CC BY
13
УДК [616-005.1-08:331.1]:615.22
Ключевые слова: фаза молозивного питания, фаза молочного питания, фаза молочно-растительного питания, противосвертывающая система крови, фибринолиз, телята, перекисное окисление липидов
Key words: phase of a colostrum feed, phase of a dairy feed, phase of a dairy-vegetative feed, anticoagulative system of blood, fibrinolysis, calves, lipid peroxidation
Завалишина С. Ю.
ОНТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИНАМИКА ПРОТИВОСВЕРТЫВАНИЯ И ФИБРИНОЛИЗА У ТЕЛЯТ ПРИ СМЕНЕ СПОСОБОВ ПИТАНИЯ
ontogenetic dynamics of anticoagulation and fibrinolysis at calves
when the method of feeding is being changed
Курский институт социального образования (филиал) РГСУ Адрес: 305029, г. Курск, ул. Карла Маркса, 53
Kursk Institute of Social Education (branch of) Russian State Social University Address: 305029, Kursk, Karla Marksa street, 53
Завалишина Светлана Юрьевна, к.б.н., ст. преподаватель каф. медико-биологических дисциплин,
адаптивной физической культуры и спорта
Zavalishina Svetlana Y., Ph.D. in Biology Science, Senior Teacher of the Dept. of Medical and Biologic Disciplines, Adaptive Physical Training and Sports
Аннотация. У здоровых телят в раннем онтогенезе имеет место нарастание функциональной активности про-тивосвертывания и фибринолиза. Это ведет к поддержанию на оптимальном уровне жидкостных свойств крови, ее реологических свойств, обеспечивая необходимый уровень доставки кислорода к тканям. Онтогенетическая динамика систем противосвертывания и фибринолиза крови при переходе с одного вида питания на другой позволяет теленку адаптироваться к существующим условиям существования на ранних этапах развития. Summary. The increase offunctional activity of anticoagulation and fibrinolysis takes place at healthy calves in early ontogenesis. It conducts to maintenance of liquid properties of blood, its rheological properties at the optimum level, providing the necessary level of oxygen delivery to fabrics. Ontogenetic dynamics of blood anticoagulative system and fibrinolysis when the method of feeding is being changed allows calves to adapt to existence conditions at the early stages of development.
Введение
Закономерное онтогенетическое изменение активности противосвертывающей и фибринолитической систем плазмы крови на начальных этапах индивидуального развития телят является одним из важнейших физиологических элементов обеспечения гомеостаза в постнатальном периоде. Необходимый уровень функциональной активности противосвертывающей и фибрино-литической систем во многом обеспечивает адаптацию к внешней среде всех систем организма, контролируя жидкостные свойства крови, поддерживая уровень ее текучести по сосудам, способствуя оптимальному развертыванию генетической программы развития теленка. При этом онтогенетическая динамика активности противосвертывающей и фи-бринолитической систем у здоровых телят при закономерной смене питания в течение раннего онтогенеза изучена недостаточно.
В этой связи сформулирована цель исследования: оценить онтогенетическую динамику физиологического состояния противо-свертывающей и фибринолитической систем плазмы крови у здоровых телят в фазу ново-рожденности, молочного и молочно-расти-тельного питания.
Материалы и методы
В исследование включены 29 физиологически зрелых, здоровых новорожденных телят на 1-2 сутки жизни, 32 здоровых теленка молочного питания на 11-е сутки жизни, 36 здоровых телят молочно-растительного питания, взятые на 31-е сутки жизни, чернопестрой и сементальской породы с нормальными показателями лабораторных и инструментальных исследований и в последующем не имевших отклонений в состоянии здоровья. Комплекс обследований состоял из определения активности перекис-
ного окисления липидов плазмы (ПОЛ) по содержанию ацилгидроперекисей (АГП) [3] и ТБК-активных продуктов набором фирмы ООО «Агат-Мед» с оценкой антиокислительной активности (АОА) жидкой части крови [2]. У каждого взятого под наблюдение теленка оценивалась активность противо-свертывающей системы плазмы крови путем определения активности антитромбина III (АТ III) и протеина С в плазме [1].
Для выяснения активности фибриноли-тической способности плазмы крови у телят использован метод определения времени спонтанного эуглобулинового лизиса, уровня плазминогена, а2-антиплазмина и содержания продуктов деградации фибрина фе-нантролиновым методом [1].
Включенные в исследование телята осматривались и обследовались за фазу мо-лозивного питания: на 1-2, 3-4, 5-6, 7-8 и 9-10 сутки. Наблюдаемые телята молочного питания обследовались: на 11, 15, 20, 25 и 30 сутки жизни. Учитываемые показатели у здоровых телят молочно-растительного питания определялись: на 31, 45, 60, 75 и 90 сутки жизни.
Статистическая обработка полученных результатов проведена с использованием ^критерия Стьюдента [4].
Результаты исследования
В течение фазы новорожденности у здоровых телят обнаружено постоянство активности ПОЛ плазмы (табл. 1). При этом концентрация ТБК-активных продуктов и уровень АГП в плазме их крови не испытывали достоверной динамики в течение всей фазы ново-рожденности. Стабильность ПОЛ обеспечивалась постоянством у телят в течение фазы молозивного питания уровня антиоксидант-ной защиты организма - антиокислительный потенциал плазмы у них в среднем составлял за новорожденность 33,7±0,14 %. На протяжении фазы молочного питания у здоровых телят отмечалась стабильность уровня АОА плазмы (в среднем 32,6±0,21 %) и активности пероксидации липидов крови. Так, уровень первичных продуктов ПОЛ-АГП составлял с среднем 1,48±0,02 Д233/1мл при невысоком содержании вторичных продуктов сво-
боднорадикального окисления липидов -ТБК-активных соединений (в среднем 3,29± 0,02 мкмоль/л), достоверно не отличаясь от исследования к исследованию в течение всей фазы молочного питания. В фазу молочно-растительного питания у здоровых телят к 45 суткам жизни регистрировалось ослабление уровня АОА плазмы до 27,4±0,15 % с последующим его повышением до 33,9± 0,24 % к 90 суткам жизни. Это обусловило выявленную динамику уровня первичных продуктов ПОЛ-АГП: к 45 суткам был отмечен его пик (1,80±0,14 Д233/1мл) при последующем понижении (1,41±0,11 Д233/1мл) до значений ниже, чем в начале фазы. Это сопровождалось аналогичной динамикой содержания вторичных продуктов сво-боднорадикального окисления липидов -ТБК-активных соединений (на 45 сутки 3,77±0,16, на 90 сутки 3,45±0,19 мкмоль/л), возвращаясь к значениям, характерным для ТБК-продуктов в начале фазы молочно-рас-тительного питания.
Таким образом, у здоровых новорожденных телят отмечается стабильность анти-оксидантного потенциала, что обеспечивает постоянство уровня ПОЛ в жидкой части крови, способствуя поддержанию у них го-меостаза, стабилизируя структуры сосудов, наружные мембраны форменных элементов крови, обеспечивая оптимальный уровень функционирования белков плазмы крови, в том числе участвующих в свертывании и фибринолизе.
В крови здоровых новорожденных телят установлена легкая тенденция к повышению уровня антитромбина III, составляющего в среднем 99,3±0,16 %. В то же время уровень протеина С достоверно нарастал у телят в течение первых 10 суток жизни с 50,1±0,24 до 75,2±0,16 % (табл. 2).
На протяжении фазы новорожденности у здоровых телят отмечена небольшая тенденция уровня плазминогена к повышению с достоверным снижением ингибитора его активной формы - а2-антиплазмина на 27,5 %, что обеспечивало тенденцию к замедлению времени спонтанного эуглобулинового лизиса, уровень продуктов деградации фибрина в течение фазы молозивного питания имел
Таблица 1.
Динамика показателей ПОЛ плазмы крови у здоровых телят при смене способов питания
Параметры Фаза новорожденное!!!, п=29, М±т Фаза молочного питания, п=32, М±т Фаза молочно-растительного питания, п=36, М±т
1—2 сут. жизни 3—4 сут. жизни 5-6 сут. жизни 7-8 сут. жизни 9-10 сут. жизни 11 сут. жизни 15 сут. жизни 20 сут. жизни 25 сут. жизни 30 сут. жизни 31 су т. жизни 45 сут. жизни 60 сут. жизни 75 сут. жизни 90 сут. жизни
АГП плазмы, Д^/1 МЛ 1,49±0,10 1,43±0,16 1,46±0,05 1,42±0,09 1,44±0,12 1,46±0,07 1,51±0,19 1,52±0,14 1,51±0,18 1,53±0,20 1,54±0,08 1,80±0,14, р < 0,01 1,66±0,12, р < 0,01 1,42±0,15, р < 0,01 1,41±0,11
ТБК-продукты, мкмоль/л 3,49±0,11 3,40±0,17 3,49±0,14 3,45±0,08 3,47±0,11 3,51±0,14 3,56±0,19 3,50±0,22 3,52±0,14 3,55±0,16 3,59±0,22 3,77±0,16, р < 0,01 3,67±0,14, р < 0,01 3,51±0,23, р < 0,01 3,45±0,19
Антиоксидант-ный потенциал плазмы, % 34,2±0,16 33,4±0,12 33,6±0,16 33,8±0,20 33,5±0,09 32,8±0,23 32,6±0,24 32,2±0,15 32,6±0,17 32,8±0,15 29,3±0,17 27,4±0,15, р < 0,05 30,6±0,14, р < 0,01 32,8±0,12, р < 0,01 33,9±0,24
Условные обозначения: р - достоверность динамики показателей от исследования к исследованию. В последующей таблице обозначения сходные. Таблица 2. Динамика антикоагуляционной и фибринолитической активности крови у здоровых телят при смене способов питания
Параметры Фаза новорожденное™, п=29, М±т Фаза молочного пнтання, п=32, М±т Фаза молочно-растительного пнтання, п=36, М±т
1—2 сут. жнзнн 3 4 сут. жнзнн 5-6 сут. жнзнн 7-8 сут. жнзнн 9-10 сут. жнзнн 11 сут. жнзнн 15 сут. жнзнн 20 сут. жнзнн 25 сут. жнзнн 30 сут. жнзнн 31 сут. жнзнн 45 сут. жнзнн 60 сут. жнзнн 75 сут. жнзнн 90 сут. жнзнн
Активность АТ-Ш в плазме, % 96,2±0,11 98,9±0,22 99,6±0,16 99,9±0,15 102,1±0,19 101,7±0,07 103,6±0,14, р < 0,05 105,4±0,12, р < 0,05 106,9±0,10, р < 0,05 108,2±0,16, р < 0,05 109,1 ±0,04 122,7±0,20, р < 0,01 114,6±0,06, р < 0,01 116,8±0,08, р < 0,05 119,9±0,10, р < 0,05
Протеин С, % 50,1±0,24 58,7±0,28, р < 0,01 66,3±0,22, р < 0,01 71,3±0,21, р < 0,01 75,2±0,16, р < 0,01 76,0±0,10 78,2±0,76, р < 0,05 79,4±0,04, р < 0,05 81,6±0,06, р < 0,05 83,5±0,08, р < 0,05 84,0±0,12 98,0±0,10, р < 0,01 87,3±0,16, р < 0,01 89,5±0,04, р < 0,05 93,6±0,03, р < 0,05
Время спонтанного эу-глобулинового лизиса, мин. 186,3±0,52 183,6±0,38 181,6±0,49 179,6±0,46 178,9±0,42 178,2±0,34 175,4±0,15, р < 0,05 173,0±0,22, р < 0,05 172,0±0,18 170,3±0,15, р < 0,05 170,0±0,26 152,3±0,10, р < 0,01 167,7±0,14, р < 0,01 165,0±0,13, р < 0,05 162,1±0,09, р < 0,05
Плазминоген, % 115,2±0,17 116,2±0,36 116,3±0,34 118,3±0,24 120,1±0,45 122,0±0,05 123,8±0,08, р < 0,05 124,6±0,06, р < 0,05 126,0±0,05, р < 0,05 128,6±0,10, р < 0,05 128,9±0,02 138,8±0,07, р < 0,01 130,2±0,09, р < 0,01 132,6±0,08, р < 0,05 134,5±0,08, р < 0,05
V антиплазмин, % 130,4±0,32 117,4±0,30, р < 0,01 112,1±0,20, р < 0,05 109,0±0,36, р < 0,05 102,3±0,28, р < 0,05 101,3=Ь0,19 100,0±0,14 98,7±0,06, р < 0,05 97,3±0,05, р < 0,05 96,4±0,09, р < 0,05 96,1±0,15 80,4±0,17, р < 0,01 93,6±0,05, р < 0,01 90,4±0,08, р < 0,05 89,0±0,03, р < 0,05
Продукты деградации фибрина, мкг/мл 33,9±0,21 36,3±0,17 38,5±0,18 38,6±0,29 39,5±0,34 40,2±0,25 41,3±0,19 41,9±0,20 42,2±0,09 42,8±0,16 42,9±0,16 55,8±0,25, р < 0,01 44,8±0,29, р < 0,01 43,1±0,18 44,0±0,12
тенденцию к нарастанию и являлся маркером оптимальной адаптации организма к внешней среде за счет поддержания активности фибринолиза на необходимом уровне.
В крови здоровых телят молочного питания установлено небольшое, но достоверное повышение уровня антитромбина III, составляющего в среднем 105,2±0,13 %. Одновременно с этим отмечалось достоверное нарастание в течение фазы молочного питания уровня протеина С у телят между 11 и 30 сутками жизни с 76,0±0,10 до 83,5±0,08 %. В течение фазы молочного питания у здоровых телят отмечено достоверное повышение уровня плазминогена при достоверном снижении ингибитора его активной формы -а2-антиплазмина на 5,1 %. Это обеспечивало небольшое, но неуклонное замедление времени спонтанного эуглобулинового лизиса при постоянстве уровня продуктов деградации фибрина в течение фазы молочного питания.
У обследованных здоровых телят молоч-но-растительного питания установлено достоверное повышение в крови уровня антитромбина III к 45 суткам жизни до 122,7± 0,20 %. Одновременно с этим отмечался пик активности уровня протеина С - 98,0± 0,08 %. К 60 суткам жизни активность антикоагулянтов снижалась, испытывая в последующем небольшое достоверное нарастание.
На протяжении фазы молочно-раститель-ного питания у здоровых телят отмечена аналогичная динамика уровня плазминогена при выраженном снижении ингибитора его активной формы - а2-антиплазмина на 5,1 % к 45 суткам жизни с последующим их восстановлением и плавной динамикой их активности. Это обеспечивало резкое ускорение в первые 45 суток жизни с последующим возвращением к значениям, близким к исходным, и пик в этом возрасте, а в последующем - постоянный уровень продуктов деградации фибрина в течение фазы молоч-но-растительного питания.
Таким образом, в ходе смены способов питания в раннем онтогенезе у телят отмечается закономерная динамика, связанная с постепенным достоверным повышением в плазме уровня АТ III плазми-
ногена, активности протеина С и снижении а2-антиплазмина со скачком их активности к 45 суткам с последующим восстановлением на уровне, близком к значениям в начале фазы молочно-растительного питания, что, несомненно, является важным элементом адаптации животных к новым условиям питания, способствуя переходу их гемостаза на уровень, требующийся для дальнейшего роста и развития организма.
Обсуждение
В исследовании установлено, что в течение фазы новорожденности у здоровых телят активность антиоксидантного потенциала плазмы и уровни первичных продуктов ПОЛ-АГП и вторичных - ТБК-активных соединений стабильны, что, видимо, необходимо у данного вида продуктивных животных для становления антистрессорных механизмов его гомеостаза на данном этапе развития. Невысокий уровень ПОЛ плазмы обуславливает слабую альтерацию эндотели-оцитов и компонентов жидкой части крови, способствуя слабой стимуляции плазменного гемостаза.
Весьма значимыми в антикоагуляцион-ном потенциале у здоровых новорожденных телят являются активность АТ III, плазмино-гена и протеина С, обеспечивающие равновесие антикоагулянтов и прокоагулянтов. Подтверждением этого может служить отсутствие у здорового новорожденного признаков тромбозов и геморрагий, во многом благодаря активному фибринолизу и достаточно высокой активности противосвертыва-ния, которые позволяют организму теленка адекватно реагировать на неблагоприятные факторы внешней среды, имеющие, как правило, прокоагулянтное действие на гемостаз.
У телят в фазу молочного питания отмечено отсутствие достоверных колебаний уровня ПОЛ и антиоксидантной защиты плазмы крови при определенной динамике активности противосвертывания и фибринолиза, что, несомненно, позволяет адаптироваться организму теленка к условиям внеутробно-го существования, обеспечивая нормальное реологическое состояние крови и тем самым адекватный приток питательных веществ
и кислорода к развивающимся тканям организма животного. Это является важным элементом защиты телят против возможных неблагоприятных факторов внешней среды, влияющих на их организм в фазу молочного питания. В течение фазы молочного питания достоверно меняется активность ингибиторов коагуляции и уровень фибринолитиков: возрастает АТ-Ш, протеин С и плазминоген и понижается активность ингибитора фи-бринолиза - а2-антиплазмина. Очевидно, это является физиологической реакцией приспособления организма, нуждающегося по завершению фазы новорожденности в повышении активности фибринолиза. Ввиду того что общий ингибитор контактной активации плазменных протеаз плазминоген постепенно нарастает при сохранении в крови уровня продуктов деградации фибрина, можно думать об оптимальности функционирования механизмов адаптации гемостаза в данных условиях без признаков гипокоагуляционной направленности гемостаза в эти сроки, обеспечивая оптимальные условия микроциркуляции при гемодинамической адаптации в фазу молочного питания.
Достоверное усиление уровня ПОЛ с ослаблением антиоксидантной защиты плазмы крови в начале фазы молочно-растительного питания при выраженном повышении активности противосвертывания и фибринолиза позволяет адаптироваться организму теленка к новым условиям питания, обеспечивая нормальное реологическое состояние крови и тем самым адекватный приток питательных веществ и кислорода к растущим тканям организма животного. Несомненно, это является важным элементом реакции организма телят при начале питания растительными кормами, что можно рассматривать как сильный раздражитель внешней среды, влияющий на их организм в начале фазы молочно-растительного питания и к которому быстро развивается адаптация у теленка, что, видимо, эволюционно выработано. Динамика системы противосвертывания, контролирующей агрегатное состояние крови и системы фибринолиза, растворяющей излишки фибрина, во многом обеспечивается динамикой ПОЛ, обеспечивая их адекватную готовность
к реагированию на факторы внешней среды. Так, в течение фазы молочно-растительного питания достоверно меняется активность ингибиторов коагуляции и уровень фибрино-литиков: возрастает АТ-Ш, протеин С и плаз-миноген и понижается активность ингибитора фибринолиза - а2-антиплазмина с резким скачком к 45 суткам и последующим плавным изменением. Очевидно, это является физиологической реакцией приспособления организма при переходе на растительное питание при повышении активности противо-свертывания и фибринолиза. Ввиду того, что небольшое нарастание общего ингибитора контактной активации плазменных протеаз плазминогена к концу фазы сопровождается сохранением стабильного уровня в крови продуктов деградации фибрина, можно думать о стабильной адаптации в эти сроки функционирования механизмов адаптации гемостаза в данных условиях без признаков гипокоагуляционной направленности гемостаза, обеспечивая оптимальные условия микроциркуляции при гемодинамической адаптации при окончании питания теленка молоком.
Таким образом, у телят при смене питания отмечается достоверное повышение активности противосвертывания и фибринолиза, что, вероятно, является элементом общего адаптационного процесса организма на протяжении раннего онтогенеза.
Заключение
Сочетание динамики активности проти-восвертывания и фибринолиза обеспечивает на протяжении раннего онтогенеза необходимый уровень жидкостных свойств крови и оптимальную степень перфузии внутренних органов, что в значительной степени способствует протеканию метаболизма в тканях теленка, способствуя его дальнейшему росту и развитию, являясь необходимым элементом окончательного функционального созревания организма в условиях подготовки к потреблению только растительной пищи.
Список литературы
1. Баркаган, З. С. Основы диагностики нарушений гемостаза / З. С. Баркаган, А. П. Момот. - М. : Ньюдиамед-АО, 1999. - 218 с.
2. Волчегорский, И. А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И. А. Волчегорский, И. И. Долгушин, О. Л. Колесников, В. Э. Цейликман. - Челябинск, 2000. - 167 с.
3. Гаврилов, В. Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липи-
дов в плазме крови / В. Б. Гаврилов, М. И. Миш-корудная // Лабораторное дело. - 1983. - № 3. -С. 33-36.
4. Углова, М. В. Применение методов морфоме-трии и статического анализа в морфологических исследованиях / М. В. Углова, Б. А. Углов, В. В. Архипов и др. - Куйбышев, 1982. - 46 с.
j
НОУ ДО «Институт Ветеринарной Биологии» выпускает в свет книгу УЗИ В ВЕТЕРИНАРИИ. ДИФФЕРЕНЦИАЛьНАЯ ДИАГНОСТИКА
болезней мелких домашних животных.
ПРАКТИЧЕСКОЕ РУКОВОДСТВО С ГРАФИЧЕСКИМИ СХЕМАМИ И СОНОГРАММАМИ
Автор Бушарова Е. В. (под ред. канд. биол. наук Чуваева И. В.)
Бушарова Е. В.
УЗИ В ВЕТЕРИНАРИИ
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНЕЙ МЕЛКИХ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ
Практическое руководство с графическими схемами и сонограммами
В книге представлены различные методические подходы к проведению ультразвуковой диагностики заболеваний собак и кошек. Доступным языком изложены основы физики ультразвука, систематизирована терминология. Даны характеристики нормы и патологии внутренних органов, акцентировано внимание на дифференциальной диагностике заболеваний, диагностируемых с помощью ультразвукового исследования, проведен подробный анализ и классификация артефактов и помех, возникающих при проведении ультразвукового сканирования.
Иллюстрационный материал, представленный в книге, получен в результате многолетней работы автора и коллектива Института Ветеринарной Биологии в области ультразвуковой диагностики болезней мелких домашних животных. Оригинальные сонограммы получены с помощью сканеров УЗИ «Раскан» ООО «НПП «РАТЕКС».
Для облегчения восприятия теоретический и практический материал (сонограммы) иллюстрированы оригинальными схемами и подробными комментариями.
При написании книги использованы материалы и учтен многолетний опыт проведения обучающих семинаров по применению УЗИ в ветеринарии для ветеринарных специалистов России и ближнего зарубежья (НОУ ДО УЗИ «Институт Ветеринарной Биологии» совместно с НПП «Ратекс»).
Издание рассчитано на практикующих ветеринарных врачей, специализирующихся в области ультразвуковой диагностики собак и кошек.
Объем книги - 280 стр., формат А4, полноцветная, цена - 1500 рублей.
Книгу можно заказать по тел.: (812) 927-55-92; по e-mail: virclin@mail.ru или по адресу: 196657, Санкт-Петербург, Колпино-7, а/я 36, Чуваеву И. В.
ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОИ БИОЛОГИИ
г
