CC BY
26
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология заболеваний ЛОР-органов Immunology in otorhinolaryngology
пы = 311,0000; общие критерии для обеих групп до операции U = 123,5000, p-level = 0,156443, после операции U = 130,0000, p-level = 0,856544. Это означает отсутствие статистически значимого различия средних между 1-ой и 2-ой группами.
При проведении сравнения средних выборочных исследуемых группах применяли однофакторный дисперсионный анализ с использованием критерия Круске-ла—Уоллиса (Kruskal—Wallis test) при отличии распределения от нормального с последующей оценкой попарных сравнений между группами. При оценке достоверности различий уровня IL-6 в слюне у детей между 1, 2 и контрольной группами до аденотомии, использовались следующие показатели: Median Test, Overall Median (среднее значение) = 12,9000; Chi-Square (хи-квадрат) = 10,91321, df (число степеней свободы) = 2, p (вероятность ошибки) = 0,0043, Kruskal—Wallis test: H ( 2, N = 45) = 16,19812 p = 0,0003, сумма рангов 1 группы = 499,5000, сумма рангов 2 группы = 480,5000, сумма рангов контрольной группы = 55,0000.
Так как достигаемый уровень значимости был меньше критического p < 0,05, то принимаем альтернативную гипотезу о наличии статистически значимого различия средних между 1-ой, 2-ой и контрольной группами. Между выборками 1-ой, 2-ой и контрольной групп существуют неслучайные различия по уровню IL-6.
Выводы. 1. Статистически значимого различия между показателями IL-6 в слюне у детей 1-ой и 2-ой групп не обнаружено.
2. Между выборками 1-ой, 2-ой и контрольной групп существуют неслучайные различия по уровню IL-6.
НЕЙРОИММУННОЕ ВОСПАЛЕНИЕ В ПАТОГЕНЕЗЕ РИНОСИНУСИТА
Стагниева И.В.1, Симбирцев А.С.2, Бойко Н.В.1
1ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Миинистерства здравоохранения РФ, Ростов-на-Дону, Россия
2 ФГУП«Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия.
Для передачи сигналов между нервной и иммунной системой используются универсальные медиаторы. Ри-носинусит может быть причиной и соматического (воспалительного), и нейрогенного механизма боли.
Цель. Определение роли нейроиммунного воспаления в патогенезе риносинусита.
Материалы и методы. Обследовано 337 больных с ри-носинуситом с различной выраженностью лицевой боли. Контрольная группа — 32 здоровых человека. 1 группу составили 42 больных без острого воспалительного процесса в слизистой оболочке носа и околоносовых пазух.
2 группу — 133 больных с катаральным риносинуситом,
3 группу — 162 больных с гнойным риносинуситом. Всем больным проведено полное клиническое ЛОР-обследование, оценка болевого симптома и уровня не-вротизации с помощью «Многомерного вербально-цве-тового болевого теста». Уровень цитокинов IL-1ß, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNFa, IFNy определяли методом ИФА наборами реактивов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург). Уровень SP в сыворотке крови пациентов определяли мето—дом ИФА наборами Peninsula Laboratories, LLC (Bachem Group (USA), Cat. № S-1153). Кластеры больных
с различными патогенетическими механизмами лицевой боли были выделены по результатам проведения кластерного и дискриминантного анализа с формированием соответствующих дискриминантных моделей.
Результаты. У больных с выраженным болевым симптомом средний показатель болевого теста 59,16±0,35%, что достоверно показывает наличие боли и её связь с патологическим процессом. Корреляционный анализ количественных показателей боли с активностью воспалительного процесса (по клиническим данным и уровню С-реактивного белка) показал отсутствие прямой связи: г = - 0,0691; p = 0,121. Обнаружена прямая статистически значимая корреляционная связь между ранжированными показателями вегетативной дистонии и данными шкалы невротизации (г = 0,3901; р < 0,001). Нарушение носового дыхания — один из критериев оценки качества жизни пациентов с риносинуситом, способствует более тяжелому эмоциональному переживанию боли, приводит к вегетативной дистонии по типу симпатикотонии, запускает каскад стрессорных медиаторов и этим усугубляет ней-рогенный компонент воспаления. Уровень SP варьировал от 628,3 до 5754,8 пг/мл, что более чем в 10 раз выше, чем в контрольной группе. Обнаружена прямая корреляционная связь между суммарным показателем боли и уровнем SP в сыворотке крови больного (г = 0,6825; р < 0,001). Диагностической точкой разделения уровня SP в сыворотке крови, превышение которой ассоциируется с нейроген-ным компонентом боли, была величина 1998,7 пг/мл Для показателя SP площадь под ROC — кривой (AUC) была набольшей - 0,932±0,0196 (z statistic 21,9 при р < 0,0001). При отсутствии острого воспалительного процесса в слизистой оболочке у пациентов 1 группы с болевым симптомом повышены концентрации IL-ф и IL-4. Выраженный болевой симптом с высоким уровнем SP свидетельствует о включении нейрогенных механизмов. У больных 2 и 3 групп при высоком SP показатели иммунограммы свидетельствуют о цитотоксическом варианте иммунного ответа на фоне дефицита гуморального звена и фагоцитоза. У этих больных отмечены высокие концентрации провоспалительных цитокинов IL-1P, IL-6, IL-8 и TNFa. Концентрация противовоспалительных цитокинов резко снижена. Это привело к смещению баланса активности ТЫ-ДЪ2-лимфоцитов в сторону Th1, недостаточности гуморального ответа и пролонгировании болевого симптома. Течение заболевания отягощено механизмами нейроиммунного воспаления, которое, безусловно, является причиной утяжеления клинической картины заболеваний как инфекционной, так и неинфекционной природы.
Выводы. 1. Нейроиммунная регуляция воспалительного процесса при риносинусите определяет тяжесть течения и клинические симптомы заболевания. 2. Выраженный болевой симптом при риносинусите в сочетании с высоким уровнем SP в сыворотке крови более 1998 пг/мл свидетельствует о нейроиммунном воспалении, которое проявляется резким смещением цитокинового баланса в сторону провоспалительных цитокинов, баланса активности ТЫ-ДЪ2-лимфоцитов в сторону Th1 и иммунной недостаточностью. 3. Для диагностики и выбора тактики лечения лицевой боли можно проводить определение уровня субстанции Р в сыворотке крови пациента. Его значение менее 1998 пг/мл свидетельствует о нормальной нейроиммунной регуляции, а заболевание носа и околоносовых пазух требует стандартной общепринятой терапии воспалительных заболеван ий верхних дыхательных
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
путей. При повышении уровня субстанции Р свыше 1998 пг/мл, необходимо в схему лечения включать препараты, купирующие нейроиммунное воспаление.
ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ToN-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ 2 И 4 В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ СРЕДНЕГО УХА ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Тырнова Е.В.1, Алешина Г.М.2, Янов Ю.К.1, Кокряков В.Н.2
1ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт уха, горла, носа и речи» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБНУ«Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург, Россия
Эпителиальные клетки наружных покровов в качестве клеток системы врожденного иммунитета выполняют три основные функции: барьерную, секреторную и сигнальную (Underwood M. et al., 2011). Для выполнения последней эпителиальные клетки верхних дыхательных путей, включая слуховую трубу и среднее ухо, снабжены множеством паттерн-распознающих рецепторов (Mittal R. et al., 2014), лигандами которых являются патоген-ассоцииро-ванные молекулярные паттерны. Одной из древнейших систем распознавания патогенов считают Toll-подобные рецепторы (TLR). Из 10 известных к настоящему времени членов семейства на поверхности клеток локализованы TLR4 и TLR2 (Кокряков В.Н., 2006).
Целью настоящей работы является оценка экспрессии генов Toll-подобных рецепторов 2 и 4 на основе определения мРНК в поверхностном эпителии слизистой оболочки среднего уха при хронических воспалительных заболеваниях.
Материалом для исследования служили образцы слизистой оболочки ЛОР-органов, полученные во время хирургического вмешательства в условиях общей анестезии. Образцы тканей немедленно помещали в стабилизирующий раствор RNAlater. Исследованы образцы слизистой оболочки барабанной полости (при хроническом тубо-тимпанальном среднем отите, центральная перфорация; при тимпаносклерозе; при хроническом гнойном эпиан-тральном среднем отите, холестеатоме; при отосклерозе), слизистой оболочки мастоидальной полости, в качестве контроля служили нижние и средние носовые раковины — всего 92 образца.
Молекулярно-генетические методы включали выделение общей РНК из поверхностного эпителия; синтез комплементарной кДНК с использованием обратной транскриптазы M-MLV; амплификацию методом поли-меразной цепной реакции в режиме реального времени. Уровень экспрессии мРНК стандартизировали относительно гена бета-актина в качестве внутреннего контроля.
В контрольной ткани нижних носовых раковин больных с искривлением перегородки носа и здоровой ткани слизистой оболочки среднего носового хода, полученной попутно в ходе операций, экспрессия мРНК TLR4 не выявлена. Экспрессия гена TLR4 детектирована в единичных образцах слизистой оболочки среднего уха: 7,69% случаев в барабанной полости при хроническом тубо-тимпанальном среднем отите, 7,69% при холестеатоме, 21,43% в мастоидальной полости.
Экспрессия гена TLR2 детектирована во всех исследованных образцах поверхностного эпителия. Самая
высокая экспрессия мРНК TLR2 выявлена в слизистой оболочке суперструктур стремени (тест Манна—Уитни, р < 0,02) по сравнению с контролем. В среднем ухе выявлены различия между отосклерозом и хроническим средним отитом: экспрессия гена в эпителии суперструктур стремени повышена по сравнению с тимпано-склерозом и слизистой мастоидальной полости (р < 0,05, р < 0,01 соответственно).
Отсутствие экспрессии гена TLR4 в слизистой оболочке суперструктур стремени обусловлено, по-видимому, отсутствием или незначительным количеством патоген-ассоциированных молекулярных паттернов при сохранении физиологической стерильности барабанной полости у больных отосклерозом. При хроническом среднем отите отсутствие детектируемой экспрессии мРНК TLR4 может быть связано как с первичным дефектом экспрессии гена, проявившимся на этапе острого среднего отита и предрасполагающим к хронизации заболевания, так и развитием толерантности рецептора. Вероятно, нарушение автономности местного иммунитета и стерильности среды среднего уха при хроническом среднем отите способствуют перепрограммированию экспрессии рецептора TLR4, чтобы избежать воспаления в ответ на микроорганизмы нормальной микробиоты.
Усиленная экспрессия гена в слизистой оболочке суперструктур стремени, по-видимому, обусловлена присутствием патоген-ассоциированных молекулярных паттернов эндогенного происхождения и способствует сохранению физиологической стерильности барабанной полости у больных отосклерозом. Повсеместная экспрессия мРНК в постоянно колонизированной слизистой оболочке носа в норме и среднего уха в условиях ремиссии хронического воспалительного заболевания выполняет, скорее всего, толерогенную, а не реактивную в отношении микроорганизмов функцию. По-видимому, экспрессия гена TLR2 эпителиальными клетками носа и среднего уха не является фактором, приводящим к хроническому и неконтролируемому воспалению слизистой оболочки или поддерживающим персистирующее воспаление.
ВЛИЯНИЕ ВАКЦИНАЦИИ «ПРЕВЕНАР-13» НА КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ОЧАГОВОЙ ЛОР-ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ
Фошина Е.П., Костинов М.П., Афиногенова В.П.
ФГБНУ«Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», Москва, Россия
Цель. Оценить клиническую эффективность вакцинации против пневмококковой инфекции препаратом «Превенар 13» у детей с хроническими и рецидивирующими инфекциями ЛОР-органов.
Материалы и методы. Клиническую эффективность вакцинации оценивали с помощью следующих критериев — число эпизодов острой респираторных инфекций (ОРИ), средняя продолжительность эпизода ОРИ, число эпизодов рецидивов/обострений ЛОР-патологии, число дней системной антибиотикотерапии. Сравнивали данные за год до вакцинации и в течение года после.
Результаты. Под наблюдением находилась группа из 46 детей в возрасте от 3 до 8 лет. Диагностировали рецидивирующий риносинусит (РС) у 20 детей, средний секреторный отит (ССО) — 16 детей, хр. тонзиллофарин-гит — 18 детей. Вакцинацию проводили согласно обще-
