CC BY
33УДК: 616.995.121:612.017.1
НОВОЕ В ХИМИОТЕРАПИИ ЭХИНОККОКОЗА ПЕЧЕНИ
МИРХОДЖАЕВ ИСЛОМ АСРОРОВИЧ
кандидат медицинских наук, доцент кафедры факультетской и госпитальной хирургии, урологии Бухарского Государственного медицинского института. город Бухара Республика Узбекистан. ОНОЮ Ю 0000-0002-9387-0384
ХИКМАТОВ ЖАСУР САФАРОВИЧ ассистент кафедры факультетской и госпитальной хирургии, урологии Бухарского Государственного медицинского института. город Бухара Республика Узбекистан.
ОНОЮ Ю 0000-0002-2793-8627 АННОТАЦИЯ
В статье приводятся данные по изучению действия свободного альбендазола и липосомальной формы альбендазола (ЛФА) у экспериментальных животных с эхинококкозом печени. Установлено, что ЛФА оказывает более эффективное антипаразитарное действие, чем свободная форма альбендазола. ЛФА быстро переносится в зону расположения паразитарной кисты печени и губительно действует на сколексы и протосколексы паразита. В окружности эхинококковой кисты наблюдается лимфоидная и макрофагальная инфильтрация. При этом в печеночной ткани балочное строение сохраняется, отмечается расширение пространство Диссе, гипертрофия ядер гепа-тоцитов. В целом ЛФА открывает новые возможности химиотерапии гидатидозного эхинококка печени.
Ключевые слова: Эхинококк печени, альбендазол, липосо-мальная форма альбендазола, химиотерапия эхинококка печени.
NEW IN CHEMOTHERAPY OF LIVER ECHINOCOCCOSIS
MIRKHODZHAEVISLOM ASROROVICH
Candidate of Medical Sciences, Associate Professor of the Chair of Faculty and Hospital Surgery, Urology, Bukhara State Medical Institute.
the city of Bukhara. Republic of Uzbekistan.
ORCID ID 0000-0002-9387-0384 KHIKMATOV JASUR SAFAROVICH
Assistant Chair of Faculty and Hospital Surgery, Urology, Bukhara
State Medical Institute. the city of Bukhara. Republic of Uzbekistan.
ORCID ID 0000-0002-2793-8627 ABSTRACT
The article provides data on the study of the action of free albendazole and the liposomal form of albendazole (LFA) in experimental animals with liver echinococcosis. It was found that LFA has a more effective antiparasitic effect than the free form of albendazole. LFA is quickly transferred to the area of the parasitic cyst of the liver and has a detrimental effect on the scolexes and protoscolexes of the parasite. In the circumference of the echinococcal cyst, lymphoid and macrophage infiltration is observed. At the same time, in the hepatic tissue, the beam structure is preserved, the expansion of the Disse space, hypertrophy of the hepatocyte nuclei are noted. In general, LFA opens up new possibilities for chemotherapy of hydatid liver echinococcus.
Key words: Echinococcus of the liver, albendazole, liposomal form of albendazole, chemotherapy of echinococcus of the liver.
ЖИГАР ЭХИНОККОКОЗИ КИМЁТЕРАПИЯСИДА ЯНГИЧА
КАРАШЛАР МИРХОДЖАЕВ ИСЛОМ АСРОРОВИЧ
Т.ф.н., Факультет ва госпитал хирургия, урология кафедраси доценти, Бухоро давлат тиббиёт институти,
Бухоро, Узбекистон. ОИОЮ Ю 0000-0002-9387-0384
ХИКМАТОВ ЖАСУР САФАРОВИЧ
Факультет ва госпитал хирургия, урология кафедраси ассистенти, Бухоро давлат тиббиёт институти, Бухоро,
Узбекистон. ОНОЮ Ю 0000-0002-2793-8627 АННОТАЦИЯ
Мацолада эркин ва липосомал богланган альбендазолнинг (ЛФА) цайвонлардаги экспериментал жигар эхинококкозидаги таъсири тугрисидаги маълумотлар келтирилган. Аницланишича, ЛФА нинг антипаразитар таъсири кучлироц. У жигарнинг паразитар кистаси жойлашган жойга тезроц етиб боради ва паразитнинг сколекслари, протосколексларига цалокатли таъсир курсатади. Эхинокок кистаси атрофида лимфоид ва макрофагли инфильтрация пайдо булади. Шунингдек, жигарда гепатоцит-ларнинг тусицли жойлашуви сацланиб колинади, Диссе бушлиги кенгаяди, гепатоцитлар ядроси гипертрофияланади. Умуман олганда, ЛФА жигарнинг гидатидоз эхинококкининг кимётера-пиясида янги имкониятларни очиб беради.
Калит сузлар: жигар эхинококки, альбендазол, альбендазолнинг липосомал шакли, жигар эхинококкининг кимётерапияси.
Введение. Консервативное лечение больных однокамерными и многокамерными формами эхинококкоза, относящихся к наиболее тяжелым и распространенным гельминтозам человека, до настоящего времени относится к числу сложных проблем. Применение антипаразитарных препаратов альбендазола, мебендазола, флубен-дазола требует длительного лечения - [2.; 1]. Вышеуказанные препараты при ежедневном и длительном пероральном применении (до 2-3 месяцев) вызывают на 90-96% задержку роста ларвоцист, гибели отдельных конгломератов паразита - [1].
Период полувыведения препарата альбендазола имеет значительный разброс (от 1 ч до 9 ч) - [2]. К факторам, определяющим эффективность терапии альбендазола помимо объема, локализации, множественности поражения, длительности болезни и других, следует отнести управляемый фактор - уровень содержания препарата в плазме в зависимости от всасывания его в кишечнике. С целью повышения биодоступности альбендазола многие авторы предлагают повышение суточной дозы препарата при лечении экспериментального эхинококкоза.
А.М. Лурье (1987) предложил сочетать альбендазол с фосфолипидами, что приводило к повышению биодоступности препарата за счет повышения всасывания из желудочно-кишечного тракта. При этом в крови обеспечиваются пролонгировано более высокие уровни препарата. Однако, поиск более эффективных методов лечения препаратами пролонгированного действия и с меньшим числом побочных действий остается актуальной задачей.
В настоящее время показано, что лекарственные препараты, заключенные в липосомы, могут быть защищены от периферического метаболизма. При этом увеличивается их эффективность за счет позволяет снижать их терапевтические дозы - [4; 5; 6; 7]. В связи с этим в настоящем исследовании была поставлена цель разработать липосомальную форму альбендазола (ЛФА) для повышения эффективности транспортировки препарата в зону, пораженную эхинококком печень, увеличения его концентрации в патологическом очаге, снижения побочных эффектов препарата. В настоящей работе проводилось сравнительное изучение влияния свободного альбендазола и инкапсулированного в малые однослойные липосомы (МОЛ) альбендазола на течение и развитие экспериментального эхинококкоза печени.
Материал и методы. Эксперименты проведены на 40 кроликах породы Шиншилла с исходным весом 2200-3500 гр. Моделирование экспериментального эхинококкоза печени проводили по предложенной нами методике (патент на изобретение N 3441- 1996 г.) Животные разделены на 2 группы (по 20 в каждой). В 1 группе-животных с экспериментальным эхинококкозом печени лечили альбендазолом, введенным перорально в дозе 250 мг/кг веса животных в течении 1 месяца.
Во II группе - лечение животных с экспериментальным эхинококкозом печени проводили липосомальной формой альбендазола. Учитывая то, что при внутрибрюшинном введении вышеуказанной формы препарата в 8 раз снижается захват их Купферовскими клетками печени и макрофагами селезенки, нами применен внутривенный путь введения препарата. Животным внутривенно вводили липосомальную форму альбендазола в дозе 250 мг/кг веса животных в течении 1 мес.
Способ приготовления липосомальной формы альбендазола.
Для получения липосом была использована печень барана. Экстракцию липидов проводили модифицированным методом Фольча (1957 г.). Фракционирование фосфолипидов осуществляли в тонких слоях силикагеля марки КСК, содержащего 6,5% гипса, в системе растворителей хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода в соотношении (65:43:14). Для получения малых однослойных везикул (МОВ), липид, растворенный в органическом растворителе, высушивали потоком газообразного гелия до образования тонкой пленки на дне пробирки. К высушенному липиду добавляли препарат альбендазол, растворенный в дистиллированной воде. Встряхиванием гидратировали липид. Таким образом, приготовленную суспензию озвучивали с помощью аппарата УЗДН-1 при частоте 22
кГц (мощностью 3 Вт) в течение 5 мин с интервалом 2-3 мин. Для получения гомогенной фракции МОВ препарат липосом пропускали через миллипорные фильтры. В качестве микроколонки использовали цилиндр разового шприца размером 5 куб. Колонку набивали сефадексом Gм10 и уравновешивали соответствующим буфером. На готовую колонку наносили образец липосом. Колонку помещали в подходящий ротор центрифуги и крутили в течение 5 мин при 200 об/мин. Не включенный в липосому препарат содержался в сефадексе, а образец состоял из липосом, содержащих только включенное вещество, которое измеряли на гамма-счетчике. При этом процент включения препарата в липосому составил 45% от введенной дозы.
Объектами исследования служили эхинококковые кисты, их фиброзная капсула, ткань печени, взятая на различном расстоянии от патологического очага. Материал взят на 3,7,14,21,28 сутки опыта. Контролем служили интактные кролики. Пользовались гистологическими методами исследований.
Результаты и обсуждение. Сравнительный анализ морфологических изменений в печени животных I и II группы позволил выявить определенные различия. В I группе экспериментальных животных на фоне лечения альбендазолом наблюдалось выраженное демаркационное воспаление вокруг имплантата, в глубине печеночной паренхимы появляются очаги гиалиново-капельной дистрофии гепатоцитов с некрозом. Эти данные указывают на токсическое влияние паразитарных очагов печени.
На 14 сутки в этой серии животных не отмечается положительная клиническая динамика от проведенного лечения. Эхинококковая киста печени не уменьшена в размере, содержание ее однородное, хитиновая оболочка утолщена. Наблюдаются участки обсеменения паразитарных кист по всей париетальной брюшине,
большому сальнику, петлям тонкого и толстого кишечника. На 21-28 сутки и в более поздних сроках лечения наблюдалось уменьшение размеров паразитарных кист печени, происходила частичная гибель элементов паразита. При паразитологическом экспресс-методе исследовании эхинококковой жидкости с целью обнаружения зародышевых элементов паразита в ранние сроки эксперимента обнаруживались протосколексы, а на 21-28 сутки последние отсутствовали. При гистологическом исследовании печеночной ткани в окружности паразитарной кисты определяются очаги некроза, воспалительная инфильтрация с преобладанием нейтрофильных лейкоцитов. В гепатоцитах резко выражена баллонная дистрофия, ядра гипер-хромные, иногда в состоянии кариолизиса.
Во второй группе животных на 3 сутки лечения липосомальной формой альбендазола отмечалось отсутствие свободной жидкости в брюшной полости. В области имплантации и инокуляции определяли формирование вокруг эхинококковой кисты нежной фиброзной капсулы. Содержимое кист янтарно-прозрачное, хитиновая оболочка несколько утолщена в размере. Зоны обсеменения в брюшной полости не выявлены. При гистологическом исследовании в окружности паразитарной кисты определяется демаркационный вал, состоящий из макрофагов, лейкоцитов и лимфоцитов. Вокруг очага в печеночной ткани отмечаются минимальные изменения с гиперемией сосудов, небольшим отеком межуточной ткани и активацией Купферовских клеток. Гепатоциты сохраняют балочное строение, цитоплазма их в состоянии мутного набухания.
На 7 день эксперимента животные сохраняют свой первоначальный вес, активные, подвижные, хорошо принимают пишу, шерсть кроликов не опавшая. По вскрытии в брюшной полости не отмечается свободной жидкости, брюшина гладкая, блестящая. Паразитарная киста печени уменьшена в размере, плотно окутана
белесоватой фиброзной капсулой. По вскрытии кисты эхинококковая жидкость уменьшена, отмечается резкое сморщивание хитиновой оболочки. При микроскопии эхинококковой жидкости-сколексов и протосколексов не обнаруживаются. Печеночная ткань на разрезе обычной окраски. При микроскопическом исследовании наблюдается уплотнение хитиновой оболочки паразитарной кисты. Непосредственно вокруг хитина обнаруживаются очаги некроза и кровоизлияния, выраженная инфильтрация ткани лимфо-гистиоцитарными элементами. Печеночная ткань, прилегающая к описанному демаркационному валу, характеризуется выраженным серозным отеком печеночной паренхимы и гипертрофией клеток Купфера с увеличением ядер в объеме и гиперхромией. В гепатоцитах отмечается баллонная дистрофия, печеночные балки деформированы, цитоплазма гепатоцитов мелкозернистая, имеются двуядерные клетки.
На 14 и 21 дни эксперимента состояние животных удовлетворительное, они активные, набирают в весе до 200-300 граммов, охотно принимают пищу. Операционная рана заживает первичным натяжением. При макроскопическом осмотре органов брюшной полости отмечается, что органы без видимых на глаз патологических изменений. В брюшной полости патологической жидкости нет, брюшина гладкая, блестящая. Печень и селезенка не увеличены в размере. Эхинококковая киста печени резко уменьшена в размере, уплотнена, а также окружена плотной фиброзной капсулой. По вскрытии кисты-хитиновая оболочка резко сморщена и припаяна к стенке фиброзной капсулы, отмечается заполнение полости кисты соединительной тканью. При микроскопии -зародышевых элементов эхинококкового паразита не обнаруживаются.
В большинстве случаев на 21 день опыта наблюдалось полное рассасывание или же обызвествление паразитарной кисты. В брюшной полости очагов обсеменения нет. Микроскопическое исследование показало, что в зоне имплантата обнаруживаются прослойки грануляционной и зрелой соединительной ткани с преобладанием волокнистых структур. В этой фиброзной ткани обнаруживаются остатки хитиновой оболочки в виде гомогенной массы, а также детрит эхинококка. В окружности фиброзной капсулы имеются небольшие поля лимфо-гистиоцитарной инфильтрации. В печеночной ткани отмечается гипертрофия Купферовских клеток, гепатоцита в состоянии мутного набухания, ядра их гипертрофированы, что свидетельствует о компенсаторно - приспособительной реакции печеночных клеток. В отдельных случаях в печеночной ткани определяются петрифицированные очаги дочерних эхинококковых пузырей. В участках гибели дочерних эхинококковых кист обнаруживаются активно фагоцитируемые макрофаги, цитоплазма которых заполнена фагоцитированными частичками. На 28 день эксперимента животные активные, подвижные, отмечается прибавление в весе до 300-350 гр. Брюшина гладкая, блестящая, киста печени резко уменьшена в размере, уплотнена, местами кальцифицирована. По вскрытии кисты ткань режется с трудом, фиброзная капсула резко утолщена. Хитиновая оболочка лизирована, замещена плотной соединительной тканью. При микроскопии в патологическом очаге имеются детритные массы эхинококка, а также очаги петрификации. Последние окружены волокнистой фиброзной тканью, что свидетельствует о полном рассасывании эхинококка под действием липосом содержащего альбендазола с замещением соединительной ткани. Вокруг этого очага и в других отделах печени отмечается обычное строение печени. Лишь вокруг трактов остаются небольшие очаги лимфо-гистиоцитарной инфильтрации. В печеночной
паренхиме сохраняется балочное и дольчатое строение. Гепатоциты имеют обычное строение, в большинстве из них определяется двуядерность.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что эффективность химиотерапии эхинококкоза препаратом альбенда-зола ограничена и требует длительного лечения, что соответствует данным других исследователей - [1]. Применение липосомальной формы альбендазола оказывает более эффективное антипаразитарное действие, чем свободная форма препарата. Механизмы этого эффекта заключаются в следующем: липосомы обладают способностью проникать через клетки ретикуло-эндотелиальной системы, аккумулируются в печени, активизируют ее функцию, приводят к гипертрофии и гиперплазии, а также повышают барьерную функцию стромы печени. Липосомальная форма альбендазола быстро переносится в зону расположения паразитарной кисты печени и губительно действует на этот очаг, приводит к деструктивным изменениям элементов, уничтожает протосколексы и сколексы паразита. В окружности эхинококковой кисты наблюдается лимфоидная и макрофагальная инфильтрация. В печеночной ткани балочное строение сохранено, отмечается расширение пространства Диссе, гипертрофия ядер гепатоцитов.
Таким образом, применение липосомальной формы альбендазола открывает новые перспективы консервативной химиотерапии гидатидозного эхинококкоза печени вплоть до излечения лабораторных животных от инвазии.
Список литературы:
1. Ахмедов Р.М., Мирходжаев И.А., Муаззамов Б.Б. Диагностика и лечение эхинококкоза // «Сарбурни»- Германия, 211 с., 2012 г.
2.Джаббарова В.И., Коваленко Ф.П., Кротов Л.И. Новый метод скрининга противоэхинококковых препаратов на экспериментальной
модели многокамерного эхинококкоза // Проблемы мед. паразитологии, Сб. науч. трудов - Ташкент, 1986,- С. 19- 20.
3. Лурье А.А., Щербаков А.М. Фармакокинетика мебендазола у человека //Мед. паразитология и паразитарные болезни. - 1987, N4.
4. Мирходжаев И.А. Роль цитокинов в развитии и течении эхинококка печени, //«Биология и интегративная медицина», 2020, №2,с.62-75.
5. Dunnick J.K., Mc-Dougall J.R. Aragon A et.al //J. Nucl Med.-1975 -Vol. 16-P. 483- 487.
6. Gregoriadis G. //In: Liposomes in Biological Systems// Eds. G. Gregoriadis, A. Allison - Chichester NY. Brisbane -Toronto. 19M). P. 2586.
7. Loeb C., Besio G. Mainardi P. el.al Epilepsia-1986,-Vol 27 - P. 98102.
8. Mori N., Ohta S-J.//Brain Res - 1992 Vol. 593- P. 329-331.
9. Yokoyama H., Mori N. Osonoe K. e.t.al Brain Res. 1992,-Vol 572 P.273-275.
