CC BY
57
Том 152, кн. 2
Естественные науки
2010
УДК 547.481:546.183:591.69-9
НОВЫЙ ПОДХОД К СОЗДАНИЮ АНТИГЕЛЬМИНТНЫХ СРЕДСТВ: ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕЛЬМИНТНОЙ АКТИВНОСТИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ СОЛИ ФОСФОНИЯ И НИТРОЗАМЕЩЕННОГО БЕНЗОФУРОКСАНА
И.В. Галкина, М.Х. Лутфуллин, С.Н. Егорова, Р. Ф. Мавлиханов,
Н.А. Лутфуллина, Н.В. Воробьева, Е.В. Тудрий, Л.В. Спатлова, Л.М. Юсупова, В.И. Галкин
Аннотация
Разработаны препаративные подходы к созданию нового типа антигельминтных лекарственных композиций на основе четвертичных солей фосфония с высшими ал-кильными радикалами в качестве мембранного якоря и нитрозамещенного бензофурок-сана в качестве генератора NO и антиметаболита.
Изучено антигельминтное действие лекарственной формы «Дегельм» на 5-месячных поросятах при лечении нематодозов, вызываемых аскаридой Ascaris suum, эзофагосто-мой Oesophagostomum dentatum и власоглавом Trichocephalus suis.
Определена острая токсичность предлагаемого препарата - 3500 мг/кг. Из полученных результатов следует, что «Дегельм» не обладает токсическим действием (по классификации химических веществ по степени опасности в соответствии с ГОСТ 12.00.76 относится к 4 классу опасности) и приводит к фрагментации кутикулы нематод при использовании очень низких концентраций препарата.
Ключевые слова: антигельминтные препараты, четвертичные фосфониевые соли, динитробензофуроксан.
Введение
Лечение гельминтозов является актуальной проблемой медицины и ветеринарии. В отличие от простейших, грибов, вирусов и бактерий, имеющих достаточно нежный покров, многие гельминты, а особенно нематоды, имеют многослойную мышечную кутикулу, которая надежно защищает органы паразита. Данный факт обусловливает необходимость применения молекулярного подхода к синтезу новых антигельминтных препаратов, сочетающих высокую селективную токсичность для паразитов с низкой токсичностью для «хозяина» (человека или животного). При разработке такого рода препаратов следует учитывать существующие значительные физиологические и биохимические различия между организмами паразита и хозяина.
Результаты и их обсуждение
Антинематодозные препараты различной химической структуры, применяемые в настоящее время в медицине и ветеринарии, за небольшим исключением, по механизму действия на нематод делятся на две группы. К первой группе
НзС
НзС
Н
С
СН2
СН2
Н2С
НзС
СН2
СН2
СН2
Н2С
Н2С
Н2С
Н2С
2 \
Н2С
2С Н2С
Н2С
СН2
Н2С
СН2
н
С
СН2
СН2
СН2
СН2
СН2
СН2
н
С
СН2
Н2С
СН2
Н3С
3 N
2
СН2
СН2
СН2
НзС
СНз
Вг
©
НзС
Н2С
Н2С
2С Н2С
Н2С
2С Н2С
СН2
Н2С
Н2С
СН2
СН2
СН2
СН2
СН2
СН2
Н2С
Н2С
СН2
Н2С
СН2
Н2С
Н2<
С
Н2С
СН2
СН2
н
СН2
СН2
Н2С
СН2
о-ю
0 С1
Нз
вВгО
СН3 СН2
Н2С
СН2
АЛ
\ / ^СНз
0 Вг
о
Рис. 1. Молекулярная структура синтезированных солей четвертичного фосфония
относятся вещества, влияющие на моторную активность: нарушающие нейромы-шечную передачу и вызывающие паралич у гельминта (производные диэтилен-диамина, этаноламина, пиримидина и др.), ко второй - вещества, нарушающие энергетический обмен (хлорорганические углеводороды, производные бензи-мидазола и метилового эфира бензимидазолкарбаминовой кислоты и др.). Знание механизма антигельминтного действия имеет самостоятельную научную ценность и является основой для создания новых, более эффективных, по сравнению с существующими, препаратов [1, с. 929-935].
Синтезированные нами соединения - четвертичные соли фосфония с высшими алкильными радикалами (рис. 1) - с химической точки зрения не являются ни одним из вышеописанных производных, и механизм их действия на паразита сводится к разрыву мембраны гельминта.
Аналогичное действие оказывает четвертичная соль аммония - близкий по строению к четвертичной соли фосфония вагинальный контрацептив, спермицид и антисептик на основе бензалкония хлорида (рис. 2) «Фарматекс» [1, с. 956].
СН2СН2ОН
7=4 ги\т® /СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН3 СН2—^„^ \ / \/ \ / \2„/т \2 ' 3
о.
е /
С1 СН2СН2ОН
СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2 СН2
Рис. 2. Молекулярная структура бензалкония хлорида
Спермицидное действие бензалкония хлорида обусловлено способностью препарата повреждать мембраны сперматозоидов.
Таким образом, можно предположить, что фармакологически активные соединения, содержащие в своей химической структуре мембранный якорь [2, 8. 230] в виде высшего алкильного радикала (от Сю до С18), способны в низших живых организмах повреждать поверхностные мембраны благодаря сходству с ними в строении (рис. 3).
сн
©
3
3 I 11 тт| 2 /
сн3 о нс о
о сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 с сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн3
Сн _0 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 /сн2 /сн2 сн2 СН2
СН2 Ч-с^^ -2с/н2нс/н2нсн2нснснсн2нсннсннсн3
22
о
Рис. 3. Молекулярная структура фосфолипида биомембраны клетки
Важно отметить, что синтезированные соли фосфония (рис. 1) являются структурными аналогами фрагментов фосфолипидов биомембран клетки.
В свете вышесказанного в качестве примера была проведена апробация ан-тинематодозного действия фармацевтической композиции «Дегельм», содержащей четвертичную соль фосфония с липидной компонентой биомембран (1) и бис-нитроанилинозамещенный динитробензофуроксан (2) (рис. 4).
сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 ^ \2Т< V/ \ / \ / V/ \ / \ / \2
сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн2 сн3
( 1 )
02К
(л^02-с6н4^ н
кн(с6н4-ко2-.)
N
о
( 2 )
N.
X
N0,
о
Рис. 4. Молекулярная структура составляющих фармацевтической композиции «Дегельм»: (1) - четвертичной соли фосфония с липидной компонентой биомембран; (2) -бис-нитроанилинозамещенного динитробензофуроксана
В качестве наполнителя антигельминтной композиции «Дегельм» использовали кристаллическую медицинскую глюкозу (ГОСТ 975-88), которая является основным питательным веществом для гельминтов и, таким образом, может служить приманкой.
Компонент (1) представляет собой катионный детергент, который встраивается в клеточную мембрану кутикулы нематод (так называемый мембранный якорь), блокирует ее барьерные функции и вызывает деструкцию кутикулы гельминта, делая ее доступной для проникновения пищеварительных соков хозяина.
Полифункциональный компонент (2), обладая значительно более низкой ан-тигельминтной активностью и высокой антибактериальной по сравнению с 1-м компонентом [3], существенно усиливает его активность благодаря своей способности генерировать до 6 молекул N0 из одной молекулы бензофуроксана [4, 5] под действием серосодержащих (И28) компонентов кишечника, что позволяет заметно снизить концентрацию компонента (1) в композиции «Дегельм». Аналогичное тиолзависимое высвобождение оксида азота из фуроксанов подробно описано в исследовании [6].
Важной особенностью (2) также является структурное сходство с нуклеоос-нованиями (пуриновыми основаниями) ДНК и РНК, такими, как аденин и гуанин, которые обладают способностью встраиваться между цепями ДНК или РНК и быть ответственными за связывание с различными рецепторами мембраны клетки:
Аденин Гуанин
Поскольку большинство микроорганизмов и гельминтов не способны синтезировать пурины, должны получать их от организма хозяина и, соответственно, иметь ферментные системы, пригодные для их метаболизма, антиметаболитиче-ское действие производных бензофуроксана, в данном случае (2), по-видимому, способствует реализации их антибактериального и антигельминтного действия.
Механизм синергизма (1) и (2) пока остается до конца не изученным, можно лишь констатировать факт значительной активизации процесса встраивания липидного «хвоста» синтетического аналога биомембраны в мембрану кутикулы паразита, что в конечном счете приводит к разрыву последней.
Для объяснения этого феномена нами совместно с сотрудниками кафедры фармацевтической химии Нижегородской государственной медицинской академии были проведены исследования [7] по изучению взаимодействия синтезированных солей фосфония (1) с лецитином на модели ленгмюровских монослоев. Установлено, что фосфониевые бромиды с высшими алкильными радикалами взаимодействуют с лецитином и, следовательно, могут включаться в липидные слои биомембран паразитов, кардинально изменяя их состояние. Увеличение эффективной молекулярной площади лецитина в мембране приводит к образованию пор и, в предельном случае, к разрыву биомембраны, что может служить объяснением антибактериального и антипаразитарного действия трифенил(алкил)фосфоний бромидов [7].
Антигельминтная активность композиции «Дегельм» апробирована на 6 изолированных спонтанно инвазированных нематодами свиньях обоего пола, пятимесячного возраста (23-25 кг), отобранных по результатам гельминтоовоскопиче-ского исследования фекалий по методу Фюллеборна, в ООО «Колос» Тетюшского
Табл. 1
Характеристические данные испытуемых свиней до лечения и дозы лекарственных форм (1) и (2) на курс лечения (в квадратных скобках указана доза на 1 кг живого веса свиньи)
№ свиньи № группы Диагноз Количество яиц до лечения в 1 г фекалий Картина крови до лечения Дозы (1) и (2) на курс лечения [доза на 1 кг веса свиньи]
1 1 Аскаридоз 140 ± 6.8 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 100 мг (1) [4 мг/кг]; 1000 мг (2) [40 мг/кг]
2 1 Аскаридоз, эзофагостомоз 120 ± 7.1 28 ± 8.3 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 100 мг (1) [4 мг/кг]; 1000 мг (2) [40 мг/кг]
3 2 Аскаридоз, токсокароз 210 ± 9.4 30 ± 6.9 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 100 мг (1) [4 мг/кг]
4 2 Аскаридоз, трихоцефалез 196 ± 11.2 70 ± 6.7 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 100 мг (1) [4 мг/кг]
5 3 Аскаридоз, трихоцефалез 80 ± 7.4 20 ± 5.6 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 1000 мг (2) [40 мг/кг]
6 3 Аскаридоз, эзофагостомоз 180 ± 7.5 30 ± 6.7 Анемия, лейкопения, эритроцитопения 1000 мг (2) [40 мг/кг]
района Татарстана и в условиях вивария кафедры паразитологии и радиобиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины.
Животные были разделены на 3 группы по 2 свиньи в каждой для последующего испытания на них антигельминтной активности как композиции «Де-гельм», так и ингредиентов (1) и (2) при их приеме внутрь с кормами. Характеристические данные испытуемых свиней до лечения и дозы лекарственных препаратов на курс дегельминтизации представлены в табл. 1.
Как следует из данных табл. 1, во всех группах животных картина крови до лечения характеризовалась анемией, лейкоцитопенией, эритроцитопенией.
С целью изучения антигельминтной активности композиции и ее компонентов исследуемые препараты вводили животным перорально в облатках с кормами 2 раза в день - утром и вечером. Лекарственным препаратом для 1-й группы поросят стала полученная нами композиция «Дегельм» весом 0.5 г, состоящая из 0.025 г н-гексадецилтрифенилфосфонийбромида (1), 0.250 г динитробензо-фуроксана (2) и 0.250 г глюкозы. Для 2-й группы лекарственная форма весом 0.5 г содержала 0.025 г соли фосфония (1) и 0.475 г глюкозы. Для 3-й группы лекарственная форма весом 0.5 г содержала 0.250 г динитробензофуроксана (2) и 0.250 г глюкозы.
Фекалии свиней исследовали через 1, 2, 3 и 4 недели после применения испытываемых препаратов. Результаты копрологических исследований и оценка состояния животных приведены в табл. 2.
Как следует из данных табл. 2, в первой группе животных, принимавшей композицию «Дегельм», полная дегельминтизация произошла в течение 1-2 дней с дальнейшим двухнедельным постепенным очищением организма от остатков гельминтов и мертвых яиц. Показатели крови также нормализовались через 2 недели. Появлявшийся временно в течение первой недели кашель свидетельствовал о гибели личинок нематод в легких, а аллергические реакции были связаны с одновременной гибелью большого количества нематод. Кашель и аллергия были выражены незначительно и прошли самопроизвольно. Фекалии осветленного цвета пластилиновой консистенции появились однократно (на 10-й день) у 1-й свиньи (микроскопия выявила остатки кутикулы аскарид) и дважды у 2-й свиньи (на 7-й и 10-й день) в виде остатков кутикул эзофагостом и аскарид соответственно.
По сравнению со свиньями 2-й и 3-й групп, в 1-й группе животные после дегельминтизации были существенно более активны, поноса и каких-либо других побочных эффектов приема препаратов не наблюдалось. Необходимо отметить улучшение общего состояния животных и хороший аппетит после приема фармацевтической композиции «Дегельм». При патологоанатомиче-ском исследовании в кишечнике гельминты обнаружены не были.
Во 2-й группе, получавшей соль фосфония (1) и глюкозу, картина дегельминтизации оказалась более размытой, а очищение организма животного более длительным. Показатели крови нормализовались в течение 3 недель. У 4-й свиньи был отмечен затяжной процесс очищения, который ставит под сомнение полную дегельминтизацию. Таким образом, несмотря на разрушение кутикулы нематод под действием соли фосфония, прием соли (1) без динитробензофуроксана (2) оказался менее эффективным, чем их совместное применение в композиции «Дегельм» (группа 1).
В 3-й группе свиней, получавшей динитробензофуроксан (2) и глюкозу, наряду с частичной дегельминтизацией (выход мертвых неполовозрелых аскарид, от 8 до 15 см) через 4 недели были обнаружены яйца паразитов, а в дальнейшем у шестой свиньи появилась тенденция к их росту на фоне возникшей кишечной инфекции, что проявлялось в виде диареи, исхудания животного и сопровождалось лейкоцитозом крови. Таким образом, несмотря на наличие антигельминтной активности у динитробензофуроксана, применение его менее эффективно по сравнению с композицией, содержащей динитробензофуроксан и соль фосфония, так как, во-первых, кутикула нематод не разрушается и, во-вторых, присоединяется кишечная инфекция.
Появление большого количества яиц разного срока созревания в фекалиях свиней 1-й и 2-й групп объясняется нарушением целостности кутикулы гельминтов, а также их матки и яйцеводов, что делает тело гельминта доступным для пищеварительных соков кишечника хозяина. Результаты выращивания (инкубации) личинок из полученных таким образом яиц нематод показали полное отсутствие развития последних по сравнению с контрольным выращиванием.
Табл. 2
Результаты копрологических исследований фекалий свиней после применения лекарственного препарата «Дегельм» и его компонентов
№ № группы, Диагноз Количество яиц в 1 г фекалий Примечание
свиньи препарат через 1 неделю через 2 недели через 3 недели через 4 недели
1 1 «Дегельм» Аскаридоз 10500 ± 7 фрагментация яиц и кутикул 3500 ±5.7 фрагментация яиц и кутикул 1420 ± 6.7 0 Фрагменты аскарид (2 нед.), разрушенные яйца разных стадий созревания, аллергия, кашель (1 нед.), на 2-й неделе показатели крови пришли в норму
2 1 Аскаридоз, 8950 ±8.9 3410 ±9.2 1100 ±9.1 37 ±8.7 Фрагменты эзофагостом (1 нед.),
«Дегельм» эзофагостомоз 284 ± 8.3 фрагментация яиц и кутикул 52 ±8.5 фрагментация яиц и кутикул аскарид (2 нед.), разрушенные яйца разных стадий созревания, аллергия (1 нед.), на 2-й неделе показатели крови пришли в норму
3 2 Аскаридоз, 14120 ±9.4 4840 ± 7.8 2120 ±5.9 425 ± 6.0 Состояние стабильное (1-2
соль фос- токсокароз 285 ±6.9 68 ±6.4 16 ±5.5 - нед.), на 3-й неделе показатели
фония (1), крови пришли в норму
глюкоза
4 2 Аскаридоз, 7750 ±8.8 1320 ±5.9 2630 ±7.8 730 ±6.0 Состояние стабильное (1-2
соль фос- трихоцефалез 270 ±6.1 68 ±7.5 42 ±6.8 18 ±5.8 нед.), на 3-й неделе показатели
фония (1), крови пришли в норму
глюкоза
5 3 Аскаридоз, 80 ±7.4 68 ±7.3 26 ±7.9 22 ±8.3 Вышло 9 мертвых аскарид
бензофу- трихоцефалез 20 ±5.6 36 ±7.4 15 ±5.9 7 ±5.8 с прозрачной кутикулой, показа-
роксан (2), выход мерт- выход мерт- выход мерт- выход мерт- тели крови к 3-й неделе пришли
глюкоза вых аскарид вых аскарид вых аскарид вых аскарид в норму
6 3 Аскаридоз, 180 ±7.5 160 ± 7.7 46 ±7.5 54.3 ±8.9 Вышло 17 мертвых аскарид
бензофу- эзофагостомоз 30 ±6.7 17 ±5.4 28 ±8.5 - с прозрачной кутикулой, на фо-
роксан (2), выход мерт- выход мерт- выход мерт- не сохраненных показателей
глюкоза вых аскарид вых аскарид вых аскарид крови появился леикоцитоз
В результате проведенного исследования было установлено, что полученная композиция «Дегельм» обладает высоким антинематодозным действием при низких лечебных дозах 0.047-0.044 г/кг, в то время как препараты пипера-зинового ряда используются в дозах 0.33 г/кг, что значительно превышает дозу предлагаемого препарата.
Уровень острой токсичности антигельминтной композиции «Дегельм» при пероральном и внутрибрюшинном введении у мышей (ЛД50 3500 мг/кг) соответствует категории относительно безвредные - IV класс токсичности по Измерову [8, с. 196-197].
Антибактериальная и антимикотическая активность ингредиентов композиции «Дегельм» обусловливала отсутствие расстройств стула и других признаков кишечной инфекции [3, 9].
Таким образом, лекарственная композиция «Дегельм», включающая три компонента: н-гексадецилтрифенилфосфоний бромид (1), 5,7-бис-(м-нитроани-лино)-4,6-динитробензофуроксан (2) в определенном весовом соотношении и глюкозу, - обладает высокой эффективностью при дегельминтизации животных в низких лечебных дозах. Каждый компонент данной композиции вносит свой вклад в антигельминтное и антибактериальное действие препарата.
В основу создания антигельминтного препарата «Дегельм» положен комплексный научно-методический подход, включающий теоретическое обоснование механизма действия потенциальных лекарственных веществ и состава фармацевтической композиции, направленный синтез биологически активных веществ, разработку лекарственной формы, изучение специфической фармакологической (антигельминтной) активности. Все это является необходимым для создания и внедрения в производство нового оригинального отечественного лекарственного препарата.
Экспериментальная часть
Синтез н-гексадецилтрифенилфосфоний бромида (1). н-гексадецилтри-фенилфосфоний бромид (1) получали по реакции, описанной в работе [7].
Синтез замещенного бензофуроксана (2). 5,7-бис-(м-нитроанилино)-4,6-ди-нитробензофуроксан (2) синтезировали согласно схеме, описанной в работе [10].
Индивидуальность, структура, чистота и термическая устойчивость подтверждены комплексом современных химических, физических и физико-химических методов исследования.
Рентгеноструктурные исследования выполнены на диффрактометре Nonius Kappa CCD, оборудованном вращающимся анодным генератором Nonius FR591.
ЯМР 'И, 31Р и С спектральные исследования проводились на приборе AVANCE-400 фирмы Bruker.
ЭПР-исследования проведены на спектрометре Varian Е-12 и BRUKER ELEXYS 680. Частота СВЧ - 9.7 ГГц. В работе использовалась смесь абсолютированных растворителей этиловый спирт - диэтиловый эфир (1 : 3).
ИК-спектры сняты на фурье-спектрометре IFS 66 v/s.
Дериватограммы ТГ/ДСК записаны на приборе NETZSCH STA 449C в интервале температур от 20 °С до 400 °С со скоростью нагрева образца 10 °С в минуту в среде аргона.
Получение антигельминтной фармацевтической композиции «Дегельм» и препаратов сравнения (контроль). В фарфоровой ступке растирали небольшое количество глюкозы, смешивали ее с 0.25 г н-гексадецилтрифенилфосфоний бромида (1) и (или) 2.50 г 5,7-бис-(м-нитроанилино)-4,6-динитробензофурок-сана (2), добавляли глюкозу до общей массы порошковой смеси 5.25 г («Дегельм») или 5.0 г (смеси (1) и (2) с глюкозой) и перемешивали до получения однородного порошка красного цвета, которым наполняли 10 облаток (дозированные закрывающиеся контейнеры из крахмала).
Работа выполнена при финансовой поддержке совместной российско-американской программы «Фундаментальные исследования и высшее образование» (BRHE), REC-007, BP4M07; гранта Минобрнауки РФ № 2.2.2.2/5013.
Summary
I.V. Galkina, M.Kh. Lutfullin, S.N. Egorova, R.F. Mavlikhanov, N.A. Lutfullina, N.V. Vo-robijova, E.V. Tudriy, L.V. Spatlova, L.M. Yusupova, V.I. Galkin. Synthesis and Approbation of a New Generation of Antigelmint Means.
Preparative approaches were elaborated to creating a novel type of antigelmint means on the base of phosphonium salts with higher alkyl radical as a "membrane anchor" and nitro-substituted benzofuroxan as NO generator. The given composition in vivo breaks the energetic exchange at gelmints, getting through membranes of cell and mitochondria, destroying muscular cuticulum, which leads to fragmentary destruction of a parasite (under microscopical investigation). Experimental approbation of antigelmint action of preparation "Degelm" is carried out on pigs at treatment of nematode infections caused by Ascaris suum, Oesopha-gostomum dentatum and Trichocephalus suis. Sharp toxicity of the offered preparation is estimated at 3500 mg/kg. It is stated that "Degelm" does not possess toxic action, belongs to class 4 of danger (GOST 12.00.76) and leads to a fragmentation of nematode cuticulum at use in low doses.
Key words: antigelmint means, quaternary phosphonium salts, dinitrobenzofuroxan.
Литература
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая волна, 2010. - 1216 c.
2. Koolman J., Rohm K.-H. Taschenatlas der Biochemie. - Stuttgard: Georg Thieme Verlag, 1998. - 469 S.
3. Пат. 2255935 РФ. 5,7-Дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы С6№06^1)2, обладающий акарицидной и бактерицидной активностью / Л.М. Юсупова, И.Ф. Фаляхов, Л.В. Спатлова, Т.В. Гарипова. - Опубл. 10.07.2005, Бюл. № 19 (III ч.). - С. 822.
4. Bohn H., Brendel J., Martorana P.A., Schonafinger K. Cardiovascular actions of the furoxan CAS 1609, a novel nitric oxide donor // Br. J. Pharmacol. - 1995. - V. 114. -P. 1605-1612.
5. Mu Li, Feng S-S., Go M.L. Stady of synthetisis and cardiovascular activity of some furoxan derivatives as potential NO-donors // Chem. Pharm. Bull. - 2000. - V. 48, No 6. -P. 808-816.
6. Medana C., Ermondi G., Fruttero R., Di Stilo A., Ferretti A., Gasco A. Furoxanes as Nitric Oxide release and biological evaluation // J. Med. Chem. - 1994. - V. 37, No 25. -P. 4412-4416.
7. Галкина И.В., Мельникова Н.Б., Тудрий Е.В., Галкин В.И., Жильцова О.Е., Жукова О.В., Егорова С.Н. Взаимодействие солей фосфония с липидными компонентами мембран // Фармация. - 2009. - № 4. - С. 35-38.
8. Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном введении (Справочник). - М.: Медицина, 1977. - 240 с.
9. Галкина И.В, Тудрий Е.В., Бахтиярова Ю.В., Егорова С.Н., Галкин В.И. Синтез, строение и исследование биологической активности солей фосфония // Материалы Рос. конф. «Фармакология и токсикология фосфорорганических соединений и других биологически активных веществ», посв. 75-летию проф. И.А. Студенцовой. -Казань, 2008. - Вып. 4. - С. 23.
10. Юсупова Л.М., Гармонов С.Ю., Захаров И.М., Быков А.Р., Гарипов Т.В., Фаля-хов И. Ф. Средства биологической защиты многоцелевого назначения на основе хлорпроизводных нитробензофуроксана // Вестн. Казан. технол. ун-та. - 2005. -№ 1. - С. 103-111.
Поступила в редакцию 07.12.09
Галкина Ирина Васильевна - кандидат химических наук, доцент кафедры высокомолекулярных и элементоорганических соединений Химического института им. А.М. Бутлерова Казанского (Приволжского) федерального университета.
E-mail: vig54@mail.ru
Лутфуллин Минсагит Хайруллович - доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой паразитологии и радиобиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины.
Егорова Светлана Николаевна - доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармации ФПК и ППС Казанского государственного медицинского университета.
Мавлиханов Ранис Фаридович - аспирант кафедры паразитологии и радиобиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины.
Лутфуллина Наиля Ахметовна - ассистент кафедры паразитологии и радиобиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины.
Воробьева Наталья Владимировна - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармации ФПК и ППС Казанского государственного медицинского университета.
Тудрий Елена Вадимовна - аспирант кафедры высокомолекулярных и элементоорганических соединений Химического института им. А.М. Бутлерова Казанского (Приволжского) федерального университета.
Спатлова Лидия Валентиновна - ассистент кафедры химии и технологии органических соединений азота Казанского государственного технологического университета.
Юсупова Луиза Магдануровна - доктор химических наук, профессор кафедры химии и технологии органических соединений азота Казанского государственного технологического университета.
Галкин Владимир Иванович - доктор химических наук, профессор, заведующий кафедрой высокомолекулярных и элементоорганических соединений Казанского (Приволжского) федерального университета, член-корреспондент АН РТ, директор Химического института им. А. М. Бутлерова.
