CC BY
23
УДК 616.831.7-005.1-005.4-036.11-08
НЕЙР0ПР0ТЕКТ0РНЫЕ ЭФФЕКТЫ С0ЛК0СЕРИЛА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ МОЗГА У КРЫС
Волохова Г.А., Стоянов А.Н.
Одесский государственный медицинский университет
Представлены результаты экспериментальных исследований, целью которых является выяснение эффективности нейропротективного действия Солкосерила в условиях ишемического инсульта, вызванного двусторонней перевязкой общих сонных артерий. Показано, что ишемиче-ское повреждение мозга у крыс сопровождается высокой летальностью, выраженным неврологическим дефицитом и моторными нарушениями, которые проявляются мышечной слабостью, неспособностью принимать естественное положение и осуществлять синхронные координированные движения. Применение Солкосерила в этих условиях оказывает противоинсультное действие, что проявляется предупреждением летальности крыс, нормализацией неврологического статуса и моторной активности животных. Результаты данного экспериментального исследования позволяют предположить целесообразность клинического тестирования эффектов Солкосерила в качестве составного компонента комплексной патогенетической терапии ишемиче-ского повреждения мозга.
Ключевые слова: ишемия мозга, инсульт, Солкосерил, мышечный
Введение
Ишемический инсульт (ИИ) представляет собой важнейшую социально-медицинскую проблему [3, 9, 14, 17]. В мире ежегодно более 10 млн. человек переносят ИИ. В России и Украине заболеваемость инсультом составляет 2.5-3 случая на 1000 населения в год, смертность - 1 случай на 1000 населения [8, 20]. При этом наблюдается "омоложение" инсульта и увеличение его распространенности среди лиц трудоспособного возраста [3]. Среди всех инсультов подавляющее число случаев - 70-85% - составляют ИИ.
Смертность в течение первых 30 суток после ИИ составляет около 30% [9]. Инвалидизация больных обусловлена в большинстве случаев двигательными нарушениями [8-10, 14, 16]. У 80-90% больных в остром периоде инсульта выявляется гемипарез. Остаточные явления перенесенного ИИ разной степени выраженности и характера отмечаются примерно у 65-70% больных. При этом только 30% больных могут самостоятельно передвигаться в первые недели после перенесенного острого нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) [14, 24]. Принимая во внимание длительный срок потери работоспособности, частые случаи инвалидности пациентов и недостаточно эффективные методы лечения и восстановления отмеченного контингента пациентов, очевидной становится актуальность фундаментальных исследований, направленных на повышение эффективности лечения ишемического поражения мозга.
Раннее и патогенетически обоснованное дифференцированное лечение ИИ в сочетании с целенаправленной профилактикой повторных ОНМК позволят приблизиться к выполнению задач, определенных Европейским регионарным бюро ВОЗ, которые заключаются в снижении
тонус, нейропротекция
летальности в течение первого месяца заболевания до 20% и обеспечении независимости в повседневной жизни через 3 месяца от его начала не менее чем у 70% выживших пациентов. Несмотря на патогенетическую направленность лечения, фармакотерапия ишемического поражения мозга считается недостаточно эффективной.
С учетом этого при лечении и профилактике инсульта широко применяются препараты с нейромодуляторными и нейротрофическими свойствами, улучшающие выраженность пластичных процессов в нервной ткани, ускоряющие образование новых ассоциативных структурных связей, нормализующие метаболические процессы в периферической и центральной нервной системе (ЦНС). А также препараты комбинированного действия (усиливающие ре-паративные и регенерационные процессы, нормализующие метаболизм и микроциркуляцию) [4, 11, 20]. Одним из фармакологических препаратов, которым свойственны описанные эффекты, является препарат природного происхождения Солкосерил - депротеинизированный гемо-дериват, полученный из крови молодых телят.
Целью работы явилось изучение нейропротек-торных эффектов Солкосерила и его влияние на мышечную активность в условиях экспериментальной ишемии мозга.
Материалы и методы исследования
Исследования проводились в условиях хронического эксперимента на 76 половозрелых белых крысах линии Вистар массой от 180 до 220 г, которых содержали в индивидуальных боксах с естественной 12-часовой сменой света и темноты, влажностью воздуха 60%, температурой 22+1 °С, со свободным доступом к воде и пище, в соответствии с указаниями, изложенными в «Основных методах изучения токсично-
* Работа выполнена в рамках НДИ кафедры нейрохирургии и неврологии Одесского государственного медицинского университета "Состояние и дисфункция вегетативной нервной системы на различные уровни ее организации при церебро-васкулярной патологии" (№ госрегистрации 0105и008877).
сти потенциальных фармакологических препаратов» (Фармкомитет Украины, Киев, 2000). С целью приручения, крыс перед началом эксперимента держали в руках по 2-3 мин в течение 5 дней, что oблeгчaлo пocлeдyющиe экспериментальные иccлeдoвaния c животными [2]. Работу с лабораторными животными проводили с соблюдением основных нормативных и этических требований к проведению опытов с участием экспериментальных животных разных видов. Данные исследования были проведены в соответствии с требованиями комиссии ОГМУ по этическому проведению экспериментов.
Ишемию мозга (ИМ) в эксперименте воспроизводили следующим образом: в условиях эфирного рауш-наркоза крысам производили двустороннюю перевязку общих сонных артерий [18, 19, 22, 26, 27]. Эксперименты выполняли в сле-
дующих группах животных: крысам первой группы с ИМ в течение последующих 14 дней внут-рибрюшинно (в/бр) вводили 0.5 мл физиологического раствора NaCl (n=18). Животным второй и третьей групп (по 21 крысы в каждой) с ИМ в течение последующих 14 дней в/бр вводили Солкосерил (Valeant Pharmaceuticals Switzerland GmbH, Швейцария) в дозах, соответственно, 40 мг/кг и 80 мг/кг. С учетом важности начала лечения ИМ как можно раньше, первый раз Солкосерил вводили через 60 мин с момента индукции ИМ. Введение препарата осуществляли один раз в день, утром, в интервале между 9.00 и 10.00. Выделяли также контрольную группу (n=8) и группу ложнооперированных (n=8) крыс, которым под эфирным рауш-наркозом разрезали кожу, обнажали доступ к общей сонной артерии и ушивали рану (Рис. 1).
День 1 Опытная Контроль, интактные Ложноопериро-
группа, n=60 крысы, n=8 ванные крысы, n=8
День 1 Ишемия Ишемия моз- Ишемия мозга Физиологиче- Физиологический
+ 1 час мозга + физ. га + Солкосе- + Солкосерил ский раствор раствор
р-р, n=18 рил (40 мг/кг), (80 мг/кг), n=21
n=21
День 1 День 4 День 7 День 10 День 14 Выживаемость экспериментальных животных Определение неврологического дефицита (% по шкале МсСгош) Определение болевой чувствительности Поведенческие тесты: 1. Определение тонуса мышц. 2. Тест с удержанием позы на горизонтальной перекладине 3. Тест на координацию движений
Рис. 1. Схема проведения экспериментальных исследований по
Через 2 часа после двусторонней перевязки сосудов, а также через 4, 7, 10 и 14 дней с момента ИМ животных наблюдали на открытой площадке и определяли число крыс, сохраняющих вертикальную позу, их болевую чувствительность, длительность удерживания неудобной позы на спине или на боку, а также летальность. Дополнительно исследовали динамику изменений мышечной активности и координационных движений, неврологический статус.
Болевые реакции у животных оценивали количественно по трем баллам в пробе с защипыванием кончика хвоста корнцангом используя четырехбалльную шкалу [25]: 0 баллов - животные не реагируют на защипывание; 1 балл - в ответ на раздражитель возникает вокализация и/или кратковременная локомоция; 2 балла - живот-
изучению нейропротекторных эффектов Солкосерила.
ное поворачивается в сторону действия раздражителя; 3 балла - животное локализует источник боли, набрасывается на корнцанг, пытается освободиться. Мышечную активность определяли по времени, в течение которого крысы передними и задними лапами способны были удерживаться на двух горизонтально расположенных палочках [25]. Тест на координацию движений заключался в способности крыс удерживаться на горизонтально вращающемся стержне (ротароде) диаметром 25 мм, длиной 60 см, разделенном при помощи 5 дисков на 6 отсеков [23]. Определяли количество животных, которые смогли удержаться на вращающемся с частотой 15 оборотов в минуту стержне в течение 120 сек. Неврологический статус оценивали при подсчете выраженности неврологического де-
фицита по шкале оценки инсульта (stroke-index) McGrow в модификации И.В.Ганнушкиной [7].
Для обработки полученных данных использовали одновариантный критерий ANOVA, сопровождавшийся в случае соответствия критерию достоверности тестом Neuman-Keuls. При неравномерном распределении признаков достоверность определяли с помощью непараметрического теста Крушкал-Валиса. P<0.05 выбирали критерием достоверности.
Результаты и их обсуждение
Через 1 час после двусторонней перевязки общей сонной артерии погибли 9 из 18 крыс с ИМ, лечение которым не производилось (50%; группа №1; Рис. 2; P<0,05 по сравнению с аналогичными контрольными наблюдениями). При этом в группе крыс с ИМ, которым ввели Солко-серил в дозе 40 мг/кг, погибли 8 из 21 крысы (38%, группа №2; P<0,05 по сравнению с аналогичными контрольными наблюдениями). В группе крыс с ИМ, которым вводили Солкосерил в дозе 80 мг/кг, (группа №3) погибла 1 крыса -
выживаемость составила 90% (Р<0,05 по сравнению с аналогичными наблюдениями у крыс с ИМ без лечения; Рис. 2). При исследовании в дальнейшие временные интервалы прослеживалась аналогичная тенденция гибели и выживаемости животных. В частности, через 7 дней с момента воспроизведения ИМ выжила 1 крыса из 18 в той группе, в которой лечение животным не проводилось (Р<0,05 по сравнению с аналогичными контрольными наблюдениями). В группе с ИМ с введением Солкосерила (40 мг/кг) выжили 2 крысы из 21 (Р<0,05 по сравнению с аналогичными контрольными наблюдениями), а в случае введения Солкосерила в дозе 80 мг/кг выживаемость составила 81% (Р<0,01 по сравнению с аналогичными наблюдениями у крыс с ИМ без лечения; Рис. 2). Через 10 и 14 дней после воспроизведения ИМ погибли все крысы в 1-й и 2-й группах, а группе №3 - 17 и 14 крыс из 21, соответственно (качественные различия, (Р<0,01, критерий Крушкал-Валлиса).
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
□ Контроль ИИМ
И ИМ + солкосерил (40 мг/кг) НИМ + солкосерил (60 мг/кг)
#
*
■В
In
■в
In
ШШ
##
*
а
10
14
Рис. 2. Влияние Солкосерила на выживаемость крыс после ИМ По оси ординат - количество крыс в группах, % По оси абсцисс - дни с момента воспроизведения ИМ
Примечания: * - Р<0,01 - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими в контрольных наблюдениях; # - Р<0,05, ## - Р<0,01 - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими у крыс с ИМ без лечения и с ИМ на фоне введения Солкосерила в дозе 40 мг/кг (статистический критерий Крушкал-Валис).
В течение первых суток после двусторонней случаев, что имело значительное различие по перевязки общей сонной артерии у всех 9 крыс сравнению с аналогичными показателями у наблюдались неврологические нарушения (вя- крыс с ИМ без лечения (Р<0,05; таблица 1). Че-
лость, замедленность движений, слабость конечностей, в том числе разной степени выраженности парез и паралич конечностей; таблица 1). У крыс 2-й группы указанные выше неврологические нарушения были выражены аналогично. У крыс 3-й группы сильные неврологические нарушения, проявляющиеся в виде манежных движений по кругу, парезов и параличей конечностей, были зарегистрированы в 21% и 11%
рез 4 и 7 дней после воспроизведения ИМ выраженность неврологических нарушений у крыс 1-й и 2-й групп была идентичной; у крыс 3-й группы отмеченные показатели ослабевали. Подобная динамика вплоть до частичного восстановления моторной функции конечностей была зарегистрирована через 10 и 14 дней (таблица 1).
1
4
7
Таблица 1
Влияние Солкосерила на выраженность неврологического дефицита в процентах у крыс после ИМ по шкале МсОгош в модификации И.В.Ганнушкиной
Группы животных Вялость, замед- Слабость Манежные дви- Парез 1-4 ко- Паралич
ленные движения движении жения нечностей 1-4 конечностей
1 час после ИМ
Контроль, п=8 25 13 0 0 0
ИМ, п=9 100** 100** 56** 56* 33**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=13 85* 92** 54 46 28
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=19 68* 37# 21# 11# 0#
4 день после ИМ
Контроль, п=8 13 0 0 0 0
ИМ, п=3 100** 100** 67** 67** 33**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=5 100** 80** 60** 60** 0
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 41# 29## 12## 0## 0#
7 день после ИМ
Контроль, п=8 0 0 0 0 0
ИМ, п=1 100** 100** 0 0 100**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=2 100** 100** 50** 50** 50**
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 29## 24## 12## 0 0##
10 день после ИМ
Контроль, п=8 0 0 0 0 0
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 24 12 6 0 0
14 день после ИМ
Контроль, п=8 0 0 0 0 0
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=14 14 14 7 0 0
Примечания: (в табл. 1 и 2) на 10 день после ИМ погибли все крысы 1-й и 2-й групп. * - Р<0.05, ** - Р<0.01 (статистический критерий Крушкал-Валис) - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими в контрольных наблюдениях. # - Р<0.05, ## - Р<0.01 (статистический критерий Крушкал-Валис) - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими у крыс с ИМ без лечения.
Похожая тенденция была прослежена нами в случае исследования ответа на нанесение болевого раздражения животным исследуемых групп, что представлено на рис. 3. В течение всего срока наблюдения (14 дней) ложноопери-рованные животные интенсивно вокализовали при защипывании кончика хвоста корнцангом и локализовали источник раздражения. Крысы с ИМ через 1 час не вокализовали в данных условиях и практически не совершали попыток избежать действия болевого стимула. Средняя выраженность болевой реакции у крыс 1-й группы составила 0.5+0.1 балл (Р<0,05), 2-й группы -1.0+0.2 балл (Р<0,05) и 3-й группы - 1.5+0.2 балл (Р<0,05 по сравнению с таковыми показателями у крыс с ИМ без лечения; рис. 3). В дальнейшем выраженность ответной реакции крыс на нанесение болевого раздражения не различалась существенно в группах ложнооперированных животных и таковых с ИМ с введением Солкосерила в дозе 80 мг/кг.
После придания неудобной позы на спине крысы с ИМ через 1 час оставались без движе-
ния в таком положении в течение 580,7+44,6 с, что в 58 раз превышало аналогичный показатель у ложнооперированных животных (Р<0,001; таблица 2). Солкосерил не влиял существенно на величину исследуемого показателя, поскольку крысы, которым его вводили в дозах 40 и 80 мг/кг, оставались в неудобном положении на спине в течение 490,5+38,4 с и 390,8+35,6 с, соответственно, что также существенно превышало соответствующий контрольный показатель (Р<0,001). Через 4 дня после воспроизведения ИМ у крыс с введенным Солкосерилом (80 мг/кг) величина исследуемого показателя была равна 165,1+18,5 с, что в 3.7 раза было меньше соответствующего времени нахождения в неудобной позе крыс с ИМ без лечения (Р<0,01). При дальнейшем наблюдении (7-14 дни с момента воспроизведения ИМ) время нахождения в неудобной позе не различалось существенно с таковым в контрольных наблюдениях (таблица 2).
□ Контроль
□ ИМ + солкосерил (40 мг/кг)
□ ИМ
□ ИМ + солкосерил (60 мг/кг)
1,5
0,5
*
* *
Рис. 3. Влияние Солкосерила на выраженность болевой реакции у крыс после ИМ По оси ординат - выраженность ответной реакции на болевое раздражение, баллы По оси абсцисс - дни с момента воспроизведения ИМ
Примечания: * - Р<0,01 - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими в контрольных наблюдениях; # - Р<0,05, - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими у крыс с ИМ без лечения (статистический критерий Крушкал-Валис).
Таблица 2
Влияние Солкосерила на мышечную активность и на координацию движений крыс после ИМ
3
2,5
2
0
4
7
Группы животных Время сохранения не- Количество крыс, удержав- Количество крыс,
удобнй позы, с шихся на двух горизонтальных перекладинах, % удержавшихся на вращающемся стержне, %
1 час после ИМ
Контроль, п=8 10,2+1,0 88 75
ИМ, п=9 580,7+44,6*** 0** 0**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=13 490,5+38,4*** 8** 0*
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=19 390,8+35,6*** 63# 42#
4 день час после ИМ
Контроль, п=8 2,1+0,2 100 100
ИМ, п=3 610,4+55,7*** 33* 0**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=5 540,7+43,8*** 40* 25*
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 165,1+18,5## 71# 59##
7 день после ИМ
Контроль, п=8 1,4+0,1 100 100
ИМ, п=1 635 0** 0**
ИМ + Солкосерил (40 мг/кг), п=2 577,1+49,7*** 50* 0**
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 92,3+8,8## 88## 71##
10 день после ИМ
Контроль, п=8 1,1+0,1 100 100
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=17 35,1+3,4 94 71
14 день после ИМ
Контроль, п=8 1,1+0,1 100 100
ИМ + Солкосерил (80 мг/кг), п=14 27,2+4,2 93 86
Примечания: * - Р<0.05, ** - Р<0.01, *** - Р<0.0001 (критерии Крушкал-Валис и АНОВА - при высчитывании времени сохранения неудобной позы) - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими в контрольных наблюдениях. # - Р<0.05, ## - Р<0.01 (статистический критерий Крушкал-Валис и АНОВА - при высчитывании времени сохранения неудобной позы) - достоверные различия исследуемых показателей по сравнению с такими у крыс с ИМ без лечения.
Через 1 час ослабление мышечного тонуса отмечалось у 9 крыс из 9 (100%) с ИМ без лечения (Р<0,01 по сравнению с контрольными животными), у 12 крыс из 13 с введением Солкосе-рила (40 мг/кг; Р<0,01 по сравнению с контрольными животными) иу 13 из 19 крыс с введением Солкосерила (80 мг/кг; Р<0,05 по сравнению с крысами с ИМ без лечения; таблица 2). Через 4 дня после ИМ на двух горизонтально расположенных перекладинах удержались 1 крыса из 1-й группы, 2 - из 2-й и 12 - из 3-й (таблица 2). В дальнейших наблюдениях было зарегистрировано повышение мышечного тонуса у крыс с ИМ, которым вводили Солкосерил в максимальной дозе, что не различалось существенно с аналогичными контрольными показателями.
Нарушения координации движения отмечались у всех крыс с ИМ через 1 час после её воспроизведения (таблица 2). Солкосерил в максимальной дозе способствовал тому, что на вращающемся стержне (ротароде) в течение 120 с смогли удержаться 8 животных из 19 (Р<0,05). На 4 день исследования нарушение координации движения отмечались у 100% крыс 1-й группы, у 75% крыс 2-й группы и 41% крыс 3-й группы. В дальнейшем было зарегистрировано существенное ослабление нарушений координации движений под влиянием Солкосерила (80 мг/кг, таблица 2).
Таким образом, проведенные исследования показали, что течение ИМ у крыс сопровождается высокой летальностью, выраженным неврологическим дефицитом и моторными нарушениями, которые проявляются, прежде всего, мышечной слабостью, неспособностью принимать естественное положение и осуществлять синхронные координированные движения. Подобные «выпадения» функций были зарегистрированы и в исследованиях других авторов, что подтверждает адекватность использованной нами модели ИМ [10, 17].
Таким образом, в результате проведенных исследований показаны противоинсультные эффекты Солкосерила, которые были отчетливо выражены в предупреждении высокой летальности крыс, нормализации неврологического статуса и моторной активности животных. Полученные результаты, по нашему мнению, в дискуссионном аспекте следует разделить на три основные части.
Во-первых, показанные нейропротекторные свойства Солкосерила, согласуются с показанными его защитными эффектами в условиях травматического повреждения мозга [5, 6, 13]. При этом, следует заметить, что в настоящих исследованиях эффективной оказалось доза 80 мг/кг, в то время как в условиях экспериментальной черепно-мозговой травмы Солкосерил был эффективен в меньшей дозе. Препарат начинал оказывать защитные эффекты уже в течение первых суток с момента воспроизведения ИМ.
Во-вторых, Солкосерил нормализовал в основном неврологический дефицит и те моторные функции, для реализации которых достаточно активности срединных структур мозга и его подкорковых образований. Логичным будет предположить наличие нормализующего нейро-протекторного влияния Солкосерила в условиях ИМ и на кору больших полушарий, однако, для подтверждения этого следует провести исследования, в частности, изучить влияние препарата на моторную активность в тесте «открытое поле», а также на выраженность когнитивных функций животных.
В третьих, интересным является вопрос о механизмах реализации нейропротекторных эффектов Солкосерила. В этом аспекте важно напомнить, что для данного препарата показаны его антиоксидантные эффекты, ускорение под его влиянием репаративных и регенерационных процессов в поврежденных тканях путем стимуляции пролиферации клеток и их миграции непосредственно в очаг поражения [1], а также облегчение утилизации кислорода и стимуляцию транспорта глюкозы клетками в условиях гипоксии и истощения метаболических ресурсов [12, 15, 21]. Учитывая сложный каскад патохимиче-ских реакций, лежащих в основе ишемического повреждения мозга, возможно предположить общее нормализующее действие Солкосерила, которое может лежать в основе реализации его нейропротекторных эффектов.
Важно, что нейропротекторные эффекты Солкосерила развивались в случае его раннего применения - в наших условиях - в течение 60 минут после воспроизведения экспериментальной ИМ.
Следовательно, по результатам проведенных исследований с использованием модели экспериментальной ИМ можно предположить целесообразность клинического тестирования эффектов Солкосерила в качестве составного компонента комплексной патогенетической терапии ишемического повреждения мозга.
Выводы
1. Ишемическое повреждение мозга у крыс сопровождается высокой летальностью, выраженным неврологическим дефицитом и моторными нарушениями, которые проявляются мышечной слабостью, неспособностью принимать естественное положение и осуществлять синхронные координированные движения.
2. Применение Солкосерила оказывает противоинсультное действие, что проявляется предупреждением летальности крыс, нормализацией неврологического статуса и моторной активности животных.
3. Солкосерил начинал оказывать защитные эффекты уже в течение первых 60-мин с момента воспроизведения ИМ.
Эффективной дозой препарата является 80 мг/кг.
4. Одним из механизмов реализации ней-ропротекторного эффекта Солкосерила в условиях экспериментальний ИМ является общее нормализующее действие Солкосерила.
5. Результаты экспериментального исследования эффективности Солкосерила в условиях ИМ у крыс позволяют предположить целесообразность клинического тестирования его эффектов в качестве составного компонента комплексной патогенетической терапии ишемического повреждения мозга.
Литература
1. Бульйон В.В. Цикпоферон и солкосерил в лечении дуоденальных язв у крыс / В.В. Бульйон, Л.К. Хниченко, Н.С. Сапронов [и др.] // Эксп. клин. фармакол. - 2001. - Т.64, №6. - С. 41-44.
2. Буреш Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д. Хьюстон. - М. : Высшая школа, 1991. - 400 с.
3. ВЫичук С.М. Гострий ¡шемнний ¡нсульт / С.М. Вшичук, М.М. Прокотв. - К. : Наукова думка, 2006. - 286 с.
4. ВЫичук С.М. Комплексна нейропротекцт в гострий перь од ¡шемнного ¡нсульт1 / С.М. ВЫичук, О.А. Пустова, В.О. Мохнач [та ¡н.] // Медицина неотложных состояний. -2008. - №4. - С. 1-7.
5. Волохова Г.А. Влияние Солкосерила на вызванные черепно-мозговой травмой электрографические изменения и поведение крыс / Г.А. Волохова, А.Н. Стоянов // Межд. неврол. журн. - 2008. - №2 (18). - С. 51-57.
6. Волохова Г.А. К вопросу об экспериментальной разработке комплексной патогенетической терапии травматического повреждения мозга / Г.А. Волохова, А.Н. Стоянов // Патолопя. -2008. -Т.5, №2. -С.126.
7. Ганнушкина И.В. Функциональная ангиоархитектоника головного мозга / И.В. Ганнушкина. - М., 1977. - 119 с.
8. Горбачева Ф.Е. Лечение церебрального инсульта / Ф.Е. Горбачева // Рос. мед. журнал. - 2006. -№14. - С. 436438.
9. Гусев Е.И. Проблема инсульта в России / Е.И. Гусев // Журн. неврол. психиат. (Прил. "Инсульт"). - 2003. - №9. -С. 3-7.
10. Гусев Е.И. Ишемия головного мозга / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова. - М. : Медицина, 2001. - 328 с.
11. Гусев Е.И. Нейропротективная терапия ишемического инсульта / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова. - М. : Атмосфера, 2002. - С.3-7.
12. Карович-Билинска А. Оценка показателей окислительного стресса в течение лечения беременных женщин с внутриутробной задержкой роста / А. Карович-Билинска, Дж. Сузин, П. Сирожевски // Ме<1 Бс1. МопК. - 2002. -Уо!.8, N3. - Р. 211-216.
13. Марусанов В.Е. Солкосерил в интенсивной терапии тяжелой черепно-мозговой травмы / В.Е. Марусанов, А.Г. Мирошниченко, С.А. Николау [и др.] // Вестн. хир. им. И.И.Грекова. - 2000. - T.159, №3. - С. 37-39.
14. Никифоров A.C. Клиническая неврология. Учебник. В 3 томах. Т. II / A.C. Никифоров, А.Н. Коновалов, Е.И. Гусев.
- М. : Медицина, 2002. — 792 с.
15. Руденко А.Ю. Солкосерил - новый препарат для патогенетического лечения пациентов с судорожными формами цереброваскулярной патологии / А.Ю. Руденко, Л.М. Башкирова // Лкарська справа. - 2003. - №7. - С. 110113.
16. Скворцова В.И. Проблема инсульта в Российской Федерации / В.И. Скворцова, Л.В. Стаховская, Н.Ю. Айриян // Сердце. - 2005. - №6. - С.309-311.
17. Скворцова В.И. Первичная профилактика инсульта/ [ В.И. Скворцова, И.Е. Чазова, Л.В. Стаховская, H.A. Пря-никова]. - М. : Медицина, 2006. - 352 с.
18. Слесарчук В.Ю. Нейропротекторы ефекти препарата кверцетину при гострому порушены мозкового кровооб1гу в експеримент1 / В.Ю. Слесарчук, В.Й. Мамчур // Одесь-кий медичний журнал. - 2008. -№4 (108). - С. 3-6.
19. Хугаева В.К. Нарушение мозгового кровотока при ишемии и его коррекция с помощью лей-энкефалина / В.К. Хугаева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1991.
- Т. 112, №8. - С. 117-120.
20. Черний В.И. Интенсивная терапия критических состояний, обусловленных мозговым инсультом / В.И. Черний, Т.Н. Калмыкова, Е.В. Черний [и др.] : Методические рекомендации. -Киев, 2006. - 57 с.
21. Akaike A. Pharmacological and physiological properties of serofendic acid, a novel neuroprotective substance isolated form fetal calf serum / A. Akaike, H. Katsuki, T. Kume // Life Sci. - 2003. - Vol. 74. - P. 263-269.
22. Capdeville C. Naloxone effect on the neurological deficit induced by forebrain ischemia in rats / C. Capdeville, D. Pruneau, M. Allix [et al.] // Life Sci. - 1986. - Vol.38, N5. - P. 437-442.
23. Christiensen D. Combined systemic administration of the glycine/NMDA receptor antagonist, (+)-HA966 and morphine attenuates pain-related behaviour in a rat model of trigemi-nal neuropathic pain / [D. Christiensen, M. Gautron, G. Guil-baud, V. Kayser] // Pain. - 1999. - Vol.83. - P. 433-440.
24. Pohjasvaara T. Comparison of stroke feature and disability in daily life in patients with ischemic stroke aged 55 to 70 and 71 to 85 years / [T. Pohjasvaara, T. Erkinjuntti, R. Vataja, M. Kaste] // Stroke. - 1997. - Vol.28. - P. 729-735.
25. Myslobodsky M. Convulsant specific architecture of postictal behavioral syndrome in the rat / M. Myslobodsky, O. Kof-man, M. Mintz // Epilepsia. - 1981. - Vol.27, N4. - P. 559568.
26. Nagafuji T. Neurochemical correlates of selective neuronal loss following cerebral ischemia - role of decreased Na+, K+-ATPase activity / T. Nagafuji, T. Koide, M. Takato // Brain Res. - 1992. - Vol.571, N2. - P. 265-271.
27. Shandra A.A. Effects of delta-sleep-inducing peptide in cerebral ischemia in rats / A.A. Shandra, L.S. Godlevskii, A.I. Brusentsov [et al.] // Neurosci. Behav. Physiol. - 1998. - Vol. 28, N.4. - P. 443-446.
Реферат
НЕЙРОПРОТЕКТОРН1 ЕФЕКТИ СОЛКОСЕРИЛА В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОТ1ШЕМ11 МОЗКУ В ЩУР1В Волохова Г.О., Стоянов О.М.
Ключов1 слова: ¡шемт мозку, ¡нсульт, солкосерил, м'язцевий тонус, нейропротекцт
Подаы результати експериментальних дослщжень, метою яких е з'ясування ефективност1 нейропротективноТ дм Солкосерила в умовах ¡шемнного ¡нсульта, спричиненого двобнноТ перев'язкою загальних сонних артерм. Показано, що ¡шемнне ураження мозку в щур1в супроводжуеться високою летальнютю, вираженим невролопчним дефЩитом I моторними порушеннями, як1 проявляются м'язовою слабкютю, нездатнютю приймати природне положения та здмснювати синхроны координоваж рухи. Засто-сування Солкосерила при цьому спричиняе протишсультну д1ю, що проявляеться зменшенням летальност1 щур1в, нормал1зац1-ею невролог1чного статуса та моторноТ активност1 тварин. Результати даного експериментального досл1дження дозволяють припустити доцтьнють кп1н1чного тестування ефект1в Солкосерила в якост1 скпадового компонента комплексно! патогенетичноТ терапп ¡шем1чного ураження мозку.
Summary
NEUROPROTECTIVE EFFECTS OF SOLKOSERYL UNDER THE EXPERIMENTAL CEREBRAL ISCHEMIA IN RATS. Volohova H.O., Stoyanov O.M.
Key words: cerebral ischemia, stroke, Solkoseryl, muscular tonus, neuroprotection.
The researches were aimed to study the effectiveness of Solkoseryl neuroprotection under the conditions of cerebral stroke caused by bilateral ligation of common carotid arteries. It has been demonstrated the cerebral ischemic lesion in rats is usually accompanied with high lethality, pronounced neurological deficiency and motor impairment followed with muscle atony, failure in taking normal posture and making synchronous and coordinated movements. The administration of Solkoseryl in this case produces anti-stroke effect that becomes apparent by decrease in rats' lethality, normalization of neurological status and motor activity in animals. The findings of the experiment enable to assume the expediency in clinical testing of the effects of Solkoseryl as a constituent in complex pathogenic therapy of cerebral ischemic lesion.
УДК: 616.36 - 004 - 099 - 036.12.00136
П0Р1ВНЯЛЬНИЙ АНАЛ13 ТРЬОХ МОДЕЛЕЙ Ф1БР03У ПЕЧ1НКИ, ЗУМ0ВЛЕН0Г0 И ХР0Н1ЧНИМ ТОКСИЧНИМ УРАЖЕННЯМ
Гаврилюк 1.М., Гаврилюк О.М., Чикайло 1.П., Нектегаев 1.О.
Льв1вський нацюнальний медичний уыверситет ¡м. Данила Галицького, м.Льв1в
У статт{ проанал1зовано морфо-функцюналът змти при тръох моделях ф{брозу печтки, зумо-вленого гг хротчним токсичним ураженням. Встановлено, що для вивчення процес{в ф{брозу дощлъно використовувати моделъ з ттрагастралъним введенням тетрахлорметану два рази на тижденъ впродовж 30 дтв.
Ключов1 слова: фЮроз печшки, тетрахлорметан, етанол
Вступ.
Ф1броз печшки розвиваеться при бшьшосп хроычних захворювань печшки \ характеризуемся збтьшенням кшькосп бтюв позакл1тинно-го матриксу, зокрема колагену. Тривалий час ф1броз розцшювався як пасивний \ незворотнш процес, що призводить до розвитку цирозу, пе-чшково-кл1тинноТ недостатносл \ портальноТ п-пертензп. Останшм часом в л1тератур1 з'явилося багато даних, як1 свщчать про зворотнють ф1б-ротичних змш у людей \ лабораторних тварин [4, 8, 11]. Згщно з сучасними поглядами ф1броз роз-глядають як модель загоення при хроычному уражены печшки [3]. Встановлення нових факт1в стосовно можпивосп регресп ф1брозу розширюе перспективи фармакотерапевтичноТ корекцп цього процесу \ стимулюе вчених до пошуку ан-тиф1бротичних засоб1в.
Розробка нових антиф1бротичних препарате передбачае застосування адекватних моделей ф1брозу в лабораторних тварин. На сьогоды ви-користовують р1зы модел1 ф1брозу, кожна з яких вщображае специф1чш мехаызми ф1брогенезу в залежност1 вщ причини розвитку патологи печшки. Ф1броз, спричинений токсичним хроычним ураженням печшки, моделюють за допомогою повторного введения тетрахлометану [1,12,14,16], диметилштрозамшу [9], галактоза-мшу [15], тюацетамщу [17] та етанолу [7]. Для вщтворення фброзу, зумовленого нагрома-дженням у печшц1 метал1в, тваринам вводять ж-
трилотриацетат зал1за або Mifli [5]. Тривале застосування цих гепатотоксижв призводить до розвитку ф1брозу, який може супроводжуватися асцитом, прол1ферац1ею жовчних проток та пор-тальною ппертенз1ею. 3 метою моделювання ф1брозу, спричиненого холестазом, здшснюють перев'язування загальноТ жовчноТ протоки [13]. При цьому розвиток ф1брозу пов'язаний з нагро-мадженням жовчних кислот у печшц1 i характе-ризуеться прол1ферац1ею ежтел1альних кл1тин жовчних проток. Ф1броз можна викликати також шляхом ¡нфкування шистосомою [6]. Ця модель ¡MiTye шистосоматоз у людини, який е досить поширеним у cbítí i часто спричиняе ф1броз. В цьому випадку розвиваеться ¡мунна вщповщь на яйця шистосоми, як1 потрапили у портальж ве-нули, що веде до розвитку перипортального ф1-брозу. MeTioHiH- або метюнш/холшодефщитна д1ета може використовуватися для моделювання неалкогольного стеатогепатиту [10]. Ця модель характеризуемся розвитком ф1брозу, запален-ням та збтьшенням вмюту жир1в у печшцк OcTaHHiM часом використовують також транс-reHHi модел1 ф1брозу пов'язаж з посиленням експресп гежв [19] або Тх нокаутом [20]. Bei пе-рел1чеж модел1 використовуються на гризунах i лише з певним обмеженням можуть застосову-ватися для оцшки ф1брогенезу в людей у зв'язку з м1жвидовими вщмшностями. Однак на даний час модел1 in vivo залишаються незамшними при вивченн1 антиф1бротичних 3aco6iB, осктьки на BiflMiHy Bifl експеримент1в in vitro вони дають мо-
* Досл!дження виконане в рамках планово!' науково-досл!дно( роботи "Синтез ф^зюлоячно активних речовин, пох/дних не-конденсованих, конденсованих /' макрогетероцишчних систем, вивчення Тх ф1зико-х1м1чних властивостей та бюлог1чноГ активной, дослЮження рЬних вид/в рослин заюдного региону з метою одержання нових складов та опрацювання сучасних методов фармацевтичного та юмко-токсиколоячного анализу" (шифр теми 1Н.10,06,0001,06, номер держреестрацп: 010би012672).
