CC BY
30
■а I Новые молекулярные механизмы вирус-ассоциированного преинвазивного " и инвазивного рака шейки матки
Ключевые слова: рак шейки матки, молекулярно-генетические показатели
Keywords:
cervical cancer, molecular-genetic parameters
Ковчур П.И., Курмышкина О.В., Захаров Д.А., Ковчур О.И., Волкова Т.О.
ФГБОУ ВПО «Петрозаводский государственный университет» 185014, Российская Федерация, Петрозаводск, ул. Ленина, д. 13 E-mail: pkovchur@mail.ru
New molecular mechanisms of virus-associated preinvasive and invasive cervical cancer
Kovchur P.I., Kurmyshkina O.V., Zakharov D.A., Kovchur O.I., Volkova T.O.
Petrozavodsk State University
13 Lenina str., Petrozavodsk, 185014, Russian Federation E-mail: pkovchur@mail.ru
Резюме
Изучены новые молекулярно-генетические, иммунологические показатели у пациентов с преинвазивным и микроин-вазивным раком шейки матки.
Abstract
Molecular genetic and immunological parameters were studied in patients with preinvasive and microinvasive cervical cancer.
Цель исследования — целенаправленный поиск биомаркеров дифференциальной диагностики и мишеней для мультитаргетной терапии рака шейки матки (РШМ).
Материалы и методы. Исследованы уровни экспрессии генов VEGF-C, VEGF-R3, Р^, ETS1 в образцах морфологически нормального эпителия с ВПЧ, ЦИН 1-3, преинвазивного и микроинвазивного РШМ. Оценен уровень экспрессии CD95, активности каспаз, содержание регуляторных Т-клеток в образцах периферической крови у 285 пациенток с ДНК ВПЧ (100%). Контроль — 30 здоровых женщин. Анализ уровня экспрессии генов проводили методом ПЦР в режиме реального времени. Иммунофенотипирование CD4-Tregs проводилось методом проточной цитофлуори-метрии. Определение активности каспаз -3, —6, —8 и -9 — спектрофлуориметрическим методом с использованием AFC-меченных тетрапептидных субстратов.
Результаты. Анализ экспрессии спектра генов, контролирующих ключевые точки сигнальных путей лимфо-ангиогенеза и эпителиально-мезенхимального перехода, показал увеличение экспрессии генов VEGF-C, VEGF-R3, Р^ и ЕТБ1 в клетках преинвазивного РШМ. Это лимфан-гиогенное «переключение» затрагивает уровни ростовых факторов (VEGF-C, Р^), уровни их рецепторов (VEGF-R3) и уровни эндотелий-специфичных внутриклеточных транскрипционных факторов ^ТБ!). Анализ изменений численности популяций лимфоцитов с фенотипами СР95+, СР3+СР95+/Ы§^ СР3+СР 4+СР95+/Ы§^ СР3+СР8+ СР95+/Ы§Ь| выявил повышение экспрессии СР3+
СР95+/Ы§Ь| Т-клеток (эффекторов) и СР3+СР4+95+/Ы§Ь| Т-хелперов (р < 0,05). Показано увеличение экспрессии рецептора апоптоза СР95 на лимфоцитах (р < 0,05), увеличение количества СР4+СР25+ Т-клеток СР4+СР25+/Ы§Ь| СР4 (+)СР25 (+)СР127 ^т/пе§) и СР4 (+)СР25 (+^охР3 (+) (р < 0,05), продукции TGF-P1 Тге§-клетками (р < 0,05). Обнаружено увеличение активности СР95-регулируемой каспазы-8 и эффекторной каспазы-3 в лимфоцитарной фракции больных ЦИН и РШМ. Только после хирургического лечения (диатермоконизация ш/матки) — отмечена тенденция к постепенному восстановлению показателей клеточного иммунитета в течение 3 месяцев. При комплексном лечении (диатермоконизация шейки матки + аллокин-альфа 1,0 мг 6 раз п/к) происходит эффективная нормализация Т-хелперов, Тге§Б, снижение уровня экспрессии СР95-маркера и супрессорно-го цитокина TGF-P1 и FOXP3, уровня активности каспаз -8, —9, —3 и -6 в циркулирующих лимфоцитах, а также снижение ВПЧ-позитивных пациенток (1,7%) и отсутствие онкобелка Е7 (р < 0,01).
Выводы. Развитие РШМ на самых ранних этапах сопровождается скоординированными изменениями исследуемых показателей на локальном и системном уровнях. Проведение комплексной терапии с применением имму-номодулирующих препаратов позволяет улучшить результаты лечения и предотвратить рецидивы заболевания.
Работа выполнена при поддержке РФФИ
(проект № 17-75-10027).
44 III Национальный конгресс «Онкология репродуктивных органов: от профилактики и раннего выявления к эффективному лечению», 31 мая-2 июня 2018 года, Москва
