О влиянии температурных условий на синтез оптимальных гидрозольных диагностикумов Текст научной статьи по специальности «Химические науки»

Н.А. Тагакова, проф. А.Г. Мешандин

О ВЛИЯНИИ ТЕМПЕРАТУРНЫХ УСЛОВИЙ НА СИНТЕЗ ОПТИМАЛЬНЫХ ГИДРОЗОЛЬНЫХ

ДИАГНОСТИКУМОВ

Кировская государственная медицинская академия

Гидрозольные препараты представляют со бой коллоидные и полуколлоидные растворы оксидов и гидроксидов «переходных» металлов: прежде всего меди и железа, на поверхности ко торых адсорбированы биоспецифические ком поненты, в частности, антигены, либо компли ментарные им антитела к различным нозологи- ям. При последующем смешении гидрозолей и биологических жидкостей: сыворотки крови, плазмы крови, слюны и т.д. - в случае положи тельной реакции происходит процесс агглюти нации, т.е. потеря агрегативной устойчивости коллоидного раствора. При отрицательной ре акции, агглютинации не происходит. В результа те достигается возможность бесприборного тес тирования тех или иных нозологий практически в течение 1-3 минут при существенно низкой цене одного анализа (не больше 20 центов США).

Гидрозольные препараты могут применяться, прежде всего, в целях охраны окружающей сре ды: выявление аллергенов, в медицинской и ве теринарной диагностике различных инфекцион ных и соматических заболеваний. Эти препара ты могут также использоваться для контроля адекватности лечебных и профилактических на значений. Также возможно применение гидро зольных препаратов в биотехнологии как объек тов для контроля качества ферментируемых вак цин, иммуноглобулинов и т.д.

Гидрозольные препараты использовались нами на основе коллоидного раствора гексациа- ноферрата железа (III). При этом коллоидные частички для усиления связи биолиганда и их поверхности подвергались хемосорбционной модификации. После этого проводилась адсорб ция биоспецифического лиганда. В качестве биоспецифического лиганда был антиген, выде ленный из микобактерий туберкулеза. Иммуно- химическая активность гидрозоля напрямую за висит от размеров его частиц. Нами была уста новлена связь между размерами частиц гексаци- аноферрата железа (III) и способами их синтеза. Размеры частиц контролировали при помощи электронного микроскопа (JSM-52A, на базе КГМА, кафедра гистологии). В качестве факто ра, влияющего на размер частиц и, отсюда, на стабильность гидрозоля, был выбран темпера турный режим получения ГЦФЖ (III).

Гидрозоли синтезировали по известной мето дике [1].

На поверхности твердой фазы сорбировали биолиганд-туберкулезный антиген. О влиянии размера частиц на качество препарата судили по стабильности полученного диагностикума и его иммунохимическим свойствам в реакции «анти ген-антитело». Методика постановки на стекле сводится к следующему: полученный гидрозоль ный препарат вносили в образцы раститрован- ного до определенной величины биоматериала в количествах 20-50 мкл биоматериала + 20-50 мкл гидрозоля. Результаты реакции учитывали через 30 сек. - 2 мин. В образце с положительной сы вороткой наблюдалась агглютинация, а в образ це отрицательной сыворотки агглютинации не было.

Температура синтеза и соответствующая ей величина частиц, а также их агрегативная устой чивость представлены в табл.1.

Таблица 1

Зависимость иммунохимических веществ гидрозоля от температуры синтеза

Фактор, включающий на р-р частиц ГЦФЖ (III), концентрац. 0,01м Температура

20°С 50иС 60иС 70 С 80 С

Размер частиц 17,5мкм 10,3 мкм 9,5 мкм 7,8 мкм 6,7 мкм

Агрегативно устойчивый в агглютинации отрицательной сыворотки титр 1/20 1/80 1/120 1/140 1/160

Реакция в положительной сыворотке Есть Есть Есть Нет Нет

Таким образом, в ходе электронно-микро- скопического исследования гидрозолей на осно ве ГЦФЖ (III) выяснили, что оптимальный раз мер частиц твердой фазы, необходимой для проведения иммунохимического анализа - 10 мкм, что достигается при синтезе гидрозоля при температуре 50°С и 60°С.

После синтеза гидрозоля он может хранить ся в жидком либо лиофилизированном виде. В последнем случае срок хранения практически неограничен.

Литература

1.Патент РФ № 2169924, 2000 г.

2.И.А. Тагакова. А.Г. Мешандин. Информ. Лис ток ИЛ № 2412602, 26.04.02

Summary

THE INFLUENCE OF TEMPERATURE

CONDITIONS ON THE SYNTHESIS OF OPTIMAL WYDROSOLE DIAGNOSTICUMS

I.A. Tagakova, A.G. Meshandin Kirov State Medical Academy Department of General Chemistry

The temperature influence and optimal conditions for hydrosole synthesis of the TB diagnosticums were determined in the investigation.