Научная статья на тему 'Неспецифическая профилактика осложнений стресса природными цеолитами'

Неспецифическая профилактика осложнений стресса природными цеолитами Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
132
38
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Человек. Спорт. Медицина
Scopus
ВАК
ESCI
Область наук
Ключевые слова
ТРОМБИН / ТРОМБИНЕМИЯ / РАЦИОН / ЦЕОЛИТЫ / СТРЕСС / THROMBIN / THROMBINEMIA / RATION / ZEOLITES / STRESS

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Никулина Е. Г.

В экспериментах на белых крысах изучено влияние природных цеолитов VII минералогической группы на последствия тромбинемии, вызываемой стресс-воздействиями. Показано, что дополнительное введение цеолитов в рацион ограничивает гемокоагуляционные сдвиги и прирост содержания маркеров тромбинемии в условиях стресса.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Никулина Е. Г.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Nonspecific prophylaxis of complications of stress by natural zeolites

In experiment on white rat is studied influence natural zeolites VII mineral group on consequences of thrombinemia, caused by stress. It is shown that additional introduction zeolites in ration limits the shifts of hemocoagulation and increase of the contents markets of thrombinemia in condition of the stress.

Текст научной работы на тему «Неспецифическая профилактика осложнений стресса природными цеолитами»

УДК 615.115.3+616.151.5

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ОСЛОЖНЕНИЙ СТРЕССА ПРИРОДНЫМИ ЦЕОЛИТАМИ

Е.Г. Никулина

Ханты-Мансийская государственная медицинская академия, г. Ханты-Мансийск

В экспериментах на белых крысах изучено влияние природных цеолитов VII минералогической группы на последствия тромбинемии, вызываемой стресс-воздействиями. Показано, что дополнительное введение цеолитов в рацион ограничивает гемокоагуляционные сдвиги и прирост содержания маркеров тромбинемии в условиях стресса.

Ключевые слова: тромбин, тромбинемия, рацион, цеолиты, стресс.

Введение

Стресс - генерализованная неспецифическая реакция организма, возникающая под действием различных факторов возмущающего характера (холод, физическая нагрузка, эмоциональное воздействие и др.), различной силы и длительности [10].

Одним из механизмов реализации и поддержания патохимических и патофизиологических реакций в условиях стресса является активация системы регуляции агрегатного состояния крови, вызываемая различными причинами и приводящая к образованию сериновой протеазы - тромбина. Последний, как известно, вызывает коагуляционные превращения фибриногена, активирует более ранние этапы плазмокоагуляции, фибринолиз, систему комплемента, антикоагуляционное звено, тромбоциты и изменяет реологию крови. В последние годы оценка реологических свойств крови и ее компонентов приобретают все большее значение для научно-исследовательской и клинической практики. [1,2, 7].

Широкое распространение патологических состояний, вызываемых реакцией напряжения [2] и проявляющихся тромбогеморрагическими осложнениями, требует поиска новых средств направленного воздействия на гемостаз.

Независимо от причины, обуславливающей ускорение постоянно протекающего внутрисосу-дистого свертывания, основным разрешающим фактором служит избыточное образование тромбина - сериновой протеазы, вызывающей коагуляционные превращения фибриногена, активацию клеток крови и прокоагулянтов [5, 6].

Усилия гемостазиологов до настоящего времени в большей степени были направлены на борьбу с последствиями усиленного тромбиноге-неза - в клинической практике широко используются различные формы гепарина, обладающие прямым антикоагулянтным эффектом, и ингибиторы синтеза витамин К-зависимых факторов свертывания [8].

В исследованиях, проведенных за последние десятилетия, показана возможность снижения угрозы тромбообразования с помощью неспецифических воздействий, в частности, антиоксидантами из группы витаминов [3]. Профилактическое использование антиоксидантов ограничивает запредельное ускорение постоянно протекающего свертывания крови до рамок ДВС-синдрома в условиях эксперимента и клиники.

Тромбинемия индуцирует гуморальный ответ эндокринных структур, способствуя изменению содержания в кровотоке гормонов стрессорного ряда. Таким образом, тромбинемию следует рассматривать в качестве универсального стресс-реализующего фактора, ограничением которого можно изменить реакции организма на стресс-воздействия.

Перспективными соединениями для использования в таких целях могут служить естественные природные цеолиты VII минералогической группы, обладающие рядом положительных биологических эффектов [3,4].

Целью наших исследований явилось изучение влияния природных цеолитов на коагуляционный потенциал при тромбинемии, вызываемой стресс-воздействиями .

Материалы и методы

Эксперименты проводились на половозрелых самцах беспородных крыс массой 220-400 г. Животные содержались на полноценном рационе с оптимальным соотношением белков, липидов и углеводов, в составе суточных порций, которого, вводили природные цеолиты в виде порошка в дозе 0,25 г/кг массы тела. Дозы цеолитов были рассчитаны, исходя из рекомендаций для человека, и не являлись токсичными. Интактные и контрольные животные получали диету без добавок. Пробы крови отбирали из яремной вены. Экзогенную тромбинемию моделировали введением в яремную вену раствора тромбина. В день эксперимента контрольной и опытной группам в ярем-

Проблемы здравоохранения

ную вену вводили тромбин («Технология - стандарт») в дозе 0,167 N111 ед./кг массы, который предварительно растворяли в 0,85 %-ном растворе №С1. Крысам интактной группы вводили соответствующий объем физиологического раствора. Пробы крови забирали через 0,5 и 1 ч после воздействия. Эвтаназию осуществляли путем декапитации под эфирным наркозом.

Эндогенную тромбинемию моделировали комбинированным стрессом, вызываемым физической нагрузкой («свободное плавание» в течение 30 минут) и Холодовым фактором (температура воды +15 °С). Пробы крови отбирали из яремной вены до воздействия, а также спустя 0,1, 1, 3, 6 часов после проведения комбинированного стресса.

Ишемию создавали пережатием магистрального сосуда в течение 4 минут. Кровь для коагулоло-гических исследований стабилизировали 3,8 % раствором цитрата натрия в соотношении 9:1 и, в ряде случаев, гепарином. Отбор проб, их последующая обработка, в том числе получение бедной тромбоцитами плазмы, соответствовали требованиям, принятым для коагулологических исследований.

Для оценки состояния плазмокоагуляции определяли активированное частичное тромбопла-стиновое время (АЧТВ), тромбиновое время (ТВ), содержание фибриногена, антитромбина - III и растворимых комплексов мономерного фибрина (РКМФ).

Результаты исследований и их обсуждение

Введение тромбина контрольным животным уже через 0,5 ч привело к развитию диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС): снижение ПТИ, удлинение АЧТВ и ТВ, гипофибриногенемия (рис. 1), тромбоцитопения потребления, прирост содержания активированных форм тромбоцитов и тромбоцитарных агрегатов. Через 1 ч признаки запредельной активации тромбоцитов и коагулопатии потребления ослаб-

Рис. 1. Изменения содержания фибриногена у животных, получавших и не получавших природные цеолиты, в различные сроки после введения тромбина

лялись, но не достигали показателей интактной группы.

У животных, получавших цеолиты, интенсивность развития ДВС крови была выражена в заметно меньшей степени, чем в контроле (ослабление коагулопатии, тромбоцитопении, прироста активированных клеточных форм). На этом фоне возросла толерантность животных к введению тромбина и увеличилась скорость нормализации показателей плазменного и тромбоцитарного гемостаза.

При экзогенной тромбинемии через 0,1 ч после воздействия у животных контрольной группы наблюдалась существенная интенсификация тром-биногенеза, проявляющаяся ускорением непрерывно протекающего свертывания крови на уровне ДВС 1-П стадии. На 135 % выросла концентрация РКМФ, заметно укоротилось тромбиновое время - на 23 %, увеличилась концентрация фибриногена (43 %), что может быть связано с уменьшением объема циркулирующей плазмы. Одновременно произошло интенсивное потребление антитромбина-Ш и удлинение АЧТВ (рис. 2). Последнее, на наш взгляд, объясняется ускоренным потреблением факторов внутреннего пути активации протромбиназы в ответ на развивающуюся катехоламинемию.

К 1 ч в еще большей степени выросло содержание маркеров тромбинемии (РКМФ), фибриногена, произошло удлинение тромбинового времени (рис. 3) в согласовании с приростом содержания антитромбина-Ш. Время образования фибринового сгустка в тесте АЧТВ существенно укоротилось, но не достигло показателей интактного контроля. Схожие результаты обнаружились к 3 ч после воздействия. Лишь к 6 часу нормальных значений достигли показатели тромбинового времени, а содержание фибриногена и РКМФ превышало исходную норму.

Рис. 2. Динамика изменения содержания АЧТВ у животных, получавших и не получавших природные цеолиты, в различные сроки после комбинированного («холодового-водоплавающего») стресса

Никулина Е.Г.

Неспецифическая профилактика осложнений стресса природными цеолитами

Тромбиновое время

время,ч

Рис. 3. Динамика изменения содержания тромбинового времени у животных, получавших и не получавших природные цеолиты, в различные сроки после комбинированного («холодового-водоплавающего») стресса

Рис. 4. Динамика изменения содержания АТ-Ш у животных, получавших и не получавших природные цеолиты, в различные сроки после комбинированного («холодового-водоплавающего») стресса

Таблица

Показатели Интактный контроль Контроль с ишемией Интактные цеолиты Цеолиты с ишемией

Количество Тц 1004,8 ±9,6 1241,3 ±26,3 1006,7 ± 4,3 1047,9 ± 14,3

Дискоциты, % 54,5 ± 1,7 34,3 ± 1,8 58,0 ± 0,7 46,6 ± 0,5

Активированные формы, % 45,5 ± 1,7 65,7 ± 1,8 42,0 ±0,7 53,4 ± 0,5

Малые агрегаты (на общее число клеток) 1,8 ±0,3 1,1 ±0,1 1,3 ±0,2 0,7 ± 0,2

Большие агрегаты (на общее число клеток) 0,1 ±0,1 1,0 ±0,2 0,1 ±0,1 0,6 ± 0,2

РКМФ, мг/100 мл 3,0 ±0,1 10,0 ±2,0 3,0 ±0,1 4,5 ± 0,7

ТВ, с 19,7 ±0,6 52,1 ±2,2 22,0 ± 1,0 31,5 ±0,6

АТ-Ш, % 148,3 ± 0,9 160,3 ± 1,4 146,7 ± 0,4 153,2 ±0,7

ТПВ, с 16,2 ±0,3 11,7 ±0,3 16,1 ±0,3 14,5 ± 0,3

Оценивая в целом динамику отдельных показателей, отметим следующее: стресс-воздействие в течение всего наблюдаемого времени вызвало у животных, не получавших цеолиты, стойкий прирост содержания фибриногена и РКМФ, «волнообразное» изменение показателей клоттинговых тестов (АЧТВ и тромбинового времени) и уровня антитромбина-Ш.

У животных, получавших цеолиты, последствия стресс-воздействия были выражены в гораздо меньшей степени. Через 0,1 ч уровень РКМФ не превышал контрольные значения, что наблюдалось и в течение всего эксперимента. Содержание фибриногена незначительно возросло к 0,1 ч, однако в последующем его прироста не наблюдалось. АЧТВ к 0,1 ч увеличилось лишь на 30 %, а в дальнейшем не отличалось от показателей контроля. Тромбиновое время к 0,1 ч незначительно укоротилось (на 9,6%), а в последующем возвратилось к показателям нормы, и лишь к 6 ч вновь снизилось.

В отличие от контрольных животных, содер-

жание антитромбина-Ш постепенно возрастало (рис. 4) и возвращалось к норме к 6 ч, т. е. эндогенная тромбинемия не приводила к значительному потреблению данного антикоагулянта, что свидетельствует (как и показатель РКМФ) о меньшей интенсивности тромбиногенеза.

Ишемия, создаваемая пережатием магистрального сосуда, привела у контрольных животных к приросту количества тромбоцитов и их активации: содержание дискоцитов снизилось на 37 %. Наблюдались и другие признаки развивающегося ДВС-синдрома: укорочение тромбопласти-нового времени, существенное удлинение тромбинового времени, прирост антитромбиновой активности и РКМФ.

У животных, получавших цеолиты, перечисленные сдвиги были выражены достоверно в меньшей степени (см. таблицу). Это подтверждает результаты предыдущих экспериментов, свидетельствующих о том, что изучаемые цеолиты позитивно изменяют толерантность животных к тромбинемии.

Проблемы здравоохранения

Заключение

Анализируя результаты исследований, мы пришли к убеждению, что цеолиты обладают свойствами, обеспечивающими повышение защитного ответа на действие эндогенных факторов, способных трансфертировать стрессовую ситуацию в реакцию защитного характера и реализовывать комплекс адаптивных механизмов.

Результаты настоящего исследования подтверждают полученные ранее в нашей лаборатории данные о том, что природные цеолиты оказывают протективное влияние на биохимический и клеточный компоненты гемостаза в условиях диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови.

Дополнительное введение природных цеолитов повышает толерантность животных к эндогенной тромбинемии, что проявляется ограничением вызываемых гемокоагуляционных сдвигов и сокращением периода их нормализации, т. е. реализуется за счет изменения коагуляционного потенциала.

Литература

1. Алексеев, Н.А. Геморрагические диатезы и тромбофшии: руководство для врачей / НА. Алексеев. - СПб.: Гиппократ, 2004. — 608 с.

2. Баркаган, З.С. Современные аспекты патогенеза, диагностики и терапии ДВС-синдрома /

З.С. Баркаган, А.П. Момот // Вестник гематологии. - 2005. -Т. !,№> 2.- С. 5-14.

3. Гагаро, М.А. Влияние цеолитов на гемостаз лабораторных крыс / М. А. Гагаро, В.Г. Соловьев // Научный вестникХМГМИ. —2006. —№ 1. — С. 36-37.

4. Гагаро, М.А. Коррекция природными цеолитами гомеостатических сдвигов при активации свертывания крови: дис. ... канд. биол. наук / М.А. Гагаро. — Тюмень, 2007. — С. 138.

5. Зубаиров, Д. М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования / Д.М. Зубаиров. — Казань, 2000.

6. Кузник, Б. И. Физиология и патология системы крови/Б.И. Кузник// Чита, 2004. — 330 с.

7. Лабораторные методы исследования системы гемостаза / В.П. Балуда, З.С. Баркаган, Е.Д. Гольдберг и др. — Томск: Изд-во ТГУ, 1980. — 313 с.

8. Предложения по унификации методов исследования системы гемостаза / Г.Н. Детенкина, И. М. Дынкина, Ж.Н. Тюрин и др. // Лаб. дело. — 1984.- М3.-С. 140-143.

9. Пшеникова, М.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии / М.Г. Пшеникова // Патол. физиология и эксперим. терапия. - 2001. — № 1. — С. 26—23.

10. Селье, Г. На уровне целого организма / Г. Селье. — М.: Наука, 1972. - 24 с.

Поступила в редакцию 23 ареля 2010 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.