CC BY
11
НАРОДНЫЙ КОМИССАРИАТ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ГИГИЕНА и САНИТАРИЯ
Отв. редактор А. Я. КУЗНЕЦОВ, зам. отв.редактора Н. А. БАРАН, С. И. КАПЛУН Члены редколлегии: Г. А. БАТКИС, Ф. Е. БУДАГЯН, А. В. МОЛЬКОВ, Н. А. СЕМАШКО, А. Н. СЫСИН, Т. Я. ТКАЧЕВ Отв. секретари: Р. М. БРЕЙНИНА. Ц. Д. ПИК
1943 8-й ГОД ИЗДАНИЯ № 4
> Новое в лабораторной диагностике и профилактике сыпного тифа
А. А. СМОРОДИНЦЕВ
Из Всесоюзного института экспериментальной медицины им. Горького
Распространению сыпного тифа способствует три фактора: наличие больных людей, присутствие переносчиков — вшей, передающих возбудителя от больного к здоровому, и восприимчивость людей к этому, заболеванию. Чтобы ликвидировать сыпной тиф в данном населенном пункте, •необходимо немедленно госпитализировать заболевших и одновременно уничтожать вшей на коже, платье и вещах больного и окружающих его лиц. Известно, что вошь становится заразной через б—7 дней после кормления на больном человеке, поэтому решающее значение имеет ранняя постановка диагноза, когда находящиеся на больных вши еще мало опасны. Между тем> нередко врач затрудняется с постановкой диагноза сьшного тифа в первые дни заболевания, когда проявления болезни еще не вполне типичны. В это время лабораторное исследование крови по реакции Вейль-Феликса дает отрицательный результат: агглютинины к протею Хю появляются не ранее 6—7-го дня болезни, т. е. лишь тогда, когда клинические признаки сыпного тифа уже вйолне выражены.
Распознавать сыпной тиф в первые дни удается проверенным нами чувствительным методом ранней диагностики с помощью реакции, разработанной во Всесоюзном институте экспериментальной медицины проф. В. И. Иоффе. Принцип этой реакции заключается в следующем. В сыворотке больного сыпным тифом содержатся растворимые специфические антигены, обнаруженные при взаимодействии с сывороткой переболевшего сыпным тифом в присутствии комплемента морской свинки. Реакция эта особенно чувствительна, если взаимодействие антигена и антител протекает при температуре около 0°. При наличии в сыворотке испытуемого больного сыпнотифозного антигена он будет реагировать с антителами сыворотки переболевших и свяжет комплемент морской свинки. В связи с этим добавленные в качестве индикатора эритроциты барана, подготовленные к гемолизу специальной сывороткой, не дадут гемолиза эритроцитов. Для этого требуется наличие свободного, не связанного комплемента. Если реакция ставится с сывороткой человека, бо-
леющего не сыпным, а например, брюшным тифом, она не будет реагировать с антителами сыворотки 'переболевших сыпным тифом. Комплемент морской свинки остается свободным, активным, п добавленные эритроциты барана растворятся.
Д-р А. И. Дробышевская в отделе вирусов ВИЭМ проверила чувствительность этой реакции связывания комплемента Па 250 больных сыпным тифом'. Антиген сыпнотифозного возбудителя успешно обнаруживался ею о сыворотке больных с первых дней заболевания, причем результаты были тем точнее, чем раньше исследовалась сыворотка. Так, в первые 4 дня болезни, когда практическая ценность лабораторного исследования для лечащего врача и эпидемиолога особенно велика, положительные ответы получаются почти для 100% больных сыпным тифом. На 5—7-й день болезни чувствительность реакции падает, давая 50—60% положительных ответов, на 8—9-й день процент этот снижается до 20—40. После 10-го дни данная реакция всегда отрицательна: в крови больного происходит полная нейтрализация сыпнотифозного антигена специфическими для него антителами. Реакция строго специфична— сыворотки больных другими инфекциями реагируют отрицательно.
Таким образом, метод ранней диагностики сыпного тифа с помощью реакции связывания комплемента компенсирует основной недостаток реакции агглютинации по Вейль-Феликсу — малую чувствительность последней в начальном периоде болезни, наиболее трудном для клинической диагностики. Минусом нового метода является его методическая сложность, требующая участия опытного серолога. Постановка соответствующих исследований вполне возможна в городских лабораториях, располагающих квалифицированными] серологами, овладевшими техникой проведения реакции Вассермана.
Наряду со своевременной госпитализацией и энергичными мерами против завшивленности населения для борьбы с сыпным тифом разрабатываются дополнительные способы защиты, основанные на повышении невосприимчивости людей к этому заболеванию в результате активной иммунизации их убитыми или ослабленными вакцинами. В военной обстановке некоторые профессиональные группы (медицинский персонал, работники милиции, железнодорожного и городского транспорта и т. д.) подвергаются повышенной опасности заражения, соприкасаясь по долгу службы с людьми, неблагополучными в санитарном отношении. Очень важно искусственно создать у этих наиболее угрожаемых групп состояние повышенной защиты к сыпному тифу. Долгое время не удавалось приготовить эффективных вакцин. Мельчайший микроб сыпного тифа (риккетсии Провачека) не размножается на искусственных питательных средах. Поэтому вакцину приходилось приготовлять из тканей животных, восприимчивых к сыпному тифу (обезьяны, морские свинки), или из насекомых-переносчиков этого заболевания (платяная вошь).
Чтобы вакцина была активной, необходимо присутствие в ней весьма больших количеств сыпнотифозных микробов. Морская свинка и обезьяна таких количеств не давали. Поэтому неудивительно, что первая вакцина, получившая практическое распространение, приготовлялась из платяных вшей, в эпителии кишечника которых могут интенсивно размножаться риккетсии Провачека. Методика приготовления такой вакцины разработана Вейглем. В лабораториях искусственно разводят большие количества вшей. Они содержатся в специальных кормушках и вскармливаются на здоровых людях-донорах. Взрослые вши, взятые из кормушек, заражаются вирусом сыпного тифа с помощью клизмы: через тонкий стеклянный капилляр р прямую кишку насекомого вводят эмульсию из мозга больной морской свинки или из растертых кишечников сыпнотифозных вшей. Зараженные таким образом насекомые повторно
вскармливаются на людях, переболевших сыпным тифом или же предварительно вакцинированных против него. Через 8 дней, когда риккетсии дают обильный .рост в кишечнике вшей, последний удаляют. Взвесь из кишечников вшей, растертых в ступке со слабым раствором карболовой кислоты или формалина, и является вакциной Вейгля. Для полной иммунизации одного человека Вейгль берет от 80 до 120 кишечников. Вакцина вводится в 3 приема с промежутками в 7—10 дней.
Основной недостаток вакцины Вейгля — исключительная сложности изготовления, ограничивающая масштабы практического использования этого ценного препарата. В СССР проф. Пшеничников сильно упростил методику Вейгля: вши вскармливаются кровью через искусственные мембраны, а не на людях. Таким же путем происходит их заражение. Вакцина Вейгля весьма эффективна: привитые люди болеют значительно реже непривитых и в случае заболевания легко переносят сыпной тиф. Вакцина готовится из личинок и нимф.
Второй тип вакцины предложен французскими ученым« Дюраном, Жиру и Спарроу. Им удалось приучить возбудителя сыпного тифа к легким белых мышей и вызвать у этих животных смертельную пневмонию. Под микроскопом в легком больных или погибших мышей находят огромные количества риккетсий Провачека. Для приготовления вакцины такие легкие растирают в ступке, освобождают с помощью центрифуги от грубых частиц, после чего концентрируют риккетсий в осадке дополнительным интенсивным центрифугированием. 'Из осадка готовят вакцину, разводя его раствором формалина. Легкие одной мыши обеспечивают ¡прививочный материал на 5 человек. Вакцина эта безвредна. При трехкратном введении в организм человека она стимулирует иммунитет, понижающий как опасность заражения, так и тяжесть его. •
В СССР легочная вакцина французских ученых усовершенствована и проверена на людях проф. М. К. Кронтовской и М. М. Маевским. Но и этот бакпрепарат сравнительно мало практичен: для получения большого количества вакцины необходимы многие тысячи дефицитных белых мышей.
Американский бактериолог Кокс предложил приготовлять сыпнотифозную вакцину из развивающихся куриных зародышей. Свежие куриные яйца выдерживают в инкубаторе при температуе 38,5° и обильном увлажнении воздуха. В этих условиях куриный зародыш хорошо развивается, превращаясь через 21 день в цыпленка. Для вакцины нужно брать куриные зародыши в возрасте 5—8 дней. Через отверстие в скорлупе вводится небольшое количество заразного материала с таким расчетом, чтобы микробы сыпного тифа оказались внутри желточного мешка, занимающего у молодого эмбриона наибольшую часть яйца. Зараженные яйца снова помещают в инкубатор при температуре 35—37°. Риккетсии Провачека хорошо размножаются в клетках желточного мешка. Через 4 дня яйца вскрывают, оболочки желточного мешка отмывают от желтка и измельчают встряхиванием с бусами. После этого эмульсию из тканей желточного мешка разводят слабым раствором формалина и выдерживают около 15 дней в леднике до полной гибели возбудителя. Вакцину фильтруют через марлю, разливают по ампулам и проверяют на стерильность.
Вакцина Кокса не уступает по своей эффективности французской вакцине Дюрана-Спарроу. Для ее изготовления необходимы только точные термостаты и опытные руки. Эта вакцина выгодно отличается 'полным отсутствием в ней посторонних микробов, всегда имеющихся в легких бел1>1х мышей, а тем более в кишечниках вшей.
Всесоюзный институт экспериментальной медицины проводит в настоящее время большую работу по усовершенствованию вакцины Кокса
и массовому ее производству для (предупреждения сыпного тифа среди наиболее угрожаемых контингентов населения.
В обстановке напряженной борьбы с фашистскими захватчиками крупнейшее значение приобретает охрана населения от распространения сыпного тифа. Творческая инициатива советских врачей и ученых особенно важна на этом участке народного здравоохранения.
Проф. И. Е. МИНКЕВИЧ
vVA ьактерии группы coli и их санитарно-
показательное значение1
Из кафедры микробиологии Военно-медицинской академии Красной Армии им.
С. М. Кирова
История равития учения о кишечной палочке как индикаторе фекального загрязнения насчитывает уже около полустолетия. В начале 90-х годов прошлого века Теобальд Смит и Фрейденрейх для установления фекального загрязнения воды впервые предложили бродильные методы обнаружения В. coli — прототипы современного способа определения ко-ли-титра Эйкмана-Булира и его различных модификаций.
Взгляд на кишечную палочку как санитарный показатель утвердился яе сразу. Наряду с мнением большинства исследователей, видевших в бактериях coll истинных показателей фекального загрязнения в силу исключительно кишечного происхождения этих микроорганизмов, выдвигалась и противоположная, так называемая убиквита-ристская точка зрения, трактовавшая бактерии типа coli как микробы, не только свойственные кишечному каналу человека и животных, но и повсеместно распространенные в природе независимо от фекального загрязнения, почему показательное значение этих бактерий отрицалось. Точка зрения убиквитаристов поддерживалась некоторыми весьма видными представителями гигиенического и бактериологического мира. Достаточно привести имена Гертнера и Крузе.
Однако систематическое и планомерное изучение границ распространения кишечной палочки в природе и сопоставление их с зонами фактического фекального загрязнения продемонстрировали необоснованность убиквитаристской точки зрения. Обстоятельные исследования Конриха, Федерольфа и ряда других авторов, в том: числе наших отечественных исследователей Мордберга, Горовиц-Власовой и др., с полной убедительностью показали, что чем интенсивнее фекальное загрязнение почвы, воды и других объектов, тем регулярнее и обильнее находки в них В. coli, и, наоборот, вне зон фекального загрязнения находки этих бактерий становятся редкостью. Таким образом, точка зрения интестиналистов (сторонников строго кишечного происхождения кишечной палочки) восторжествовала, и роль В. coli как индикатора фекального загрязнения получила всеобщее признание.
В 20—30-х годах нашего столетия отзвуки убиквитаристской доктрины вновь появились в модернизированной форме — в 'виде так называемого дуалистического учения американской бактериологической школы. Апологетами «новой» доктрины в первую очередь выступили Макс Левин и Стюзрт Козер. Последний, как известно, является автором нитратного диференциального теста, который за-хлючается в том, что при посевах на синтетическую минеральную среду, содержащую в качестве единственного источника углерода лимоннокислую соль натрия, одни разновидности бактерий группы coli не могут развиваться, другие же, способные ферментировать лимоннокислую соль, дают в названной среде обильный рост.
Приняв за основу диференцирования разновидностей кишечной палочки способность микробов продуцировать ацетилметилкарбинол в содержащих глюкозу жидких питательных средах (открывается реакцией Фогес-Проскауэра), а также конечную pH в отживающих (четырехдневных) культурах на тех же средах (регистрируется, по предложению Клерка, с помощью индикатора метилрота) и, учтя предложенный Козе-ром цитратный тест, М. Левин начал с 1917—1918 гг. развивать уже намечавшееся в более ранних работах других американских авторов (Клерк, Рожерс, Ивен£, Девис)
1 По докладам автора на 4-й Ленинградской конференции по пищевой гигиене З.У.1941 г. и на заседании Московского гигиенического общества 17.У.1941.
v\
