CC BY
35
Duracid IS is a new agent for control of flies at the territories near poultry houses. Tashbulatov A.A., Safiullm R.T. “RABOS Int.”; All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.
Summary. The working solution of combined insecticide Duracid IS prepared with ratio of 50 ml of concentrate per 10 l of water was used for pouring
Л
on of territories near poultry houses with rate of 1 l per 20 m for control of flies. The intensefficacy values were 82,9 and 76,2% on 3 and 5 weeks post treatment.
НЕЙРОНАЛЬНЫЕ СИГНАЛЬНЫЕ СИСТЕМЫ У РЕДИЙ И ЦЕРКАРИЙ MOLINIELLA ANCEPS (TREMATODA: ECHINOSTOMATIDAE).
Теренина Н.Б., Толстенков О.О.
Центр паразитологии Института проблем экологии и эволюции им.
А.Н.Северцова РАН
Введение. Нейрональные сигнальные вещества или нейромедиаторы наиболее изучены в нервной системе взрослых форм трематод. Исследованию данного вопроса у трематод, находящихся на различных стадиях жизненного цикла, уделяется гораздо меньшее внимание. В частности, остаются недостаточно изученными такие вопросы как наличие, локализация, функция нейромедиаторов у редий - партеногенетического поколения трематод, и церкарий - свободноживущей личинки гермафродитного поколения.
С целью дальнейшего расширения представлений о наличии, локализации и функциональном значении нейрональных сигнальных системах у трематод на разных стадиях их жизненного цикла в настоящей работе исследовали серотонинергические и пептидергические компоненты в нервной системе редий и церкарий трематоды Moliniella anceps (Echinostomatidae), используя иммуноцитохимический метод и конфокальную сканирующую лазерную микроскопию.
Материалы и методы. В работе использовали редий и церкарий трематоды Moliniella anceps из моллюсков Limnaea palustris (Белоруссия). Материал был фиксирован в 4% параформальдегиде при температуре + 4°С и затем перенесён в 10% раствор сахарозы в 0,1 М растворе фосфатного буфера (рН 7,4). Серотонин и нейропептид FMRF-амид выявляли иммуноцитохимическим методом, описанным Coons et al. (1955), используя тотальные препараты. Редии и церкарии инкубировались в первичной антисыворотке (Incstar, USA, в разведении 1:500), затем после промывания -во вторичной антисыворотке (в разведении 1:50). Контроль на специфичность окрашивания включал инкубацию образцов в растворе без первичных антител и использование неиммунной сыворотки.
Для окраски мускулатуры использовали меченый тетраметилродаминизотиоцианат (TRITC) фаллоидин (Sigma; разведение 1:200) (Wahlberg, 1998).
409
Для анализа результатов был использован конфокальный сканирующий лазерный микроскоп Leica TCS 4D, соединённый с Leitz Aristoplan флуоресцентным микроскопом.
Результаты. Редия. Мускулатура редии трематоды M. anceps представлена кольцевыми и продольными мышечными волокнами. Хорошо выражены мышечные элементы репродуктивной поры. В области ротового отверстия видно скопление нервных клеток, содержащих серотонин, от которых идут волокна к ротовому отверстию. Вдоль тела проходят шесть продольных серотонинергических стволов. По ходу этих стволов расположены несколько клеток, положительно окрашенных на серотонин и имеющих размер около 5х9 мкм. Мышечные структуры репродуктивной поры иннервируют порядка семи серотонинергических волокон, идущих от продольных нервных стволов.
Положительная окраска на FMRF-амидергические структуры хорошо выражена в головных ганглиях, от которых идут вперёд к ротовой присоске нервные волокна и назад по телу - нервные стволы. Продольные стволы тела соединены между собой волокнами, образуя неправильную сеть.
Церкария. Длина тела церкарии составляет около 540 мкм. Кольцевые, продольные и диагональные мышцы церкарии M. anceps, окрашенные TRITC-меченным фаллоидином, хорошо выражены. С каждой стороны тела церкарии обнаружено по 7-8 серотонинергических нервных клеток, из них 3-4 нервные клетки расположены в головном ганглии, от которых идут волокна к ротовой присоске. Вдоль тела церкарии идут шесть нервных стволов, соединённых поперечными комиссурами. Длина хвоста составляет около 480 мкм. Мускулатура хвоста представлена кольцевыми и продольными мышцами. Кроме того, можно видеть несколько редких поперечных кольцевых волокон. В хвосте церкарии имеется четыре серотонинергических нервных волокна и две нервные клетки, расположенные на расстоянии примерно 78 мкм от начала хвоста. В месте соединения хвоста с телом церкарии обнаружено несколько мелких серотонинергических клеток и кольцевая комиссура.
Окраска на FMRF-амидергические нервные структуры у церкарии M. anceps обнаружена в продольных нервных стволах (особенно она интенсивная в главных нервных стволах), в комиссурах между ним, головных ганглиях, волокнах идущих к ротовой присоске. В хвосте церкарии видны четыре нервных волокна, а также две нервные клетки (расположенные на расстоянии примерно 203 мкм от начала хвоста).
Обсуждение. Имеющиеся к настоящему времени данные свидетельствуют о том, что в деятельности нервной системы трематод принимают участие ряд нейромедиаторов, включая серотонин и нейропептиды (Halton, Maule, 2004; и др.). Предполагают, что функциональное значение этих нейрональных сигнальных веществ связано с регуляцией сократительной активности мускулатуры паразитов. Полученные нами данные о наличии серотонинергических и пептидергических компонентов в нервной системе редий Moliniella anceps согласуются с имеющимися в литературе сведениями по этому вопросу у редий других представителей трематод (Теренина и др.,
410
2008; Terenina et al., 2006). Окрашивание мышечных волокон с помощью фаллоидина показывает наличие хорошо развитой мускулатуры стенки тела, состоящей из кольцевых волокон и более толстых продольных мышц у всех исследованных редий. Мышцы глотки представлены радиальным мышечными волокнами. У некоторых редий отмечено хорошо выраженное развитие кольцевых мышц вокруг родильной поры. Выявлено также наличие радиально направленных к родильной поре мышц стенки тела, вероятно, принимающих участие в работе сфинктера родильной поры редии.
У всех исследованных редий в области расположения мозговых ганглиев обнаружены нервные клетки и волокна, содержащие серотонин и нейропептид ЕМКУамид. От головных ганглиев к заднему отделу тела идут продольные иммунореактивные к серотонину нервные стволы, соединённые комиссурами. В стенке тела выявлен нервный плексус, состоящий из серотонинергических нервных волокон. Несколько серотонинергических клеток обнаружено в теле редий, их количество различно у редий трематод, принадлежащих к различным семействам.
В литературе имеются данные о локализации серотонинергических и FMRF-амидергические элементов в нервной системе церкарий трематод, относящихся к различным морфологическим, таксономическим и биологическим группам (Pan et al. 1996; Sebelova et al.2004; Tolstenkov et al., 2008, Теренини и др.2010). Анализ литературных и наших данных показывает, что серотонин - и FMRFamide -иммунореактивные нервные структуры выявляются у различных типов церкарий. Число и распространение нервных элементов, содержащих исследуемые вещества, варьирует в различных группах; размер серотонин - и FMRFамид - иммунореактивных клеток примерно одинаков. Как правило, в хвосте у церкарий имеется от двух до четырёх серотонинергических или пептидергических волокон, а также содержатся две серотонин - иммунореактивные клетки, которые расположены в начале, середине хвоста или, как у фуркоцеркарий, в его конце. С каждой стороны тела исследованных церкарий выявлено несколько нервных клеток, содержащих серотонин. На границе тела церкарий и его хвоста иногда можно видеть мелкие серотонинергические клетки.
Общим для всех исследованных церкарий является то, что по сравнению с серотонинергическими, FMRFамидергические компоненты в основном имеют большее распространение в нервной системе церкарий трематод.
Таким образом, результаты проведённого исследования и анализ имеющихся в литературе данных свидетельствуют о том, что в нервной системе партеногенетического поколения трематод (редий), как и гермафродитного поколения (церкария, марита) присутствуют серотонинергические и пептидергические компоненты. Функциональное значение исследуемых нейромедиаторов, их роль в жизнедеятельности трематод требует дальнейших исследований.
Работа выполнена по плану Совместного Российско-армянского научно-экспериментального центра зоологии и паразитологии ИПЭЭ им. А.Н.Северцова РАН и Института зоологии НЦ зоологии и гидроэкологии
411
НАН Армении и частично поддержана грантом Президента РФ МК-1093.2011.4
Литература: 1. Теренина Н.Б., Толстенков О.О., Густафссон М., Сербина Е.А. // Сб.мат.научн.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», Москва, ВИГИС. - 2008.- вып.9. -С. 468-470; 2. Теренина Н.Б., Толстенков О.О., Густафссон М., Осипова О.С. , Куклин В.В., Куклина М.М. // Российский паразитологический журнал.- 2010, -№1.- С. 22 - 29; 3. Coons A.H., Leduc E.H., Connolly J.M.. // J. Exper. Med. - 1955. - V. 102. - Р. 49-60; 4. Halton DW, MauleAG. // Can.J.Zool. - 2004. - V.82 - P. 316-333; 5. Pan J-Z, Halton DW, Shaw C., Maule A.G., Jonston CF. // Parasitol Res. -1994 - V. 80. -388-395; 6. Sebelova S., Stewart M.T., Mousley A., Fried B., Marks N.J., Halton D.W. // Parasitol,Res. - 2004. - V.93. P. 196-206; 7. Terenina N.B., Tolstenkov O., Fagerholm H-P, Serbina E.A., Vodjanitskaja S.N., Gustafsson M.K.S. // Tissue Cell. -2006 - V.38(2). - P. 151-157; 8. Tolstenkov O.O., Terenina N.B., Gustafsson
M.K.S., Serbina E.A., Kreshchenko N.D. Maklakova L.M., Jashim A.V. // Acta Biologica Hungarica, Supplement. - 2008. - V. 59, P. 221-225; 9.Wahlberg M.H. // Cell and Tissue Research. - 1998. -V. 291. - Р. 561-570.
Neuronal signal systems in redia and cercaria of Moliniella anceps (Trematoda: Echinostomatidae). Terenina N.B., Tolstenkov O.O. Centre of Parasitology of A.N. Severtzov Institute of Ecology and Evolution of RAS.
Summary. The neuronal signal compounds serotonin and neuropeptide FMRFamide were examined in the nervous system of redia and cercaris of trematode Moliniella anceps using immunocytochemical method and confocal scanning laser microscopy. TRITC-conjugated phalloidin was used to stain the musculature. The presence of serotonin- and FMRFamidergic components were revealed in central and peripheral nerve system of redia and cercariae of M. anceps. The results are discussed in connection with literature data on other species of trematodes.
ДИНАМИКА ЗАРАЖЕННОСТИ КОЗ ОРЕНБУРГСКОЙ ПОРОДЫ ИНВАЗИЯМИ В УСЛОВИЯХ ОРЕНБУРЖЬЯ
Терентьева З.Х.
Оренбургский ГАУ
Введение. Ситуация по паразитарным заболеваниям овец и коз в разных регионах остаётся актуальной. В различных климато-географических районах сохраняется неблагополучная обстановка по ряду инвазий и особенно по тем, которые опасны для человека [3]. Регистрируется высокая зараженность животных эхинококкозом, цистицеркозом, ценурозом, стронгилятозами, эймериозом и др. Во многих регионах высокая инвазированность овец и коз
412
