CC BY
224УДК 57.084.1:619:615
ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ДОКЛИНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ БЕЗОПАСНОСТИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ВЕТЕРИНАРНОГО ПРИМЕНЕНИЯ
Н.П.Бирюкова - кандидат ветеринарных наук, зам.зав.отделом; С.В.Русаков - кандидат биологических наук, зав. отделом; В.В.Напалкова - кандидат биологических наук; вед. н.с.
ФГБУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов», г.Москва (123022, г.Москва, Звенигородское шоссе, д. 5,
тел.+7 (495) 253-14-91, e-mail: [email protected]).
Определение степени эффективности и безопасности лекарственных средств основано на результатах целого комплекса научных исследований, важнейшим из которых является оценка безопасности, которая должна быть гармонизирована с международными стандартами. Основная цель доклинических исследований - предупреждение неблагоприятных последствий применения лекарственного препарата при клинических испытаниях. Для воспроизведенных лекарственных средств необходимо исследование общетоксических свойств в сравнении с зарегистрированным аналогом, для оригинальных лекарственных средств - исследование общетоксических свойств, специфических видов токсичности, фармакологической безопасности, специфической фармакологической активности, фармакокинетики. Изучение общетоксических свойств подразделяется на два этапа: исследование острой токсичности, исследование токсичности при повторном введении. Клинически значимые эффекты можно охарактеризовать при введении максимально возможных доз, либо в диапазоне до максимально переносимой дозы. Для изучения общетоксических свойств используют несколько видов лабораторных половозрелых животных (мыши, крысы, морские свинки, кролики, собаки) обоего пола, за исключением средств, предназначенных для производства препаратов, а также для новорожденных, неполовозрелых, беременных животных. Особенности исследования лекарственного препарата (в том числе способ и кратность введения) зависят от физических и химических свойств тестируемого вещества, от основного пути предполагаемого поступления в организм целевых животных, а также от целей проводимого исследования. По результатам проведенного доклинического исследования безопасности лекарственных средств оформляется отчет, содержащих первичные данные в виде таблиц и/ или графиков, которые должны быть обработаны статистически, а заключения и выводы о возможности клинического исследования должны базироваться на статистических заключениях. Оформление отчетов осуществляется в соответствии установленными требованиями и правилами лабораторной практики.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: доклинические исследования, лабораторные животные, оценка безопасности, общетоксические свойства.
Успешное внедрение в клиническую практику новых лекарственных препаратов для лечения животных предполагает наличие доказанных в соответствии с современными требованиями данных о высокой степени эффективности и безопасности их применения. Для этого должен выполняться определенный порядок научных исследований на различных уровнях, важнейшим из которых является доклиническая оценка безопасности лекарственного средства на основе международных стандартов для осуществления и ускорения гармонизации требований к проводимым исследованиям [6, 7,10,12, 18, 19].
Доклинические исследования проводятся с целью исключения у целевых видов животных неблагоприятных последствий применения лекарственного препарата в процессе клинических испытаний. В ходе доклинических исследований получают предварительную информацию о токсичности, эффективности, фармакологических свойствах, фармако-кинетике и метаболизме изучаемого лекарственного
средства [7, 19]. Задачи доклинических исследований безопасности включают: описание токсического влияния лекарственного средства на органы-мишени, зависимости от дозы, связи с экспозицией, выраженности и потенциальной обратимости эффектов, возникающих при взаимодействии фармакологического вещества с организмом лабораторных животных. Полученные данные используют для определения начальной безопасной дозы, диапазона доз для клинических исследований, а также для установления параметров клинического мониторинга потенциальных нежелательных явлений и определения возможности и риска проведения клинических исследований лекарственного препарата.
Практически единственным методом изучения биологических реакций на воздействие экстремальных факторов, является исследование на теплокровных животных. Общие принципы, которыми необходимо руководствоваться при проведении контролируемых исследований на живых объектах,
следующие: минимизация количества привлекаемых к исследованию животных за счет стандартизации условий эксперимента, повышения информативности методических приемов, исключения факторов, увеличивающих разброс экспериментальных данных; убедительные основания в необходимости планируемых экспериментальных исследований и невозможности замены животного какой-либо моделью или альтернативным объектом; принятие необходимых мер, исключающих страдания животных; обязательное обеспечение надлежащего ухода за животными с учетом особенностей их этиологии [5, 6, 16].
Все исследовательские работы с лабораторными животными выполняются в соответствии с существующими правилами лабораторной практики и этическими нормами обращения с животными, на основе принятых в организации, осуществляющей исследования стандартных операционных процедур, которые должны соответствовать международным правилам по защите позвоночных животных, используемых для исследовательских и иных научных целей [3-6, 8].
Не существует «универсального» объема доклинических токсикологических исследований, поэтому план исследования должен быть приспособлен к конкретным исследуемым веществам. Проведение токсикологических исследований в полном объеме обязательно для субстанции оригинального фармакологического вещества. Если лекарственная форма содержит вспомогательные вещества (стабилизаторы, растворители, наполнитель и др.), не разрешенные для применения в практике, то каждое из этих веществ подвергают токсикологическому исследованию. При комбинации нескольких фармакологических веществ в одной лекарственной форме (фиксированная комбинация) изучают токсичность комбинации в целом и каждого компонента в отдельности, если он не был ранее разрешен для применения в практике. При изменении способа получения фармакологического вещества или лекарственной формы проводится повторная токсикологическая оценка на наиболее чувствительном виде животных, который определяется исходя из данных первоначальных исследований. При изменении количественного соотношения ингредиентов в лекарственной форме или увеличении дозы следует провести анализ уже имеющихся данных для обоснованного решения вопроса о необходимости дополнительных токсикологических исследований [1, 2, 7, 17, 18].
До начала доклинических исследований анализируют сведения о структуре, физико-химических свойствах, растворимости, условиях хранения, фармакологической активности, предполагаемых дозах и путях введения препарата, а также другие значимые для проведения эксперимента сведения о свойствах субстанции фармакологического вещества или его лекарственной формы.
В доклиническую оценку безопасности оригинальных лекарственных препаратов обычно входят: фармакологические исследования, общетоксические исследования, токсикокинетические, доклинические фармакокинетические исследования, изучение репродуктивной токсичности и генотоксичности. Для лекарственных препаратов, которые обладают потенциальной опасностью или предназначены для длительного применения, необходимо также проводить исследования канцерогенных свойств [18].
Для воспроизведенных лекарственных средств необходимый объем доклинических токсикологических исследований включает: исследование общетоксических свойств (острая и подострая/субхрони-ческая токсичность, местнораздражающее действие) в сравнении с зарегистрированным аналогом; для оригинальных лекарственных средств - исследование общетоксических свойств, специфических видов токсичности (мутагенность, репродуктивная токсичность, канцерогенное действие, аллергизирующее действие, иммунотоксическое действие), фармакологической безопасности, специфической фармакологической активности, фармакокинетики [2].
Изучение общетоксических свойств обязательно для всех групп лекарственных средств, и подразделяется на два этапа: исследование острой токсичности (токсическое действие вещества, введенного в однократной дозе или в многократных дозах в течение не более 24 ч, которое может выражаться в расстройстве физиологических функций или в нарушении морфологии органов экспериментальных животных, а также гибели животного); исследование хронической токсичности при повторном введении (совокупность функциональных и/ или морфологических нарушений органов и систем подопытного животного после повторного длительного введения вещества).
Потенциальные клинически значимые эффекты в токсикологических исследованиях, как правило, можно охарактеризовать при введении доз в диапазоне до максимально переносимой (MTD), однако нет необходимости выявлять MTD в каждом исследовании. К другим подходящим лимитирующим дозам относятся максимально возможные для введения дозы (MFD), использование которых позволяет избежать исследования доз, не представляющих дополнительную информацию для прогнозирования клинической безопасности препарата. Летальный эффект подопытных животных не должен являться обязательным конечным результатом эксперимента [14].
В экспериментах используют несколько видов лабораторных половозрелых животных (мыши, крысы, морские свинки, кролики, собаки) обоего пола, за исключением средств, предназначенных для производства препаратов, а также: для новорожденных, неполовозрелых, беременных животных, полученных из сертифицированных питомников и прошедших
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ № 1/2018
карантин в течение 10-14 дней. Выбор вида животных должен быть обоснован. Широко используются в фармакологических и токсикологических исследованиях в качестве экспериментальных моделей крысы и мыши за их сравнительно короткую продолжительность жизни, восприимчивость к индукции новообразований и доступность этих хорошо изученных видов грызунов [2, 3, 4, 5].
Условия содержания животных должны соответствовать действующим правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев) [3-8].
Эксперименты на самцах и самках проводят раздельно, минимальный размер группы составляет 5-6 особей грызунов, при использовании собак или кроликов - 3-5 особей. Животные должны быть отобраны методом сплошной выборки, помечены и содержаться в клетках не менее пяти дней до начала введения тестируемого вещества, что позволит им привыкнуть к лабораторным условиям. Исследование хронической токсичности следует проводить на животных того же рода и того же происхождения, что и животные, использовавшиеся в предварительных токсикологических исследованиях небольшой продолжительности. При исследовании хронической токсичности наиболее предпочтительным видом грызунов является крыса, в основном используются женские особи, так как они являются более чувствительными к воздействию токсикантов. Если токсикологические и токсикокинетические данные для структурно родственных веществ показывают, что мужские особи являются более чувствительными, следует использовать животных данного пола. Женские особи не должны быть беременными или рожавшими. Каждое животное на момент начала эксперимента должно быть в возрасте от 8 до 12 недель, а его масса должна составлять ±20% от средней массы ранее исследуемых животных [22, 23, 24].
Число животных в каждой группе должно быть достаточным для того, чтобы оценить характер и частоту проявления токсических эффектов и подвергнуть результаты исследований надлежащей статистической обработке.
Лекарственное средство вводят подопытным животным в виде субстанции и/или лекарственной формы. Выбор способа введения зависит от физических и химических свойств тестируемого вещества, а также от основного пути предполагаемого поступления в организм целевых животных. Сравнение полученных параметров токсичности (недействующая, пороговая, максимально переносимая, летальные дозы) при разных путях введения может дать ориентировочные данные о скорости и степени всасывания фармакологического вещества, а сопоставление прямых, отражающих зависимость величины токсического эффекта от дозы, позволит судить о сходстве или различии в механизмах, вызывающих
интоксикацию при разных путях введения [15, 21].
Предназначенные для системного введения лекарственные средства, вводят перорально и парентерально (внутрибрюшинно, если они не растворимы в воде, внутривенно и подкожно, если они растворимы). Следует учитывать, что при определении токсичности имеют значение концентрация и объем вводимого фармакологического вещества, а при внутривенных инъекциях также скорость введения. Лекарственные средства для местного применения, наносят или вводят в соответствующую область согласно способу, предлагаемому для клинических исследований, лекарственные средства для перо-рального введения вводят через зонд, закладывают на корень языка; лекарственные средства для ингаляции изучают, помещая мелких лабораторных животных в затравочные камеры, снабженные специальными затравочными устройствами [10, 21].
Как правило, изучаемое вещество вводится фиксированными объемами в диапазоне испытуемых доз путем изменения концентрации доз. Если изучаемые средства в жидком состоянии, то целесообразно их использование для тестирования без разбавления, это может быть важно для последующей оценки риска использования вещества. Максимальный разовый объем жидкости зависит от размера подопытного животного. Вводимый грызунам объем не должен превышать 1 мл/100 г массы животного, но в случаях с водными растворами объем дозы может составить 2 мл/100 г массы. Рекомендуется использовать водные растворы/суспензии/эмульсии химических веществ, для продуктов, нерастворимых в воде и в других растворителях, отдавая предпочтение растворам/суспензиям/эмульсиям на масляной основе (растительные масла). В случае использования разбавителя (растворителя), не являющегося водой, его токсикологические характеристики должны быть известны. Дозы лекарственного средства должны быть приготовлены незадолго до введения с учетом его стабильности в период исследования [7, 21].
Действие фармакологического вещества может изменяться под влиянием ряда физиологических факторов. При проведении токсикологических исследований необходимо учитывать суточные и сезонные ритмы деятельности организма. В связи с этим рекомендуется вводить фармакологические вещества в фиксированное время суток и указывать время года, когда проводились эксперименты. Обязательным является проведение токсикологических исследований на здоровых животных, хотя наличие патологии может изменить чувствительность животных и позволяет в ряде случаев получить дополнительную информацию о токсичности. Однако широкое использование животных с искусственными, спонтанными или генетическими заболеваниями в настоящее время не может быть рекомендовано для токсикологических исследований, поскольку
ценность данных, полученных в таких условиях эксперимента, требует дальнейшего изучения и подтверждения.
Рекомендации при подборе метода исследования острой токсичности можно найти в Руководстве к проведению тестирования острой оральной токсичности [14, 17]. Наиболее адекватным является метод, основанный на введении животным серий фиксированных доз [тестовый метод], который позволяет избежать использования смерти животных, как конечного результата эксперимента, и основывается на наблюдении явных признаков токсичности в одной из серий введенных фиксированных доз[14]. Испытания in vivo и модельные эксперименты совместно демонстрируют, что процедура является воспроизводимой, требует меньшее число животных и причиняет животным меньше страданий, чем традиционные методы, а также позволяет ранжировать вещества таким же образом, как и другие методы исследования острой токсичности.
Общая продолжительность наблюдения за животными при исследовании острой токсичности составляет не менее 14 дней, причем в первый день после введения животные должны находиться под непрерывным наблюдением. Информация, полученная в результате исследования острой токсичности, может использоваться для прогнозирования последствий передозировки препарата у целевых животных и должна быть доступна до начала клинического исследования. Наиболее важную информацию дает высокая нетоксическая доза (NOAEL), установленная в доклинических исследованиях безопасности на лабораторных животных, которая будет стартовой дозой для исследования переносимости лекарственного препарата целевыми животными [22].
Исследование токсичности при многократном введении проводят с целью: определения характеристики повреждающего действия фармакологического вещества при его длительном введении и наивысшего уровня воздействия, при котором не наблюдается негативный эффект (NOAEL); выявления опасных свойств химических веществ и органов-мишеней; описания зависимости «доза-ответ» и возможности обратимости вызываемых повреждений. Наиболее часто применяемым в исследованиях хронической токсичности способом введения является внутрижелудочный (пе-роральный) способ. Исследуемое вещество вводится ежедневно порциями нескольким группам подопытных животных. Рекомендуемая продолжительность исследования токсичности при многократном введении лекарственного средства определяется предполагаемым курсом его клинического применения, и составляет при изучении подострой/субхронической токсичности 2-12-24 недель, хронической токсичности - 3-6-12-18 месяцев при введении лекарственного средства в терапевтическом диапазоне доз. Как правило, введение лекарственного средства в течение 12
месяцев, достаточно для того, чтобы стали очевидны любые проявления кумулятивной токсичности, без влияния возрастных изменений. Ограничения доз для исследования токсичности на лабораторных животных до 1000 мг/кг/сут признано целесообразным практически для всех случаев. Если доза 1000 мг/кг/сут не обеспечивает 10-кратного превышения клинической экспозиции, а клиническая доза превышает 1 г/сут, тогда дозы в токсикологических исследованиях лимитируются дозой 2000 мг/кг/сут или MFD [21-24].
В процессе экспериментов за животными наблюдают индивидуально, после однократного введения дозы не меньше, чем один раз в первые 30 мин, регулярно в течение первых 24 ч (причем особое внимание уделяется первым четырем часам) и затем ежедневно в течение 14 дней. Важно зафиксировать время появления и исчезновения симптомов токсичности, особенно если есть тенденция к замедленному возникновению токсических симптомов. При оценке изменений, наблюдаемых у животных в хроническом токсикологическом исследовании, необходимо исключить возможность влияния всех побочных факторов, не связанных с приемом препарата (содержание, кормление, заболевание животных и т.п.). Животные должны находиться под ежедневным наблюдением на протяжении всего срока исследования. При этом, отмечают потребление корма и воды, состояние шерстного и кожного покрова, слизистых оболочек, размер зрачка, положение хвоста, особенности поведения, интенсивность и характер двигательной активности, координации движений, наличие и характер судорог, тонус скелетных мышц, реакцию на тактильные, болевые, звуковые и световые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, ритм сердечных сокращений, количество и консистенцию фекальных масс, частоту мочеиспускания и окраску мочи, изменение массы тела и другие показатели, характеризующие токсическое действие исследуемого лекарственного средства. Для соответствующих групп фармакологических веществ целесообразно исследовать ряд гематологических показателей (морфологические, биохимические, свертываемость крови), обязательна регистрация сроков развития интоксикации и гибели животных. Один раз в неделю животных взвешивают, регулярно (в исследовании продолжительностью свыше 1 мес. - не менее 2 раз) исследуют функциональное состояние сердечно-сосудистой, нервной, пищеварительной и выделительной систем, морфологические и биохимические показатели крови. Методы исследования для оценки функционального состояния органов и систем организма выбирает исследователь: они должны быть современными и достаточно чувствительными, чтобы обеспечить регистрацию признаков возможного повреждающего действия изучаемого фармакологического вещества [10-12, 21-24]. Все животные, погибшие в течение иссле-
дования, подвергаются вскрытию для установления характера повреждающего действия фармакологического вещества с оценкой макроскопической картины места введения препарата и внутренних органов, определяют их абсолютную и относительную массу, проводят гистологическое исследование. Патологические изменения, возникающие у животных после введения высоких доз лекарственного средства, дают ценную информацию для характеристики его токсических свойств, однако эта информация должна быть подвергнута тщательному анализу и полученные результаты следует рассматривать в качестве предупреждения, а не противопоказания для клинических исследований.
Полученные в результате доклинического токсикологического исследования первичные данные документируют и хранят в соответствии с установленными требованиями [6, 7, 9]. В отчете представляются
первичные данные в виде таблиц и/или графиков, которые должны быть обработаны статистически, а заключения и выводы должны базироваться на статистических заключениях. Оформление отчета осуществляется в соответствии установленными требованиями и правилами лабораторной практики [9]. Заключение о результатах исследования должно содержать выводы о возможности клинического исследования изученного лекарственного препарата. При решении и обосновании этого вопроса следует учитывать: терапевтическую широту фармакологического вещества (соотношение минимальной токсической и терапевтической доз), характер и обратимость выявленной патологии, степень опасности острого и хронического отравления, прогноз возможных побочных реакций и рекомендации по необходимым ограничениям применения лекарственного препарата при клиническом исследовании.
Литература
1. Березовская, И.В. Классификация химических веществ по параметрам острой токсичности при парентеральных способах введения / И.В.Березовская // Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т. 37, № 3. - С. 12-15.
2. Березовская, И.В. Актуальные проблемы безопасности дженериков / И.В.Березовская, В.М.Иванова // Бюллетень ВНЦ БАВ. - Старая Купавна, 2002. - С.37-52.
3. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П.Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А.Захария, Б.В.Западнюк. - 3-е изд., перераб. и доп. - Киев: Вища школа, 1983. - 230 с.
4. Каркищенко, Н.Н. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях / Н.Н.Каркищенко, С.В.Грачева. - М.: Профиль, 2010. - 200 с.
5. О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных: приказ Минздрава СССР от 12.08.1977. - № 755. - М., 1977. - 7 с.
6. Правила надлежащей лабораторной практики Евразийского экономического союза в сфере обращения лекарственных средств: решение Совета Евразийской экономической комиссии от 03.11.2016. - № 81 // Фармацевтический вестник: сайт. Документы ЕАЭС. - С. 1.
7. Руководство по проведению доклинических исследований лекарст-венных средств. Часть первая / под ред. А.Н.Миронова. - М., 2012.
8. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев): приказ МЗ от 06.04.1973. - № 1045-73. - М., 1973.
9. Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Отчет о научно-исследовательской работе. Структура и правила оформления. ГОСТ 7.32-2001: введен Постановлением Госстандарта РФ от 04.09.2001 г. - № 367-ст (ред. от 01.12.2005). - М., 2005.
10. Hazard identification by methods of animal-based toxicology / S.M.Barlow [et al.] // Food. Chem. Toxicol. -2001. - № 40. - Р. 145-191.
11. Chronic Toxicity Studies. ОЕСР Test № 452.
12. Combes, R.D. A Scientific and Animal Welfare Assessment of the OECD Health Effects Test Guidelines for the Safety Testing of Chemicals under the European Union REACH System / R.D.Combes, I.Gaunt, M.Balls // ATLA. - 2004.
- № 32. - Р. 163-208.
13. Draft consultant's proposal OECD TG // Draft OECD guideline for the testing of chemicals. Acute Oral Toxicity-Fixed Dose Procedure. - 2008. - № 13, Vol. 8, November. - P. 452.
15. EEC Council Directive 86/609/EEC on the approximation of laws, regulations and administrative provisions of the Member States regarding the protection of animals used for experimental and other scientific purposes // Official Journal.
- 1986. - № 29, 18th December. - Р.358.
16. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and other Scientific Purposes (ETS 123). - Strasbourg, 1986.
17. Guidance Document on Acute Oral Toxicity Testing. - 2001. - № 24. - 23 Jul. - 24 p.
18. ICH Harmonized Tripartite Guideline (M3). Timing of Non-clinical Safety Studies for the Conduct of Human Clinical Trials for Pharmaceuticals. - 1997.
19. ICH Harmonized Tripartite Guideline (S6). Preclinical Safety Evaluation of Biotechnology-derived Pharmaceuticals. - 1997.
20. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - No. 19. Guidance Document on the recognition, assessment, and use of clinical signs as humane endpoints for experimental animals used in safety evaluation. - 2000.
21. Gad, S.C. Preclinical Development: handbook-toxicology, 2008.
22. Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents. OECP Test №407. Международный стандарт. Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Определение токсичности при повторном / многократном пероральном поступлении вещества на грызунах. 28-дневный тест: Гост 32641-2014. - М.: Стандартинформ, 2015.
23. Repeated Dose 90-Day Oral Toxicity Study in Rodents. OECP Test№ 408. Международный стандарт. Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Определение токсичности при повторном / многократном пероральном поступлении вещества на грызунах. 28-дневный тест: Гост 32641-2014. - М.: Стандартинформ, 2015.
24. Report of the Consultation Meeting on Sub-chronic and Chronic Toxicity // Carcinogenicity Testing. OECD. - 1995.
GENERAL PRINCIPLES OF PRECLINICAL SAFETY EVALUATION OF PHARMACOLOGICAL DRUGS FOR VETERINARY USE
Birukova N.P. - Candidate of Veterinary Sciences; Rusakov S.V. - Candidate of Biological Sciences;
Napalkova V.V. - Candidate of Biological Sciences.
The All-Russian State Center for Quality and Standardization of Veterinary Drugs and Feed (VGNKI), Moscow
(e-mail: [email protected]).
The definition of degree of efficacy and safety of medicines is based on the results of a whole range of scientific studies, the most important of which is the safety evaluation, which should be harmonized with International Standards. The main purpose of preclinical study is to prevent the adverse effects of the drug in clinical trials. The reproduced drugs need studying the general toxic properties in comparison with the registered analogue, for the original medicines - the study of general toxic properties, specific types of toxicity, pharmacological safety, specific pharmacological activity, pharmacokinetics. The study of general toxicity is divided into two stages: study of acute toxicity, toxicity study with repeated administration. Clinically significant effects can be characterized by administration of the maximum possible dose, or in the range up to the maximum tolerated dose. To study the general toxic properties, several species of laboratory sexually mature animals (mice, rats, guinea pigs, rabbits, dogs) of both sexes are used, with the exception of products intended for the manufacture of preparations, as well as for newborns, immature, pregnant animals. The features of drug study including the method and frequency of administration depend on physical and chemical properties of tested substance, on the main path of the expected entry into the body of target animals, and also on the objectives of the study. According to the results of preclinical safety study of drugs, the report containing primary data in the form of tables and / or graphs that should be statistically processed is prepared, and inferences and conclusions of the possibility of clinical study should be based on statistical conclusions. The reporting is carried out in accordance with the established requirements and rules of laboratory practice.
References
1. Berezovskaya, I.V. Klassifikaciya himicheskih veshhestv po parametram ostroj toksichnosti pri parenteralnyh sposobah vvedeniya [Classification ofchemicals byacute toxicity parameters for parenteral rout of administration] / I.V.Berezovskaya // Himiko-farmatsevticheskij zhurnal. - 2003. - Vol. 37, № 3. - P. 12-15.
2. Berezovskaya, I.V. Aktualnye problemy bezopasnosti dzhenerikov [Current problems of generic safety] / I.V.Berezovskaya, V.M.Ivanova // Byulleten VNTS BAV. - Staraya Kupavna, 2002. - P.37-52.
3. Laboratornye zhivotnye. Razvedenie, soderzhanie, ispolzovanie v eksperimente [Laboratory animals. Breeding, keeping, using in the experiment] / I.P.Zapadnyuk, V.I.Zapadnyuk, E.A.Zahariya, B.V.Zapadnyuk. - 3-e izd., pererab. i dop. - Kiev: Vishha shkola, 1983. - 230 p.
4. Karkishhenko, N.N. Rukovodstvo po laboratornym zhivotnym i alternativnym modelyam v biomeditsinskih issledovaniyah [Guide to laboratory animals and alternative models in biomedical research] / N.N.Karkishhenko,
S.V.Gracheva. - M.: Profil, 2010. - 200 p.
5. O merah po dalnejshemu sovershenstvovaniyu organizatsionnyh form raboty s ispolzovaniem eksperimentalnyh zhivotnyh: prikaz Minzdrava SSSR ot 12.08.1977. - № 755. [Guide to laboratory animals and alternative models in biomedical research] - M., 1977. - 7 p.
6. Pravila nadlezhashhej laboratornoj praktiki Evrazijskogo ekonomicheskogo soyuza v sfere obrashheniya lekarstvennyh sredstv: reshenie Soveta Evrazijskoj ekonomicheskoj komissii ot 03.11.2016. - № 81 [Rules of good laboratory practice of the Eurasian Economic Union in the sphere of medicinal products circulation: the decision of the Council of the Eurasian Economic Commission of 03.11.2016. - № 81] // Farmatsevticheskij vestnik: sajt. Dokumenty EAES. - P. 1.
7. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskih issledovanij lekarstvennyh sredstv. Chast pervaya [The guide for preclinical studies of drugs. Part one] / pod red. A.N.Mironova. - M., 2012.
8. Sanitarnye pravila po ustrojstvu, oborudovaniyu i soderzhaniyu eksperimentalno-biologicheskih klinik (vivariev): prikaz MZ ot 06.04.1973. [Sanitary rules on the arrangement, equipping and maintenance of experimental-biological clinics (vivariums): order of the Ministry of Health of the USSR of 06.04.1973]. - № 1045-73. - M., 1973.
9. Sistema standartov po informatsii, bibliotechnomu i izdatelskomu delu. Otchet o nauchno-issledovatelskoj rabote. Struktura i pravila oformleniya. GOST 7.32-2001: vveden Postanovleniem Gosstandarta RF ot 04.09.2001 g. - № 367-st (red. ot 01.12.2005). [System of standarts on information, librarianship and publishing. Research report. Structure and rules of registration. GOST 7.32-2001: was introduced by the resolution of Gosstandart of the Russian Federation of 04.09.2001 r. - № 367- former editing of 01.12.2005)]. - M., 2005.
10. Hazard identification by methods of animal-based toxicology / S.M.Barlow [et al.] // Food. Chem. Toxicol. -2001. - № 40. - P. 145-191.
11. Chronic Toxicity Studies. OECP Test № 452.
12. Combes, R.D. A Scientific and Animal Welfare Assessment of the OECD Health Effects Test Guidelines for the Safety Testing of Chemicals under the European Union REACH System / R.D.Combes, I.Gaunt, M.Balls // ATLA. - 2004.
- № 32. - P. 163-208.
13. Draft consultant's proposal OECD TG // Draft OECD guideline for the testing of chemicals. Acute Oral Toxicity-Fixed Dose Procedure. - 2008. - № 13, Vol. 8, November. - P. 452.
15. EEC Council Directive 86/609/EEC on the approximation of laws, regulations and administrative provisions of the Member States regarding the protection of animals used for experimental and other scientific purposes // Official Journal.
- 1986. - № 29, 18th December. - P.358.
16. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and other Scientific Purposes (ETS 123). - Strasbourg, 1986.
17. Guidance Document on Acute Oral Toxicity Testing. - 2001. - № 24. - 23 Jul. - 24 p.
18. ICH Harmonized Tripartite Guideline (M3). Timing of Non-clinical Safety Studies for the Conduct of Human Clinical Trials for Pharmaceuticals. - 1997.
19. ICH Harmonized Tripartite Guideline (S6). Preclinical Safety Evaluation of Biotechnology-derived Pharmaceuticals.
- 1997.
20. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - No. 19. Guidance Document on the recognition, assessment, and use of clinical signs as humane endpoints for experimental animals used in safety evaluation. - 2000.
21. Gad, S.C. Preclinical Development: handbook-toxicology, 2008.
22. Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents. OECP Test №407. Mezhdunarodnyj standart. Metody ispytaniya po vozdejstviyu himicheskoj produktsii na organizm cheloveka. Opredelenie toksichnosti pri povtornom / mnogokratnom peroralnom postuplenii veshhestva na gryzunah. 28-dnevnyj test: Gost 32641-2014. [International Standart. Trials methods for effects of chemical products on human body. Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents. OECP Test № 407.Gost 32641-2014 ]. - M.: Standartinform, 2015.
23. Repeated Dose 90-Day Oral Toxicity Study in Rodents. OECR Test№ 408. Mezhdunarodnyj standart. Metody ispytaniya po vozdejstviyu himicheskoj produktsii na organizm cheloveka. Opredelenie toksichnosti pri povtornom / mnogokratnom peroralnom postuplenii veshhestva na gryzunah. 28-dnevnyj test: Gost 32641-2014. [International Standart. Trials methods for effects of chemical products on human body.Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents. OECPTest №407.Gost32641-2014 ]. - M.: Standartinform, 2015.
24. Report of the Consultation Meeting on Sub-chronic and Chronic Toxicity // Carcinogenicity Testing. OECD. - 1995.
