CC BY
23
2. Релапаротомии должны быть направлены на ограничение истечения содержимого из культи ДПК от свободной брюшной полости, формирование дуоденального свища.
3. Заживление дуоденальных свищей после резекции желудка с формированием брауновского межкишечного анастомоза протекает более благоприятно, чем заживление свищей ДПК после резекции желудка на короткой петле.
4. Обтурация дуоденальных свищей в виде пломбировки модифицированным полиуретановым клеем ускоряет заживление последних.
Литература
1. Попандуполо Г.Д., Иваненко С.Д. Послеоперационные наружные дуоденальные свищи // Вестник хирургии. 1974. № 9. С. 112-115.
2. Прохоров Г.П. Выбор лечебно-хирургической тактики при высоких несформированных кишечных свищах: дис. ... канд. мед. наук. Чебоксары, 2001. 115 с.
3. Рысбеков М.М., Муканова У.А., Есиркепов М.Р., Есиркепов М.М. Лечение свищей двенадцатиперстной кишки // Хирургия. 2007. N° 11. С. 40-43.
ПРОХОРОВ ГЕННАДИЙ ПЕТРОВИЧ. См. с. 391.
ФЁДОРОВ НИКОЛАЙ ФЁДОРОВИЧ. См. с. 391.__________________________________________
УДК 591.11:591.23:599.323
Л П. РОМАНОВА, И И. МАЛЫШЕВ
НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ 18-ДНЕВНЫХ КРЫСЯТ ПРИ ЗАЖИВЛЕНИИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ ПЕЧЕНИ В УСЛОВИЯХ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Ключевые слова: крысята, печень, механическая травма, показатели крови, биологически активные вещества.
При исследовании установлено стимулирующее влияние биологически активных веществ на физиологические показатели крови при заживлении механической травмы печени у крысят.
L.P. ROMANOVA, I.I. MALYSHEV SOME BLOOD INDICES IN 18-DAYS OLD YOUNG RATS WHILE MECHANICAL LIVER TRAUMA HEALING IN CONDITION OF USING BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCES Key words: young rats, liver, mechanical trauma, blood indices, biologically active substances.
The performed investigation established positive influence of biologically active substances on physiological blood indices in young rats in mechanical traumas of liver.
В ранее опубликованной работе [3] показано, что биологически активные вещества «Трепел» и «Сувар» активизируют регенераторные процессы со стороны гепатоцитов, в результате чего травматический дефект у них на большем протяжении замещается пролиферирующими печеночными клетками. В то же время в литературе имеются указания на то, что применение биологически активных веществ («Трепела» и «Сувара») в ветеринарии улучшают физиологические и биохимические показатели крови у различных животных [1, 2].
Целью исследования явилось изучение физиологических показателей крови у крысят при механической травме печени в условиях применения биологически активных веществ «Трепел» и «Сувар».
Материал и методы. В качестве экспериментальных животных были взяты 39 крысят 18-дневного возраста массой 23-28 г, которым через кожу стальной иглой с ограничителем выполняли прокол печени. Сразу после операции в основной рацион крысам добавляли биологические вещества «Трепел» из расчета 1,25 мг/кг и «Сувар» - 50 мг/кг; питание животных осуществляли в режиме свободного доступа к пище и воде.
Контролем были 30 крысят аналогичного возраста, которым после прокола печени питание было организовано основным рационом, без добавления биогенных веществ.
После операции животные обеих групп чувствовали себя хорошо, были активными, хорошо принимали пищу.
Животных забивались эфиром в сроки от 1 до 30 суток. Из печени животных вырезали кусочки размером 1x1 см, куда включались участки печени с повреждением. Кусочки после фиксации в 10%-ном нейтральном формалине заключались в парафин, изготавливались серийные гистотопографические срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином и по ван Гизону. Для оценки пролиферативной активности печени производили подсчет митозов (на 7000 клеток при увеличении x900). Определение гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов осуществляли с использованием автоматического гематологического анализатора SIMEX KX-21; скорость оседания эритроцитов (СОЭ) устанавливалась методом Вестергена с использованием одноразовых пробирок с 3,8% антикоагулянтом натрия. Общий белок в сыворотке крови определяли рефрактометром ИРФ-22 (А.М. Ахметов), общего кальция - комплексометрическим методом по Уилкинсону. Исследование в сыворотке крови активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ), аланинаминотран-сферазы (АлАт), аспартатаминотрансферазы (АсАт) осуществляли с помощью анализатора BS 3000. Статистическая обработка материала производилась по программе «Статистика» с привлечением пакета программ Microsoft Office (Word et Excel) Pentium 166 MMX. Для определения различия статистических показателей между средними величинами использовали критерий Стьюдента (t).
Результаты исследования. Микроскопически через 1 сутки после нанесения травмы у опытных животных участок повреждения был представлен щелевидной полостью, заполненной эритроцитами и погибающими гепато-цитами. Через 3-5 суток у опытных крысят вокруг очага травмы появлялось небольшое количество молодых мезенхимальных клеток. С 5-х суток зона повреждения была представлена полостью, по краю которой лежало небольшое количество лимфоидных клеток и (с 7-9-х суток) фибробластов. На 9-е и особенно на 11-е сутки среди клеток начинали прослеживаться тонкие, нежные волоконца, окрашивающиеся по ван Гизону в бледно-розовый цвет. Размеры полости с 5-х до 11-х суток постепенно уменьшались. На 15-е, 20-е и 30-е сутки на месте погибшей ткани печени обнаруживался небольшой фокус волокнистой соединительной ткани.
У контрольных крысят с 3-х суток вокруг очага повреждения появлялось большое количество лимфоидных клеток. Фибробласты начинали преобладать в клеточном инфильтрате с 7-х и, особенно, с 9-х суток; при этом по пе-
риферии начинали прослеживаться нежные волокна. Постепенно развивающаяся соединительная ткань заполняла участок травмы и на 11-е сутки полностью замещалась волокнистой соединительной тканью. Очаг склероза был во много раз больше, чем такой же участок у опытных животных.
На основании гистологического исследования было сделано заключение, что биологически активные вещества «Трепел» и «Сувар» снижают мезенхимальную реакцию, замедляют появление фибробластов и уменьшают их количество вокруг очага травмы и, тем самым, препятствуют коллагенизации и развитию соединительной ткани.
Произведенный подсчет митозов показал, что у животных, получающих биогенные вещества, по сравнению с контролем имеют место более высокие показатели митотического индекса (табл. 1).
Учитывая данные пролиферативной активности гепатоцитов, можно заключить, что у опытных крысят биологически активные вещества, снижая мезенхимальную и фибробластическую реакции, одновременно стимулируют пролиферацию печеночных клеток; при этом размножающиеся ге-патоциты постепенно сдавливают участок повреждения, уменьшая его размеры, и, таким образом, он на большем протяжении оказывается заполненным пролиферирующими гепатоцитами. Развивающаяся позднее соединительная ткань занимает лишь небольшую часть дефекта печени.
У контрольных крысят пролиферативные проявления со стороны гепатоцитов выражены значительно слабее, а мезенхимальная и фибробластическая реакции в ответ на повреждение, наоборот, выражена резко. Поэтому зона повреждения у них на большем протяжении замещается соединительной тканью.
Гематологическое исследование выявило разницу в содержании гемоглобина и эритроцитов у животных опытной и контрольной групп (табл. 2).
Из табл. 2 можно видеть, что у опытных крысят уровень гемоглобина и количество эритроцитов значительно выше, чем это имело место у контрольных животных. Число лейкоцитов у опытных крысят увеличивалось относительно в небольших пределах.
В табл. 3 представлены данные о содержании общего белка в сыворотке крови.
Таким образом, содержание общего белка в сыворотке крови у опытных животных превышает общий белок у контрольных крысят.
Исследование активности ряда ферментов также установило различие показателей у опытных и контрольных животных (табл. 4).
Таблица 1
Количество митозов гепатоцитов у животных опытной и контрольной групп в зависимости от времени после операции, %о
Время после операции, сутки Количество митозов гепатоцитов
опытные животные М ± т контрольные животные М ± т
1 2,6±1,2 1,1±0,4
3 6,5±2,4* 3,6±1,4
5 7,2±3,8* 4,2±1,9
7 7,3±4,7* 2,1±0,8
9 6,4±2,9* 1,0±0,4
11 5,6±2,8 -
15 3,6±1,8 -
20 0,8±0,1
Примечание. * р < 0,001.
Таблица 2
Г ематологический спектр опытных и контрольных крысят (М±т)
Время после операции, сутки Опытные животные Контрольные животные
эритроциты, млн/мкл гемоглобин, г/л лейкоциты, 109/л эритроциты, млн/мкл гемоглобин, г/л лейкоциты, 109/л
1 5,6±0,30 119±0,50 4,7±0,01 5,5±0,08 120±0,09 5,4±0,01
3 5,7±0,08 121±0,90 4,9±0,02 5,6±0,01 121±0,10 6,5±0,92
5 6,4±0,01 129±0,10* 5,4±0,01* 5,6±0,01 120±0,10 7,3±0,01
7 6,6±0,01 128±0,10* 5,6±0,01* 5,4±0,01 119±0,10 7,5±0,01
9 7,0±0,01 135±0,10* 5,6±0,01* 5,3±0,01 119±0,10 7,1±0,02
11 7,1±0,01 135±0,10* 5,6±0,01* 5,4±0,01 120±0,10 6,5±0,01
15 7,3±0,01 137±0,10* 5,4±0,01* 5,0±0,01 118±0,10 6,3±0,01
20 7,4±0,01 137±0,10* 5,3±0,01* 4,6±0,01 116±0,10 6,1±0,02
30 7,3±0,01 137±0,10 5,7±0,03 5,0±0,01 118±0,10 5,7±0,01
Примечание. Здесь и далее * р < 0,05.
Из табл. 4 можно видеть, что у опытных крысят активность АсАт и АлАт ниже, чем у контрольных крысят, а активность ЛДГ - значительно выше.
При исследовании кальция в сыворотке крови животных было отмечено что его содержание волнообразно изменялось в течение эксперимента и колебалось в узком диапазоне от 1,9±0,01 до 2,6±0,02 ммоль/л. У опытных и контрольных животных были получены практически близкие показатели.
Таблица 4
Показатели ферментативной активности крови (М±т)
Время по- Опытные животные Контрольные животные
сле опера- АлАт АсАт ЛДГ АлАт АсАт ЛДГ
ции, сутки Ед/л Ед/л Ед/л Ед/л Ед/л Ед/л
1 12,1±0,37 26,7±0,52 58,1±2,08 14,5±1,64 24,5±2,73 44,6±3,72
3 12,8±1,08* 27,3±1,63* 60,5±1,70* 23,6±2,17 31,9±1,81 50,2±1,26
5 11,9±0,91* 27,5±0,21* 64,3±0,81* 22,7±1,72 36,4±0,10 51,7±0,25
7 10,8±0,07* 24,3±1,91* 66,5±1,14* 24,3±0,05 35,1±0,09 50,9±0,16
9 7,3±0,83* 20,7±0,70* 67,1±2,52* 24,5±1,56 32,4±1,82 51,8±1,63
11 7,0±0,02* 19,2±0,09* 66,3±1,73* 16,3±2,35 24,5±1,62 52,6±0,92
15 5,7±0,62* 9,6±1,05* 60,6±1,55* 12,5±1,73 15,6±0,93 49,2±2,47
20 6,1±0,09* 7,4±1,08* 58,2±1,93* 10,9±1,54 14,4±1,08 50,7±1,93
30 5,3±0,05* 6,5±0,64* 58,4±0,91* 9,3±0,57 10,7±0,82 45,3±0,91
Оценивая полученные в данной работе результаты, можно прийти к заключению, что скармливание 18-дневным крысятам биологически активные вещества «Трепел» и «Сувар» оказывает стимулирующее воздействие на гематологическую и биохимическую картину крови. Сопоставив данные морфологического, гематологического и биохимического исследований, можно видеть, что между ними имеют место определенные параллели. В частности, меньшая активность АсАт и АлАт в сыворотке крови опытных крысят подтверждает полученные в ранее опубликованной работе [3] морфологические
Таблица 3
Содержание общего белка в сыворотке крови у опытных и контрольных животных (М±т)
Время после операции, сутки Общий белок в сыворотке крови, г/л
опытные животные контрольные животные
1 47,2±0,15 48,1±0,16
3 51,7±0,17 49,0±0,21
5 58,1±0,23 53,6±0,15
7 64,5±0,20* 51,9±0,23
9 62,8±0,19* 47,3±0,24
11 65,2±0,21* 52,7±0,17
15 67,1±0,22* 53,4±0,21
20 70,4±0,07* 50,9±0,15
30 71,8±0,25* 56,3±0,18
данные о том, что у животных насчитывается значительно меньше дистрофически измененных гепатоцитов по сравнению с контролем. Проанализировав данные пролиферативной активности гепатоцитов и показателей крови, можно видеть, что у опытных крысят наблюдается прямая зависимость между количеством эритроцитов и содержанием гемоглобина, с одной стороны, и уровнем пролиферативной активности печеночных клеток - с другой. Таким образом, создается вполне определенное мнение, что активация гематологических и биохимических показателей крови у опытных животных лежит в основе активации пролиферации гепатоцитов в ответ на повреждение.
Литература
1. Архипова М.Н., Шуканов А.А. Совершенствование функциональных систем у боровков в биогео-химических условиях Чувашского Центра с назначением биогенных соединений // Материалы I Всерос. молодежной науч. конф. Сыктывкар, 2008. С. 198-199.
2. Григорьев С.Г., Шуканов Р.А., Арестова И.Ю., Шуканов А.А. Корреляционный анализ физиологических процессов у боровков с применением биогенных соединений // Аграрная наука. 2009. № 1. С. 22-24.
3. Романова Л.П., Малышев И.И. Особенности заживления механической травмы печени у молодых крысят в условиях стимуляции биологически активными веществами // Аллергология и иммунология. 2009. № 1. С. 114-115.
РОМАНОВА ЛЮБОВЬ ПЕТРОВНА - кандидат биологических наук, старший преподаватель кафедры нормальной анатомии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (Malichev_med@mail).
ROMANOVA LUBOV PETROVNA - candidate of biological sciences, senior teacher of Normal Physiology Department, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
МАЛЫШЕВ ИГОРЬ ИВАНОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической анатомии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (romanoff_med@mail.ru).
MALYSHEV IGOR IVANOVICH - doctor of medical sciences, professor, head of Pathological Anatomy Department, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 591.23-003.93:569.238
Л.П. РОМАНОВА, ИИ. МАЛЫШЕВ
РОЛЬ ДВУЯДЕРНЫХ ГЕПАТОЦИТОВ В РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ ПОСЛЕ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ У КРЫС
Ключевые слова: плоды и новорожденные крысята, печень, механическая травма, митозы, двуядерные гепатоциты.
Изучена динамика образования двуядерных гепатоцитов в ходе заживления механической травмы печени у плодов и новорожденных крысят. Полученные данные дают основание полагать, что имеет место закономерная связь между митотической активностью и увеличением двуядерных гепатоцитов в регенерирующей печени.
L.P. ROMANOVA, I.I. MALYCHEV THE ROLE OF BINUCLEAR HEPATOCYTES IN LIVER REGENERATION AFTER A MECHANICAL TRAUMA IN EARLY ONTOGENESIS IN RATS Key words: fetuses and newborn rats, liver, mechanical trauma, karyokinesis, binuclear hepatocytes.
The dynamics of binuclear hepatocytes formation in the course of a mechanical liver trauma healing in fetuses and in newborn rats was studied in early ontogenesis in rats. The findings obtained give grounds to consider that there is a natural connection between a kariomitotic activity and an increase of binuclear hepatocytes in a regenerating liver.
Определённое количество двуядерных гепатоцитов обнаруживается и в интактной печени. Увеличение их числа в ходе регенерации печени после
