CC BY
32
УДК: 618.177 (571.51)
ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС У БЕСПЛОДНЫХ ЖЕНЩИН БУРЯТСКОЙ ЭТНИЧЕСКОЙ ГРУППЫ
Любовь Ильинична КОЛЕСНИКОВА1, Марина Александровна ДАРЕНСКАЯ1, Людмила Анатольевна ГРЕБЕНКИНА1, Наталья Викторовна СЕМЕНОВА1, Альбина Владимировна ЛАБЫГИНА1, Зорикто Юрьевич ДАРЖАЕВ2, Тумэн Будажапович ЦЫРЕНОВ3
1 ФГБУ Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН 664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16
2 ГУЗ Республиканский перинатальный центр 670031, г. Улан-Удэ, ул. Солнечная, 4а
3 ГУЗ Республиканская клиническая гинекологическая больница 670031, г. Улан-Удэ, пр. Победы, 6
Обследовано 50 женщин с первичным и вторичным бесплодием бурятской этногруппы, проживающих на территории Республики Бурятия. Отмечено, что у пациенток с первичным бесплодием изменения интенсивности липопероксидации носят более выраженный характер, что сопровождается снижением общей антиокислительной активности крови, активности супероксиддисмутазы и содержания а-токоферола.
Ключевые слова: перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита, бесплодие, бурятская эт-ногруппа.
Около 10-15 % брачных пар в современных экономически развитых странах и около 17-20 % в России являются бесплодными [9, 11, 13], столько же обладают пониженной плодовитостью. Значительно возросла доля женщин старшего репродуктивного возраста, обратившихся в лечебные учреждения по поводу лечения бесплодия [13]. Современная демографическая ситуация в Республике Бурятия характеризуется устойчивым сокращением численности населения. По данным Госкомстата, за период 1991-2009 гг. численность населения в республике снизилась на 88,5 тыс. человек, что обусловлено как миграционным оттоком, так и низким уровнем рождаемости [12]. В Республике Бурятия проведено исследование
частоты бесплодия среди городских жителей, которое составило 20,01 %, что соответствует данным проведенного эпидемиологического исследования в соседней Иркутской области, где установлена частота бесплодия 19,56 ± 1,1 % (у жительниц городов - 18,94 ± 1,3 %; в сельской местности - 21,17 ± 0,74 %) [8, 12]. При анализе форм бесплодия установлено, что на территории Республики Бурятия, как и в Иркутской области и в целом по России, преобладает вторичное бесплодие [12].
Многочисленные исследования подтверждают этиологическую роль свободных радикалов в генезе женского бесплодия [7, 20, 17]. Развитие окислительного стресса зачастую происходит вследствие снижения буферной емкости
Колесникова Л.И. - д.м.н., проф., член-кор. РАМН, директор, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru Даренская М.А. - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции, e-mail: mops_my@front.ru
Гребенкина Л.А. - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Семенова Н.В. - к.б.н., младший научный сотрудник лаборатории патофизиологии репродукции, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Лабыгина А.В. - д.м.н., зав. лабораторией гинекологической эндокринологии, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru Даржаев З.Ю - к.м.н., врач-акушер-гинеколог, зав. центром планирования и репродукции человека, e-mail: rpcbur@mail.ru
Цыренов Т.Б. - врач отделения оперативной гинекологии, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
системы антиоксидантной защиты (АОЗ), нарушения ее мобилизации в ответ на повышение интенсивности продукции активных форм кислорода и процессов, связанных с окислительной деструкцией биологически активных соединений [3, 14].
В условиях многонациональное™ регионов России метаболические проявления многих заболеваний [5, 10], в том числе бесплодия, также могут иметь свою специфику. В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и состояния системы АОЗ у женщин бурятской этногруппы с первичным и вторичным бесплодием.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследовано 50 женщин бурятской эт-ногруппы, обратившихся по поводу бесплодия в браке в Республиканский перинатальный центр г. Улан-Удэ (средний возраст 31,0 ± 4,97 года). Все пациентки были разделены на 2 группы: с первичной (отсутствие беременности в анамнезе, 25 женщин) и вторичной (наличие беременности в прошлом, 25 женщин) формами бесплодия. Контрольная группа состояла из 20 женщин (средний возраст 29,5 ± 2,74 года). Получение информированного согласия на участие в проводимом исследовании являлось обязательной процедурой при включении пациентки в одну из групп. В работе соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации от 1964 года, с последним пересмотром в 2000 году. Обязательным условием включения в основные группы явилось наличие бесплодия в браке, т. е. беременность не наступала при регулярной половой жизни пары (без предохранения) в течение одного года и более. В контрольную группу вошли практически здоровые женщины с реализованной репродуктивной функцией. Критериями отбора в контрольную группу являлись наличие беременности в течение последних трех лет, применение барьерной, химической или внутриматочной контрацепции. Обследование проводилось по стандартам ВОЗ и включало анкетирование и анализ медицинской документации, протоколов лапароскопических операций, общеклиническое обследование, гинекологическое бимануальное обследование, УЗИ органов малого таза, гистеросальпингографию, эндоскопические методы обследования, обследование супруга.
Материалом исследования служила сыворотка крови и гемолизаты. Забор крови проводили
из локтевой вены в соответствии с общепринятыми требованиями. Интенсивность процессов ПОЛ в сыворотке крови оценивали по содержанию его субстратов с сопряженными двойными связями (Дв. св.), а также продуктов - диеновых конъюгатов (ДК), кетодиенов и сопряженных триенов (КД и СТ) [1], продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активных продуктов) [2]. Состояние системы АОЗ оценивали по общей антиокислительной активности сыворотки крови [4], содержанию а-токоферо-ла и ретинола в сыворотке [16], активности су-пероксиддисмутазы (СОД) в эритроцитах [19]. Измерения проводили на спектрофлуорофото-метре «Shimadzu ЯБ-1501» (Япония), спектрофотометре «Shimadzu ЯБ-1650» (Япония).
При анализе межгрупповых различий для независимых выборок использовали методы математической статистики, реализованные в лицензионном интегрированном статистическом пакете комплексной обработки данных STATIS-Т1СА 6.1 Stat-Soft 1пс, США (правообладатель лицензии - ФГБУ НЦ проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН). Вычисляли среднее арифметическое значение (М), ошибку среднего арифметического значения (т) и представляли в виде М ± т. Различия между группами оценивали с помощью критерия Стъюдента, достоверными считали результаты при р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Статистически значимых различий по частоте встречаемости причин бесплодия (эндокринные факторы: дисфункция яичников, поли-кистоз яичников, гиперпролактинемия, гипе-рандрогения надпочечникого генеза, гиперго-надотропная аменорея; трубно-перитонеальный фактор, маточный фактор) в двух группах обследованных выявлено не было.
Учитывая ключевую роль процессов ПОЛ в патогенезе репродуктивных осложнений [15, 6], были обследованы женщины бурятской эт-ногруппы с первичной и вторичной формами бесплодия. Результаты исследования процессов липопероксидации показали, что у женщин бурятской этногруппы с первичным бесплодием по сравнению с группой контроля происходило статистически значимое увеличение содержания ДК (в 1,35 раза, р = 0,010), КД и СТ (в 1,71 раза, р = 0,000) и ТБК-активных продуктов (в 2,4 раза, р = 0,000) (табл. 1). Состояние системы ПОЛ у пациенток с вторичным бесплодием характеризовалось значимым увеличением уровня ТБК-активных продуктов в 2,45 раза (р = 0,000) (см. табл. 1).
Примечание. Здесь и в табл. 2 * - отличие от величины соответствующего показателя женщин контрольной группы статистически значимо при р < 0,05.
Таблица 2
Состояние системы АОЗ в группах бесплодных женщин бурятской этногруппы
Таблица 1
Содержание субстратов и продуктов ПОЛ в сыворотке крови бесплодных женщин
бурятской этногруппы (М ± т)
Группа Субстраты с двойными связями, усл.ед. ДК, мкмоль/л КД и СТ, усл. ед. ТБК-активные продукты, мкмоль/л
Контроль 2,76 ± 0,15 2,10 ± 0,12 0,58 ± 0,05 0,75 ± 0,07
Первичное бесплодие 2,87 ± 0,20 2,83 ± 0,18* 0,99 ± 0,08* 1,80 ± 0,14*
Вторичное бесплодие 2,17 ± 0,27 1,88 ± 0,23 0,51 ± 0,07 1,84 ± 0,15*
Группа АОА, усл. ед. Активность СОД, усл. ед. Содержание а-токоферола, мкмоль/л Содержание ретинола, мкмоль/л
Контроль 17,28 ± 0,95 1,87 ± 0,01 10,03 ± 0,68 0,55 ± 0,03
Первичное бесплодие 13,88 ± 1,36* 1,75 ± 0,03* 7,91 ± 0,28* 0,62 ± 0,07
Вторичное бесплодие 11,20 ± 1,48* 1,67 ± 0,08* 9,69 ± 0,87 0,74 ± 0,08*
При оценке системы АОЗ в группе женщин с первичным бесплодием было обнаружено статистически значимое снижение величины общей АОА (на 20 %, р = 0,042), содержания основного неферментативного антиоксиданта а-токоферола (на 21 %, р = 0,009) и незначительное уменьшение активности антиоксидант-ного фермента СОД в сравнении с контрольной группой (табл. 2). Система АОЗ у женщин с диагнозом вторичное бесплодие характеризовалась статистически значимым снижением величины общей АОА сыворотки крови (на 35 %, р = 0,001), активности СОД (на 11 %, р = 0,008) и увеличением концентрации ретинола (на 35 %, р = 0,040) (см. табл. 2).
ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ интенсивности процессов ПОЛ у пациенток бурятской этногруппы показал их активацию, проявляющуюся в увеличении содержания ТБК-активных продуктов относительно контрольных значений независимо от формы бесплодия. Результаты, полученные сотрудниками Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека СО РАМН, а также данные литературы свидетельствуют о том, что независимо от фактора бесплодия при данной патологии происходит повышение концентрации атерогенных и снижение уровня антиатерогенных липопротеидов, что указывает на формирование дислипопротеидемии [7, 6]. Соответственно, происходит усиление процессов липопероксидации, которое приводит к
образованию и накоплению высокотоксичных соединений и, в конечном счете, к дестабилизации клеточных мембран и субклеточных структур [3].
Несмотря на то что процессы липоперокси-дации непрерывно происходят во всех органах и тканях, они не приводят к развитию их повреждения, поскольку для каждой биологической структуры характерно поддержание окислительных реакций на стационарном уровне. Эта стационарность в определенной степени достигается за счет функционирования согласованной системы антиоксидантной защиты [14].
Результаты исследования в группе пациенток бурятской этногруппы с первичным бесплодием показали снижение активности СОД, а также интегрального показателя - общей АОА крови. СОД является основным ферментом ан-тиоксидантной защиты в организме и данные изменения, несомненно, могут свидетельствовать о снижении адаптационно-компенсаторных возможностей бесплодных женщин бурятской этногруппы. Кроме того, в условиях патологического процесса имеет место снижение содержания жирорастворимого витамина ан-тиоксидантного действия - а-токоферола, что напрямую может влиять на репродуктивную функцию женщин. Известно, что витамины, как и гормоны, являются высокоактивными соединениями, причастными к работе всех звеньев регуляции гонадотропной функции гипофиза. Включаясь в патогенез заболевания, как правило, вторично, процессы липопероксидации иг-
рают важную роль в прогнозе и исходе болезни [15, 18]. К возможным причинам развития окислительного стресса также можно отнести эндокринные нарушения (гиперпролактинемия, гиперандрогения, неполноценная лютеиновая фаза), которые имеют место при бесплодии. Известно, что гиперпролактинемия, сопровождающаяся гипоэстрогенией, может вызывать изменения липидного спектра в сторону ускорения процессов липосинтеза [17]. Возможно, женщины бурятской этногруппы с первичным бесплодием находятся в группе риска в отношении дальнейшего прогноза заболевания. При вторичном бесплодии у больных бурятской этногруппы при сниженной общей АОА сыворотки крови отмечается компенсаторное накопление жирорастворимого ретинола. Ретинол в настоящее время принято считать не только антиоксидантом прямого действия (ответственным совместно с токоферолом за «гашение» перекисных радикалов), но и фактором, оказывающим антиокислительный опосредованный эффект через гормональную регуляцию системного метаболизма и функционирование многих органов и систем организма [7]. В данном случае можно говорить об определенных защитных явлениях при наличии вторичного бесплодия у представительниц бурятской эт-ногруппы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, в результате проведенных клинико-биохимических исследований можно заключить, что у пациенток с бесплодием независимо от формы имеет место активация процессов липопероксидации в сочетании с недостаточностью АОЗ. Вместе с тем у женщин бурятской этногруппы с первичным бесплодием отмечаются более выраженные изменения, сопровождающиеся истощением антиоксидант-ных механизмов. Полученные данные позволяют уточнить механизмы развития различных форм бесплодия у пациенток бурятской эт-ногруппы. Возможно использование результатов исследования для прогнозирования течения заболевания, а также при дифференцированном подходе в назначении антиоксидантной терапии у женщин, страдающих бесплодием.
Исследование проводилось при поддержке гранта Президента РФ НШ - 494.2012.7.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Волчегорский И.А., Налимов А.Г., Яровинс-кий Б.Г., Лифшиц Р.И. Сопоставление различных подходов к определению продуктов ПОЛ в геп-
тан-изопропанольных экстрактах крови // Вопр. мед. химии. 1989. (1). 127-131.
2. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль A.M. Способ определения малонового диальдегида в сыворотке крови по реакции с тиобарбитуровой кислотой // Вопр. мед. химии. 1987. (1). 118-121.
3. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньщикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука / Интерпериодика», 2001. 343 с.
4. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Тесел-кин Ю. О. и др. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеинов // Лаб. дело. 1988. (5). 59-62.
5. Колесникова Л.И., Даренская М.А., Барды-мова Т.П. и др. Изучение состояния процесса ли-попероксидации у женщин различных этнических групп с угрозой прерывания беременности // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2010. (6). 31-33.
6. Колесникова Л.И., Семенова Н.В., Лабыги-на А.В. и др. Оценка антиоксидантного статуса у женщин с эндокринным бесплодием // Журн. акушерства и женских болезней. 2010. (4). 57-60.
7. Корнакова Н.В. Функциональное состояние системы «перекисное окисление липидов - анти-оксидантная защита» у женщин с эндокринным бесплодием: автореф. дис. ... канд. биол. наук. Иркутск, 2008.
8. Кузьменко Е.Т. Клинико-эпидемиологичес-кие аспекты женского бесплодия (на примере Иркутской области): автореф. дис. ... канд. мед. наук. Иркутск, 2008.
9. Кулаков В.И., Лопатина Т.В. Репродуктивное здоровье населения России // Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению / Ред. В.И. Кулаков. М.: ГОЭТАР-Медиа,
2005. 10-19.
10. Лабыгина А.В., Колесникова Л.И., Сутури-на Л.В. и др. Некоторые клинические и метаболические особенности бесплодия у женщин русской и бурятской национальности // Международный конгресс по репродуктивной медицине. М., 2011. 105-106.
11. Овсянникова Т.В., Камилова Д.П. Эндокринное бесплодие у женщин // Гинекологическая эндокринология. 2-е изд. М.: МЕДпресс-информ,
2006. 252-283.
12. Ринчиндоржиева М.П. Женское бесплодие в промышленном городе Республики Бурятия: эпидемиология, клинические формы, факторы риска: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Иркутск, 2011.
13. Руководство по эндокринной гинекологии / Ред. Е.М. Вихляева. М.: Медицинское информационное агентство, 2002. 768 с.
14. Сазонтова Т.Г., Архипенко Ю.В. Значение баланса прооксидантов и антиоксидантов - равнозначных участников метаболизма // Патол. физи-ол. эксперим. терапия. 2007. (3). 2-18.
15. Третьякова Т.В., КубасовР.В., Власова О. С. и др. Взаимоотношения между содержанием в сыворотке крови токоферола, ретинола и гормонов репродуктивной системы у детей // Клин. лаб. диагностика. 2009. (12). 11-14.
16. Черняускене Р.Ч., Варшкявичене З.З., Гри-баускас П.С. Одновременное определение концентраций витаминов Е и А в сыворотке крови // Лаб. дело. 1984.
17. Agarwal А., Gupta S., Sekhon L. et al. Redox considerations in reproductive function and assisted
reproduction: from molecular mechanisms to health implications // Antioxid. Redox Signal. 2008. 10. (8). 1375-1403.
18. Brigelius-Flohe R., Galli F. Vitamin E: a vitamin still awaiting the detection of its biological function // Mol. Nutr. Food. 2010. 54. (5). 583-587.
19. Misra H.P., Fridovich I. The role of superoxide anion in the autoxidation of epinephrine and a simple assay for superoxide dismutase // J. Biol. Chem. 1972. 247. 3170-3175.
20. Pyari J.S., Rekha S., Singh R.K. et al. Free radicals in female infertility // J. Obstet. Gynecol. India. 2006. 56. (1). 64-67.
OXIDATIVE STRESS IN INFERTILE WOMEN OF BURYAT ETHNIC GROUPS
Lubov lljinichna KOLESNIKOVA1, Marina Aleksandrovna DARENSKAYA1, Lyudmila Anatolevna GREBENKINA1, Natalia Victorovna SEMENOVA1, Albina Vladimirovna LABYGINA1, Zorikto Yurjevich DARZHAEV2, Tumen Budazhapovich TSYRENOV3
1 Scientific Center of the Family Health and Human Reproduction Problems, SB RAMS 664003, Irkutsk, Timiryazev str., 16
2 Buryat Republican Perinatal Center 670031, Ulan-Ude, Solnechnaya str., 4a
3 Republican Clinical Gynaecological Hospital 670031, Ulan-Ude, Pobedy str., 6
The study involved 50 women with primary and secondary infertility of Buryat ethnic groups living in the territory of the Republic of Buryatia. It is noted that in patients with primary infertility changes in lipid peroxidation are more pronounced, which is accompanied by decrease in blood total antioxidant activity, superoxide dismutase activity and a-tocopherol level.
Key words: lipid peroxidation, antioxidant protection, infertility, Buryat ethnic groups.
Kolesnikova L.I. - doctor of medical sciences, professor, corresponding member of RAMS, director, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Darenskaya M.A. - candidate of biological sciences, senior researcher of laboratory of pathophysiology of reproduction, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Grebenkina L.A. - candidate of biological sciences, senior researcher of laboratory of pathophysiology of reproduction, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Semenova N.V. - candidate of biological sciences, junior researcher of laboratory of pathophysiology of reproduction, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Labygina A.V. - doctor of medical sciences, head of the laboratory of gynecological endocrinology, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
Darzhaev Z.Yu. - candidate of medical sciences, Dr. obstetrician-gynecologist, head of the center of planning and human reproduction, e-mail: rpcbur@mail.ru
Tsyrenov T.B. - Dr. of Department of Operative Gynecology, e-mail: iphr@sbamsr.irk.ru
