 20,6% случаев из общего числа больных с травмой опорно-двигательной системы, притом инвалидами 1-2 групп становятся 86,9% пострадавших, 88,5% больных остаются инвалидами в течение 3 и более лет, 36,1% пациентов госпитализируются однократно, 34,4% — дважды, 21,3% — трижды, 3,3% — четырежды, 4,9% — пять раз и более.
В процессе выполнения работы было проанализировано 146 пациентов с переломом грудного и поясничного отделов позвоночника (97 мужчин и 49 женщин). Средний возраст составил 33,4 года.
Чаще страдали лица в возрасте от 20 до 45 лет, то есть наиболее трудоспособная часть населения, что соответствует данным литературы [2, 3]. Наибольшую долю составил бытовой и транспортный травматизм, причем самой распространенной причиной травм позвоночника было падение с высоты — 36,1%. Наиболее часто получали травму рабочие (30,2%) и служащие (22,8%).
При травматических повреждениях в первую очередь страдает грудопоясничный переход и верхняя часть поясничного отдела позвоночника, дистрофические же поражения чаще локализовались в нижней части поясничного и пояснично-крестцо-вого отделов [3].
В структуре травматических поражений позвоночника переломы согласно классификации F. Denis подразделялись на «малые» (30,8%) и «большие» (69,2%)
